胡蘿卜新品種選育及制種技術(shù)研究

一、項目信息表項目名稱胡蘿卜新品種選育及制種技術(shù)研究推薦單位***所屬技術(shù)領(lǐng)域動植物育種技術(shù)申報單位

經(jīng)濟類型股份制經(jīng)濟主要研究內(nèi)容種源控制和品種開發(fā)是世界胡蘿卜產(chǎn)業(yè)的核心。本項目重點研究胡蘿卜雄性不育（CGMS）A、B對的提純復壯技術(shù)、保持系（N）msms的更新技術(shù)、褐藥型（Brown

Anther

Type）溫敏雄性不育系臨界溫度測定、瓣化型（Petaloid

Type）雄性不育系花冠顏色分離穩(wěn)定性分析、C系快速提純技術(shù)、分子輔助育種技術(shù)和保護地制種技術(shù)，建立和掌握胡蘿卜三系育種的核心技術(shù)和基礎(chǔ)材料，培育出具有市場競爭力的胡蘿卜F1新品種。在突破胡蘿卜CGMS雄性不育三系雜交育種的前提下，建立高效的胡蘿卜雜交種保護地產(chǎn)業(yè)化制種技術(shù)規(guī)程，以優(yōu)良國產(chǎn)化雜交種來替代進口種子、降低生產(chǎn)成本、保障優(yōu)良種源供應，奠定胡蘿卜產(chǎn)業(yè)發(fā)展的種源根基，解決胡蘿卜雜交種市場國產(chǎn)化瓶頸。項目預期達到總體目標以實現(xiàn)主要蔬菜作物雜交種種業(yè)國產(chǎn)化為發(fā)展目標，開展胡蘿卜雄性不育三系F1育種及制種產(chǎn)業(yè)化開發(fā)攻關(guān)技術(shù)研究。從基礎(chǔ)上建立雄性不育三系育種材料體系，以提高創(chuàng)新能力及核心競爭力。提出A、B對2組，F(xiàn)1雜交種新品種2個，登記2個；種植胡蘿卜母根100畝，建采種大棚30棟，生產(chǎn)1.5噸胡蘿卜雜交種子。擬分解的

課題名稱1、胡蘿卜雄性不育三系更新?lián)Q代技術(shù)及遺傳穩(wěn)定性研究

2、抗抽苔、低溫著色型胡蘿卜雄性不育三系F1新品種選育研究

3、提高（A×C）F1制種質(zhì)量的保護地采種技術(shù)研究

4、胡蘿卜細胞質(zhì)雄性不育基因N、S生物技術(shù)標記分子輔助育種的研究創(chuàng)新點、主要技術(shù)難點和瓶頸問題1、創(chuàng)新點：三系材料的核心是保持系，本項目通過技術(shù)創(chuàng)新用（S）MS_材料代換（N）msms的核基因，創(chuàng)造新的CGMS(S)msms、（N）msms材料；Brown

Anther

Type溫度敏感型雄性不育系臨界溫度測定，探索胡蘿卜F1育種新途徑。

2、技術(shù)難點：雄性不育保持系（N）msms的更新技術(shù)；淘汰抽苔、著色不良技術(shù)；Brown

Anther

Type雄性不育系育性的溫度控制。

3、技術(shù)瓶頸：配制出不低于進口胡蘿卜雜交種，技術(shù)核心是選育出優(yōu)良CGMS雄性不育三系材料，需要解決的瓶頸就是三系材料創(chuàng)新技術(shù)。課題計劃來源

計劃級別地方科技計劃計劃名稱攻關(guān)項目編號

GJ2010GG002179項目名稱

胡蘿卜新品種選育及制種技術(shù)研究預期主要

成果形式

新產(chǎn)品(含農(nóng)業(yè)新品種、計算機軟件)項目開始時間2010.3項目截止時間

2013.2

二、申請人信息申

請

人

基

本

情

況姓名***性別男出生年月***學歷***學位***職稱***所學專業(yè)蔬菜學從事專業(yè)蔬菜遺傳育種與栽培工作單位***電話***手機***其他方式傳真***E-mail***項目

負責

人曾

承擔

各類

科技

計劃

項目

情況計劃名稱項目名稱名次政府資助金額起止時間完成情況

申請

人獲獎、

取得

知識

產(chǎn)權(quán)

及轉(zhuǎn)

化情況，

發(fā)表科普作品

、參與科普活動等情況申請人1983年大學畢業(yè)以來，主持和參加了甜菜、番茄、胡蘿卜、洋蔥等作物種質(zhì)資源引進、雄性不育三系遺傳育種、新品種示范推廣工作。從1995開始至今主要開展了胡蘿卜雄性不育三系引進和遺傳育種研究。主要研究成果有：育成甜菜新品種6個，累計推廣面積1000萬畝，洋蔥新品種2個，累計推廣面積15萬畝；在日本研究期間參加日本文部省研究計劃課題并參與登記胡蘿卜新品種1個；申請胡蘿卜雄性不育三系發(fā)明專利2項；曾主持和參加科研課題14項；獲原輕工業(yè)部科技進步二等獎1項、三等獎2項，黑龍江省科技進步三等獎2項，哈爾濱市科技進步二等獎1項；在《園藝學雜志》（日文）、《園藝學報》、《中國蔬菜》、《中國甜菜糖業(yè)》等核心刊物上發(fā)表論文40余篇。

項目

聯(lián)系

人姓名電話E-mail傳真手機/bp***************三、項目組、主要參加人員及協(xié)作單位情況人員總數(shù)博士后博士碩士學士博研碩研大學大專正高副高中級初級6人0人4人1人1人0人0人0人1人2人1人2人1人主

要

參

加

人

員姓名性別年齡學歷學位技術(shù)職稱所學專業(yè)從事專業(yè)工作單位分工工作時間***男52博士博士研究員蔬菜學蔬菜學***CGMS三系選育50%***男40博士博士副教授蔬菜學蔬菜學***F1組配與生產(chǎn)力測定40%***男30本科學士農(nóng)藝師園藝學蔬菜學***C系快速提純50%***女45?？?/p>

農(nóng)藝師園藝學蔬菜學***昆蟲媒介授粉?采種技術(shù)?種子加工85%***男37博士博士研究員蔬菜學生物技術(shù)***DNA分析40%***女26碩士碩士助研生物工程蔬菜學***田間試驗?調(diào)查?田間管理85%

協(xié)作

合作

單位

四、申請單位信息單位簡介：（發(fā)展歷程、從事行業(yè)、主要產(chǎn)品等）

公司***1983年大學畢業(yè)后始終從事植物雄性不育的研究工作。在日的6年研究期間，參加了導師主持的日本文部省研究計劃“胡蘿卜Petaloid

Type雄性不育系的遺傳、選拔和育種應用”課題，參加審定的雄性不育A、B對1組，登記的F1新品種1個。2000年回國，同時從日本系統(tǒng)引進了KURODA

TYPE胡蘿卜雄性不育三系材料。目前引進和創(chuàng)新的胡蘿卜種質(zhì)資源材料近500份，包括雄性不育A、B對3組、C系自交分離提純材料200余份。為建立集胡蘿卜科研、育種、產(chǎn)業(yè)開發(fā)、銷售于一體的高科技民營企業(yè)，在已有研究成果和市場業(yè)務的基礎(chǔ)上，2009年***組建***公司，注冊資金100萬元。公司現(xiàn)有職工8人中6人為科技研發(fā)人員。公司以蔬菜作物制種國產(chǎn)化為經(jīng)營方向，目前主要業(yè)務為胡蘿卜雄性不育三系F1新品種選育和產(chǎn)業(yè)化制種基地建設(shè)工作。公司的突出特點是研發(fā)能力強，擁有胡蘿卜育種的核心技術(shù)和CGMS雄性不育三系材料，為培育優(yōu)良F1新品種打下了基礎(chǔ)。注冊

資本100注冊

時間2009.11職工

人數(shù)8銀行信譽等級開戶行***帳號***時間資產(chǎn)總額固定資產(chǎn)負債總額資產(chǎn)負債率銷售收入凈利潤交納稅金研發(fā)經(jīng)費申報前一個月80504050%70212.3115五、項目經(jīng)費預算1、經(jīng)費來源預算單位：萬元項目2010年2011年2012年總計備注申請市科技計劃撥款503020100

單位自籌1307050250

銀行貸款40201070

其它（風投、創(chuàng)投等）0000

合計22012080420

2、經(jīng)費支出預算單位：萬元支出項目支出明細包括名稱、型號、單位、數(shù)量等總金額其中市撥人員費1、課題負責人6.0(每年2萬，3年)

6.0

2、主要研究人員22.5(每人每年1.5萬，5人3年)

22.5

3、其它人員36.0(公司職工4人，每人每年1.2萬，3年14.4萬；臨時用工每年40元×6個月/×10人×3年＝21.6萬)

36.0

儀器設(shè)備費1、購置費

2、試制費6.0(DNA片段回收試劑盒、測序及各種分子生物學實驗試劑)

6.0

2.0

3、建筑工程費150.0(30畝制種大棚30萬，母根貯存庫2000m280萬，冬季采種溫室200m210萬)

120.0

30.0

4、種子脫毛機制造2.0（鋼板、角鋼、電機購置費）

2.0

1.0

相關(guān)業(yè)務費1、材料費130.0（購入核心CGMSA、B對2組，需80萬；微噴設(shè)施10公頃、米氏瓷盆1500個、網(wǎng)箱500個、25目紗網(wǎng)10000m2、棚膜、肥料、農(nóng)藥，50萬）

130.0

40.0

2、燃燒及動力費15.5（溫室及實驗室水電費、灌溉電費、機耕費）

15.5

5.0

3、測試及化驗費4.0（遺傳分析、隨機引物合成）

4.0

2.0

4、會議差旅費20.0(學術(shù)會、種質(zhì)引進、區(qū)域試驗、國際合作交流)

20.0

5.0

5、出版物/文獻/信息傳播費20.0（論文發(fā)表版面費、專利申報、田間鑒評、品種登記、課題鑒定驗收、資料收集）

20.0

10.0

6、土地流轉(zhuǎn)費18.0（共150畝，每畝每年400元，3年）

18.0

2.0

課題管理費

5.0

協(xié)作費

5.0（DNA分析、LSSR、AFLP分子標記、RAPD擴增）

5.0

2.0

其它費用

10.0

10.0

預算支出合計

420.0

100.0

六、資金保證評價項目總投資420萬元，其中企業(yè)自籌320萬元，申請政府投資100萬元。

企業(yè)自籌資金保障：流動資金100萬元（已入公司賬戶），擴股吸納社會資金150萬元（將原公司股份做40％，吸收3方股份，各占20％，在開發(fā)成熟一部分時按股分紅利，已達成協(xié)議），貸款70萬元（固定資產(chǎn)評估140萬元），合計320萬元。七、研究開發(fā)的目的、意義：(1000字以內(nèi))

胡蘿卜(Daucus

carota

L．)為傘形科胡蘿卜屬二年生草本植物，是目前唯一比較容易大量獲得維生素A源的蔬菜作物。世界上發(fā)達國家普遍栽培和食用胡蘿卜，胡蘿卜汁飲料等需要大量加工用胡蘿卜原料，另外在畜牧業(yè)上作為飼料業(yè)大量使用胡蘿卜。全世界胡蘿卜年貿(mào)易流通量約在150萬噸，貿(mào)易量在蔬菜作物中位居前列。我國出口量和出口金額分別為39．0萬噸和1．04億美元，占世界洋蔥出口量的26％。據(jù)聯(lián)合國糧食與農(nóng)業(yè)組織(FAO)統(tǒng)計，2008年全世界胡蘿卜栽培總面積為109．92萬hm2，其中我國45．3萬hm2，占全世界栽培面積的42．0％。我國已成為世界胡蘿卜第一生產(chǎn)國和主要出口國。以往日本、韓國的進口胡蘿卜以美國產(chǎn)品為主，但近年來隨著F1胡蘿卜的引進栽培開發(fā)成功，中國產(chǎn)胡蘿卜占居了該市場的主要份額，出口量增長近10倍。對俄遠東市場的年出口量約在15萬噸，黑龍江口岸約在12萬噸，占80％左右。目前我國F1胡蘿卜種子市場尚無國產(chǎn)主導品種，國內(nèi)F1胡蘿卜種子市場被法國利馬格蘭（GROUPE

LIMAGRAIN）、荷蘭BEJO

SEED、日本SAKADA、MARUTANE及TAKII等種苗公司所壟斷。每年以每公斤350～550美元單價進口約50噸高檔F1種子及以每公斤50～80美元價格進口中檔種子100噸。我國目前胡蘿卜種子的年需求量在1100噸，其中北方的新疆產(chǎn)區(qū)、甘肅產(chǎn)區(qū)、寧夏產(chǎn)區(qū)、內(nèi)蒙古高原產(chǎn)區(qū)、山西大同、河北壩上地區(qū)、東北三省栽培區(qū)域的胡蘿卜種子需求量就達年300噸，僅黑龍江就有30噸的銷售市場。目前多數(shù)以常規(guī)種為主，品質(zhì)差不適于出口。

我國目前出口的胡蘿卜多從日本直接進口的F1品種而來。日本進口商在日本種苗界的委托下常以種植日本品種作為進口的前提條件。另一方面日本政府以保護日本農(nóng)民為理由2003年重新修正《種苗修正案》，規(guī)定未經(jīng)交納種苗技術(shù)專利費、擅自利用日本植物種源生產(chǎn)或改良農(nóng)產(chǎn)品的，個人侵權(quán)者被處以300萬日元以下的罰金或三年以下有期徒刑，法人企業(yè)侵權(quán)時可最高處以1億日元的罰金。這一規(guī)定為限制我國輸日胡蘿卜埋下設(shè)置了障礙。

開展胡蘿卜雄性不育三系F1新品種選育及制種技術(shù)研究，解決胡蘿卜優(yōu)良品種國產(chǎn)化是提高我國胡蘿卜生產(chǎn)力水平的提前條件。胡蘿卜種植面積居世界第一位的國家，其產(chǎn)業(yè)的發(fā)展不能長期依賴進口種子，最終要走國產(chǎn)化的道路，實現(xiàn)這一目標的基礎(chǔ)條件及核心技術(shù)就是育成能和國外品種抗衡的國產(chǎn)化品種和產(chǎn)業(yè)化制種技術(shù)。八、國內(nèi)外相關(guān)行業(yè)現(xiàn)狀、發(fā)展趨勢及市場需求：(1000字以內(nèi))

胡蘿卜為異花授粉作物，由于花器官很小，難以開展常規(guī)人工雜交育種。因此，早期育種方法主要采用群體選擇和系譜選擇法，但這種方法育成的品種一致性和穩(wěn)定性都比較差，主要原因在于常規(guī)品種本身的雜合性和群體內(nèi)自交造成嚴重的種性衰退。進入20世紀，眾多研究機構(gòu)或種子公司嘗試進行有性雜交育種。在北美，通過常規(guī)品種間的雜交獲得一些很成功的品種，如Imperator、Gold

Pak等，其中Gold

Pak是通過Long

Imperator和Nantes雜交獲得的。亞洲主栽的桔紅色品種黑田五寸(Kuroda)是由東方類型和西方類型雜交選育獲得的。

20世紀40年代就有學者建議進行胡蘿卜F1的選育。隨著胡蘿卜細胞質(zhì)雄性不育材料的發(fā)現(xiàn)，胡蘿卜F1的選育成為現(xiàn)實。20世紀60年代，美國率先育成了胡蘿卜一代雜種。目前，發(fā)達國家使用的胡蘿卜品種多為F1，但不同國家使用的雄性不育源不同，如美國主要以Petaloid

Type為主，歐洲多數(shù)種子公司使用Brown

Anther

Type，亞洲多使用Petaloid

Type。

我國胡蘿卜育種研究工作起步于20世紀60年代，吳光遠等在Imperator品種中發(fā)現(xiàn)了胡蘿卜褐藥型雄性不育株，進行了雄性不育系的選育工作，后來該項研究中斷。天津市園藝研究所選育的天紅品種，由于選種地自然氣候條件如母根的低溫感應問題，低溫著色等性狀上不能嚴格淘汰，在北方栽培時出現(xiàn)抽苔較重、根著色不良等問題，不能與進口種子抗衡，在國內(nèi)推廣面積較小。目前國內(nèi)尚沒有替代進口品種的優(yōu)良材料，這方面的研究滯后嚴重。

本課題組自1995年開始系統(tǒng)引進KURODA

TYPE胡蘿卜CGMS三系種質(zhì)資源，包括A、B對2組，優(yōu)良常規(guī)品種（系）30余份。在此基礎(chǔ)上通過保持系更新技術(shù)創(chuàng)新A、B對材料1組，自交分離C系材料200余份；系統(tǒng)地開展了胡蘿卜雄性不育三系選育和雜交制種研究工作，在材料選育上對先期抽苔、著色不良等性狀能夠嚴格淘汰。經(jīng)過持續(xù)10余年的攻關(guān)研究，通過引進和創(chuàng)新保存胡蘿卜種質(zhì)資源近500份，其中核心材料有抗抽苔、著色優(yōu)良的A、B對1組MS001A、MS001B，抗病、根形優(yōu)良的C系核心材料5份。目前正在進行F1組合配制和生產(chǎn)力測定工作。

胡蘿卜F1雜交種在商品性和產(chǎn)量等指標均高于常規(guī)品種，無論內(nèi)銷還是出口發(fā)展趨勢是雜交種將最終取代常規(guī)種。目前F1雜交種國產(chǎn)化率幾乎是零，種植的主要為日本種苗公司的KURODA

TYPE系，我國胡蘿卜種子年需總量為1100噸，市場需求潛力巨大，未來10年內(nèi)國產(chǎn)胡蘿卜雜交種都將處于供不應求的情況，不存在滯銷的市場風險

九、用途和應用領(lǐng)域：(500字以內(nèi))

種源控制和品種開發(fā)是世界胡蘿卜產(chǎn)業(yè)的核心。黑龍江省政府農(nóng)業(yè)良種化工程實施方案強調(diào)：種子產(chǎn)業(yè)發(fā)展水平直接決定農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)的整體效益和產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展。按照充分發(fā)揮市場引導作用，加強政府扶持引導的原則，種子工程建設(shè)的調(diào)動地方、企業(yè)及社會各界投入為主，以政府補助投資為輔，加快種子工程建設(shè)。黑龍江省國民經(jīng)濟和社會發(fā)展第十一個五年規(guī)劃綱要指出：實施良種化工程，引進、選育、推廣100個達到或接近國際品種標準、符合市場需求的農(nóng)作物新品種。

胡蘿卜雜交制種國內(nèi)尚屬空白階段，種植所用均屬進口雜交品種，價格昂貴。本項目雜交制種的研制成功首先填補了國內(nèi)無雜交品種的空白，代替進口雜交品種，降低了生產(chǎn)投入成本，胡蘿卜雄性不育雜交一代的研制成功，可解決我國北緯40度以北區(qū)域的新疆產(chǎn)區(qū)、甘肅產(chǎn)區(qū)、寧夏產(chǎn)區(qū)、內(nèi)蒙古高原產(chǎn)區(qū)、山西大同、河北壩上地區(qū)、東北三省胡蘿卜產(chǎn)區(qū)的雜交種源問題。相當于日本“新黑田五寸”生產(chǎn)力水平的雜交一代可出口至北朝鮮、韓國江原產(chǎn)區(qū)、獨聯(lián)體國家產(chǎn)區(qū)及歐美干旱種植區(qū)。僅我國北方寒區(qū)的胡蘿卜開發(fā)容量在200萬畝，種子市場潛力在300噸/年。十、項目研究內(nèi)容、總體目標、關(guān)鍵技術(shù)內(nèi)容、需解決的技術(shù)瓶頸、創(chuàng)新點和知識產(chǎn)權(quán)情況：

1、研究內(nèi)容：（1）胡蘿卜雄性不育保持系（N）msms的更新技術(shù)研究；（2）Brown

Anther

Type雄性不育系溫度敏感性（溫敏型TGMS）研究；（3）Petaloid

Type雄性不育花冠顏色遺傳機制研究；（4）C系快速提純技術(shù)研究；（5）提高（A×C）F1制種質(zhì)量的栽培技術(shù)研究；（6）胡蘿卜細胞質(zhì)雄性不育基因N、S分子輔助育種的研究。

2、總體目標：以實現(xiàn)主要蔬菜作物雜交種種業(yè)國產(chǎn)化為發(fā)展目標，開展胡蘿卜雄性不育三系F1育種及制種產(chǎn)業(yè)化開發(fā)攻關(guān)技術(shù)研究。從基礎(chǔ)上建立CGMS雄性不育三系育種材料體系，以提高創(chuàng)新能力及核心競爭力，提出A、B對2組，F(xiàn)1雜交種新品種2個，登記2個；種植胡蘿卜母根100畝，建采種大棚30棟，生產(chǎn)1.5噸胡蘿卜雜交種子。

3、關(guān)鍵技術(shù)內(nèi)容：雄性不育保持系（N）msms的更新技術(shù)；淘汰抽苔、著色不良技術(shù)；溫度對Brown

Anther

Type雄性不育系育性控制。

4、需解決的技術(shù)瓶頸：配制出不低于進口胡蘿卜雜交種，技術(shù)核心是選育出優(yōu)良CGMS雄性不育三系材料，需要解決的瓶頸就是三系材料創(chuàng)新技術(shù)。

5、創(chuàng)新點：三系材料的核心是保持系，本項目通過技術(shù)創(chuàng)新用（S）MS_材料代換（N）msms核基因，創(chuàng)造新的CGMS(S)msms、（N）msms材料；測定Brown

Anther

Type溫度敏感型雄性不育系臨界溫度，探索胡蘿卜F1育種新途徑。

6、知識產(chǎn)權(quán)情況：引進日本KURODA

TYPE雄性不育三系A(chǔ)、B對2組K156A、K156B和TK06A、TK06B，均為一次性購入產(chǎn)權(quán)，歸本項目承擔者所有。創(chuàng)新A、B對1組MS001A、MS001B，具有100%自有知識產(chǎn)權(quán)。自交分離提C系材料200余份，其中抗病、根形優(yōu)良的核心材料5份。申報2項育種技術(shù)發(fā)明專利。十一、研究方法、技術(shù)路線（工藝、流程）、成果或知識產(chǎn)權(quán)應用、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)移的方案：(1300字以內(nèi))

1、研究方法與技術(shù)路線：

（1）胡蘿卜雄性不育保持系(N)msms更新技術(shù)研究。應用自主專利技術(shù)更新保持系：優(yōu)良F1多代自交獲純系(S)MS＿→(N)msms經(jīng)典保持系×(S)MS_→(N)MSms、(N)msms(母50％、父50％)→(N)MSms或(N)msms×(S)MS＿→(N)MSMS、(N)MSms、(N)msms(母25％、父75％)→(N)MSMS或(N)MSms或(N)msms

×(S)MS＿→(N)MSMS、(N)MSms、(N)msms(母12.5％、父87.5％)→(N)MSMS或(N)MSms或(N)msms

×(S)MS＿→(N)MSMS、(N)MSms、(N)msms(母6.25％父93.75％)→(S)msms經(jīng)典不育系×(N)MSMS或(N)MSms或(N)msm新保持系→(S)MSMS可育、(S)MSms

可育、(S)msms不育

（2）Brown

Anther

Type雄性不育系溫度敏感性（溫敏型TGMS）研究。2007年在不育系中發(fā)現(xiàn)高溫育性恢復敏感型株系TK06-31A，本研究測定其臨界溫度：①在人工氣候培養(yǎng)箱內(nèi)設(shè)置不同溫度處理；②防雨采種棚新塑料遮蓋、舊塑料遮蓋、舊塑料加遮陰網(wǎng)三個處理。

（3）Petaloid

Type雄性不育花冠顏色遺傳機制研究。選瓣化型雄性不育系與可育自交系雜交，然后測交或自交，調(diào)查花冠顏色分離情況，分析其遺傳機制。

（4）C系快速提純技術(shù)研究。①一年一周期法：冬季溫室采種；②生物技術(shù)法：花藥培養(yǎng)→再生植株→加倍→純系

（5）提高（A×C）F1制種質(zhì)量的技術(shù)研究。防雨棚和人工授粉技術(shù)；加工方法與種子淺休眠、芽勢、芽率關(guān)系。

（6）胡蘿卜細胞質(zhì)雄性不育基因N、S生物技術(shù)標記分子輔助育種的研究。目的：通過生物技術(shù)基因標記方法，標記細胞質(zhì)基因N型（可育）與S型（不育），標記細胞核msms型基因。供于迅速判斷（N）MS＿型、（N）msms型、（S）msms型。方法、路線：每群體株數(shù)均大于200株，隨機選取30株進行檢測。線粒體和葉綠體DNA提取、分離→DNA純化→DNA擴增→RAPD擴增、LSSR、AFLP分子標記。

2、成果或知識產(chǎn)權(quán)應用、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)移的方案：本研究成果胡蘿卜F1制種技術(shù)可申請發(fā)明專利，以保護知識產(chǎn)權(quán)。公司掌握核心制種技術(shù)、有較強的市場開發(fā)能力，將自主開發(fā)胡蘿卜F1國產(chǎn)化制種工作。

十二、與現(xiàn)有技術(shù)或工藝比較所具有的優(yōu)勢特點：(500字以內(nèi))

1、創(chuàng)新F1雜交種：

與目前國內(nèi)已育成登記的常規(guī)系統(tǒng)選育相比較有明顯的雜交優(yōu)勢、整齊度高、商品性狀好，育種目標有顯著可操控性。與進口雜交種比較本項目培育的F1品種抗抽苔、產(chǎn)量高、顏色佳。目前美、荷的品種在我國北方栽培有時抽苔較重，日本的TAKII

SEED的品種能夠適應東北地區(qū)的生態(tài)環(huán)境，但價格上過高限制了使用。利用國內(nèi)低成本的保護地采種方式與國外進口高檔種子競爭市場。日本種子商均在海外委托合同制種，三系雜交種的委托合同價在80～100美元/公斤左右，進口商須支付13％進口增值稅，加之國內(nèi)1～2級批發(fā)代理，至少加價30％。本項目保護地本土采種，生產(chǎn)成本在100元/公斤左右，訂單生產(chǎn)價在300～500元/公斤，質(zhì)量不低于進口的F1種子，國產(chǎn)化生產(chǎn)在采種成本上有明顯的競爭優(yōu)勢。

2、采種方法：

與目前國內(nèi)外大公司的傳統(tǒng)適區(qū)露天采種相比，人為可控性好。千粒重、發(fā)芽率等種子商品性狀上不低于或超過國外同類的雜交一代商品種子。

十三、關(guān)鍵技術(shù)突破后對所屬領(lǐng)域產(chǎn)業(yè)的作用與影響：(500字以內(nèi))

種源控制和品種開發(fā)是世界胡蘿卜產(chǎn)業(yè)的核心。胡蘿卜F1雜交種在商品性和產(chǎn)量等指標均高于常規(guī)品種，無論內(nèi)銷還是出口發(fā)展趨勢是雜交種將最終取代常規(guī)種。目前我國胡蘿卜種子年需總量為1100噸，市場需求巨大，但F1雜交種國產(chǎn)化率幾乎是零。開展胡蘿卜雄性不育三系F1新品種選育及制種技術(shù)研究，解決胡蘿卜優(yōu)良品種國產(chǎn)化是提高我國胡蘿卜生產(chǎn)力水平的提前條件，也是發(fā)展我國胡蘿卜產(chǎn)業(yè)、縮短與先進國家的差距、提高國際市場競爭力的技術(shù)條件。胡蘿卜種植面積居世界第一位的國家，其產(chǎn)業(yè)的發(fā)展不能長期依賴進口種子，最終要走國產(chǎn)化的道路，實現(xiàn)這一目標的基礎(chǔ)條件及核心技術(shù)就是育成能和國外品種抗衡的國產(chǎn)化品種和產(chǎn)業(yè)化制種技術(shù)。

本項目完成后，可填補我國胡蘿卜F1雜交種空白，向市場提供1.5噸F1種子，促進黑龍江、吉林的大多數(shù)主產(chǎn)區(qū)的對俄出口胡蘿卜產(chǎn)業(yè)發(fā)展，種源將不再受外國種苗界的壟斷性控制，在國產(chǎn)化種源根基上穩(wěn)步發(fā)展。十四、環(huán)境保護、資源綜合利用、節(jié)能等相關(guān)措施：(500字以內(nèi))

1、培育抗病、蟲品種，減少農(nóng)藥使用量，因而可降低對環(huán)境的污染。

2、全面推廣測土配方施肥，建立科學的平衡施肥制度，增加有機肥用量，執(zhí)行綠色食品化肥施用標準，合理、有限度施用化肥，減少耕地養(yǎng)分流失和環(huán)境污染。

3、全面推廣病蟲草害的化學、生物、農(nóng)藝、人工綜合防治，執(zhí)行綠色食品農(nóng)藥施用標準，最大限度地減少農(nóng)藥對環(huán)境造成地影響。

4、通過項目建設(shè)，提高項目區(qū)農(nóng)民收入，增強農(nóng)民改善生態(tài)環(huán)境的能力和主動性。十五、已具備的研究開發(fā)條件

1、現(xiàn)有工作基礎(chǔ)、本單位人員、實驗設(shè)備、技術(shù)水平等情況：（800字以內(nèi)）

1、工作基礎(chǔ)：目前本課題組通過引進和創(chuàng)新保存胡蘿卜種質(zhì)資源近500份。其中從日本引進KURODA

TYPE胡蘿卜雄性不育三系材料2組，通過自主創(chuàng)新1組。C系自交分離提純材料200余份。申報發(fā)明專利2項。本項目組掌握胡蘿卜育種的核心技術(shù)和CGMS雄性不育三系材料，奠定了胡蘿卜雄性不育三系F1雜交種制種的基礎(chǔ)。目前正在進行F1雜交組合配制和F1生產(chǎn)力鑒定研究工作。

2、研究力量：參加本項目的研究成員共7人，高級職稱4人，中級職稱2人，初級職稱1人，其中博士4人，碩士1，具有系統(tǒng)扎實的專業(yè)理論基礎(chǔ)與豐富的實踐經(jīng)驗基礎(chǔ)。精通日、英、俄、韓語與國際同行建立了廣泛的合作關(guān)系，不斷地從國外引進最新育種材料與技術(shù)資料。是具有強大凝聚力的高素質(zhì)科研隊伍，為本項目順利實施提供了有力的技術(shù)支持的保障。

3、現(xiàn)有實驗設(shè)備條件：項目申請者及主要參與者所在的研究室具有試驗用地100畝，用于種質(zhì)資源的引種馴化、保存、繁育與創(chuàng)新，小份采種大棚2棟。擁有遺傳育種實驗室、基因序列分析實驗室、分子生物學實驗室、組織培養(yǎng)室。有無菌操作臺，凝膠成像系統(tǒng)，PCR擴增儀，超速冷凍離心機，電子顯微鏡等實驗設(shè)備等儀器設(shè)備?？梢詽M足本項目研究的需要。2、第一協(xié)作單位配套情況（協(xié)作情況、保證條件、配套條件）：（500字以內(nèi)）3、第二協(xié)作單位配套情況（協(xié)作情況、保證條件、配套條件）:（500字以內(nèi)）十六、項目考核指標管理指標:(擬執(zhí)行、擬取得權(quán)威管理部門頒發(fā)的技術(shù)標準、技術(shù)規(guī)范、許可證、認證、資質(zhì)等)

1、育成雄性不育F1新品種2個，登記2個。2010年向黑龍江省農(nóng)作物品種審定委員會申請進行專家田間鑒定，2011年申請品種登記，擬獲得黑龍江省農(nóng)作物品種委員會頒發(fā)的品種登記證書。

2、申請發(fā)明專利2項，擬獲得國家知識產(chǎn)權(quán)局頒發(fā)的發(fā)明專利證書。

3、F1種子純度98％，千粒重在1.5克以上，芽勢、芽率達國際標準

4、項目完成后，及時向哈爾濱市科技局提交項目技術(shù)工作報告，申請對項目進行鑒定，擬獲得哈爾濱市科技局頒發(fā)的成果證書。

5、本研究項目嚴格執(zhí)行國家行業(yè)標準中的有關(guān)各項規(guī)定，逐步建立完善的質(zhì)量標準體系，質(zhì)量監(jiān)控體系和產(chǎn)品開發(fā)體系。主要技術(shù)指標:

1、出優(yōu)良A、B對材料2組?？钩樘π缘陀?％、濃紅色，優(yōu)于更新前的經(jīng)典材料。

2、育成雄性不育F1新品種2個，登記2個?？钩樘π缘陀?％、濃紅色，優(yōu)于日本進口品種新黑田五寸，產(chǎn)量等其他綜合指標與之相當。

3、采種大棚為鋼架結(jié)構(gòu)，長74m，寬7.4m，面積550m2，2個鋼架間距1.2m。

4、項目完成時提供F1種子1.5噸，F(xiàn)1種子純度98％，千粒重在1.5克以上，芽勢、芽率達國際標準，畝生產(chǎn)50公斤雜交種子。

5、申請發(fā)明專利兩項。通過技術(shù)創(chuàng)新，掌握培育優(yōu)良性狀保持系（N）msms更新?lián)Q代的核心技術(shù)。成果指標:(新技術(shù)、新產(chǎn)品、新工藝、新裝置、計算機軟件、論文、著作、技術(shù)標準、規(guī)范等的數(shù)量、水平、級別等)序號成果形式數(shù)量水平備注1新產(chǎn)品(含農(nóng)業(yè)新品種、計算機軟件)2組抗抽苔性低于5％、濃紅色，優(yōu)于經(jīng)典材料應用提純復壯技術(shù)和保持系更新技術(shù)創(chuàng)新CGMS雄性不育A、B對2組。2新產(chǎn)品(含農(nóng)業(yè)新品種、計算機軟件)2個綜合性狀不低于進口F1新黑田五寸應用具有100%自有知識產(chǎn)權(quán)的胡蘿卜育種核心技術(shù)和CGMS雄性不育三系材料，擬育成雄性不育F1新品種2個?？钩樘π缘陀?％、濃紅色，產(chǎn)量等其他綜合指標不低于日本進口品種新黑田五寸。3新技術(shù)2項自主創(chuàng)新技術(shù)A、B對提純復壯和更新是胡蘿卜CGMS雄性不育三系育種的核心技術(shù)，本研究成擬申請發(fā)明專利，以保護自有知識產(chǎn)權(quán)。4新產(chǎn)品(含農(nóng)業(yè)新品種、計算機軟件)1.5噸質(zhì)量達國際標準F1種子1.5噸，千粒重1.5克以上、發(fā)芽率85％以上、純度95％以上、凈度98％以上達國際標準，畝生產(chǎn)50公斤雜交種子5論文論著2篇國家一級期刊

專利情況:序號專利類別名稱受理及授權(quán)情況備注1發(fā)明專利一種胡蘿卜CGMS雄性不育保持系的更新方法受理

2發(fā)明專利一種胡蘿卜PetaloidType型CGMS雄性不育材料的轉(zhuǎn)育方法受理

主要經(jīng)濟指標:(預期取得的經(jīng)濟效益、市場規(guī)模、社會效益等)生產(chǎn)能力銷售量銷售收入利潤稅金

其它2010年2011年F1雜交種子200kg200kg20萬元12萬元1.32萬元2012年F1雜交種子1500kg1500kg150萬元90萬元9.9萬元執(zhí)行期內(nèi)

累計指標F1雜交種子1700kg1700kg170萬元102萬元11.22萬元社會效益:

1、項目實施到位建30棟采種棚作為胡蘿卜F1國產(chǎn)化制種基地，對自育品種進行良種繁育，年生產(chǎn)1.5噸雜交種子，以每公斤300元價訂單生產(chǎn)，項目區(qū)農(nóng)戶年收入為45萬元，平均每個農(nóng)戶增收1.5萬元（每戶承包1個大棚），純利潤約1萬元。公司按每公斤1000元價格銷售，銷售收入150萬元，扣除種子生產(chǎn)費用45萬元和銷售成本15萬元，凈利潤約為90萬元。1.5噸優(yōu)良雜交種，可供應9000畝種植區(qū)，與進口種子相比，種植戶每年節(jié)省種子費50％約150萬元。

2、解決我國胡蘿卜雄性不育F1雜交種產(chǎn)業(yè)化制種瓶頸，從而打破進口種子壟斷我國胡蘿卜高端種子市場的現(xiàn)狀，逐步平抑胡蘿卜種子市場價格，大幅度降低胡蘿卜生產(chǎn)成本，促進胡蘿卜胡蘿卜產(chǎn)業(yè)在國產(chǎn)化種源根基上穩(wěn)步發(fā)展。

3、促進農(nóng)民就業(yè)，每戶農(nóng)民可經(jīng)營棟采種大棚，可安排30人二次就業(yè)。

4、對項目區(qū)種植業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整、提高農(nóng)民種植技術(shù)水平、農(nóng)產(chǎn)品安全生產(chǎn)、農(nóng)民增收、出口創(chuàng)匯、擴大內(nèi)銷市場、擴大保健蔬菜消費將起有力的推動作用。人才培養(yǎng):(項目實施過程中對科技人才培養(yǎng)情況)

公司需要多層面相應專業(yè)的專門人才。首先，在公司內(nèi)部，應該注重自身人力資源的挖掘，積極培養(yǎng)人才。本項目的實施將為年輕研究人員提供施展才華的“舞臺”與“目標”，加之建立一套“增壓”和考核的機制，從而促進其脫穎而出，業(yè)務水平上一個臺階。公司讓2名中青年研究人員進入研究的核心領(lǐng)域，擔當重要攻關(guān)內(nèi)容，在統(tǒng)一研究方案前提下和有經(jīng)驗的育種專家的指導下，放手讓他們獨擋一面，在實際攻關(guān)研究中得到鍛煉，提高專業(yè)研究能力，為他們成為公司的研究中堅力量打下基礎(chǔ)。其次，在人才競爭十分激烈的今天，公司根據(jù)自身發(fā)展的需要，有計劃地引進各類人才，也是企業(yè)增強活力和競爭力的有效途徑。隨著業(yè)務的發(fā)展，公司計劃招聘年輕的專業(yè)研究人員2名。本項目能提供一個施展才華的舞臺，安排參加本項目的研究攻關(guān)，在項目實施過程中，提高專業(yè)研究能力、積累實踐工作經(jīng)驗，成為基礎(chǔ)理論知識扎實、動手能力強、能夠獨立思考、創(chuàng)新型的蔬菜育種專業(yè)人才，作為公司進一步發(fā)展的人才儲備力量。基地建設(shè):(項目實施過程中形成的示范基地、中試線、生產(chǎn)線及其規(guī)模)

應用自主創(chuàng)新胡蘿卜CGMS三系F1雜交組合和大棚保護地制種技術(shù)，項目實施到位建30棟采種棚作為胡蘿卜F1國產(chǎn)化制種基地，對自育品種進行良種繁育。年生產(chǎn)1.5噸雜交種子，以每公斤300元價訂單生產(chǎn)，項目區(qū)農(nóng)戶年收入為45萬元。公司按每公斤1000元價格銷售，銷售收入150萬元，扣除種子生產(chǎn)費用45萬元和銷售成本15萬元，凈利潤約為90萬元。1.5噸優(yōu)良雜交種，可供應9000畝種植區(qū)，與進口種子相比，種植戶每年節(jié)省種子費50％約150萬元。其它指標:

進口胡蘿卜F1雜交種種子因為昂貴的價格及較高的進口增值稅，難以在我國大面積推廣種植。根據(jù)我國胡蘿卜F1種子空白以及北方市場和俄羅斯市場需求，在此基礎(chǔ)上部分利潤用于擴大再生產(chǎn)，5年內(nèi)制種基地可達400畝制種田、每年開發(fā)20噸F1種子規(guī)模，農(nóng)戶種子生產(chǎn)可創(chuàng)600萬元產(chǎn)值、400萬元效益；公司可產(chǎn)生20000萬元產(chǎn)值、1200萬效益。20噸F1種子供應10萬畝胡蘿卜生產(chǎn)區(qū)種，種植產(chǎn)區(qū)年生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)胡蘿卜25萬噸，供應俄遠東及北方市場，年創(chuàng)產(chǎn)值1.75億元，效益1.2億元。進口種子每公斤按300美元計算，每年可節(jié)匯600萬美元。黑龍江、吉林的大多數(shù)主產(chǎn)區(qū)的對俄出口胡蘿卜產(chǎn)業(yè)發(fā)展，種源將不再受外國種苗界的壟斷性控制，在國產(chǎn)化種源根基上穩(wěn)步發(fā)展。十七、項目預期指標可行性分析各類指標的制定依據(jù)、測算方法、可行性分析。

1、技術(shù)指標可行性分析

1995年項目負責人赴日本進行胡蘿卜CGMS雄性不育系選育及其遺傳機制的研究，在此研究工作的基礎(chǔ)上，系統(tǒng)引進了日本低溫著色的寒地生態(tài)型胡蘿卜資源。至今引進和創(chuàng)新保存胡蘿卜種質(zhì)資源近500份，引進了胡蘿卜雄性不育A、B對2組，自主創(chuàng)新1組；自交分離C系材料200份；胡蘿卜育種技術(shù)發(fā)明專利2項。在掌握了豐富的胡蘿卜種質(zhì)資源基礎(chǔ)上，并通過創(chuàng)新選育技術(shù)上對先期抽苔、著色不良等性狀能夠嚴格淘汰，為創(chuàng)新2組胡蘿卜雄性不育A、B對打下了基礎(chǔ)。本項目組的突出特點是研發(fā)能力強，通過技術(shù)創(chuàng)新掌握了胡蘿卜育種的核心技術(shù)和CGMS雄性不育三系材料，目前進入大量配制胡蘿卜雄性不育三系F1雜交組合和生產(chǎn)力測定階段，能夠保證篩選出優(yōu)良的F1雜交組合，提出2個品種參加田間鑒定及品種登記。建立了一整套胡蘿卜雄性不育三系F1產(chǎn)業(yè)化制種的技術(shù)規(guī)程，可以保證30棟采種大棚規(guī)模的成果轉(zhuǎn)化基地建設(shè)順利實施。

2、經(jīng)濟指標可行性分析

我國胡蘿卜栽培面積45．3萬hm2，年需1100噸胡蘿卜種子，其中北方區(qū)域300噸，黑龍江30噸，市場容量巨大。目