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大蒜中可溶性多糖的提取分離與檢測指導(dǎo)老師:蔣開軍班級:生物工程0702學(xué)生:葉玉平學(xué)號:200706030221大蒜中多糖的種類及結(jié)構(gòu)
多糖是指由10個以上的單糖分子通過糖苷鍵連接而成的高分子聚合物,可以包括幾百甚至幾千個單糖分子。在多糖結(jié)構(gòu)中除含單糖外,有時還含有糖醛酸、糖醇、氨基糖等,甚至別的其他取代基團(tuán)。大蒜多糖主要含85.0%的果糖,分子量9000-10000道爾頓,分子度為9。果聚糖結(jié)構(gòu)以β-2-1連接為主,帶少量的2~6支鏈的短片段聚糖;聚合度一般平均為58,屬于新蔗果三糖類果聚糖;其終端為葡萄糖單位,分子式為GFn,其中G為終端葡萄糖單位,F(xiàn)代表果糖分子,n則代表果糖單位數(shù)。另外大蒜多糖還含14.0%葡萄糖和1.0%半乳糖的雜多糖。果糖、葡萄糖的糖苷鍵為β-糖苷鍵.
研究的目的及意義目的:在于通過實驗得出熱水浸提法提取大蒜中的多糖的最佳工藝參數(shù)。意義:本實驗根據(jù)大蒜多糖自身的特點(diǎn),在現(xiàn)有的實驗條件下,采用熱水浸提法提取大蒜中的多糖,再通過合適的純化、鑒定方法,從而可以得到比較純的大蒜多糖,因此可以為進(jìn)一步的理論研究和應(yīng)用提供合格的樣品。葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定圖1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
利用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品配制的標(biāo)準(zhǔn)液,用紫外分光光度計于490nm的波長下測定其吸光度,從而得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。線性方程為A=0.0011+0.0039C1。因此大蒜多糖的提取率=M2/M1×100%M2=C×V=0.9×K1×K2×A×V提取溫度溫度單因素實驗圖2提取溫度單因素實驗
從圖2中可以看出隨著溫度的升高,粗多糖的提取率逐漸增大,但超過80℃以后提取率有所降低,原因是隨著溫度的逐漸升高多糖會發(fā)生降解,因此選擇80℃為提取溫度。料水比單因素實驗圖3料水比單因素實驗
由圖3可以看到當(dāng)用水量增大時,粗多糖提取率也提高1:7時達(dá)到最高,且與后面的提取率基本平行。一般說來,料液比越高提取率也較高,但料液比增加,成本增加,在保證提取效果的同時,應(yīng)減少水的用量和降低蒸發(fā)濃縮負(fù)荷,因此料液比選擇1:7。提取時間單因素實驗圖4提取時間單因素實驗
從圖4中可以看出,隨著提取時間的延長,粗多糖的提取率呈上升趨勢,在180min左右提取率達(dá)到較高值,隨后再延長提取時間,提取率趨于平緩,說明大蒜中多糖基本提取完畢,為縮短工時節(jié)省能源,選擇180min為提取時間。大蒜多糖純度鑒定
大蒜多糖經(jīng)去除果膠類物質(zhì),Sevag除蛋白,再經(jīng)纖維素層析柱純化,最后上樣于SephadexG100柱以檢查其純度,用蒸餾水
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