微生物基礎(chǔ)培訓(xùn)-試驗(yàn)卡藥敏測試與clsi

試驗(yàn)卡藥敏試驗(yàn)與CLSI標(biāo)準(zhǔn)試劑研發(fā)部

何開大2主要內(nèi)容CLSI

M100-S23/S24的主要更新點(diǎn)試驗(yàn)卡藥敏試驗(yàn)與CLSI標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系藥敏試驗(yàn)的定義定義：使用體外方法測定抗菌藥物抑制病原微生物生長的效力。藥敏試驗(yàn)的目的使用體外試驗(yàn)的方法檢測細(xì)菌的耐藥性，療效果，并為臨床醫(yī)生針對某一特定的臨床抗菌藥物的臨床治問題選用藥物提供依據(jù)----實(shí)施 化治療。由于細(xì)菌耐藥性的快速增長，單純依賴經(jīng)驗(yàn)選用藥物經(jīng)常無效，在 的時(shí)候需要參考藥敏實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。用于流行病學(xué)及院內(nèi)的，減少耐藥菌株的流行。藥敏試驗(yàn)的結(jié)果(定量與定性)最低抑菌濃度（

Minimum

inhibitory

concentration，MIC）在體外達(dá)到抑制細(xì)菌生長所需要的最低的藥物濃度。臨床治療要求的血藥濃度一般為MIC值（μg/ml）的4-8倍。對于不同部位的不同藥物，其濃度可能更高或更低。敏感（Susceptible，S）對

部位使用推薦劑量時(shí)，該菌株被通?？蛇_(dá)到的抗菌藥物濃度水平所抑制提示患者對該種抗微生物藥物治療有反應(yīng)的可能性大耐藥（，R）用常規(guī)用量治療不能抑制細(xì)菌的生長MIC高于藥物在血、體液中可能達(dá)到的濃度提示用該抗微生物藥物治療可能失敗藥敏試驗(yàn)的結(jié)果(定量與定性)中介(Intermediate，I)MIC接近血、體液中藥物的濃度，治療反應(yīng)率低于敏感株藥物生理濃集部位有效(如：尿——喹諾酮類和β-內(nèi)酰胺）加大用藥劑量可能有效（如：β-內(nèi)酰胺）緩沖區(qū)：防止操作的系統(tǒng)誤差造成重大結(jié)果的判定錯誤劑量依賴型敏感(Susceptible-Dose

Dependent

，SDD)是否敏感取決于用藥劑量對于SDD分離株，需要提高用藥劑量或者用藥頻率或者二者兼有在CLSI

M100-S24首次提出天地人生化藥敏試驗(yàn)卡種類腸桿菌科細(xì)菌生化·藥敏試驗(yàn)卡微球菌科細(xì)菌生化·藥敏試驗(yàn)卡非發(fā)酵菌生化·藥敏試驗(yàn)卡鏈球菌科細(xì)菌生化·藥敏試驗(yàn)卡奈瑟菌/

桿菌生化·藥敏試驗(yàn)卡弧菌科細(xì)菌生化·藥敏試驗(yàn)卡芽胞桿菌生化·藥敏試驗(yàn)卡棒狀桿菌生化·藥敏試驗(yàn)卡酵母樣真菌生化·藥敏試驗(yàn)卡厭氧菌生化·藥敏試驗(yàn)卡（在研）生化藥敏試驗(yàn)卡與CLSI的關(guān)系？1998年，將CLSI制定的藥敏標(biāo)準(zhǔn)定為我國的部頒標(biāo)準(zhǔn)，依照CLSI所制定的藥敏試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)作為選藥指南。CLSI的主要內(nèi)容藥物分組細(xì)菌/藥物敏感性折點(diǎn)相關(guān)注釋與藥物推導(dǎo)測試方法質(zhì)量控制1、藥物種類的選擇？2、藥物濃度的選擇？3、結(jié)果的報(bào)告？生化藥敏試驗(yàn)卡抗菌藥物/濃度組合的選擇CLSI

M100CLSI

M45Performance

Standards

for

Antimicrobial

Susceptibility

TestingMethods

for

Antimicrobial

Dilution

and

Disk

Susceptibility

testing

ofinfrequently

Isolated

or

Fastidous

BacteriaReference

Method

for

Borth

Dilution

Antifungal

Susceptibility

Testing

of

YeastsCLSI

M27《抗菌藥物臨床應(yīng)用管理辦法》藥敏試驗(yàn)藥物種類的選擇藥物分組：臨床療效、耐藥菌株的流行、盡可能減少耐藥性的出現(xiàn)、價(jià)格、FDA批準(zhǔn)藥物臨床應(yīng)用指征、目前關(guān)于首選與次選藥物的一致推薦意見。CLSI對抗菌藥物的分組A組：首選，常規(guī)試驗(yàn)和報(bào)告B組：首選抗生素，在下列情況下選擇使用細(xì)菌對A組同類藥物耐藥嚴(yán)重對A組抗生素過敏、不耐受或無效或多部位、多種細(xì)菌混合的抗菌藥物控制傳染病流行C組：備選抗生素，在下列情況下使用對一個(gè)或多個(gè)首選藥耐藥的地區(qū)流行株對基本藥物過敏的患者對不常見菌 的治療控制傳染病的流行U組：包含某些僅用于或首選治療泌O組：一般

常規(guī)測試與報(bào)告的藥物InV組：正在進(jìn)行研究藥敏試驗(yàn)藥物種類的選擇根據(jù)藥物分組進(jìn)行確定（國際）兼顧中國

（國內(nèi)）和歐盟

的要求以及臨床藥物的實(shí)際情況客戶定制腸桿菌科細(xì)菌生化藥敏試驗(yàn)卡藥物的選擇非發(fā)酵菌生化藥敏試驗(yàn)卡藥物的選擇鏈球菌科細(xì)菌生化藥敏試驗(yàn)卡藥物的選擇奈瑟菌/桿菌生化藥敏試驗(yàn)卡藥物的選擇弧菌科細(xì)菌生化藥敏試驗(yàn)卡藥物的選擇天地人生化藥敏試驗(yàn)卡不包括霍亂弧菌棒狀桿菌生化藥敏試驗(yàn)卡藥物的選擇芽胞桿菌生化藥敏試驗(yàn)卡藥物的選擇天地人生化藥敏試驗(yàn)卡不包括炭疽芽胞桿菌酵母樣真菌生化藥敏試驗(yàn)卡藥物的選擇氟康唑、伏立康唑、卡泊芬凈、氟胞嘧啶、伊曲康唑濃度參考CLSI

M27-S3制定；兩性霉素B、制菌霉素、咪康唑、酮康唑和特比萘芬，CLSI無相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。試驗(yàn)卡藥物濃度的選擇試驗(yàn)卡藥物濃度的選擇結(jié)果的報(bào)告特殊細(xì)菌結(jié)果的報(bào)告結(jié)果的報(bào)告特殊部位結(jié)果的報(bào)告結(jié)果的報(bào)告天然耐藥結(jié)果的報(bào)告結(jié)果的報(bào)告與治療有關(guān)的注釋腸球菌引起的嚴(yán)重，如心內(nèi)膜炎，除非高水平耐慶大霉素和鏈霉素，可選用氨芐西林、青霉素或萬古霉素（敏感株）與氨基糖苷類進(jìn)行聯(lián)合治療。這種聯(lián)合治療可起協(xié)同殺菌效果。藥物的推導(dǎo)在藥物分組表格中用“或”連接的藥物，如1A表格對于腸桿菌科細(xì)菌中的“頭孢曲松”或“頭孢噻肟”。解釋表格中的注釋，如2D中的氨芐西林 可用于預(yù)報(bào)不產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶腸球菌對阿莫西林/克拉維酸、哌拉西林等的結(jié)果。結(jié)果的報(bào)告34試驗(yàn)卡藥敏試驗(yàn)與CLSI標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系主要內(nèi)容CLSI

M100-S23/S24的主要更新點(diǎn)近年來CLSI標(biāo)準(zhǔn)重要的變化增加天然耐藥判斷折點(diǎn)（更新、刪除）增加新的抗菌藥物刪除某些藥物檢測方法變更增加給藥方案2011年增加腸桿菌科細(xì)菌天然耐藥附表B-B12013年–刪除了克氏枸櫞酸桿菌對阿莫西林/克拉維酸、氨芐西林/舒巴坦R–進(jìn)一步闡明2013年新增非腸桿菌科細(xì)菌固有耐藥附錄B-B22014年新增2013年新增葡萄球菌固有耐藥附錄B-B32013年新增腸球菌固有耐藥附錄B-B4CLSI

M100-S23/S24折點(diǎn)的變化新增注釋折點(diǎn)的設(shè)置基于每8h

1g的劑量或者每6h

500mg的劑量折點(diǎn)的變化——頭孢吡肟變更原因1、先前的折點(diǎn)基于較高的劑量設(shè)置；2、臨床發(fā)現(xiàn)，當(dāng)分離株的MIC為4-8ug/ml時(shí)，治療常常失敗，尤其是使用較低的劑量時(shí)；3、由于目前對于多重耐藥的革蘭氏 菌具有療效的新藥有限，優(yōu)化目前可用藥物的使用是有必要的；基于敏感性設(shè)計(jì)用藥劑量有助于達(dá)到這一目的。第五代頭孢——ceftaroline廣譜，具有抗MRSA活性頭孢菌素殺菌是通過與青霉素結(jié)合蛋白(PBPs)結(jié)合而介導(dǎo)。能與金黃色葡萄球菌PBP2a以及

鏈球菌與PBP2X

結(jié)合，所以對MRSA、青霉素耐藥的

鏈球菌有效。頭孢洛林一種具有體外抗GP和GN活性的頭孢菌素。GP：金黃色葡萄球菌（

MSSA和MRSA

）、化膿性鏈球菌、無乳鏈球菌、

鏈球菌制藥研制僅有靜脈制劑頭孢洛林2010年10月，F(xiàn)DA批準(zhǔn)的適應(yīng)癥急性細(xì)菌性皮膚及皮膚結(jié)構(gòu)–MRSA、MSSA、化膿性鏈球菌、無乳鏈球菌–大腸、

克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌社區(qū)獲得性細(xì)菌性

（CABP)–

鏈球菌、MSSA、流感

桿菌–大腸、

克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌頭孢洛林對產(chǎn)ESBLs、AmpC和碳青霉烯酶的腸桿菌科細(xì)菌無抗菌活性對銅綠無抗菌活性對厭氧菌有部分抗菌活性（對脆弱類桿菌無活性）葡萄球菌—2013將CLSI

M100-S22

表2C中所有的頭孢菌素/青霉素被刪除，除了青霉素、苯唑西林、頭孢西丁和頭孢洛林以外。檢測結(jié)果推測結(jié)果青霉素苯唑西林SS所有青霉素類、?-內(nèi)酰胺類/酶抑制劑復(fù)合物、頭孢菌素和碳青霉烯類敏感RS耐藥：不耐酶青霉素類敏感：耐酶青霉素?-內(nèi)酰胺類/酶抑制劑復(fù)合物頭孢菌素碳青霉烯類RR