毒理學(xué)專題2-PPT幻燈片

第一節(jié)DNA的損傷一、基因的結(jié)構(gòu)與功能1、DNA的結(jié)構(gòu)DNA的一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)結(jié)構(gòu)DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)DNA的三股螺旋結(jié)構(gòu)第一節(jié)DNA的損傷一、基因的結(jié)構(gòu)與功能2、基因的調(diào)控①轉(zhuǎn)錄前調(diào)控②轉(zhuǎn)錄后調(diào)控③翻譯的調(diào)控④翻譯后的調(diào)控第一節(jié)DNA的損傷二、DNA的化學(xué)損傷DNA損傷：是指在某些因素的作用下，DNA的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變，阻礙DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄。包括：①基因突變②染色體畸變③DNA鏈斷裂④DNA-DNA交聯(lián)和DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)第一節(jié)DNA的損傷②點(diǎn)突變和移碼突變③同義突變、錯(cuò)義突變和無義突變同義突變：如UUA、UUG、CUU、CUC、CUA、CUG均代表亮氨酸，如UUA中的A被G置換，遺傳信息的含義未改變，這就叫同義突變二、DNA的化學(xué)損傷

1、基因突變第一節(jié)DNA的損傷錯(cuò)義突變：指堿基的突變使密碼子的堿基組成發(fā)生改變，且導(dǎo)致遺傳信息的含義改變，如CUA中的C被G轉(zhuǎn)換，則原代表亮氨酸的變成了頡氨酸無義突變：指堿基的突變使代表氨基酸的密碼子變?yōu)殡逆満铣傻慕K止密碼子，如賴氨酸AAG中的C被G轉(zhuǎn)換，則原代表亮氨酸的變成了頡氨酸第一節(jié)DNA的損傷二、DNA的化學(xué)損傷1、基因突變④正向突變和回復(fù)突變

正向突變野生型突變型

回復(fù)突變第一節(jié)DNA的損傷二、DNA的化學(xué)損傷2、染色體畸變①染色體數(shù)目的異常②染色體結(jié)構(gòu)的異常第一節(jié)DNA的損傷二、DNA的化學(xué)損傷3、DNA鏈斷裂①單鏈斷裂（singlestrandbreakage,SSB)②雙鏈斷裂（doublestrandbreakage,DSB)第一節(jié)DNA的損傷二、DNA的化學(xué)損傷４、DNA-DNA交聯(lián)和DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)DPC（DNA-proteincrosslinks）第二節(jié)DNA的修復(fù)一、直接修復(fù)

1、光復(fù)活修復(fù)光修復(fù)酶-→嘧啶二聚體-→吸收藍(lán)光光子-→電子轉(zhuǎn)移-→二聚體環(huán)斷開2、烷基轉(zhuǎn)移O6-烷基G-→烷基轉(zhuǎn)移酶-→活性中心-→烷基半光氨酸自殺性酶或修復(fù)蛋白第二節(jié)DNA的修復(fù)二、堿基切除修復(fù)尿嘧啶或烷化的堿基-→N-糖基化酶-→排除異常堿基-→去嘌啉或嘧啶的位點(diǎn)-→核酸內(nèi)切酶-→磷酸二酯鍵斷裂-→核酸外切酶-→DNA修復(fù)合成三、核苷酸切除修復(fù)核酸內(nèi)切酶-→斷裂-→核酸外切酶-→切除損傷部位-→DNA修復(fù)合成-→DNA連接酶連接第二節(jié)DNA的修復(fù)四、復(fù)制后DNA修復(fù)應(yīng)急修復(fù)或SOS修復(fù)五、損傷的DNA復(fù)制六、錯(cuò)配修復(fù)5-甲基胞嘧啶殘基脫氨基形成胸腺嘧啶第三節(jié)誘變?cè)囼?yàn)一、試驗(yàn)項(xiàng)目的選擇1、遺傳學(xué)終點(diǎn)類型Geneticendpoint①DNA完整性改變②DNA重排或交換③DNA堿基序列改變④染色體完整性改變⑤染色體分離改變第三節(jié)誘變?cè)囼?yàn)2、成套試驗(yàn)設(shè)計(jì)的原因

①化學(xué)毒物的種類和結(jié)構(gòu)不同②化學(xué)毒物的致突變作用機(jī)制不同③化學(xué)毒物的致突變性有強(qiáng)弱之分第三節(jié)誘變?cè)囼?yàn)3、成套試驗(yàn)的選擇原則

①包括每一類型的遺傳學(xué)終點(diǎn)②應(yīng)盡量包括多種進(jìn)化程度不同的物種③體內(nèi)試驗(yàn)與體外試驗(yàn)結(jié)合④生殖細(xì)胞與體細(xì)胞結(jié)合第三節(jié)誘變?cè)囼?yàn)4、觀察方法的新進(jìn)展①轉(zhuǎn)基因小鼠致突變系統(tǒng)BigBlueMouse,MutaMouse②微核自動(dòng)化檢測(cè)技術(shù)③熒光原位雜交技術(shù)第三節(jié)誘變?cè)囼?yàn)二、誘變?cè)囼?yàn)中的一些問題1、陰性和陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)立①陰性對(duì)照②陽(yáng)性對(duì)照第三節(jié)誘變?cè)囼?yàn)二、誘變?cè)囼?yàn)中的一些問題2、體外試驗(yàn)的活化系統(tǒng)①哺乳動(dòng)物細(xì)胞介導(dǎo)②肝S9③純化酶和基因工程第三節(jié)誘變?cè)囼?yàn)3、誘變?cè)囼?yàn)與致癌試驗(yàn)的關(guān)系意義：

①大多數(shù)致癌物具有致突變作用

②接觸致癌物和DNA加合物與特異堿基突變有關(guān)

③致癌試驗(yàn)花費(fèi)大、周期長(zhǎng)、不適用于快速篩選二、誘變?cè)囼?yàn)中的一些問題第三節(jié)誘變?cè)囼?yàn)致癌物：遺傳毒性致癌物非遺傳毒性致癌物遺傳毒性非致癌物非遺傳毒性非致癌物

二、誘變?cè)囼?yàn)中的一些問題第三節(jié)誘變?cè)囼?yàn)4、試驗(yàn)結(jié)果在毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)中的作用致突變?cè)囼?yàn)的質(zhì)量控制：①設(shè)立陰性與陽(yáng)性對(duì)照組②盲法觀察③資料的統(tǒng)計(jì)分析④結(jié)果的重現(xiàn)性二、誘變?cè)囼?yàn)中的一些問題第三節(jié)誘變?cè)囼?yàn)陰性結(jié)果判斷條件：①最高劑量應(yīng)為最大劑量②組間差距不應(yīng)過大二、誘變?cè)囼?yàn)中的一些問題4