組織培養(yǎng)育苗課件

組織培養(yǎng)育苗植物組織培養(yǎng)（Planttissueculture）是指在無菌條件下，體的植物器官（根、莖、葉、花等）、組織（如形成層、花藥組織、胚乳、皮層等）、細(xì)胞（體細(xì)胞和生殖細(xì)胞），以及原生質(zhì)體，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件，使其長成完整的植株，統(tǒng)稱為植物組織培養(yǎng)。

組織培養(yǎng)育苗獲取外植體無菌接種誘導(dǎo)愈傷組織的形成試管苗的形成擴(kuò)大培養(yǎng)移栽脫分化再分化培養(yǎng)基配制組織培養(yǎng)步驟（脫毒）1．先在燒杯中放入一些蒸餾水。2．分別取母液10ml倒入。3．一般稱取30g蔗糖倒入，攪拌溶解。4．加蒸餾水用量筒定溶至1L。5．用微量可調(diào)移液器吸取各種激素，減少誤差。6．用精密試紙或酸度計(jì)調(diào)整PH至5.7～5.8。7．稱取5g左右瓊脂粉,倒入上面配好的溶液中，放在電爐上加熱至沸騰，直到瓊脂粉熔化。8．稍微冷卻后，分裝入培養(yǎng)容器中。無蓋的培養(yǎng)容器要用封口膜或牛皮紙封口，用橡皮筋或繩子扎緊。9．放入消毒滅菌鍋滅菌，滅菌20分鐘左右。10．滅菌后從滅菌鍋中取出培養(yǎng)基，平放在超凈工作臺上令其冷卻凝固。培養(yǎng)基的配置微量可調(diào)移液器

滅菌是組織培養(yǎng)重要的工作之一。培養(yǎng)基用濕熱滅菌高壓滅菌的原理是：在密閉的蒸鍋內(nèi)，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點(diǎn)不斷提高，從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢。滅菌高壓蒸汽滅菌器7接種1．將初步洗滌及切割的材料放入燒杯，用消毒劑滅菌，再用無菌水沖洗，最后瀝去水分，取出放置在滅過菌的紗布上或?yàn)V紙上。2．材料吸干后，一手拿鑷子、一手拿剪刀或解剖刀，對材料進(jìn)行適當(dāng)?shù)那懈?。在接種過程中要經(jīng)常灼燒接種器械，防止交叉污染。3．用灼燒消毒過的器械將切割好的外植體插植或放置到培養(yǎng)基上。培養(yǎng)1．固體培養(yǎng)法

用瓊脂固化培養(yǎng)基來培養(yǎng)植物材料的方法。是現(xiàn)在最常用的方法。雖然該方法設(shè)備簡單，易行，但養(yǎng)分分布不均，生長速度不均衡，并常有褐化中毒現(xiàn)象發(fā)生。

2．液體培養(yǎng)法用不加固化劑的液體培養(yǎng)基培養(yǎng)植物材料的方法。由于液體中氧氣含量較少，通常需要通過攪動或振動培養(yǎng)液的方法以確保氧氣的供給。這種定期浸沒的方法，既能使培養(yǎng)基均一，又能保證氧氣的供給。需要一定的營養(yǎng)物質(zhì)、植物生長調(diào)節(jié)劑、光照等條件營養(yǎng)物質(zhì)：水、糖類、維生素類、氨基酸類、大量元素化合物、微量元素化合物組織培養(yǎng)幼苗的優(yōu)缺點(diǎn)1、在不受植物體其它部分干擾下研究被培養(yǎng)部分的生長和分化的規(guī)律2、利用各種培養(yǎng)條件影響它們的生長和分化，以解決理論上和生產(chǎn)上的問題3、有力地推動了生物科學(xué)中各學(xué)科的發(fā)展和相互滲透4、促進(jìn)了營養(yǎng)生