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選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁!基礎(chǔ)知識(一)固定化酶的應(yīng)用實(shí)例
——生產(chǎn)高果糖漿(1)高果糖漿的生產(chǎn)原理:葡萄糖異構(gòu)酶果糖葡萄糖選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁!(2)葡萄糖異構(gòu)酶固定:
將葡萄糖異構(gòu)酶固定在顆粒狀載體上,裝入反應(yīng)柱中。(3)高果糖漿的生產(chǎn)操作:從反應(yīng)柱上端注入葡萄糖溶液,從下端流出果糖溶液,一個(gè)反應(yīng)柱可連續(xù)使用半年。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁!2.固定化酶的反應(yīng)柱示意圖選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁!(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1.將酶或細(xì)胞固定化的方法包埋法選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁!(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1.將酶或細(xì)胞固定化的方法將酶(或細(xì)胞)包埋在細(xì)微網(wǎng)格里包埋法化學(xué)結(jié)合法選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁!(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1.將酶或細(xì)胞固定化的方法將酶(或細(xì)胞)包埋在細(xì)微網(wǎng)格里將酶(或細(xì)胞)相互連接起來包埋法化學(xué)結(jié)合法吸附法選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁!【比較】酶和細(xì)胞的固定方法和特點(diǎn)固定對象酶細(xì)胞適宜固定法化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法包埋法特點(diǎn)體積小,固定一種酶。包埋法容易丟失體積大,固定一系列酶。難以化學(xué)結(jié)合和吸附選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁!2.固定化酶和固定化細(xì)胞的聯(lián)系與區(qū)別聯(lián)系:應(yīng)用相同,都能催化某些反應(yīng)選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁!〖思考〗將谷氨酸棒狀桿菌生產(chǎn)谷氨酸的發(fā)酵過程變?yōu)檫B續(xù)的酶反應(yīng),應(yīng)當(dāng)固定(酶、細(xì)胞);若將蛋白質(zhì)變成氨基酸,應(yīng)當(dāng)固定(酶、細(xì)胞)。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁!3.固定化細(xì)胞的材料:固定化細(xì)胞時(shí)應(yīng)當(dāng)選用不溶于水的多孔性載體材料,如明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁!〖思考2〗活化是指什么?1.制備固定化酵母細(xì)胞(1)酵母細(xì)胞的活化:1g干酵母+10mL蒸餾水→50mL燒杯→攪拌均勻→放置1h,使之活化。2.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁!(2)配制CaCl2溶液:
0.83gCaCl2+150mL蒸餾水→200mL燒杯→溶解備用。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁!(3)配制海藻酸鈉溶液:0.7g海藻酸+10mL水→50mL燒杯→酒精燈微火(或間斷)加熱,并不斷攪拌,使之溶化→蒸餾水定容到10mL?!妓伎?〗微火加熱并不斷攪拌的目的是什么?選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁!(4)海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞的混合:將溶化的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫,加入活化酵母細(xì)胞液,攪拌后吸入到注射器中。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁!(4)海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞的混合:將溶化的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫,加入活化酵母細(xì)胞液,攪拌后吸入到注射器中?!妓伎?〗為什么要海藻酸鈉溶液冷卻后才能加入酵母細(xì)胞?防止高溫殺死酵母細(xì)胞。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁!(6)沖洗:將固定的酵母細(xì)胞凝膠珠用蒸餾水沖洗2~3次。(二).固定化酵母細(xì)胞的發(fā)酵選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁!〖思考5〗發(fā)酵過程中錐形瓶為什么要密封?〖思考6〗錐形瓶中的氣泡和酒精是怎樣形成的?〖思考7〗在利用固定化酶或固定化細(xì)胞進(jìn)行生產(chǎn)的過程中,需要無菌操作嗎?選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁!〖思考5〗發(fā)酵過程中錐形瓶為什么要密封?〖思考6〗錐形瓶中的氣泡和酒精是怎樣形成的?〖思考7〗在利用固定化酶或固定化細(xì)胞進(jìn)行生產(chǎn)的過程中,需要無菌操作嗎?酵母菌的酒精發(fā)酵需要缺氧條件。酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生的。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁!直接使用酶、固定化酶和固定化細(xì)胞區(qū)別類型優(yōu)點(diǎn)不足直接
使用酶
固定
化酶
固定化
細(xì)胞
選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁!類型優(yōu)點(diǎn)不足直接
使用酶
催化效率高,低耗能、低污染等。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁!類型優(yōu)點(diǎn)不足固定
化酶
選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁!類型優(yōu)點(diǎn)不足固定
化酶
酶既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離,同時(shí),固定在載體上的酶還可以被反復(fù)利用。一種酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng),而在生產(chǎn)實(shí)踐中,很多產(chǎn)物的形成都通過一系列的酶促反應(yīng)才能得到的。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第23頁!類型優(yōu)點(diǎn)不足固定化細(xì)胞
成本低,操作更容易。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第24頁!例1.下列有關(guān)固定化技術(shù)的敘述,正確的是()A.固定化酶只是在細(xì)胞內(nèi)才能發(fā)揮作用B.固定化酶能提高酶的利用率C.酶的固定是酶分離純化的常用方法D.固定化酶的固定化方式就是吸附在
固體表面上。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第25頁!例2.溶解海藻酸鈉,最好采用______加熱的方法A.小火間斷B.小火持續(xù)C.大火間斷D.大火持續(xù)選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第26頁!例3.關(guān)于酵母菌的敘述,正確的是A.酵母菌在營養(yǎng)物質(zhì)充足時(shí)、環(huán)境適宜
時(shí),依靠有性生殖進(jìn)行繁殖B.酵母菌的代謝類型時(shí)異養(yǎng)厭氧型C.酵母菌的生物膜系統(tǒng)包括細(xì)胞膜、核
膜、各種的細(xì)胞器膜等膜D.用酵母菌釀酒時(shí),應(yīng)先密封后通氣選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第27頁!例4.將酵母菌的培養(yǎng)液由富氧狀態(tài)變?yōu)槿毖鯛顟B(tài),下面加快的一項(xiàng)是A.CO2的釋放B.丙酮酸的氧化C.葡萄糖的利用D.ATP的形成選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第28頁!例5.固定化酶的優(yōu)點(diǎn)是A.有利于增加酶的活性B.有利于產(chǎn)物的純化C.有利于提高反應(yīng)速度D.有利于酶發(fā)揮作用選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第29頁!例6.下列不是用于包埋法固定化細(xì)胞的載體是A.瓊脂糖B.醋酸纖維素C.聚丙烯酰胺D.聚乙烯樹脂選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第30頁!例7.固定化細(xì)胞技術(shù)不包括A.包埋法B.化學(xué)結(jié)合化C.物理法D.生物法選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第31頁!(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1.將酶或細(xì)胞固定化的方法選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第32頁!(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1.將酶或細(xì)胞固定化的方法將酶(或細(xì)胞)包埋在細(xì)微網(wǎng)格里包埋法選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第33頁!(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1.將酶或細(xì)胞固定化的方法將酶(或細(xì)胞)包埋在細(xì)微網(wǎng)格里將酶(或細(xì)胞)相互連接起來包埋法化學(xué)結(jié)合法選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第34頁!(二)固定化細(xì)胞技術(shù)1.將酶或細(xì)胞固定化的方法將酶(或細(xì)胞)包埋在細(xì)微網(wǎng)格里將酶(或細(xì)胞)相互連接起來將酶(或細(xì)胞)吸附在載體表面上包埋法化學(xué)結(jié)合法吸附法選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第35頁!2.固定化酶和固定化細(xì)胞的聯(lián)系與區(qū)別選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第36頁!2.固定化酶和固定化細(xì)胞的聯(lián)系與區(qū)別聯(lián)系:應(yīng)用相同,都能催化某些反應(yīng)區(qū)別:1)固定化細(xì)胞技術(shù)操作容易,成本低,
容易回收;2)固定化細(xì)胞技術(shù)對酶活性影響更??;3)固定化細(xì)胞固定的一系列酶;4)由于大分子難以通過細(xì)胞膜,因此固
定化細(xì)胞的應(yīng)用有一定的限制;選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第37頁!〖思考〗將谷氨酸棒狀桿菌生產(chǎn)谷氨酸的發(fā)酵過程變?yōu)檫B續(xù)的酶反應(yīng),應(yīng)當(dāng)固定(酶、細(xì)胞);若將蛋白質(zhì)變成氨基酸,應(yīng)當(dāng)固定(酶、細(xì)胞)。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第38頁!1.制備固定化酵母細(xì)胞(1)酵母細(xì)胞的活化:1g干酵母+10mL蒸餾水→50mL燒杯→攪拌均勻→放置1h,使之活化。2.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第39頁!活化是指讓處于休眠狀態(tài)的微生物重新恢復(fù)正常生活狀態(tài)的過程?!妓伎?〗活化是指什么?1.制備固定化酵母細(xì)胞(1)酵母細(xì)胞的活化:1g干酵母+10mL蒸餾水→50mL燒杯→攪拌均勻→放置1h,使之活化。2.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第40頁!(3)配制海藻酸鈉溶液:
0.7g海藻酸鈉+10mL水→50mL燒杯→酒精燈微火(或間斷)加熱,并不斷攪拌,使之溶化→蒸餾水定容到10mL。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第41頁!防止海藻酸鈉焦糊。(3)配制海藻酸鈉溶液:0.7g海藻酸+10mL水→50mL燒杯→酒精燈微火(或間斷)加熱,并不斷攪拌,使之溶化→蒸餾水定容到10mL?!妓伎?〗微火加熱并不斷攪拌的目的是什么?選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第42頁!(4)海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞的混合:將溶化的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫,加入活化酵母細(xì)胞液,攪拌后吸入到注射器中?!妓伎?〗為什么要海藻酸鈉溶液冷卻后才能加入酵母細(xì)胞?選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第43頁!(5)固定化酵母細(xì)胞:以恒定速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到CaCl2溶液中,形成凝膠珠狀顆粒。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第44頁!(二).固定化酵母細(xì)胞的發(fā)酵(6)沖洗:將固定的酵母細(xì)胞凝膠珠用蒸餾水沖洗2~3次。(7)發(fā)酵:150mL10%葡萄糖+固定化酵母細(xì)胞→200mL錐形瓶→密封→25℃發(fā)酵24h。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第45頁!〖思考5〗發(fā)酵過程中錐形瓶為什么要密封?〖思考6〗錐形瓶中的氣泡和酒精是怎樣形成的?〖思考7〗在利用固定化酶或固定化細(xì)胞進(jìn)行生產(chǎn)的過程中,需要無菌操作嗎?酵母菌的酒精發(fā)酵需要缺氧條件。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第46頁!〖思考5〗發(fā)酵過程中錐形瓶為什么要密封?〖思考6〗錐形瓶中的氣泡和酒精是怎樣形成的?〖思考7〗在利用固定化酶或固定化細(xì)胞進(jìn)行生產(chǎn)的過程中,需要無菌操作嗎?酵母菌的酒精發(fā)酵需要缺氧條件。酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生的。需要。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第47頁!類型優(yōu)點(diǎn)不足直接
使用酶
選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第48頁!類型優(yōu)點(diǎn)不足直接
使用酶
催化效率高,低耗能、低污染等。對環(huán)境條件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很難回收,不能被次利用,提高了生產(chǎn)成本;反應(yīng)后酶會(huì)混在產(chǎn)物中,可能影響產(chǎn)品質(zhì)量。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第49頁!類型優(yōu)點(diǎn)不足固定
化酶
酶既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離,同時(shí),固定在載體上的酶還可以被反復(fù)利用。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第50頁!類型優(yōu)點(diǎn)不足固定化細(xì)胞
選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第51頁!類型優(yōu)點(diǎn)不足固定化細(xì)胞
成本低,操作更容易。固定后的細(xì)胞與反應(yīng)物不容易接近,可能導(dǎo)致反應(yīng)效果下降等。選修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第52頁!例1.下列有關(guān)固定化技術(shù)的敘述,正確的是()A.固定化酶只是在細(xì)胞內(nèi)才能發(fā)揮作用B.固定化酶能提高酶的利用率C.酶的固定是酶分離純化的常用方法D.固定化酶的固定化方式就是吸附在
固體表面上?!踢x修一:酵母細(xì)胞的固定化共59頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第53頁!例2.溶解海藻酸鈉,最好采用______加熱的方法A.小火間斷B.
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