華中師范大學(xué)酶工程作業(yè)

答：不一定。天然酶的活性維持存在缺陷；（抑制、活性半衰期短）天然酶的使用性能存在缺陷；（力差，容易受產(chǎn)物抑制）天然酶的應(yīng)用存在潛力。（如：通過(guò)酶的分子改造可提高酶的穩(wěn)定性、解除酶的抗原性、改變酶學(xué)性質(zhì)(最適pH、最適溫度、Km應(yīng)用范圍。舉例：胰蛋白酶酶原，用腸激酶或胰蛋白酶進(jìn)行修飾，切除一個(gè)六肽，從而顯示胰蛋白酶的催化功能。天冬氨酸酶經(jīng)過(guò)胰蛋白酶修飾，從 C末端切除10多個(gè)氨基酸殘的肽段，可以使天冬氨酸酶的活力提高 5.5倍。這說(shuō)明天然酶并不總是處于最佳構(gòu)象狀態(tài)。答：主鏈切斷后，酶活性中心遭到破壞、酶失活。酶的抗原性降低或消失。主鏈切斷后，酶的活性中心形成，酶蛋白顯示其催化功能或酶活力的提高。酶分子側(cè)鏈基團(tuán)一般包括哪些基團(tuán)，側(cè)鏈基團(tuán)修飾的目的意義？側(cè)鏈基團(tuán)修飾的目的意義：BCD.引起酶催化活性、功能的改變EG研究酶的活性中心中的必需基團(tuán)。H.可用于測(cè)定某一種基團(tuán)在酶分子中的數(shù)量。何謂分子結(jié)合修飾，有哪些方面的作用？酶的特性和功能的方法稱(chēng)為大分子結(jié)合修飾。作用：提高酶活力：心更有利于和底物結(jié)合，并形成準(zhǔn)確的催化部位，從而使酶活力得以提高。延長(zhǎng)酶的半衰期增加酶的穩(wěn)定性提高酶的熱穩(wěn)定性及抗酸堿和抗氧化能力降低或消除抗原性：抗體與抗原之間的特異結(jié)合是由于它們之間特定的分子結(jié)構(gòu)所引起何謂分子內(nèi)交聯(lián)修飾，有哪些方面的作用？答：含有雙功能基團(tuán)的化合物（又稱(chēng)為雙功能試劑）如戊二醛、己二胺、葡聚糖二乙醛等，可以在酶蛋白分子中相距較近的兩個(gè)側(cè)鏈基團(tuán)之間形成共價(jià)交聯(lián)，從而提高酶的穩(wěn)定性的修飾方法稱(chēng)為分子內(nèi)交聯(lián)修飾。作用：增加酶的穩(wěn)定性。何謂氨基酸置換修飾，有哪些方面的作用？答：將酶分子肽鏈上的某一個(gè)氨基酸換成另一個(gè)氨基酸的修飾方法，稱(chēng)為氨基酸置換修飾。作用：通過(guò)修飾可以提高酶活力BC.通過(guò)修飾可以使酶專(zhuān)一性發(fā)生改變酶分子的物理修飾有什么特點(diǎn)，有什么用途？方法稱(chēng)為酶分子的物理修飾。用下，副鍵發(fā)生某些變化和重排，使沒(méi)分子的空間構(gòu)象發(fā)生某些改變。用途舉例：羧肽酶γ 經(jīng)高壓處理，底物專(zhuān)一性發(fā)生改變。其水解能力降低，而有利于催化多肽的合成反應(yīng)。天冬氨酸酶經(jīng)高壓處理一定時(shí)間后，可以催化 D—Asp的氨解反應(yīng)。胰蛋白酶用鹽酸胍處理，破壞蛋白質(zhì)的副鍵，肽鏈充分伸展，原有的空間構(gòu)象被破壞。然后，透析除去變性劑，再在不同的溫度條件下，使酶重新構(gòu)建新的空間構(gòu)象。結(jié)果表明，在20℃條件下，重新構(gòu)建的胰蛋白酶與天然胰蛋白酶的穩(wěn)定性基本相同而在50℃條件下重新構(gòu)建的酶，穩(wěn)定性比天然酶提高 5倍。何謂金屬離子置換修飾？方法步驟？主要的應(yīng)用？答：把酶分子中的金屬離子換成另一種金屬離子，使酶的特性和功能發(fā)生改變的修飾方法稱(chēng)為金屬離子置換修飾。純度的酶液。除去原有的金屬離子：在經(jīng)過(guò)純化的酶液中加入一定量的金屬螯合劑，如乙二胺四乙酸（EDTA）等，使酶分子中的金屬離子與EDTA分子篩層析等方法，將EDTA-金屬螯合物從酶液中除去。此時(shí)，酶往往成為無(wú)活性狀態(tài)。入的金屬離子結(jié)合，除去多余的置換離子，就可以得到經(jīng)過(guò)金屬離子置換后的酶。應(yīng)用舉例：A.一般天然α淀粉酶是雜離子型的，其中大部分含有鈣離子，有些則含有鎂離子、鋅離子或其它金屬離子。如將其它離子都換成鈣離子，成為鈣型 α淀粉酶，研究表明：結(jié)晶鈣型α淀粉酶比天然雜離子型α淀粉酶的穩(wěn)定性提高3倍以上。在α淀粉酶的發(fā)酵生產(chǎn)保存和應(yīng)用過(guò)程中添加一定量的鈣離子，有利于提高和穩(wěn)定α淀粉酶的活力B.Zn型蛋白酶的Zn2+被Ca2+置換，所得的鈣型蛋白酶活性提高 20％-30％，若制成結(jié)晶，酶活可提高2-3倍。何謂“多酶融合體？”答：許多真核生物的多酶體系是多功能蛋白，不同的酶以共價(jià)鍵連在一起，稱(chēng)為單一的肽連，稱(chēng)為多酶融合體。答：酶分子的主鏈修飾包括以下三個(gè)方面：①主鏈的切斷修飾②主