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文檔簡介
第五章
微生物的營養(yǎng)與代謝第五章
微生物的營養(yǎng)與代謝1細(xì)胞從外界環(huán)境中攝取化學(xué)物質(zhì),使其在生長過程中獲取生命活動(dòng)所需的能量及其結(jié)構(gòu)物質(zhì)的生理過程稱為營養(yǎng)或營養(yǎng)作用。細(xì)胞從外界環(huán)境中攝取化學(xué)物質(zhì),使其在生長過程中獲取生命活動(dòng)所2第一節(jié)
微生物的營養(yǎng)一、微生物細(xì)胞的化學(xué)組成從微生物細(xì)胞的組成來看,都是含有碳、氫、氧、氮和各種礦質(zhì)元素(P、S等),由這些元素組成細(xì)胞中有機(jī)和無機(jī)成分,其中主要是水分、蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂肪、核酸和無機(jī)鹽。第一節(jié)
微生物的營養(yǎng)一、微生物細(xì)胞的化學(xué)組成3微生物細(xì)胞中水分含量最多,干物質(zhì)中碳、氮、氫、氧四種元素約占90%-97%,還有礦質(zhì)元素磷、鐵、銅、錳等組成微生物細(xì)胞的各類化學(xué)元素的比例常因微生物種類的不同而不同不僅如此,微生物細(xì)胞的化學(xué)元素組成也常隨菌齡及培養(yǎng)條件的不同而在一定范圍內(nèi)發(fā)生變化第五章-微生物的營養(yǎng)與代謝課件4二、營養(yǎng)物質(zhì)及其生理功能營養(yǎng)物質(zhì)主要功用:①供給微生物合成細(xì)胞物質(zhì)的原料;②用以產(chǎn)生能量;③有的營養(yǎng)物如維生素主要用于調(diào)節(jié)新陳代謝碳源、氮源、能源、無機(jī)鹽、生長因子、水、二、營養(yǎng)物質(zhì)及其生理功能營養(yǎng)物質(zhì)主要功用:碳源、氮源、能源、5一、碳源凡是構(gòu)成微生物細(xì)胞和代謝產(chǎn)物中碳架(碳素)來源的營養(yǎng)物稱為碳源碳源既是微生物的組成成分,又是微生物的能量來源。微生物可以利用的碳源范圍極廣,分為有機(jī)碳源和無機(jī)碳源兩大類,糖類是最廣泛利用的碳源。一、碳源凡是構(gòu)成微生物細(xì)胞和代謝產(chǎn)物中碳架(碳素)來源的營6碳源物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)過一系列復(fù)雜的化學(xué)變化后成為微生物自身的細(xì)胞物質(zhì)(如碳水化合物、脂、蛋白質(zhì)等)和代謝產(chǎn)物,碳可占一般細(xì)菌細(xì)胞干重的一半。碳源物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)過一系列復(fù)雜的化學(xué)變化后成為微生物自身的細(xì)7二、氮源:凡是能提供微生物生長繁殖所需氮元素的營養(yǎng)源,稱為氮源氮是組成微生物蛋白質(zhì)、酶和核酸的成分能利用的氮源種類十分廣泛??諝庵蟹肿討B(tài)的氮、無機(jī)和有機(jī)氮二、氮源:凡是能提供微生物生長繁殖所需氮元素的營養(yǎng)源,稱為氮8氮源這類物質(zhì)主要用來合成細(xì)胞中的含氮物質(zhì),一般不作為能源,只有少數(shù)自養(yǎng)微生物能利用銨鹽、硝酸鹽同時(shí)作為氮源與能源。不同種類的微生物對(duì)氮源的需要也不盡相同。微生物培養(yǎng)時(shí)最常用的有機(jī)氮源是牛肉膏、酵母膏等,蛋白胨(部分水解蛋白質(zhì))是許多微生物良好的氮源。氮源這類物質(zhì)主要用來合成細(xì)胞中的含氮物質(zhì),一般不作為能源,只9從微生物所能利用的氮源種類來看,存在著一個(gè)明顯的界限:一部分微生物是不需要利用氨基酸作氮源的,它們能把尿素、銨鹽甚至氮?dú)獾群唵蔚醋孕泻铣伤枰囊磺邪被?,稱為氨基酸自養(yǎng)型生物凡需要從外界吸收現(xiàn)成的氨基酸作氮源的微生物就是氨基酸異養(yǎng)型生物固氮微生物:利用分子氮從微生物所能利用的氮源種類來看,存在著一個(gè)明顯的界限:10三、能源指能為微生物的生命活動(dòng)提供最初能量來源的營養(yǎng)物或輻射能。微生物的能源譜化學(xué)物質(zhì)有機(jī)物化能異養(yǎng)型微生物的能源(與C源相同)能源物質(zhì)無機(jī)物化能自養(yǎng)型微生物的能源(與C源不同)輻射能光能自養(yǎng)和光能異養(yǎng)微生物的能源營養(yǎng)功能:單功能、雙功能和三功能三、能源指能為微生物的生命活動(dòng)提供最初能量來源的營養(yǎng)物或輻射11四、無機(jī)鹽主要有P、S、Mg、K、Ca、Na、F微量元素等;無機(jī)鹽是微生物生長必不可少的一類營養(yǎng)物質(zhì),它們?cè)跈C(jī)體中的生理功能主要是作為酶活性中心的組成部分、維持生物大分子和細(xì)胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性、調(diào)節(jié)并維持細(xì)胞的滲透壓平衡、控制細(xì)胞的氧化還原電位和作為某些微生物生長的能源物質(zhì)等。四、無機(jī)鹽主要有P、S、Mg、K、Ca、Na、F微量12主要元素包括磷、硫、鉀、鎂、鈣、鐵等微量元素包括銅、鋅、鈉、硼、錳、氯、鉬、鈷、硅等。在配制培養(yǎng)基時(shí),首選加入磷酸氫二鉀和硫酸鎂,基本時(shí)可以同時(shí)提供4種需要量最大的元素。主要元素包括磷、硫、鉀、鎂、鈣、鐵等13五、生長因子生長因子通常指那些微生物生長所必需且需要量很小,而且微生物自身不能合成或合成量不足以滿足機(jī)體生長需要的有機(jī)化合物根據(jù)生長因子的化學(xué)結(jié)構(gòu)和它們?cè)跈C(jī)體中的生理功能的不同,可將生長因子分為維生素(vitamin)、氨基酸與嘌呤及嘧啶三大類生長因子可以從酵母膏、玉米漿、麥芽汁、血液或血清中獲得五、生長因子14維生素氨基酸類嘌呤、嘧啶及其衍生物(堿基)維生素15六、水水是細(xì)胞維持正常生命活動(dòng)所必不可少的,一般可占細(xì)胞重量的70-90%。在微生物各種各樣的生理活動(dòng)中必須有水參加才能進(jìn)行。六、水水是細(xì)胞維持正常生命活動(dòng)所必不可少的,一般可占細(xì)胞重量16水是一種最優(yōu)良的溶劑,可保證幾乎一切生物化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)行水可維持各種生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性,并參與某些重要的生物化學(xué)反應(yīng)水還有許多優(yōu)良的物理性質(zhì),諸如高比熱、高汽化熱、高沸點(diǎn)以及固態(tài)時(shí)密度小于液態(tài)等,都是保證生命活動(dòng)十分重要的特性水是一種最優(yōu)良的溶劑,可保證幾乎一切生物化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)行17QUESTION請(qǐng)找出附錄Ⅸ中各種培養(yǎng)基中的碳源、氮源、無機(jī)鹽等。QUESTION請(qǐng)找出附錄Ⅸ中各種培養(yǎng)基中的碳源、氮源、無機(jī)18三、微生物的營養(yǎng)類型
根據(jù)微生物對(duì)碳源的要求不同,可將其分為自養(yǎng)菌和異養(yǎng)菌兩大營養(yǎng)類型凡能利用無機(jī)碳合成菌體內(nèi)有機(jī)碳化物的,叫自養(yǎng)菌;不能利用無機(jī)碳而需要有機(jī)碳才能合成菌體內(nèi)有機(jī)碳化物的,為異養(yǎng)菌三、微生物的營養(yǎng)類型根據(jù)微生物對(duì)碳源的要求不19根據(jù)其生命活動(dòng)所需能量的來源不同,可分為光能營養(yǎng)菌和化能營養(yǎng)菌。前者是從光線中獲得能量,后者則從化學(xué)物質(zhì)氧化中取得能量因此,根據(jù)微生物所需的碳源和能源不同,可將微生物分為光能自養(yǎng)菌、光能異養(yǎng)菌、化能自養(yǎng)菌、化能異養(yǎng)菌等四類。根據(jù)其生命活動(dòng)所需能量的來源不同,可分為光能營養(yǎng)菌和化能營養(yǎng)20光能自養(yǎng)型:以光為能源,以CO2為唯一或主要碳源,不依賴任何有機(jī)物即可正常生長光能異養(yǎng)型:以光為能源,但生長需要一定的有機(jī)營養(yǎng)化能自養(yǎng)型:以無機(jī)物的氧化獲得能量,生長不依賴有機(jī)營養(yǎng)物化能異養(yǎng)型:以有機(jī)物的氧化獲得能量,生長依賴于有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)光能自養(yǎng)型和光能異養(yǎng)型微生物可利用光能生長,在地球早期生態(tài)環(huán)境的演化過程中起重要作用第五章-微生物的營養(yǎng)與代謝課件21微生物的營養(yǎng)類型
營養(yǎng)類型主要(或唯一)碳源能源代表菌
光能自養(yǎng)型二氧化碳光能藍(lán)細(xì)菌光能異養(yǎng)型有機(jī)物光能紅螺細(xì)菌化能自養(yǎng)型二氧化碳無機(jī)物硫桿菌化能異養(yǎng)型有機(jī)物有機(jī)物大腸桿菌微生物的營養(yǎng)類型營養(yǎng)類型主要(或唯一)碳源能源代表22第二節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式
外界環(huán)境的營養(yǎng)物質(zhì)只有被微生物吸收到細(xì)胞內(nèi),才能被微生物分解與利用,微生物生長過程中產(chǎn)生的一些代謝產(chǎn)物也必須分泌到細(xì)胞外,在這兩個(gè)過程中,細(xì)胞膜起著重要作用。目前一般認(rèn)為,營養(yǎng)物質(zhì)主要以單純擴(kuò)散、促進(jìn)擴(kuò)散、主動(dòng)運(yùn)輸和基團(tuán)轉(zhuǎn)位四種方式通過微生物細(xì)胞膜。第二節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式外界環(huán)境的營養(yǎng)23一、單純擴(kuò)散指疏水性雙分子層細(xì)胞膜在無載體蛋白參與下,單純依靠物理擴(kuò)散方式讓許多小分子、非電離分子尤其是親水性分子被動(dòng)通過的一種物質(zhì)運(yùn)送方式。擴(kuò)散驅(qū)動(dòng)力:濃度梯度,不需要外界提供任何形式的能量主要有氧、二氧化碳、乙醇和某些氨基酸分子。一、單純擴(kuò)散指疏水性雙分子層細(xì)胞膜在無載體蛋白參與下,單純依24第五章-微生物的營養(yǎng)與代謝課件25二、促進(jìn)擴(kuò)散指溶質(zhì)在運(yùn)送過程中,必須借助存在于細(xì)胞膜上的底物特異載體蛋白的協(xié)助,但不消耗能量的一類擴(kuò)散性運(yùn)送方式。二、促進(jìn)擴(kuò)散指溶質(zhì)在運(yùn)送過程中,必須借助存在于細(xì)胞膜上的底物26第五章-微生物的營養(yǎng)與代謝課件27促進(jìn)擴(kuò)散與被動(dòng)擴(kuò)散的主要區(qū)別在于通過促進(jìn)擴(kuò)散進(jìn)行跨膜運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)需要借助于載體(carrier)的作用才能進(jìn)入細(xì)胞.而且每種載體只運(yùn)輸相應(yīng)的物質(zhì),具有較高的專一性。促進(jìn)擴(kuò)散與被動(dòng)擴(kuò)散的主要區(qū)別在于通過促進(jìn)擴(kuò)散進(jìn)行跨膜運(yùn)輸?shù)奈?8三、主動(dòng)運(yùn)輸指一類須提供能量并通過細(xì)胞膜上特異性載體蛋白構(gòu)象的變化,而使膜外環(huán)境中低濃度的溶質(zhì)運(yùn)入膜內(nèi)的一種運(yùn)送方式。三、主動(dòng)運(yùn)輸指一類須提供能量并通過細(xì)胞膜上特異性載體蛋白構(gòu)象29ATP
ADP
+Pi
恢復(fù)原構(gòu)像再循環(huán)耗能構(gòu)像改變膜上膜外膜內(nèi)移位結(jié)合12主動(dòng)運(yùn)輸特點(diǎn):被運(yùn)送的物質(zhì)可逆濃度梯度進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)要消耗能量,必需有能量參加。有膜載體參加,膜載體發(fā)生構(gòu)型變化。被運(yùn)送物質(zhì)不發(fā)生任何變化。ATPADP+Pi恢復(fù)再循環(huán)耗能構(gòu)像膜上膜外膜30運(yùn)送對(duì)象舉例:氨基酸、乳糖等糖類,Na+、Ca2+等無機(jī)離子運(yùn)送對(duì)象舉例:氨基酸、乳糖等糖類,Na+、Ca2+等無機(jī)離子31四、基團(tuán)轉(zhuǎn)位指一類既需特異性載體蛋白的參與,又需耗能的一種物質(zhì)運(yùn)送方式,其特點(diǎn)使溶質(zhì)在運(yùn)送前后還會(huì)發(fā)生分子結(jié)構(gòu)的變化,因此不同于一般的主動(dòng)運(yùn)送。四、基團(tuán)轉(zhuǎn)位指一類既需特異性載體蛋白的參與,又需耗能的一種物32運(yùn)送對(duì)象舉例:葡萄糖、果糖、甘露糖、嘌呤、核苷、脂肪酸等。運(yùn)送機(jī)制主要靠磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)。運(yùn)送對(duì)象舉例:葡萄糖、果糖、甘露糖、嘌呤、核苷、脂肪酸等。33第五章-微生物的營養(yǎng)與代謝課件34運(yùn)輸方式濃度載體耗能運(yùn)送分子發(fā)生變化單純擴(kuò)散高→低不需要不耗能不變化促進(jìn)擴(kuò)散高→低需要不耗能不變化主動(dòng)運(yùn)輸?shù)汀咝枰哪懿蛔兓鶊F(tuán)轉(zhuǎn)位低→高需要耗能變化運(yùn)輸方式:運(yùn)輸方式濃度載體耗能運(yùn)送分子發(fā)生變化單純擴(kuò)散高→低不需要不耗35第三節(jié)微生物培養(yǎng)基
培養(yǎng)基是人工配制的適合于不同微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物營養(yǎng)基質(zhì)。
第三節(jié)微生物培養(yǎng)基
培養(yǎng)基是人工配制的適合于36第五章-微生物的營養(yǎng)與代謝課件37一、培養(yǎng)基配制原則
1.目的明確:根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。2.選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)3.營養(yǎng)協(xié)調(diào):注意營養(yǎng)物質(zhì)的濃度比和C/N比。(C/N比是指在微生物培養(yǎng)基中所含的碳源中的碳原子摩爾數(shù)與氮源中的氮原子的摩爾數(shù)之比。)一、培養(yǎng)基配制原則1.目的明確:根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需384.理化適宜:調(diào)節(jié)適宜的pH值。各種微生物的pH5.經(jīng)濟(jì)節(jié)約:根據(jù)培養(yǎng)微生物的目的決定成分的量。以粗代精,以野代家,以廢代好,以簡代繁,以纖代糖,以國代進(jìn)等等。6.滅菌處理4.理化適宜:調(diào)節(jié)適宜的pH值。39各種微生物的pH微生物種類最低pH值最適pH值最高pH值細(xì)菌和放線菌酵母菌霉菌5.02.51.57.0~8.03.8~6.03.0~6.010.08.010.0各種微生物的pH微生物種類最低pH值最適pH值最高pH值細(xì)菌40二、培養(yǎng)基的種類
1.合成培養(yǎng)基:
由已知化學(xué)藥品配成,成分和濃度都已完全知道,每一次配制也基本恒定。這種培養(yǎng)基成分精確,重復(fù)性強(qiáng),多用于實(shí)驗(yàn)室,費(fèi)用較高。如:高氏一號(hào)培養(yǎng)基(淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基)---放線菌察氏培養(yǎng)基(蔗糖硝酸鹽培養(yǎng)基)---真菌1、根據(jù)培養(yǎng)基的成分不同分為二、培養(yǎng)基的種類1.合成培養(yǎng)基:由已知化學(xué)藥品配成,成412.天然培養(yǎng)基:
化學(xué)成分不完全了解或化學(xué)成分不恒定的天然有機(jī)物配制的培養(yǎng)基。如動(dòng)植物汁液,土壤浸出液,等配制成培養(yǎng)基。配制方便,經(jīng)濟(jì)。如:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基--細(xì)菌麥芽汁培養(yǎng)基--酵母菌2.天然培養(yǎng)基:化學(xué)成分不完全了解或化學(xué)成分不恒定的天然42牛肉膏瘦牛肉組織浸出汁濃縮而成的膏狀物質(zhì),富含水溶性碳水化合物,有機(jī)氮化合物,維生素,鹽等。蛋白胨將肉,酪素或明膠用酸或蛋白酶水解后干燥而成的粉末狀物質(zhì),富含有機(jī)氮化合物,也含有一些維生素和碳水化合物。酵母膏酵母細(xì)胞的水溶性提取物濃縮而成的膏狀物質(zhì),富含類維生素,也含有有機(jī)氮化合物和碳水化合物。牛肉膏瘦牛肉組織浸出汁濃縮而成的膏狀物質(zhì),富含水溶性碳水化43
3.半合成培養(yǎng)基:由成分已知的物質(zhì)和成分未知的天然物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基,如PDA培養(yǎng)基。如:馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基--真菌3.半合成培養(yǎng)基:由成分已知的物質(zhì)和成分未知的天然物質(zhì)配制442、根據(jù)培養(yǎng)基物理狀態(tài)分
液體培養(yǎng)基:配制后不加任何凝固劑。半固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基上加進(jìn)一定凝固劑,在液體培養(yǎng)基中如加0.5%瓊脂,可以用來觀察細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的特征,鑒定菌種,測(cè)定抗菌素的效價(jià)等。2、根據(jù)培養(yǎng)基物理狀態(tài)分液體培養(yǎng)基:配制后不加任何凝固劑45C.固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑(如1.5-2.0%瓊脂)。固體培養(yǎng)基為微生物的生長提供了一個(gè)營養(yǎng)表面,在這個(gè)表面生長微生物可形成單個(gè)菌落,用于微生物的分離,鑒定,計(jì)數(shù)。D.脫水培養(yǎng)基:指含有除水分以外的一切成分的商品培養(yǎng)基,使用時(shí)只要加入適量水分并加以滅菌即可,其成分精確且使用方便。C.固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑(如1.5-2.0%46常用的凝固劑有瓊脂(agar)、明膠(gelatin)和硅膠(silicagel)。常用的凝固劑有瓊脂(agar)、明膠(gelatin)和硅膠47粘液型菌落菌膜菌沉淀均勻渾濁對(duì)照固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基粘液型菌落菌膜菌沉淀均勻渾濁對(duì)照固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培483、根據(jù)培養(yǎng)基的用途來分基礎(chǔ)培養(yǎng)基:滿足一般微生物生長繁殖所需要的營養(yǎng)物質(zhì)。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是最常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。加富培養(yǎng)基:在自然界中各種微生物通常是混雜在一起的,了解了某一些微生物的營養(yǎng)要求,配制適合這種微生物生長而不適合其他微生物生長的培養(yǎng)基,就達(dá)到了從自然界中分離這種微生物的目的,這種培養(yǎng)基就稱為加富培養(yǎng)基。一般常加入血、血清或動(dòng)植物提取液等。----“投其所好”
3、根據(jù)培養(yǎng)基的用途來分基礎(chǔ)培養(yǎng)基:滿足一般微生物生長繁殖所49選擇培養(yǎng)基:根據(jù)不同的微生物對(duì)營養(yǎng)的特殊要求,或?qū)ξ锢砘瘜W(xué)條件的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基,利用這一類培養(yǎng)基可以把需要微生物從混雜的其他微生物分離和確定。----“取其所抗”鑒別培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入某種特殊化學(xué)物質(zhì),某種微生物在培養(yǎng)基中生長后能產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物,而這種代謝產(chǎn)物可以與培養(yǎng)基中的特殊化學(xué)物質(zhì)發(fā)生特定的化學(xué)反應(yīng),產(chǎn)生明顯的特征性變化,根據(jù)這種特征性變化,可將該種微生物與其他微生物區(qū)分開來。選擇培養(yǎng)基:根據(jù)不同的微生物對(duì)營養(yǎng)的特殊要求,或?qū)ξ锢砘瘜W(xué)條50最常見的鑒別性培養(yǎng)基是伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基,即EMB培養(yǎng)基。它在飲用水、牛奶的大腸菌群數(shù)等細(xì)菌學(xué)檢查和大腸桿菌的遺傳學(xué)研究工作中有著重要的用途。最常見的鑒別性培養(yǎng)基是伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基,即EMB培養(yǎng)基。它51EMBagarcontainsbilesaltsanddyeswhichinhibitgrowthofgram-positivebacteria.GrowthonEMBagarisausefuldiagnostictooltodistinguishbetweenlactosefermentersandnonfermenterswhichwillappearcolorless.EMBagarcontainsbilesaltsa52第四節(jié)微生物的代謝第四節(jié)微生物的代謝53代謝概述一、代謝類型1、分解代謝(異化作用、異化代謝)
指營養(yǎng)物質(zhì)在分解酶催化下,將細(xì)胞中大分子物質(zhì)降解成小分子物質(zhì),并在此過程產(chǎn)生能量。
代謝概述一、代謝類型54代謝概述一、代謝類型分解代謝分3個(gè)階段:1將蛋白質(zhì)、多糖、脂類等大分子營養(yǎng)物質(zhì)降解成aa、單糖及脂肪酸等小分子物質(zhì)。2進(jìn)一步降解成更為簡單的乙酰輔酶A、丙酮酸以及能進(jìn)入TCA的某些中間產(chǎn)物。3通過TCA循環(huán)將第二階段產(chǎn)物完全降解為H2O+CO2。代謝概述一、代謝類型55代謝概述一、代謝類型2、合成代謝(同化作用、同化代謝)指在合成酶催化下,不同的小分子物質(zhì)被合成為復(fù)雜大分子的過程。在此過程要消耗能量,合成代謝生成微生物所必需的各種大分子。代謝概述一、代謝類型56代謝概述一、代謝類型3、分解代謝與合成代謝的關(guān)系兩者相互聯(lián)系,共同促進(jìn)了生物個(gè)體的生長繁殖。復(fù)雜分子簡單分子+ATP+[H]
(還原力)代謝概述一、代謝類型復(fù)雜分子簡單分子+ATP57第五章
微生物的營養(yǎng)與代謝第五章
微生物的營養(yǎng)與代謝58細(xì)胞從外界環(huán)境中攝取化學(xué)物質(zhì),使其在生長過程中獲取生命活動(dòng)所需的能量及其結(jié)構(gòu)物質(zhì)的生理過程稱為營養(yǎng)或營養(yǎng)作用。細(xì)胞從外界環(huán)境中攝取化學(xué)物質(zhì),使其在生長過程中獲取生命活動(dòng)所59第一節(jié)
微生物的營養(yǎng)一、微生物細(xì)胞的化學(xué)組成從微生物細(xì)胞的組成來看,都是含有碳、氫、氧、氮和各種礦質(zhì)元素(P、S等),由這些元素組成細(xì)胞中有機(jī)和無機(jī)成分,其中主要是水分、蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂肪、核酸和無機(jī)鹽。第一節(jié)
微生物的營養(yǎng)一、微生物細(xì)胞的化學(xué)組成60微生物細(xì)胞中水分含量最多,干物質(zhì)中碳、氮、氫、氧四種元素約占90%-97%,還有礦質(zhì)元素磷、鐵、銅、錳等組成微生物細(xì)胞的各類化學(xué)元素的比例常因微生物種類的不同而不同不僅如此,微生物細(xì)胞的化學(xué)元素組成也常隨菌齡及培養(yǎng)條件的不同而在一定范圍內(nèi)發(fā)生變化第五章-微生物的營養(yǎng)與代謝課件61二、營養(yǎng)物質(zhì)及其生理功能營養(yǎng)物質(zhì)主要功用:①供給微生物合成細(xì)胞物質(zhì)的原料;②用以產(chǎn)生能量;③有的營養(yǎng)物如維生素主要用于調(diào)節(jié)新陳代謝碳源、氮源、能源、無機(jī)鹽、生長因子、水、二、營養(yǎng)物質(zhì)及其生理功能營養(yǎng)物質(zhì)主要功用:碳源、氮源、能源、62一、碳源凡是構(gòu)成微生物細(xì)胞和代謝產(chǎn)物中碳架(碳素)來源的營養(yǎng)物稱為碳源碳源既是微生物的組成成分,又是微生物的能量來源。微生物可以利用的碳源范圍極廣,分為有機(jī)碳源和無機(jī)碳源兩大類,糖類是最廣泛利用的碳源。一、碳源凡是構(gòu)成微生物細(xì)胞和代謝產(chǎn)物中碳架(碳素)來源的營63碳源物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)過一系列復(fù)雜的化學(xué)變化后成為微生物自身的細(xì)胞物質(zhì)(如碳水化合物、脂、蛋白質(zhì)等)和代謝產(chǎn)物,碳可占一般細(xì)菌細(xì)胞干重的一半。碳源物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)過一系列復(fù)雜的化學(xué)變化后成為微生物自身的細(xì)64二、氮源:凡是能提供微生物生長繁殖所需氮元素的營養(yǎng)源,稱為氮源氮是組成微生物蛋白質(zhì)、酶和核酸的成分能利用的氮源種類十分廣泛。空氣中分子態(tài)的氮、無機(jī)和有機(jī)氮二、氮源:凡是能提供微生物生長繁殖所需氮元素的營養(yǎng)源,稱為氮65氮源這類物質(zhì)主要用來合成細(xì)胞中的含氮物質(zhì),一般不作為能源,只有少數(shù)自養(yǎng)微生物能利用銨鹽、硝酸鹽同時(shí)作為氮源與能源。不同種類的微生物對(duì)氮源的需要也不盡相同。微生物培養(yǎng)時(shí)最常用的有機(jī)氮源是牛肉膏、酵母膏等,蛋白胨(部分水解蛋白質(zhì))是許多微生物良好的氮源。氮源這類物質(zhì)主要用來合成細(xì)胞中的含氮物質(zhì),一般不作為能源,只66從微生物所能利用的氮源種類來看,存在著一個(gè)明顯的界限:一部分微生物是不需要利用氨基酸作氮源的,它們能把尿素、銨鹽甚至氮?dú)獾群唵蔚醋孕泻铣伤枰囊磺邪被?,稱為氨基酸自養(yǎng)型生物凡需要從外界吸收現(xiàn)成的氨基酸作氮源的微生物就是氨基酸異養(yǎng)型生物固氮微生物:利用分子氮從微生物所能利用的氮源種類來看,存在著一個(gè)明顯的界限:67三、能源指能為微生物的生命活動(dòng)提供最初能量來源的營養(yǎng)物或輻射能。微生物的能源譜化學(xué)物質(zhì)有機(jī)物化能異養(yǎng)型微生物的能源(與C源相同)能源物質(zhì)無機(jī)物化能自養(yǎng)型微生物的能源(與C源不同)輻射能光能自養(yǎng)和光能異養(yǎng)微生物的能源營養(yǎng)功能:單功能、雙功能和三功能三、能源指能為微生物的生命活動(dòng)提供最初能量來源的營養(yǎng)物或輻射68四、無機(jī)鹽主要有P、S、Mg、K、Ca、Na、F微量元素等;無機(jī)鹽是微生物生長必不可少的一類營養(yǎng)物質(zhì),它們?cè)跈C(jī)體中的生理功能主要是作為酶活性中心的組成部分、維持生物大分子和細(xì)胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性、調(diào)節(jié)并維持細(xì)胞的滲透壓平衡、控制細(xì)胞的氧化還原電位和作為某些微生物生長的能源物質(zhì)等。四、無機(jī)鹽主要有P、S、Mg、K、Ca、Na、F微量69主要元素包括磷、硫、鉀、鎂、鈣、鐵等微量元素包括銅、鋅、鈉、硼、錳、氯、鉬、鈷、硅等。在配制培養(yǎng)基時(shí),首選加入磷酸氫二鉀和硫酸鎂,基本時(shí)可以同時(shí)提供4種需要量最大的元素。主要元素包括磷、硫、鉀、鎂、鈣、鐵等70五、生長因子生長因子通常指那些微生物生長所必需且需要量很小,而且微生物自身不能合成或合成量不足以滿足機(jī)體生長需要的有機(jī)化合物根據(jù)生長因子的化學(xué)結(jié)構(gòu)和它們?cè)跈C(jī)體中的生理功能的不同,可將生長因子分為維生素(vitamin)、氨基酸與嘌呤及嘧啶三大類生長因子可以從酵母膏、玉米漿、麥芽汁、血液或血清中獲得五、生長因子71維生素氨基酸類嘌呤、嘧啶及其衍生物(堿基)維生素72六、水水是細(xì)胞維持正常生命活動(dòng)所必不可少的,一般可占細(xì)胞重量的70-90%。在微生物各種各樣的生理活動(dòng)中必須有水參加才能進(jìn)行。六、水水是細(xì)胞維持正常生命活動(dòng)所必不可少的,一般可占細(xì)胞重量73水是一種最優(yōu)良的溶劑,可保證幾乎一切生物化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)行水可維持各種生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性,并參與某些重要的生物化學(xué)反應(yīng)水還有許多優(yōu)良的物理性質(zhì),諸如高比熱、高汽化熱、高沸點(diǎn)以及固態(tài)時(shí)密度小于液態(tài)等,都是保證生命活動(dòng)十分重要的特性水是一種最優(yōu)良的溶劑,可保證幾乎一切生物化學(xué)反應(yīng)的進(jìn)行74QUESTION請(qǐng)找出附錄Ⅸ中各種培養(yǎng)基中的碳源、氮源、無機(jī)鹽等。QUESTION請(qǐng)找出附錄Ⅸ中各種培養(yǎng)基中的碳源、氮源、無機(jī)75三、微生物的營養(yǎng)類型
根據(jù)微生物對(duì)碳源的要求不同,可將其分為自養(yǎng)菌和異養(yǎng)菌兩大營養(yǎng)類型凡能利用無機(jī)碳合成菌體內(nèi)有機(jī)碳化物的,叫自養(yǎng)菌;不能利用無機(jī)碳而需要有機(jī)碳才能合成菌體內(nèi)有機(jī)碳化物的,為異養(yǎng)菌三、微生物的營養(yǎng)類型根據(jù)微生物對(duì)碳源的要求不76根據(jù)其生命活動(dòng)所需能量的來源不同,可分為光能營養(yǎng)菌和化能營養(yǎng)菌。前者是從光線中獲得能量,后者則從化學(xué)物質(zhì)氧化中取得能量因此,根據(jù)微生物所需的碳源和能源不同,可將微生物分為光能自養(yǎng)菌、光能異養(yǎng)菌、化能自養(yǎng)菌、化能異養(yǎng)菌等四類。根據(jù)其生命活動(dòng)所需能量的來源不同,可分為光能營養(yǎng)菌和化能營養(yǎng)77光能自養(yǎng)型:以光為能源,以CO2為唯一或主要碳源,不依賴任何有機(jī)物即可正常生長光能異養(yǎng)型:以光為能源,但生長需要一定的有機(jī)營養(yǎng)化能自養(yǎng)型:以無機(jī)物的氧化獲得能量,生長不依賴有機(jī)營養(yǎng)物化能異養(yǎng)型:以有機(jī)物的氧化獲得能量,生長依賴于有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)光能自養(yǎng)型和光能異養(yǎng)型微生物可利用光能生長,在地球早期生態(tài)環(huán)境的演化過程中起重要作用第五章-微生物的營養(yǎng)與代謝課件78微生物的營養(yǎng)類型
營養(yǎng)類型主要(或唯一)碳源能源代表菌
光能自養(yǎng)型二氧化碳光能藍(lán)細(xì)菌光能異養(yǎng)型有機(jī)物光能紅螺細(xì)菌化能自養(yǎng)型二氧化碳無機(jī)物硫桿菌化能異養(yǎng)型有機(jī)物有機(jī)物大腸桿菌微生物的營養(yǎng)類型營養(yǎng)類型主要(或唯一)碳源能源代表79第二節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式
外界環(huán)境的營養(yǎng)物質(zhì)只有被微生物吸收到細(xì)胞內(nèi),才能被微生物分解與利用,微生物生長過程中產(chǎn)生的一些代謝產(chǎn)物也必須分泌到細(xì)胞外,在這兩個(gè)過程中,細(xì)胞膜起著重要作用。目前一般認(rèn)為,營養(yǎng)物質(zhì)主要以單純擴(kuò)散、促進(jìn)擴(kuò)散、主動(dòng)運(yùn)輸和基團(tuán)轉(zhuǎn)位四種方式通過微生物細(xì)胞膜。第二節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的方式外界環(huán)境的營養(yǎng)80一、單純擴(kuò)散指疏水性雙分子層細(xì)胞膜在無載體蛋白參與下,單純依靠物理擴(kuò)散方式讓許多小分子、非電離分子尤其是親水性分子被動(dòng)通過的一種物質(zhì)運(yùn)送方式。擴(kuò)散驅(qū)動(dòng)力:濃度梯度,不需要外界提供任何形式的能量主要有氧、二氧化碳、乙醇和某些氨基酸分子。一、單純擴(kuò)散指疏水性雙分子層細(xì)胞膜在無載體蛋白參與下,單純依81第五章-微生物的營養(yǎng)與代謝課件82二、促進(jìn)擴(kuò)散指溶質(zhì)在運(yùn)送過程中,必須借助存在于細(xì)胞膜上的底物特異載體蛋白的協(xié)助,但不消耗能量的一類擴(kuò)散性運(yùn)送方式。二、促進(jìn)擴(kuò)散指溶質(zhì)在運(yùn)送過程中,必須借助存在于細(xì)胞膜上的底物83第五章-微生物的營養(yǎng)與代謝課件84促進(jìn)擴(kuò)散與被動(dòng)擴(kuò)散的主要區(qū)別在于通過促進(jìn)擴(kuò)散進(jìn)行跨膜運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)需要借助于載體(carrier)的作用才能進(jìn)入細(xì)胞.而且每種載體只運(yùn)輸相應(yīng)的物質(zhì),具有較高的專一性。促進(jìn)擴(kuò)散與被動(dòng)擴(kuò)散的主要區(qū)別在于通過促進(jìn)擴(kuò)散進(jìn)行跨膜運(yùn)輸?shù)奈?5三、主動(dòng)運(yùn)輸指一類須提供能量并通過細(xì)胞膜上特異性載體蛋白構(gòu)象的變化,而使膜外環(huán)境中低濃度的溶質(zhì)運(yùn)入膜內(nèi)的一種運(yùn)送方式。三、主動(dòng)運(yùn)輸指一類須提供能量并通過細(xì)胞膜上特異性載體蛋白構(gòu)象86ATP
ADP
+Pi
恢復(fù)原構(gòu)像再循環(huán)耗能構(gòu)像改變膜上膜外膜內(nèi)移位結(jié)合12主動(dòng)運(yùn)輸特點(diǎn):被運(yùn)送的物質(zhì)可逆濃度梯度進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)要消耗能量,必需有能量參加。有膜載體參加,膜載體發(fā)生構(gòu)型變化。被運(yùn)送物質(zhì)不發(fā)生任何變化。ATPADP+Pi恢復(fù)再循環(huán)耗能構(gòu)像膜上膜外膜87運(yùn)送對(duì)象舉例:氨基酸、乳糖等糖類,Na+、Ca2+等無機(jī)離子運(yùn)送對(duì)象舉例:氨基酸、乳糖等糖類,Na+、Ca2+等無機(jī)離子88四、基團(tuán)轉(zhuǎn)位指一類既需特異性載體蛋白的參與,又需耗能的一種物質(zhì)運(yùn)送方式,其特點(diǎn)使溶質(zhì)在運(yùn)送前后還會(huì)發(fā)生分子結(jié)構(gòu)的變化,因此不同于一般的主動(dòng)運(yùn)送。四、基團(tuán)轉(zhuǎn)位指一類既需特異性載體蛋白的參與,又需耗能的一種物89運(yùn)送對(duì)象舉例:葡萄糖、果糖、甘露糖、嘌呤、核苷、脂肪酸等。運(yùn)送機(jī)制主要靠磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)。運(yùn)送對(duì)象舉例:葡萄糖、果糖、甘露糖、嘌呤、核苷、脂肪酸等。90第五章-微生物的營養(yǎng)與代謝課件91運(yùn)輸方式濃度載體耗能運(yùn)送分子發(fā)生變化單純擴(kuò)散高→低不需要不耗能不變化促進(jìn)擴(kuò)散高→低需要不耗能不變化主動(dòng)運(yùn)輸?shù)汀咝枰哪懿蛔兓鶊F(tuán)轉(zhuǎn)位低→高需要耗能變化運(yùn)輸方式:運(yùn)輸方式濃度載體耗能運(yùn)送分子發(fā)生變化單純擴(kuò)散高→低不需要不耗92第三節(jié)微生物培養(yǎng)基
培養(yǎng)基是人工配制的適合于不同微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物營養(yǎng)基質(zhì)。
第三節(jié)微生物培養(yǎng)基
培養(yǎng)基是人工配制的適合于93第五章-微生物的營養(yǎng)與代謝課件94一、培養(yǎng)基配制原則
1.目的明確:根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。2.選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)3.營養(yǎng)協(xié)調(diào):注意營養(yǎng)物質(zhì)的濃度比和C/N比。(C/N比是指在微生物培養(yǎng)基中所含的碳源中的碳原子摩爾數(shù)與氮源中的氮原子的摩爾數(shù)之比。)一、培養(yǎng)基配制原則1.目的明確:根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需954.理化適宜:調(diào)節(jié)適宜的pH值。各種微生物的pH5.經(jīng)濟(jì)節(jié)約:根據(jù)培養(yǎng)微生物的目的決定成分的量。以粗代精,以野代家,以廢代好,以簡代繁,以纖代糖,以國代進(jìn)等等。6.滅菌處理4.理化適宜:調(diào)節(jié)適宜的pH值。96各種微生物的pH微生物種類最低pH值最適pH值最高pH值細(xì)菌和放線菌酵母菌霉菌5.02.51.57.0~8.03.8~6.03.0~6.010.08.010.0各種微生物的pH微生物種類最低pH值最適pH值最高pH值細(xì)菌97二、培養(yǎng)基的種類
1.合成培養(yǎng)基:
由已知化學(xué)藥品配成,成分和濃度都已完全知道,每一次配制也基本恒定。這種培養(yǎng)基成分精確,重復(fù)性強(qiáng),多用于實(shí)驗(yàn)室,費(fèi)用較高。如:高氏一號(hào)培養(yǎng)基(淀粉硝酸鹽培養(yǎng)基)---放線菌察氏培養(yǎng)基(蔗糖硝酸鹽培養(yǎng)基)---真菌1、根據(jù)培養(yǎng)基的成分不同分為二、培養(yǎng)基的種類1.合成培養(yǎng)基:由已知化學(xué)藥品配成,成982.天然培養(yǎng)基:
化學(xué)成分不完全了解或化學(xué)成分不恒定的天然有機(jī)物配制的培養(yǎng)基。如動(dòng)植物汁液,土壤浸出液,等配制成培養(yǎng)基。配制方便,經(jīng)濟(jì)。如:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基--細(xì)菌麥芽汁培養(yǎng)基--酵母菌2.天然培養(yǎng)基:化學(xué)成分不完全了解或化學(xué)成分不恒定的天然99牛肉膏瘦牛肉組織浸出汁濃縮而成的膏狀物質(zhì),富含水溶性碳水化合物,有機(jī)氮化合物,維生素,鹽等。蛋白胨將肉,酪素或明膠用酸或蛋白酶水解后干燥而成的粉末狀物質(zhì),富含有機(jī)氮化合物,也含有一些維生素和碳水化合物。酵母膏酵母細(xì)胞的水溶性提取物濃縮而成的膏狀物質(zhì),富含類維生素,也含有有機(jī)氮化合物和碳水化合物。牛肉膏瘦牛肉組織浸出汁濃縮而成的膏狀物質(zhì),富含水溶性碳水化100
3.半合成培養(yǎng)基:由成分已知的物質(zhì)和成分未知的天然物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基,如PDA培養(yǎng)基。如:馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基--真菌3.半合成培養(yǎng)基:由成分已知的物質(zhì)和成分未知的天然物質(zhì)配制1012、根據(jù)培養(yǎng)基物理狀態(tài)分
液體培養(yǎng)基:配制后不加任何凝固劑。半固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基上加進(jìn)一定凝固劑,在液體培養(yǎng)基中如加0.5%瓊脂,可以用來觀察細(xì)胞運(yùn)動(dòng)的特征,鑒定菌種,測(cè)定抗菌素的效價(jià)等。2、根據(jù)培養(yǎng)基物理狀態(tài)分液體培養(yǎng)基:配制后不加任何凝固劑102C.固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑(如1.5-2.0%瓊脂)。固體培養(yǎng)基為微生物的生長提供了一個(gè)營養(yǎng)表面,在這個(gè)表面生長微生物可形成單個(gè)菌落,用于微生物的分離,鑒定,計(jì)數(shù)。D.脫水培養(yǎng)基:指含有除水分以外的一切成分的商品培養(yǎng)基,使用時(shí)只要加入適量水分并加以滅菌即可,其成分精確且使用方便。C.固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑(如1.5-2.0%103常用的凝固劑有瓊脂(agar)、明膠(gelatin)和硅膠(silicagel)。常用的凝固劑有瓊脂(agar)、明膠(gelatin)和硅膠104粘液型菌落菌膜菌沉淀均勻渾濁對(duì)照固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培
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