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2023學(xué)年高二年級(jí)下學(xué)期生物模擬測(cè)試卷注意事項(xiàng):1.答題前,考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫清楚,將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2.選擇題必須使用2B鉛筆填涂;非選擇題必須使用0.5毫米黑色字跡的簽字筆書寫,字體工整、筆跡清楚。3.請(qǐng)按照題號(hào)順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書寫的答案無(wú)效;在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。4.保持卡面清潔,不要折疊,不要弄破、弄皺,不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1.“生物導(dǎo)彈”是免疫導(dǎo)向藥物的形象稱呼,它由單克隆抗體與藥物、酶或放射性同位素配合而成,因帶有單克隆抗體而能自動(dòng)導(dǎo)向,在生物體內(nèi)與特定目標(biāo)細(xì)胞或組織結(jié)合,并由其攜帶的藥物產(chǎn)生治療作用,下列有關(guān)單克隆抗體和“生物導(dǎo)彈”的敘述,錯(cuò)誤的是()A.單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞分泌出的一種抗體B.單克隆抗體不能與靶細(xì)胞內(nèi)的抗原發(fā)生特異性結(jié)合C.用以治療癌癥的“生物導(dǎo)彈”就是以單克隆抗體作抗癌藥物定向殺死癌細(xì)胞D.“生物導(dǎo)彈”具有高度選擇性,對(duì)異常細(xì)胞具有命中率高、殺傷力強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)2.生物膜上的蛋白質(zhì)稱為膜蛋白。下列有關(guān)膜蛋白的敘述,錯(cuò)誤的是()A.部分膜蛋白具有信息交流的功能B.膜蛋白在細(xì)胞膜內(nèi)外兩側(cè)對(duì)稱分布C.載體的種類受細(xì)胞內(nèi)基因的控制D.膜蛋白的種類和含量直接決定了生物膜功能的復(fù)雜程度3.某同學(xué)利用紫玉蘭、諸葛菜、山茶、茶梅和紅花檀木的葉片為材料,放大相同倍數(shù)后觀察、記錄視野中的細(xì)胞數(shù)目,然后做“質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)”,記錄開始滴加0.3g/mL蔗糖溶液到發(fā)生初始質(zhì)壁分離的時(shí)間并計(jì)算平均值。有關(guān)敘述不合理的是()A.該實(shí)驗(yàn)中的各組材料之間相互對(duì)照B.各組實(shí)驗(yàn)中紅花檀木質(zhì)壁分離的速度最快C.山茶細(xì)胞體積最大,從接觸蔗糖溶液到發(fā)生質(zhì)壁分離的時(shí)間最長(zhǎng)D.細(xì)胞液濃度:山茶<茶梅<紫玉蘭<諸葛菜<紅花檀木4.“分子馬達(dá)”是分布于細(xì)胞內(nèi)部或細(xì)胞表面的一類蛋白質(zhì),它們的結(jié)構(gòu)會(huì)隨著與ATP和ADP的交替結(jié)合而改變,促使ATP轉(zhuǎn)化成ADP,同時(shí)引起自身或與其結(jié)合的分子產(chǎn)生運(yùn)動(dòng)。下列相關(guān)分析錯(cuò)誤的是()A.“分子馬達(dá)”具有酶的功能 B.主動(dòng)運(yùn)輸可能與“分子馬達(dá)”有關(guān)C.蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)改變意味著其失去活性 D.吸能反應(yīng)一般與ATP水解反應(yīng)相聯(lián)系5.下列關(guān)于生活應(yīng)用中,敘述正確的是A.包扎傷口要用透氣的紗布,原因是促進(jìn)傷口的有氧呼吸B.葉片呈現(xiàn)綠色的原因是葉綠素和類胡蘿卜素不吸收綠光所致C.體溫的維持與細(xì)胞呼吸有關(guān),但不需要ATP水解供能D.皮膚被銹釘扎傷后,要及時(shí)到醫(yī)院注射破傷風(fēng)抗毒血清6.為探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化。某同學(xué)進(jìn)行了如下操作,其中錯(cuò)誤的是()A.將適量的干酵母放入裝有一定濃度葡萄糖溶液的錐形瓶中,在適宜條件下培養(yǎng)B.將培養(yǎng)液振蕩搖勻后,用吸管從錐形瓶中吸取一定量的培養(yǎng)液C.在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板中央滴一滴培養(yǎng)液,蓋上蓋玻片,用濾紙吸去邊緣多余培養(yǎng)液D.將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)中央,待酵母菌沉降到計(jì)數(shù)室底部,在顯微鏡下觀察、計(jì)數(shù)二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)基因工程又稱為DNA重組技術(shù),回答相關(guān)問(wèn)題:(1)在基因工程中,獲取目的基因主要有兩大途徑,即______和從_______中分離。(2)利用某植物的成熟葉片為材料,同時(shí)構(gòu)建cDNA文庫(kù)和基因組文庫(kù),兩個(gè)文庫(kù)相比,cDNA文庫(kù)中含有的基因數(shù)目比基因組文庫(kù)中的__。(3)在基因表達(dá)載體中,啟動(dòng)子是______聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位。若采用原核生物作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞,最常用的原核生物是_______。8.(10分)某島嶼棲息著狐和野兔,生態(tài)系統(tǒng)相對(duì)穩(wěn)定。后來(lái)有人登島牧羊、捕食野兔和狐,狐也捕食羔羊。第五年,島上狐瀕臨滅絕,但野兔數(shù)量大大超過(guò)人登島前的數(shù)量。第6年,野兔種群爆發(fā)了由兔瘟熱病毒引起的瘟疫,其數(shù)量驟減?;卮饐?wèn)題:(1)人與狐的種間關(guān)系是______,兔瘟熱病毒與野兔的種間關(guān)系是________。(2)畫出由人、羊、狐、野兔和牧草組成的食物網(wǎng)。________________。(3)人登島后的第5年,與登島前相比,野兔種內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)強(qiáng)度________(增加、減小、不變)。(4)一般情況下,被捕食者傳染病的流行程度將隨捕食者種群密度的增加而___(增強(qiáng)、減弱、不變)。9.(10分)已知圖1為質(zhì)粒、圖2為含有目的基因的DNA片段,下表為有關(guān)限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒,應(yīng)選用______兩種限制酶切割,切割后的末端為______(填“黏性末端”、“平末端”或“黏性末端和平末端”),故應(yīng)選用___________酶來(lái)連接載體和目的基因。(2)為篩選出含有目的基因的大腸桿菌,應(yīng)在培養(yǎng)基中添加___________。(3)在構(gòu)建基因表達(dá)載體前,需要運(yùn)用PCR技術(shù)對(duì)含有目的基因的DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增。擴(kuò)增時(shí)需要用到___________(填酶的名稱)和圖2中的引物是___________。(4)在基因工程藥物的生產(chǎn)中,常選用大腸桿菌作受體細(xì)胞,其原因是______________________。10.(10分)為了檢測(cè)高原訓(xùn)練對(duì)運(yùn)動(dòng)員體內(nèi)的血紅蛋白含量的影響,需要對(duì)運(yùn)動(dòng)員訓(xùn)練前后的血紅蛋白進(jìn)行提取和分離,其步驟如下:(1)在紅細(xì)胞的洗滌操作中,血液離心后結(jié)果如圖所示,其中血紅蛋白位于__________(填“上清液”或“沉淀物”)。洗滌紅細(xì)胞時(shí),要用相當(dāng)于紅細(xì)胞液體體積5倍的___________洗滌紅細(xì)胞3次,然后加入蒸餾水到原血液體積,再加40%的_____________,攪拌約10min,使紅細(xì)胞破裂,釋放出血紅蛋白。(2)在樣品粗分離操作中,將收集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進(jìn)行透析。透析的目的是_______________。(3)血紅蛋白的純化是通過(guò)凝膠色譜法將雜蛋白除去,最后經(jīng)___________電泳進(jìn)行純度鑒定。研究小組用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí),相對(duì)分子質(zhì)量___________(填“較大”或“較小”)的蛋白質(zhì)先從層析柱中洗脫出來(lái)。在裝填色譜柱時(shí)不得有氣泡存在,原因是_______________________。(4)檢測(cè)結(jié)果顯示,經(jīng)過(guò)高原訓(xùn)練后,運(yùn)動(dòng)員體內(nèi)血紅蛋白含量有了明顯升高,試分析其可能的原因______________________。11.(15分)下圖甲、乙、丙是基因型為AaBb的雌性高等動(dòng)物細(xì)胞分裂模式圖,圖丁表示細(xì)胞分裂過(guò)程中染色體數(shù)目變化曲線。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)甲細(xì)胞內(nèi)有_________個(gè)染色體組,乙細(xì)胞所處的特定時(shí)期叫____________,丙圖所示細(xì)胞名稱為______________。(2)正常情況下,甲、乙細(xì)胞分裂產(chǎn)生的子細(xì)胞可能的基因型種類分別是______、_______。(3)甲、丙細(xì)胞所處的時(shí)期對(duì)應(yīng)丁中的__________、_________段。(4)請(qǐng)畫出形成丙細(xì)胞過(guò)程中,等位基因分離時(shí)期的細(xì)胞分裂圖像。_____
參考答案(含答案詳細(xì)解析)一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)1、C【答案解析】
單克隆抗體是由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。根據(jù)題意,生物導(dǎo)彈是由單克隆抗體和放射性同位素、化學(xué)藥物組合而成,能借助單克隆抗體的定位導(dǎo)向作用將藥物定向帶到靶細(xì)胞,療效高,副作用小,位置準(zhǔn)確?!绢}目詳解】A.單克隆抗體是由雜交瘤細(xì)胞經(jīng)體內(nèi)或體外培養(yǎng)產(chǎn)生的特異性強(qiáng)、靈敏度高的抗體,A正確;B.單克隆抗體不能與靶細(xì)胞內(nèi)的抗原發(fā)生特異性結(jié)合,靶細(xì)胞內(nèi)的抗原需經(jīng)效應(yīng)T細(xì)胞作用后釋放出來(lái)才能被抗體識(shí)別,B正確;C.治療癌癥的“生物導(dǎo)彈”是單抗上連接抗癌藥物,利用抗體和相應(yīng)抗原(癌細(xì)胞)特異性結(jié)合的能力,將攜帶的抗癌藥物送到特定位點(diǎn)殺傷和破壞癌細(xì)胞,C錯(cuò)誤;D.“生物導(dǎo)彈”具有高度選擇性,對(duì)異常細(xì)胞具有命中率高、殺傷力強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),D正確。2、B【答案解析】部分生物膜蛋白具有信息交流的功能,如受體蛋白,A正確;膜蛋白在細(xì)胞膜內(nèi)外兩側(cè)的分布是不對(duì)稱的,B錯(cuò)誤;體的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),是由基因控制合成的,C正確;生物膜的主要成分是蛋白質(zhì)和磷脂,其中蛋白的種類和含量直接決定了生物膜功能的復(fù)雜程度,D正確。3、D【答案解析】
據(jù)題文的描述和分析圖示可知:該題考查學(xué)生對(duì)植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離的相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力,以及對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理的能力?!绢}目詳解】A:依題意和圖示分析可知:該實(shí)驗(yàn)中的各組材料之間形成相互對(duì)照,A正確;
B:各組實(shí)驗(yàn)中,紅花檀木的質(zhì)壁分離所需平均時(shí)間最短,因此質(zhì)壁分離的速度最快,B正確;
C:山茶的細(xì)胞平均數(shù)最小,說(shuō)明其細(xì)胞體積最大,因此從接觸蔗糖溶液到發(fā)生質(zhì)壁分離的時(shí)間最長(zhǎng),C正確;
D:柱形圖顯示,視野中細(xì)胞平均數(shù)由多到少為:紅花檀木>諸葛菜>紫玉蘭>茶梅>山茶,而發(fā)生質(zhì)壁分離的平均時(shí)間由短到長(zhǎng)為:紅花檀木<諸葛菜<紫玉蘭<茶梅<山茶,據(jù)此可推知細(xì)胞液的濃度由低到高為:紅花檀木<諸葛菜<紫玉蘭<茶梅<山茶,D錯(cuò)誤。
故選D
【答案點(diǎn)睛】由題意“放大相同倍數(shù)后觀察、記錄視野中的細(xì)胞數(shù)目”可推知:細(xì)胞平均數(shù)越多,細(xì)胞的體積越?。划?dāng)外界溶液濃度大于細(xì)胞液濃度時(shí),細(xì)胞因失水而發(fā)生質(zhì)壁分離,而且外界溶液與細(xì)胞液的濃度差越大,發(fā)生質(zhì)壁分離所需時(shí)間越短。在此基礎(chǔ)上,分析比較柱形圖呈現(xiàn)的各類細(xì)胞平均數(shù)和發(fā)生初始質(zhì)壁分離的平均時(shí)間,進(jìn)而分析判斷各選項(xiàng)。4、C【答案解析】
蛋白質(zhì)功能多樣性:有些蛋白質(zhì)是結(jié)構(gòu)蛋白,有的蛋白質(zhì)具有運(yùn)輸作用,有些蛋白質(zhì)具有催化作用,有些蛋白質(zhì)具有調(diào)節(jié)機(jī)體生命活動(dòng)的功能,有的蛋白質(zhì)具有免疫功能,酶通過(guò)降低化學(xué)反應(yīng)的活化能而起催化作用?!绢}目詳解】由題意知,“分子馬達(dá)”具有催化ATP水解的作用,A正確;主動(dòng)運(yùn)輸是耗能過(guò)程,需要ATP水解釋放能量,因此與分子馬達(dá)有關(guān),B正確;蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)改變,如果功能基團(tuán)不變,其功能不會(huì)改變,C錯(cuò)誤;吸能反應(yīng)消耗ATP水解釋放的能量,因此一般與ATP水解反應(yīng)相聯(lián)系,D正確?!敬鸢更c(diǎn)睛】解答本題關(guān)鍵要結(jié)合題干信息“分子馬達(dá)能促使ATP轉(zhuǎn)變?yōu)锳DP”進(jìn)行推理、判斷,說(shuō)明“分子馬達(dá)”有催化ATP水解的作用。5、D【答案解析】
人體各部位組織細(xì)胞所需要的氧氣是通過(guò)血液循環(huán)運(yùn)輸?shù)?,而不是氧氣分子直接穿過(guò)皮膚進(jìn)入;葉綠素主要吸收紅光和藍(lán)紫光,類胡蘿卜素主要吸收藍(lán)紫光?!绢}目詳解】A.、包扎傷口要用透氣的紗布,目的是避免造成無(wú)氧環(huán)境,使破傷風(fēng)桿菌大量繁殖,破傷風(fēng)桿菌會(huì)產(chǎn)生對(duì)人體有害的物質(zhì),A錯(cuò)誤;B、葉片呈現(xiàn)綠色的原因是葉綠素和類胡蘿卜素吸收綠光很少,B錯(cuò)誤;C、寒冷刺激下,骨骼肌顫栗,以維持體溫,該過(guò)程需要ATP水解供能,C錯(cuò)誤;D、皮膚被銹釘扎傷后,要及時(shí)到醫(yī)院注射破傷風(fēng)抗毒血清,避免感染破傷風(fēng)桿菌,D正確。故選D?!敬鸢更c(diǎn)睛】本題易錯(cuò)選B項(xiàng),錯(cuò)因在于對(duì)色素吸收光能的特點(diǎn)理解不正確。葉綠素和類胡蘿卜素對(duì)綠光吸收很少,但不是不吸收綠光。6、C【答案解析】
本題考查酵母菌種群數(shù)量的調(diào)查方法,旨在考查考生基本實(shí)驗(yàn)方法和實(shí)驗(yàn)技能的掌握情況,解答此題需要熟記實(shí)驗(yàn)過(guò)程及實(shí)驗(yàn)原理?!绢}目詳解】A、葡萄糖可以為酵母菌提供能量,在適宜條件下培養(yǎng)能保證酵母菌的大量繁殖,A正確;B、吸取培養(yǎng)液計(jì)數(shù)前要將試管輕輕振蕩幾次,目的是使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布,減少誤差,B正確;C、用吸管吸取培養(yǎng)液后,將培養(yǎng)液滴在血球計(jì)數(shù)板蓋玻片一側(cè),使其自行滲入計(jì)數(shù)室,若邊緣有多余培養(yǎng)液,用濾紙吸去,C錯(cuò)誤;D、將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)中央,靜置片刻,待酵母菌沉降到計(jì)數(shù)室底部,再觀察、計(jì)數(shù),D正確。故選C?!敬鸢更c(diǎn)睛】(1)酵母菌種群密度的調(diào)查方法是抽樣檢測(cè)法,要保證獲取樣本的隨機(jī)性,減少誤差;(2)尤其要注意取樣時(shí)的操作步驟。二、綜合題:本大題共4小題7、人工合成生物材料少RNA大腸桿菌【答案解析】
(1)在基因工程中,獲取目的基因主要有兩大途徑,即人工合成和從生物材料中分離,人工合成可通過(guò)反轉(zhuǎn)錄法或人工化學(xué)合成法,從生物材料中分離即通過(guò)基因文庫(kù)法。(2)因?yàn)閏DNA文庫(kù)中只含有葉細(xì)胞已轉(zhuǎn)錄(或已表達(dá))的基因,而基因組文庫(kù)中含有該植物的全部基因,故兩個(gè)文庫(kù)相比,cDNA文庫(kù)中含有的基因數(shù)目比基因組文庫(kù)中的少。(3)基因表達(dá)載體的組成包括目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因,其中啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位;若采用原核生物作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞,因?yàn)榧?xì)菌繁殖速度快,故最常用的原核生物是大腸桿菌等細(xì)菌。【答案點(diǎn)睛】注意:基因文庫(kù)是指將含有某種生物不同基因的許多DNA片段,導(dǎo)入到受體菌的群體中儲(chǔ)存,各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因;基因組文庫(kù)包含某種生物所有的基因;部分基因文庫(kù)包含某種生物的部分基因,如cDNA文庫(kù)。8、競(jìng)爭(zhēng)和捕食寄生增加減弱【答案解析】
考查生態(tài)系統(tǒng)中種群數(shù)量變化、種間關(guān)系以及營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)的構(gòu)建等知識(shí),旨在考查理解知識(shí)要點(diǎn),把握內(nèi)在聯(lián)系形成知識(shí)系統(tǒng)的能力?!绢}目詳解】(1)人登島捕食狐,同時(shí)人和狐都以野兔和羊?yàn)槭?,因此人與狐的種間關(guān)系是競(jìng)爭(zhēng)和捕食,病毒營(yíng)寄生生活,兔瘟熱病毒與野兔之間是寄生關(guān)系。(2)根據(jù)題干中的捕食關(guān)系,從生產(chǎn)者開始構(gòu)建,即。(3)人登島后的第5年,由于狐瀕臨滅絕,野兔的天敵減少,數(shù)量大大增加,食物和空間等條件有限,種內(nèi)斗爭(zhēng)加劇。(4)題干信息可以看出,捕食者增加,可以使被捕食者數(shù)量維持在一個(gè)較穩(wěn)定的水平,且生存能力增強(qiáng),傳染病的流行程度將會(huì)減弱?!敬鸢更c(diǎn)睛】食物網(wǎng)中只有生產(chǎn)者和消費(fèi)者,它們之間的關(guān)系只有競(jìng)爭(zhēng)和捕食兩種可能,容易遺漏競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系;種內(nèi)斗爭(zhēng)的劇烈程度與種群密度成正相關(guān)。9、BclI和SmaI黏性末端和平末端T4DNA連接酶四環(huán)素Taq酶引物甲和引物丙大腸桿菌為單細(xì)胞生物,繁殖快,遺傳物質(zhì)較少【答案解析】
用圖1中的質(zhì)粒和圖2中的目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒,不能使用BamHⅠ切割,因?yàn)锽amHⅠ切割會(huì)切斷四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因,也不能用HindⅢ,因?yàn)槠錈o(wú)法切割質(zhì)粒,因此可選擇BclI和SmaI,BclI切割產(chǎn)生黏性末端,SmaI切割產(chǎn)生平末端,形成重組質(zhì)粒還需要用到DNA連接酶;由于選擇BclI和SmaI進(jìn)行切割,破壞了氨芐青霉素抗性記憶,因此標(biāo)記基因?yàn)樗沫h(huán)素抗性基因,為了篩選得到目的菌,應(yīng)在培養(yǎng)基中加入四環(huán)素;PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù),PCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)制,需要的條件有:模板DNA(目的基因所在的DNA片段)、原料(四種脫氧核苷酸)、一對(duì)引物(單鏈的脫氧核苷酸序列)、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)。大腸桿菌是原核細(xì)胞,容易培養(yǎng)、繁殖速度快,當(dāng)處于對(duì)數(shù)期時(shí),細(xì)菌代謝旺盛,個(gè)體的形態(tài)和生理特性比較穩(wěn)定,因此常作為基因工程受體細(xì)胞。【題目詳解】(1)應(yīng)選用BclI和SmaI兩種限制酶切割,切割后產(chǎn)生的末端為黏性末端和平末端,要形成重組質(zhì)粒還需用T4DNA連接酶來(lái)連接載體和目的基因。(2)形成的重組質(zhì)粒中標(biāo)記基因?yàn)樗沫h(huán)素抗性記憶,因此應(yīng)在培養(yǎng)基中添加四環(huán)素。(3)運(yùn)用PCR技術(shù)對(duì)含有目的基因的DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增需要用到熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)和引物,圖2中的引物應(yīng)選引物甲和引物丙。(4)在基因工程藥物的生產(chǎn)中,常選用大腸桿菌作受體細(xì)胞,其原因是大腸桿菌是原核生物,具有繁殖快、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少等特點(diǎn),因此常作為基因工程中的受體細(xì)胞?!敬鸢更c(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí),要求學(xué)生識(shí)記基因工程的原理及操作工具和操作步驟,能正確構(gòu)建基因表達(dá)載體,能夠識(shí)記原核生物經(jīng)常作為受體細(xì)胞的原因,同時(shí)掌握PCR的原理和方法,意在考查學(xué)生對(duì)于生物學(xué)原理的實(shí)際運(yùn)用能力。10、沉淀物生理鹽水甲苯去除分子量較小的雜質(zhì)SDS—聚丙烯酰胺凝膠較大氣泡會(huì)擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,使得到的紅色帶區(qū)歪曲、散亂,降低分離效果高原環(huán)境空氣稀薄,氧氣含量低,血紅蛋白含量會(huì)增加【答案解析】
根據(jù)蛋白質(zhì)的物化理性質(zhì):形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等千差萬(wàn)別,由此提取和分離各種蛋白質(zhì)。血紅蛋白的提取與分離的實(shí)驗(yàn)步驟主要有:(1)樣品處理:①紅細(xì)胞的洗滌(低速短時(shí)間離心),②血紅蛋白的釋放(需要加入蒸餾水和甲苯),③分離血紅蛋白(中速長(zhǎng)時(shí)間離心)。(2)粗分離:①分離血紅蛋白溶液,②透析。(3)純化:調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)。(4)純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。凝膠色譜法(分配色譜法):①原理:分子量大的分子通過(guò)多孔凝膠顆粒的間隙,路程短,流動(dòng)快;分子量小的分子穿過(guò)多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長(zhǎng),流動(dòng)慢。②凝膠材料:多孔性,多糖類化合物,如葡聚糖、瓊脂糖。③分離過(guò)程:混合物上柱→洗脫→大分子流動(dòng)快、小分子流動(dòng)慢→收集大分子→收集小分子。洗脫:從色譜柱上端不斷注入緩沖液,促使蛋白質(zhì)分子的差速流動(dòng)。④作用:分離蛋白質(zhì),測(cè)定生物大分子分子量,蛋白質(zhì)的脫鹽等?!绢}目詳解】(1)血紅蛋白在紅細(xì)胞內(nèi),而血液離心后的各種血細(xì)胞主要存在于沉淀物中,因此血紅蛋白位于沉淀物中。洗滌紅細(xì)胞時(shí),生理鹽水可以保持紅細(xì)胞不破裂,而5倍體積洗滌3次可以去除雜蛋白,得到更純的紅細(xì)胞。加入蒸餾水,紅細(xì)胞吸水破裂,加入40%的甲苯,溶解紅細(xì)胞膜,最終使紅細(xì)胞破裂,釋放出血紅蛋白。(2)透析袋能使小分子自由進(jìn)出,而大分子則保留在袋內(nèi),因此透析可以去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。(3)血紅蛋白的純化是通過(guò)凝膠色譜法將雜蛋白除去,最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。分子量大的分子通過(guò)多孔凝膠顆粒的間隙,路程短,流動(dòng)快;分子量小的分子穿過(guò)多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長(zhǎng),流動(dòng)慢。因此,研究小組用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí),相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先從層析柱中洗脫出來(lái)。如果凝膠裝填得不夠緊密、均勻,就會(huì)在色譜柱內(nèi)部形成無(wú)效的空隙,使本該進(jìn)入凝膠內(nèi)部的樣品分子從這些空隙中通過(guò),攪亂洗脫液的流動(dòng)次序,影響分離的效果,因此在裝填色譜柱時(shí)不得有氣泡存在。(4)高原空氣稀薄,氧氣含量低,為了利用更多的氧氣進(jìn)行有氧呼吸,運(yùn)動(dòng)員體內(nèi)血紅蛋白含量有了明顯升高?!敬鸢更c(diǎn)睛】本題結(jié)合圖解,考查蛋白質(zhì)的提取和分離,對(duì)于此類試題,需要考生注意的細(xì)節(jié)較多,如實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)步驟,實(shí)驗(yàn)采用的試劑及試劑的作用,能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確
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