梅毒感染的實驗室檢測流程及策略課件

浙江大學醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院檢驗科陶志華E-mail:zrtzh@

梅毒感染的實驗室檢測流程與策略1ppt課件浙江大學醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院梅毒感染的實驗室檢測1ppt課件

梅毒流行病學簡介

梅毒實驗室檢測流程羅氏梅毒檢測試劑多中心研究結果梅毒實驗室檢測策略主要內(nèi)容2ppt課件梅毒流行病學簡介主要內(nèi)容2ppt課件

據(jù)最新估計，全球每年有1200萬新發(fā)梅毒感染病例，其中200萬為孕婦WHO.2011;WHO.2012;UNICEF.2011.梅毒感染新發(fā)病例(單位：百萬)全球梅毒流行現(xiàn)狀3ppt課件

據(jù)最新估計，全球每年有1200萬新發(fā)梅毒感染病例，其中20梅毒起源于美洲，然后從美洲到西班牙，從歐洲到亞洲印度，1505年從印度傳入廣東嶺南（“廣東瘡”），后傳到全國各地。少數(shù)民族地區(qū)居民梅毒感染率=10%牧區(qū)人群梅毒感染率=48%部分城市地區(qū)人群梅毒感染率=5%部分農(nóng)村地區(qū)人群梅毒感染率=2-3%（此幻燈片內(nèi)容源自中國疾病預防控制中心性病控制中心陳祥生教授）我國梅毒流行現(xiàn)狀4ppt課件梅毒起源于美洲，然后從美洲到西班牙，從歐洲到亞洲印

通過三大措施，梅毒在我國實現(xiàn)基本消滅健康教育和宣傳運動免費梅毒篩查（梅毒血清制動試驗、熒光抗體試驗）治療我國梅毒基本消滅(1950-1964年)作為重大防治成就、學術成就，贏得國際上的廣泛認可。1978年獲得全國科學大會獎發(fā)表論文《我國對梅毒的控制和消滅》、《梅毒的傳播及在中國的消滅》（此幻燈片內(nèi)容源自中國疾病預防控制中心性病控制中心陳祥生教授）我國梅毒流行現(xiàn)狀5ppt課件通過三大措施，梅毒在我國實現(xiàn)基本消滅我國梅毒基本消滅中國梅毒報告發(fā)病趨勢梅毒報告病例數(shù)448620例，居甲乙類傳染病第3位梅毒報病較2011年增長4.41%，隱性梅毒增長的貢獻率99.6%（此幻燈片內(nèi)容源自中國疾病預防控制中心性病控制中心龔向東教授）我國梅毒流行現(xiàn)狀6ppt課件中國梅毒報告發(fā)病趨勢梅毒報告病例數(shù)448620例，居甲乙類梅毒是一個可以臨床治愈的傳染病病例診斷依據(jù)病史癥狀實驗室檢查實驗室檢查結果對梅毒診斷及判愈有決定性意義我國梅毒流行現(xiàn)狀7ppt課件梅毒是一個可以臨床治愈的傳染病病例診斷依據(jù)我國梅毒流行現(xiàn)狀7我國政府梅毒控制相關政策衛(wèi)生部于2010年6月3日下發(fā)了關于《中國預防與控制梅毒規(guī)劃（2010-2020年）》衛(wèi)生部2011年2月12日下發(fā)《預防艾滋病、梅毒和乙肝母嬰傳播工作實施方案》國務院2012年1月13日《中國預防控制艾滋病五年行動計劃（21011-2015年）》2013年1月實施《性病防治管理辦法》梅毒控制主要措施：提高梅毒實驗室檢測質量加強梅毒篩查力度我國梅毒流行現(xiàn)狀8ppt課件我國政府梅毒控制相關政策衛(wèi)生部于2010年6月3日下發(fā)了關于

梅毒流行病學簡介梅毒實驗室檢測流程

羅氏梅毒檢測試劑多中心研究結果梅毒實驗室檢測策略主要內(nèi)容9ppt課件梅毒流行病學簡介主要內(nèi)容9ppt課件常用梅毒實驗室檢測方法病原學檢測

血清學檢測10ppt課件常用梅毒實驗室檢測方法10ppt課件病原學檢查原理：一期、二期梅毒時，取硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損部位組織液或淋巴結穿刺術得到的組織液，在暗視野顯微鏡下，光線從聚光器的邊緣斜射到涂片上的梅毒螺旋體而發(fā)出亮光，從而可根據(jù)其特殊形態(tài)和運動方式進行檢測。方法：（1）暗視顯微鏡檢查

（2）鍍銀染色法

（3）核酸檢測（血液標本？）注：梅毒螺旋體目前體外人工培養(yǎng)還沒有獲得成功，僅能通過接種兔睪丸等部位進行有限增殖。

11ppt課件病原學檢查11ppt課件病原學檢查的臨床意義螺旋體檢查是診斷早期梅毒的最佳方法，對于患者的早期診斷、及時治療、預后和盡早切斷傳染源都有十分重要的意義。如未見到梅毒螺旋體，并不能排除患梅毒的可能性。12ppt課件病原學檢查的臨床意義螺旋體檢查是診斷早期梅毒的最佳方法，對梅毒血清學檢測方法非梅毒螺旋體抗原血清學試驗（非特異性梅毒抗體）

梅毒螺旋體抗原血清學試驗

（特異性梅毒抗體）兩類方法。13ppt課件梅毒血清學檢測方法13ppt課件非梅毒螺旋體抗原血清學檢測方法包括：（1）快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗(RPR)

（2）甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）（3）性病研究實驗室試驗(VDRL)等?；境煞质切牧字蚜字湍懝檀伎乖贵w結合形成復合物，凝集成網(wǎng)狀沉淀顆粒被肉眼所見上述方法的敏感性和特異性都基本相似14ppt課件非梅毒螺旋體抗原血清學檢測14ppt課件梅毒螺旋體抗原血清學檢測抗原為梅毒螺旋體特異蛋白（包括螺旋體重組特異抗原），檢測梅毒患者血中特異性抗梅毒螺旋體抗原的抗體。感染梅毒螺旋體后，一旦梅毒螺旋體抗體試驗呈陽性，則患者終身陽性。15ppt課件梅毒螺旋體抗原血清學檢測抗原為梅毒螺旋體特異蛋白（包括螺旋梅毒螺旋體抗原血清學試驗方法梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(TPPA)

梅毒螺旋體血球凝集試驗(TPHA)

梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）化學發(fā)光免疫分析法（CLIA）

梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測(RT)

熒光螺旋體抗體吸收試驗（FTA-ABS）梅毒螺旋體蛋白印跡試驗（WB）16ppt課件梅毒螺旋體抗原血清學試驗方法梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(TPP梅毒螺旋體免疫學檢測的發(fā)展歷程1980s2000EIA被FDA批準用于確認試驗和血液篩查英國公共健康實驗室指南：EIA可以作為替代VDRL/RPR+TPHA的選擇之一2001FDA批準EIA用于臨床診斷2008歐盟指南推薦：EIA/CIA/TPPA用于篩查，不再推薦VDRL/RPR2009美國CDC-APHL報告：EIA/CIA用于篩查.Europeanguidelineonthemanagementofsyphilis2008STDtreatmentguideline2006–USCDC17ppt課件梅毒螺旋體免疫學檢測的發(fā)展歷程1980s2000EIA被FD2014歐洲梅毒管理指南自動化的化學發(fā)光檢測已經(jīng)用于許多大型的歐洲實驗室，尤其適合對無癥狀的人群和獻血者進行高通量的篩查。該檢測流程更能檢測非常早期的梅毒感染。Europeanguidelineonthemanagementofsyphilis201418ppt課件2014歐洲梅毒管理指南自動化的化學發(fā)光檢測已經(jīng)用于許多大型美國梅毒檢測類型的變化

化學發(fā)光的測試數(shù)量逐年增加19ppt課件美國梅毒檢測類型的變化為何選擇ECLIA/CLIA?自動化（高通量）低成本（高樣本量的情況下）更少的實驗室職業(yè)危害沒有假陰性結果客觀檢測IgM抗體，可用于診斷非常早期的感染VSUSCDC:reversesequencesyphilisscreening20ppt課件為何選擇ECLIA/CLIA?自動化（高通量）VSUS

檢測原理:雙抗原夾心法(DAGS)，檢測時間18分鐘

IgG:樣本中，抗-TpN17,或抗-TpN15抗體釕標記的TpN17,TpN47抗原9分鐘測定IgM:樣本中，抗-TpN17,或抗-TpN47抗體生物素標記的TpN17,TpN15抗原9分鐘快速高效全自動電化學發(fā)光(ECLIA)免疫檢測原理21ppt課件

檢測原理:雙抗原夾心法(DAGS)，檢測時間18分鐘

梅毒流行病學簡介梅毒實驗室檢測流程羅氏梅毒檢測試劑多中心研究結果梅毒實驗室檢測策略主要內(nèi)容22ppt課件梅毒流行病學簡介主要內(nèi)容22ppt課件國際多中心研究ClinicalandVaccineImmunologyJanuary2015Volume22Number123ppt課件國際多中心研究ClinicalandVaccineIm意大利德國（3家中心）土耳其中國（華西醫(yī)院）泰國奧地利全球共8家研究中心（6個國家）國際多中心研究24ppt課件意大利德國（3家中心）土耳其中國（華西醫(yī)院）泰國奧地利全球共

研究設計

ElecsysLiaison?Serodia?Immulite?ArchitectLiaison?Serodia?Immulite?Architect敏感性評估特異性評估VitrosEnzygnost25ppt課件研究設計ElecsysLiaison?Serodia?樣本信息8079例3500常規(guī)樣本225HIV91EBV10Lyme病4579獻血員特異性評估樣本來源干擾樣本928例922陽性228合并HIV6陰性敏感性評估確診樣本干擾樣本26ppt課件樣本信息8079例350022591104579特異性評估樣國家/中心樣本量ElecsysLiaison?Serodia?Immulite?ArchitectTM德國lab1301100%100%100%德國lab283100%100%98.8%98.8%意大利218100%100%100%泰國124*100%100%中國202100%總體928*100%100%100%99.67%99.51%研究結果敏感性結果*Elecsys梅毒檢測試劑在所有實驗室中的敏感度結果均達到100%*2例樣本結果為“不確定”，4例為“無反應性”27ppt課件國家/中心樣本量ElecsysLiaison?Serodia梅毒分期樣本量確認陽性ElecsysI期梅毒101101100%II期梅毒124124100%隱性梅毒470470100%未知分期229227*100%總體924#922*100%研究結果梅毒分期樣本的敏感性結果*Elecsys梅毒檢測試劑在能100%檢測出不同分期梅毒樣本#排除4例疑似操作錯誤的樣本最終計算結果時排除2例確證試驗結果為未確定的樣本*排除2例確證試驗結果為未確定的樣本28ppt課件梅毒分期樣本量確認陽性ElecsysI期梅毒10110110樣本LotP1LotP2LotP3常規(guī)樣本99.80%99.90%100.00%獻血員樣本99.93%99.82%99.82%總體特異性99.88%99.85%99.89%研究結果總體特異性結果（3批次試劑）*Elecsys梅毒檢測試劑的總體特異性大于99.85%29ppt課件樣本LotP1LotP2LotP3常規(guī)樣本99.80

研究結果特異性結果-獻血員樣本*Elecsys梅毒檢測試劑在獻血員樣本中的總體特異性達到99.93%30ppt課件研究結果特異性結果-獻血

研究結果特異性結果-常規(guī)樣本*Elecsys梅毒檢測試劑在常規(guī)樣本中的總體特異性達到99.80%31ppt課件研究結果特

研究結果干擾樣本結果*Elecsys梅毒檢測試劑在可能的干擾樣本中的敏感性和特異性均更高EBV(+)/Syphilis(-)特異性HIV(+)/Syphilis(-)EBV-Lyme(+)/Syphilis(-)n=225,100%n=81,100%n=20,100%100.090.080.0敏感性HIV(+)/Syphilis(+)n=228（%）（%）32ppt課件研究結果干擾樣中國多中心研究廣西海南黑龍江濟南杭州安徽武漢湖南山西內(nèi)蒙古西安甘肅青海成都貴州西藏烏魯木齊北京*2南京上海長春昆明南寧廣州*2福州*2牽頭單位：四川大學華西醫(yī)院王蘭蘭主任/陶傳敏教授研究中心：15家33ppt課件中國多中心研究廣西海南黑龍江濟南杭州安徽武漢湖南山西內(nèi)蒙古西

研究中心醫(yī)院名稱主要研究者負責人四川大學華西醫(yī)院王蘭蘭陶傳敏昆明市第三人民醫(yī)院李曉非呂松琴第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院郝曉柯皇海首都醫(yī)科大學附屬北京佑安醫(yī)院婁金麗陳俊梅北京大學第三醫(yī)院張捷崔麗艷/梁永明吉林大學第一醫(yī)院續(xù)薇高丹丹山東省立醫(yī)院張炳昌鄒建文第二軍醫(yī)大學長海醫(yī)院鄧安梅陳園園浙江大學醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院陶志華張松照江蘇省人民醫(yī)院潘世揚徐華國南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院裘宇容袁帥廣東省中醫(yī)院黃憲章黃嫵姣福建省立醫(yī)院伍嚴安沈菁廣西醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院朱波黃文成福建醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院歐啟水陳靜34ppt課件研究中心醫(yī)院名稱主要研究者負責人四川大學華西醫(yī)院王蘭

研究設計參比方法1：Architect參比方法2：ELISA（2種品牌）參比方法3：國產(chǎn)化學發(fā)光法-CLIA常規(guī)隨機樣本預留確診樣本“臨界”樣本*干擾樣本不一致結果RIBA（免疫印跡）*臨界樣本（檢測結果出現(xiàn)不一致結果可能性較大的區(qū)間）：Architect：0.9<COI<5ELISA：0.75<COI<3國產(chǎn)化學發(fā)光法：0.9<COI<535ppt課件研究設計參比方法1：Architect參比方法2：E

樣本信息組別隨機樣本確診樣本臨界樣本干擾樣本總數(shù)Architect6004359762106649ELISA-14820391754115697ELISA-22943253152373448CLIA36551160623833總數(shù)174221119166920196274種比對方法，4組樣本*所有比對組共收集樣本近2萬例36ppt課件樣本信息組別隨機樣本確診樣本臨界樣本干擾樣本總數(shù)A研究結果Elecsys梅毒檢測結果的陽性結果分布*在所有常規(guī)隨機樣本中的陽性率為4.97%，剔除傳染病院數(shù)據(jù)后的陽性率為2.58%Cutoff1.0例數(shù)檢測結果區(qū)間37ppt課件研究結果Elecsys梅毒檢測結果的陽性結果分布Cu

研究結果Elecsys與不同比對方法間的一致性*Elecsys與所有比對方法在常規(guī)隨機樣本中的一致性達到99.48%Elecsys陽性樣本陰性樣本總體Architect83.09%99.68%99.30%ELISA-196.12%99.83%99.30%ELISA-297.85%99.66%99.49%CLIA95.15%99.85%99.56%總數(shù)99.4838ppt課件研究結果Elecsys與不同比對方法間的一致性EleElecsys比對試劑隨機樣本結果隨機樣本的敏感性和特異性結果*Elecsys在所有比對組隨機樣本中的假陽性和假陰性結果均最少vsvsvsvs假陰性假陽性假陰性假陽性假陰性假陽性假陰性假陽性39ppt課件Elecsys比對試劑隨機

研究結果隨機樣本的敏感性和特異性結果*Elecsys在所有比對組隨機樣本中的敏感性均達到100%，特異性也更優(yōu)異Elecsysvs.ArchitectElecsys

vs.ELISA-1Elecsysvs.ELISA-2Elecsys

vs.CLIA敏感性10098.2610099.1110099.77100100特異性99.8199.7499.9399.8099.8598.5699.8899.74NPV10099.9710099.9610099.85100100PPV91.2788.2898.6896.1298.5897.8598.1896.0040ppt課件研究結果隨機樣本的敏感性和特異性結果Elecsys

研究結果預留確診樣本的敏感性*Elecsys及所有比對試劑均能100%檢測出不同分期的確診梅毒樣本Elecsysvs.ArchitectElecsysvs.ELISA-1Elecsysvs.ELISA-2Elecsysvs.CLIA梅毒分期樣本數(shù)ElecsysArchitect樣本數(shù)ElecsysELISA-1樣本數(shù)ElecsysELISA-2樣本數(shù)ElecsysCLIA一期梅毒20100%100%44100%100%2100%100%無分期信息二期梅毒55100%100%74100%100%24100%100%三期梅毒6100%100%24100%100%6100%100%隱性梅毒96100%100%149100%100%56100%100%未分期182*100%100%100100%100%165100%100%116100%100%總數(shù)359*100%100%390*100%100%251*100%100%114*100%100%*共6例樣本檢測結果不一致，RIBA結果為陰性或不確定，計統(tǒng)計時予以剔除。41ppt課件研究結果預留確診樣本的敏感性Elecsysvs.

研究結果預留干擾樣本干擾樣本類型：

HBV，HCV，HIV，EBV，自身免疫病，淋巴瘤，多發(fā)性骨髓瘤，其他腫瘤，妊娠Elecsysvs.Architect僅在多發(fā)性骨髓瘤樣本中發(fā)現(xiàn)：Elecsys:1FPArchitect:1FPElecsysvs.ELISA-1僅在HIV和腫瘤樣本中發(fā)現(xiàn)：Elecsy:3FPELISA:1FPElecsysvs.ELISA-2僅在HBV和HIV樣本中發(fā)現(xiàn)：ELISA:1FP/1FN各組共收集920例干擾樣本，僅出現(xiàn)8例假陽或假陰結果，基本無干擾*FN:falsenegativeFP:falsepositive42ppt課件研究結果預留干擾樣本Elecsysvs.Arch

研究結果預留“臨界”樣本*Elecsys在所有比對組”臨界”樣本中的假陽性和假陰性結果更少Elecsysvs.ArchitectElecsysvs.ELISA-1Elecsysvs.ELISA-2結果區(qū)間樣本數(shù)ElecsysArchitect樣本數(shù)ElecsysELISA-1樣本數(shù)ElecsysELISA-2

<1.02--275FP2FN61FP-

>=1.0706FP28FP4410FP19FP92FP3FP總數(shù)726FP28FP7115FP19FP/2FN153FP3FP*FN:falsenegativeFP:falsepositive*臨界樣本（檢測結果出現(xiàn)不一致結果可能性較大的區(qū)間）：Architect：0.9<COI<5ELISA：0.75<COI<3國產(chǎn)化學發(fā)光法：0.9<COI<543ppt課件研究結果預留“臨界”樣本Elecsysvs.Ar具有最佳的靈敏度與特異性靈敏度為100%（MCE結果）特異性為99.88％（MCE結果）有效檢出不同分期的梅毒感染即用型試劑18分鐘出檢測結果僅需10ml樣本量高精密度室間、儀器間、批內(nèi)、批間精密度高無灰區(qū)準確區(qū)分樣本，無需重測安全高效可靠Elecsys?Syphilis免疫檢測降低確診試驗需求優(yōu)化工作流程較高的血清轉換特異性降低傳播風險提高檢測速度提高效率，節(jié)省成本44ppt課件具有最佳的靈敏度與特異性即用型試劑高精密度安全高效可靠降低確

梅毒流行病學簡介梅毒實驗室檢測流程

羅氏梅毒檢測試劑多中心研究結果梅毒實驗室檢測策略主要內(nèi)容45ppt課件梅毒流行病學簡介主要內(nèi)容45ppt課件

梅毒實驗室檢測策略初篩試驗：EIA/TPPA(TPHA)46CLIA+/EIA+/TPPA(TPHA)-或CLIA+/EIA+/TPPA(TPHA)-CLIA+/EIA+/TPPA(TPHA)+RPRTiter確認試驗：IgGimmunoblotanti-treponemalIgMtest梅毒排除RPRTiter<1:32OrNegativeRPRTiter>1:32梅毒活動期不能排除梅毒活動期++--Europeanguidelineonthemanagementofsyphilis201446ppt課件

梅毒實驗室檢測策略初篩試驗：EIA/TPPA(TPHA)4梅毒實驗室檢測策略方法選擇依據(jù)敏感性、特異性（試劑評估）操作流程（可及性）試劑的價格、結果時間（可接收性）47初篩目的和方法選擇47ppt課件梅毒實驗室檢測策略方法選擇依據(jù)47初篩目的和方法選擇47pp規(guī)范化梅毒實驗室檢測要求根據(jù)目的選擇檢測方法及檢測策略?？刹捎萌魏我活惷范狙鍖W檢測方法作為篩查試驗。48ppt課件規(guī)范化梅毒實驗室檢測要求48ppt課件非梅毒螺旋體抗原血清試驗臨床意義

梅毒活動期診斷治療監(jiān)測：因治療后血清滴度可下降并陰性，故可作為療效觀察、判愈、復發(fā)或再感染的指征。神經(jīng)梅毒確診：VDRL試驗用于神經(jīng)梅毒腦脊液檢測特異性高，檢測陽性可以作為神經(jīng)梅毒確診依據(jù)，但敏感性較低，即檢測陰性不能排除神經(jīng)梅毒。49ppt課件非梅毒螺旋體抗原血清試驗臨床意義梅毒活動期診斷49ppt課梅毒螺旋體抗原血清試驗臨床意義梅毒實驗室檢測初篩試驗不能區(qū)分既往感染和現(xiàn)癥感染，應結合非梅毒螺旋體抗原血清試驗結果進行診斷。TPPA等梅毒螺旋體抗原血清試驗不能作為療效觀察的指標。50ppt課件梅毒螺旋體抗原血清試驗臨床意義梅毒實驗室檢測初篩試驗50p非梅毒螺旋體抗原血清學試驗臨床意義梅毒活動期鑒別診斷治療監(jiān)測：早期梅毒（一期、二期）經(jīng)足量規(guī)則抗梅毒治療后一期梅毒1年后轉為陰性

二期梅毒2年后轉為陰性。

晚期梅毒治療后血清滴度下降緩慢，2年后約50%病人血清反應仍為陽性。51ppt課件非梅毒螺旋體抗原血清學試驗臨床意義梅毒活動期鑒別診斷51p兩個特殊人群的梅毒診斷老年人:

老年人群（特別是80歲以上）的梅毒抗體陽性率要高于其他人群，但許多梅毒螺旋體抗原血清試驗和/或非梅毒螺旋體抗原血清試驗呈陽性的老年病例并沒有明顯的臨床癥狀。這可能是既往感染或隱性感染的情況，也可能是檢測方法的假陽性所致，但一般情況下很難明確區(qū)分。實驗室應明確記錄檢測結果，并建議臨床根據(jù)實際情況進行處理孕婦晚期妊娠時，少數(shù)情況下可突然出現(xiàn)梅毒特異性抗體和/或反應素陽性，應提醒臨床注意既往梅毒感染復發(fā)或假陽性的可能性，并進行隨訪觀察52ppt課件兩個特殊人群的梅毒診斷老年人:52ppt課件THANKYOUFORYOURATTENTION!53ppt課件THANKYOUFORYOURATTENTION!浙江大學醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院檢驗科陶志華E-mail:zrtzh@

梅毒感染的實驗室檢測流程與策略54ppt課件浙江大學醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院梅毒感染的實驗室檢測1ppt課件

梅毒流行病學簡介

梅毒實驗室檢測流程羅氏梅毒檢測試劑多中心研究結果梅毒實驗室檢測策略主要內(nèi)容55ppt課件梅毒流行病學簡介主要內(nèi)容2ppt課件

據(jù)最新估計，全球每年有1200萬新發(fā)梅毒感染病例，其中200萬為孕婦WHO.2011;WHO.2012;UNICEF.2011.梅毒感染新發(fā)病例(單位：百萬)全球梅毒流行現(xiàn)狀56ppt課件

據(jù)最新估計，全球每年有1200萬新發(fā)梅毒感染病例，其中20梅毒起源于美洲，然后從美洲到西班牙，從歐洲到亞洲印度，1505年從印度傳入廣東嶺南（“廣東瘡”），后傳到全國各地。少數(shù)民族地區(qū)居民梅毒感染率=10%牧區(qū)人群梅毒感染率=48%部分城市地區(qū)人群梅毒感染率=5%部分農(nóng)村地區(qū)人群梅毒感染率=2-3%（此幻燈片內(nèi)容源自中國疾病預防控制中心性病控制中心陳祥生教授）我國梅毒流行現(xiàn)狀57ppt課件梅毒起源于美洲，然后從美洲到西班牙，從歐洲到亞洲印

通過三大措施，梅毒在我國實現(xiàn)基本消滅健康教育和宣傳運動免費梅毒篩查（梅毒血清制動試驗、熒光抗體試驗）治療我國梅毒基本消滅(1950-1964年)作為重大防治成就、學術成就，贏得國際上的廣泛認可。1978年獲得全國科學大會獎發(fā)表論文《我國對梅毒的控制和消滅》、《梅毒的傳播及在中國的消滅》（此幻燈片內(nèi)容源自中國疾病預防控制中心性病控制中心陳祥生教授）我國梅毒流行現(xiàn)狀58ppt課件通過三大措施，梅毒在我國實現(xiàn)基本消滅我國梅毒基本消滅中國梅毒報告發(fā)病趨勢梅毒報告病例數(shù)448620例，居甲乙類傳染病第3位梅毒報病較2011年增長4.41%，隱性梅毒增長的貢獻率99.6%（此幻燈片內(nèi)容源自中國疾病預防控制中心性病控制中心龔向東教授）我國梅毒流行現(xiàn)狀59ppt課件中國梅毒報告發(fā)病趨勢梅毒報告病例數(shù)448620例，居甲乙類梅毒是一個可以臨床治愈的傳染病病例診斷依據(jù)病史癥狀實驗室檢查實驗室檢查結果對梅毒診斷及判愈有決定性意義我國梅毒流行現(xiàn)狀60ppt課件梅毒是一個可以臨床治愈的傳染病病例診斷依據(jù)我國梅毒流行現(xiàn)狀7我國政府梅毒控制相關政策衛(wèi)生部于2010年6月3日下發(fā)了關于《中國預防與控制梅毒規(guī)劃（2010-2020年）》衛(wèi)生部2011年2月12日下發(fā)《預防艾滋病、梅毒和乙肝母嬰傳播工作實施方案》國務院2012年1月13日《中國預防控制艾滋病五年行動計劃（21011-2015年）》2013年1月實施《性病防治管理辦法》梅毒控制主要措施：提高梅毒實驗室檢測質量加強梅毒篩查力度我國梅毒流行現(xiàn)狀61ppt課件我國政府梅毒控制相關政策衛(wèi)生部于2010年6月3日下發(fā)了關于

梅毒流行病學簡介梅毒實驗室檢測流程

羅氏梅毒檢測試劑多中心研究結果梅毒實驗室檢測策略主要內(nèi)容62ppt課件梅毒流行病學簡介主要內(nèi)容9ppt課件常用梅毒實驗室檢測方法病原學檢測

血清學檢測63ppt課件常用梅毒實驗室檢測方法10ppt課件病原學檢查原理：一期、二期梅毒時，取硬下疳、扁平濕疣、黏膜斑等皮損部位組織液或淋巴結穿刺術得到的組織液，在暗視野顯微鏡下，光線從聚光器的邊緣斜射到涂片上的梅毒螺旋體而發(fā)出亮光，從而可根據(jù)其特殊形態(tài)和運動方式進行檢測。方法：（1）暗視顯微鏡檢查

（2）鍍銀染色法

（3）核酸檢測（血液標本？）注：梅毒螺旋體目前體外人工培養(yǎng)還沒有獲得成功，僅能通過接種兔睪丸等部位進行有限增殖。

64ppt課件病原學檢查11ppt課件病原學檢查的臨床意義螺旋體檢查是診斷早期梅毒的最佳方法，對于患者的早期診斷、及時治療、預后和盡早切斷傳染源都有十分重要的意義。如未見到梅毒螺旋體，并不能排除患梅毒的可能性。65ppt課件病原學檢查的臨床意義螺旋體檢查是診斷早期梅毒的最佳方法，對梅毒血清學檢測方法非梅毒螺旋體抗原血清學試驗（非特異性梅毒抗體）

梅毒螺旋體抗原血清學試驗

（特異性梅毒抗體）兩類方法。66ppt課件梅毒血清學檢測方法13ppt課件非梅毒螺旋體抗原血清學檢測方法包括：（1）快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗(RPR)

（2）甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）（3）性病研究實驗室試驗(VDRL)等?；境煞质切牧字蚜字湍懝檀伎乖贵w結合形成復合物，凝集成網(wǎng)狀沉淀顆粒被肉眼所見上述方法的敏感性和特異性都基本相似67ppt課件非梅毒螺旋體抗原血清學檢測14ppt課件梅毒螺旋體抗原血清學檢測抗原為梅毒螺旋體特異蛋白（包括螺旋體重組特異抗原），檢測梅毒患者血中特異性抗梅毒螺旋體抗原的抗體。感染梅毒螺旋體后，一旦梅毒螺旋體抗體試驗呈陽性，則患者終身陽性。68ppt課件梅毒螺旋體抗原血清學檢測抗原為梅毒螺旋體特異蛋白（包括螺旋梅毒螺旋體抗原血清學試驗方法梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(TPPA)

梅毒螺旋體血球凝集試驗(TPHA)

梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）化學發(fā)光免疫分析法（CLIA）

梅毒免疫層析法-梅毒快速檢測(RT)

熒光螺旋體抗體吸收試驗（FTA-ABS）梅毒螺旋體蛋白印跡試驗（WB）69ppt課件梅毒螺旋體抗原血清學試驗方法梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(TPP梅毒螺旋體免疫學檢測的發(fā)展歷程1980s2000EIA被FDA批準用于確認試驗和血液篩查英國公共健康實驗室指南：EIA可以作為替代VDRL/RPR+TPHA的選擇之一2001FDA批準EIA用于臨床診斷2008歐盟指南推薦：EIA/CIA/TPPA用于篩查，不再推薦VDRL/RPR2009美國CDC-APHL報告：EIA/CIA用于篩查.Europeanguidelineonthemanagementofsyphilis2008STDtreatmentguideline2006–USCDC70ppt課件梅毒螺旋體免疫學檢測的發(fā)展歷程1980s2000EIA被FD2014歐洲梅毒管理指南自動化的化學發(fā)光檢測已經(jīng)用于許多大型的歐洲實驗室，尤其適合對無癥狀的人群和獻血者進行高通量的篩查。該檢測流程更能檢測非常早期的梅毒感染。Europeanguidelineonthemanagementofsyphilis201471ppt課件2014歐洲梅毒管理指南自動化的化學發(fā)光檢測已經(jīng)用于許多大型美國梅毒檢測類型的變化

化學發(fā)光的測試數(shù)量逐年增加72ppt課件美國梅毒檢測類型的變化為何選擇ECLIA/CLIA?自動化（高通量）低成本（高樣本量的情況下）更少的實驗室職業(yè)危害沒有假陰性結果客觀檢測IgM抗體，可用于診斷非常早期的感染VSUSCDC:reversesequencesyphilisscreening73ppt課件為何選擇ECLIA/CLIA?自動化（高通量）VSUS

檢測原理:雙抗原夾心法(DAGS)，檢測時間18分鐘

IgG:樣本中，抗-TpN17,或抗-TpN15抗體釕標記的TpN17,TpN47抗原9分鐘測定IgM:樣本中，抗-TpN17,或抗-TpN47抗體生物素標記的TpN17,TpN15抗原9分鐘快速高效全自動電化學發(fā)光(ECLIA)免疫檢測原理74ppt課件

檢測原理:雙抗原夾心法(DAGS)，檢測時間18分鐘

梅毒流行病學簡介梅毒實驗室檢測流程羅氏梅毒檢測試劑多中心研究結果梅毒實驗室檢測策略主要內(nèi)容75ppt課件梅毒流行病學簡介主要內(nèi)容22ppt課件國際多中心研究ClinicalandVaccineImmunologyJanuary2015Volume22Number176ppt課件國際多中心研究ClinicalandVaccineIm意大利德國（3家中心）土耳其中國（華西醫(yī)院）泰國奧地利全球共8家研究中心（6個國家）國際多中心研究77ppt課件意大利德國（3家中心）土耳其中國（華西醫(yī)院）泰國奧地利全球共

研究設計

ElecsysLiaison?Serodia?Immulite?ArchitectLiaison?Serodia?Immulite?Architect敏感性評估特異性評估VitrosEnzygnost78ppt課件研究設計ElecsysLiaison?Serodia?樣本信息8079例3500常規(guī)樣本225HIV91EBV10Lyme病4579獻血員特異性評估樣本來源干擾樣本928例922陽性228合并HIV6陰性敏感性評估確診樣本干擾樣本79ppt課件樣本信息8079例350022591104579特異性評估樣國家/中心樣本量ElecsysLiaison?Serodia?Immulite?ArchitectTM德國lab1301100%100%100%德國lab283100%100%98.8%98.8%意大利218100%100%100%泰國124*100%100%中國202100%總體928*100%100%100%99.67%99.51%研究結果敏感性結果*Elecsys梅毒檢測試劑在所有實驗室中的敏感度結果均達到100%*2例樣本結果為“不確定”，4例為“無反應性”80ppt課件國家/中心樣本量ElecsysLiaison?Serodia梅毒分期樣本量確認陽性ElecsysI期梅毒101101100%II期梅毒124124100%隱性梅毒470470100%未知分期229227*100%總體924#922*100%研究結果梅毒分期樣本的敏感性結果*Elecsys梅毒檢測試劑在能100%檢測出不同分期梅毒樣本#排除4例疑似操作錯誤的樣本最終計算結果時排除2例確證試驗結果為未確定的樣本*排除2例確證試驗結果為未確定的樣本81ppt課件梅毒分期樣本量確認陽性ElecsysI期梅毒10110110樣本LotP1LotP2LotP3常規(guī)樣本99.80%99.90%100.00%獻血員樣本99.93%99.82%99.82%總體特異性99.88%99.85%99.89%研究結果總體特異性結果（3批次試劑）*Elecsys梅毒檢測試劑的總體特異性大于99.85%82ppt課件樣本LotP1LotP2LotP3常規(guī)樣本99.80

研究結果特異性結果-獻血員樣本*Elecsys梅毒檢測試劑在獻血員樣本中的總體特異性達到99.93%83ppt課件研究結果特異性結果-獻血

研究結果特異性結果-常規(guī)樣本*Elecsys梅毒檢測試劑在常規(guī)樣本中的總體特異性達到99.80%84ppt課件研究結果特

研究結果干擾樣本結果*Elecsys梅毒檢測試劑在可能的干擾樣本中的敏感性和特異性均更高EBV(+)/Syphilis(-)特異性HIV(+)/Syphilis(-)EBV-Lyme(+)/Syphilis(-)n=225,100%n=81,100%n=20,100%100.090.080.0敏感性HIV(+)/Syphilis(+)n=228（%）（%）85ppt課件研究結果干擾樣中國多中心研究廣西海南黑龍江濟南杭州安徽武漢湖南山西內(nèi)蒙古西安甘肅青海成都貴州西藏烏魯木齊北京*2南京上海長春昆明南寧廣州*2福州*2牽頭單位：四川大學華西醫(yī)院王蘭蘭主任/陶傳敏教授研究中心：15家86ppt課件中國多中心研究廣西海南黑龍江濟南杭州安徽武漢湖南山西內(nèi)蒙古西

研究中心醫(yī)院名稱主要研究者負責人四川大學華西醫(yī)院王蘭蘭陶傳敏昆明市第三人民醫(yī)院李曉非呂松琴第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院郝曉柯皇海首都醫(yī)科大學附屬北京佑安醫(yī)院婁金麗陳俊梅北京大學第三醫(yī)院張捷崔麗艷/梁永明吉林大學第一醫(yī)院續(xù)薇高丹丹山東省立醫(yī)院張炳昌鄒建文第二軍醫(yī)大學長海醫(yī)院鄧安梅陳園園浙江大學醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院陶志華張松照江蘇省人民醫(yī)院潘世揚徐華國南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院裘宇容袁帥廣東省中醫(yī)院黃憲章黃嫵姣福建省立醫(yī)院伍嚴安沈菁廣西醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院朱波黃文成福建醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院歐啟水陳靜87ppt課件研究中心醫(yī)院名稱主要研究者負責人四川大學華西醫(yī)院王蘭

研究設計參比方法1：Architect參比方法2：ELISA（2種品牌）參比方法3：國產(chǎn)化學發(fā)光法-CLIA常規(guī)隨機樣本預留確診樣本“臨界”樣本*干擾樣本不一致結果RIBA（免疫印跡）*臨界樣本（檢測結果出現(xiàn)不一致結果可能性較大的區(qū)間）：Architect：0.9<COI<5ELISA：0.75<COI<3國產(chǎn)化學發(fā)光法：0.9<COI<588ppt課件研究設計參比方法1：Architect參比方法2：E

樣本信息組別隨機樣本確診樣本臨界樣本干擾樣本總數(shù)Architect6004359762106649ELISA-14820391754115697ELISA-22943253152373448CLIA36551160623833總數(shù)174221119166920196274種比對方法，4組樣本*所有比對組共收集樣本近2萬例89ppt課件樣本信息組別隨機樣本確診樣本臨界樣本干擾樣本總數(shù)A研究結果Elecsys梅毒檢測結果的陽性結果分布*在所有常規(guī)隨機樣本中的陽性率為4.97%，剔除傳染病院數(shù)據(jù)后的陽性率為2.58%Cutoff1.0例數(shù)檢測結果區(qū)間90ppt課件研究結果Elecsys梅毒檢測結果的陽性結果分布Cu

研究結果Elecsys與不同比對方法間的一致性*Elecsys與所有比對方法在常規(guī)隨機樣本中的一致性達到99.48%Elecsys陽性樣本陰性樣本總體Architect83.09%99.68%99.30%ELISA-196.12%99.83%99.30%ELISA-297.85%99.66%99.49%CLIA95.15%99.85%99.56%總數(shù)99.4891ppt課件研究結果Elecsys與不同比對方法間的一致性EleElecsys比對試劑隨機樣本結果隨機樣本的敏感性和特異性結果*Elecsys在所有比對組隨機樣本中的假陽性和假陰性結果均最少vsvsvsvs假陰性假陽性假陰性假陽性假陰性假陽性假陰性假陽性92ppt課件Elecsys比對試劑隨機

研究結果隨機樣本的敏感性和特異性結果*Elecsys在所有比對組隨機樣本中的敏感性均達到100%，特異性也更優(yōu)異Elecsysvs.ArchitectElecsys

vs.ELISA-1Elecsysvs.ELISA-2Elecsys

vs.CLIA敏感性10098.2610099.1110099.77100100特異性99.8199.7499.9399.8099.8598.5699.8899.74NPV10099.9710099.9610099.85100100PPV91.2788.2898.6896.1298.5897.8598.1896.0093ppt課件研究結果隨機樣本的敏感性和特異性結果Elecsys

研究結果預留確診樣本的敏感性*Elecsys及所有比對試劑均能100%檢測出不同分期的確診梅毒樣本Elecsysvs.ArchitectElecsysvs.ELISA-1Elecsysvs.ELISA-2Elecsysvs.CLIA梅毒分期樣本數(shù)ElecsysArchitect樣本數(shù)ElecsysELISA-1樣本數(shù)ElecsysELISA-2樣本數(shù)ElecsysCLIA一期梅毒20100%100%44100%100%2100%100%無分期信息二期梅毒55100%100%74100%100%24100%100%三期梅毒6100%100%24100%100%6100%100%隱性梅毒96100%100%149100%100%56100%100%未分期182*100%100%100100%100%165100%100%116100%100%總數(shù)359*100%100%390*100%100%251*100%100%114*100%100%*共6例樣本檢測結果不一致，RIBA結果為陰性或不確定，計統(tǒng)計時予以剔除。94ppt課件研究結果預留確診樣本的敏感性Elecsysvs.

研究結果預留干擾樣本干擾樣本類型：

HBV，HCV，HIV，EBV，自身免疫病，淋巴瘤，多發(fā)性骨髓瘤，其他腫瘤，妊娠Elecsysvs.Architect僅在多發(fā)性骨髓瘤樣本中發(fā)現(xiàn)：Elecsys:1FPArchitect:1FPElecsysvs.ELISA-1僅在HIV和腫瘤樣本中發(fā)現(xiàn)：Elecsy:3FPELISA:1FPElecsysvs.ELISA-2僅在HBV和HIV樣本中發(fā)現(xiàn)：ELISA:1FP/1FN各組共收集920例干擾樣本，僅出現(xiàn)8例假陽或假陰結果，基本無干擾*FN:falsenegativeFP:falsepositive95ppt課件研究結果預留干擾樣本Elecsysvs.Arch

研究結果預留“臨界”樣本*Elecsys在所有比對組”臨界”樣本中的假陽性和假陰性結果更少Elecsysvs.ArchitectElecsysvs.ELIS