ABI 7300 Real Time PCR System 實時熒光定量PCR分析系統(tǒng)

ABI7300RealTimePCRSystem實時熒光定量PCR分析系統(tǒng)發(fā)布人：Admin閱讀次數(shù)：113 發(fā)布時間：2011-3-314:18:39 【字號：小中大】本設(shè)備主要特點：1、定量檢測：絕對定量（病原體檢測，轉(zhuǎn)基因食品檢測，基因表達研究）；相對定量（基因在不同組織中的表達差異，藥物療效考核）2、點突變檢測：與疾病相關(guān)的等位基因點突變檢測；SNP檢測。ABI7300RealTimePCRSystem實時熒光定量PCR操作規(guī)程一、儀器開/關(guān)機程序1、開機程序1.1打開電腦，進入桌面。1.2打開PCR儀器的電源開關(guān)（注：該儀器有兩個電源開關(guān)，一個控制PCR儀，一個控制光源系統(tǒng)）。1.3雙擊桌面上的軟件圖標，點擊“yes”，進入軟件的主菜單。2、關(guān)機程序保存數(shù)據(jù)，退出軟件的主菜單。2.2關(guān)掉電腦，關(guān)閉PCR儀器的電源開關(guān)。二、 程序文件的設(shè)置及打開1、實驗程序已預(yù)先設(shè)定1.1點擊軟件左方主目錄中的“Library”，進入該界面后。1.2選擇“ViewProtoco1”頁面，根據(jù)路徑，找到預(yù)存的程序文件。2、 創(chuàng)建新的程序文件2.1點擊軟件左方主目錄中的“Workshop”，進入該界面。2.2選擇“EditProtocol”頁面，輸入相應(yīng)的溫度、時間、重復(fù)的循環(huán)數(shù)（Repeats）,增加或刪除步驟（Cycle和Step），在“Selectdatacollectionstep（s）”中選擇需要進行熒光收集的步驟。2.3完成后，在“ProtocolFilename”中輸入程序的文件名，點擊“Savethisprotocol”。三、 儀器操作程序1、編輯樣本1.1將裝有反應(yīng)液的PCR反應(yīng)管放入PCR儀，記錄樣本擺放順序。1.2點擊進入軟件左方主目錄的“Workshop”界面，選擇“EditPlateSetup”頁面。1.3點擊“Samples：WholePlateloading”，根據(jù)樣本擺放的順序和樣本屬性，選擇相應(yīng)的圖標（Unknown和Standard））在plate上相應(yīng)位置作標識，是標準品（Standard）的，在屏幕右下方的“StandardQuantity”中輸入相應(yīng)濃度。1.4點擊“Selectandloadfluorophores”，在“1.ordeselectafluorophore”中選擇熒光標記，在“2.Assignacolor”中選擇該標記相對應(yīng)的顏色，然后在plate上對1.3所選擇的孔位進行熒光標記。1.5完成后，在“PlateSetupFilename：”中輸入樣本文件的文件名，點擊“Savethisplatesetup”。2、運行2.1編輯樣本完成后，在該頁面下點擊“Runwithselectedprotocol”。轉(zhuǎn)入“RunPrep”頁面，確認aSelectrunpurpose"所選的是“PCRQuantificationMeltCurve”和“Selectwellfactorsource”所選的是“ExperimentalPlate"，核對一下aSelectedProtocol"和“SelectedPlate”的文件名是否正確。2.3然后在“Samplevolume”中輸入反應(yīng)體系，點擊“BeginRun”，在彈出的對話框中輸入要保存的數(shù)據(jù)文件名稱，點擊保存。3、 數(shù)據(jù)分析3.1點擊軟件左方主目錄中的“Library"，進入“ViewPost-RunData”頁面。3.2找到并選中要分析的數(shù)據(jù)文件，點擊“AnalyzeData”，