薄 層 色 譜課件

薄層色譜

實(shí)驗(yàn)原理

利用混合物中各組份的物理化學(xué)性質(zhì)的差別，在層析過程中，在不相溶的兩個(gè)相中分布的不同，達(dá)到分離目的。

兩個(gè)相:一個(gè)是涂布在薄層板上的吸附劑，叫固定相(吸附劑最常用的是氧化鋁和硅膠)

，另一個(gè)是在展開過程中流過固定相的展開劑（有機(jī)溶劑），叫流動(dòng)相。

由于吸附劑對混合物中不同物質(zhì)的吸附力不同，對極性大的物質(zhì)吸附力強(qiáng)，對極性小的物質(zhì)吸附力弱。因此當(dāng)溶劑流過時(shí)，不同物質(zhì)在吸附劑和溶劑之間發(fā)生連續(xù)不斷地吸附、解吸附、再吸附、再解吸附。易被吸附的物質(zhì)相對移動(dòng)較慢，在薄層板上移動(dòng)的距離就??；反之，較難被吸附的物質(zhì)相對移動(dòng)較快一些，在薄層板上移動(dòng)的距離則大。

經(jīng)過一段時(shí)間的展開，混合物中各組份在薄層板上連續(xù)不斷地進(jìn)行吸附和解吸附過程，從而使各組份移動(dòng)的速度產(chǎn)生差異，不同物質(zhì)就被彼此被分開，最后形成互相分離的斑點(diǎn)。

薄層色譜法的應(yīng)用

1.用于藥品和制劑的質(zhì)量控制及雜質(zhì)檢查

2.控制化學(xué)反應(yīng)進(jìn)程，反應(yīng)副產(chǎn)物的檢查及中間體的分析

3.探索柱色譜的分離條件

4.精制和制備純品的藥物

5.臨床和生化檢驗(yàn)

6.毒物分析

7.中藥成分分析和含量測定

8.中藥材品種真?zhèn)螜z查及其代用品尋找

9.其它微量鑒定和分析反式偶氮苯在光照下吸收紫外光形成活化分子?；罨肿邮ミ^量的能量返回順式或反式基態(tài)，得到順式和反式異構(gòu)體。反式偶氮苯的偶極矩為0，順式偶氮苯的偶極矩為3.0D，利用兩者極性不同把它們分離。經(jīng)過薄層層析后，沒有經(jīng)過光照的偶氮苯在薄層板上只有一個(gè)斑點(diǎn)，而經(jīng)過光照的偶氮苯有兩個(gè)斑點(diǎn)。順、反偶氮苯異構(gòu)體進(jìn)行分離、分析在薄板上混合物的各個(gè)組分上升的高度與展開劑上升的前沿之比稱為該化合物的比移值，用Rf表示。前沿線色斑起始線薄層色譜示意圖比移值實(shí)驗(yàn)裝置

2.點(diǎn)樣在薄板一端1cm處用筆輕輕畫一橫線作為起點(diǎn)線，用內(nèi)徑為1mm，管口平整的毛細(xì)管垂直點(diǎn)在起點(diǎn)線上。注意動(dòng)作要輕，毛細(xì)管口不要碰到吸附劑。

如果溶液過稀，一次點(diǎn)樣后樣品量過少，可在前一次點(diǎn)樣干燥后，在原處再點(diǎn)。點(diǎn)樣的直徑不要超過2mm。因?yàn)榘唿c(diǎn)過大，會造成拖尾、擴(kuò)散，影響分離效果。

如果需要點(diǎn)多個(gè)樣，點(diǎn)之間距離不小于1～1.5cm。前沿線色斑起始線薄層色譜示意圖常用的顯色手段：紫外燈，顯色劑如碘、硫酸等4.計(jì)算Rf4.劃線點(diǎn)樣：在活化好的板上離底部約1cm的地方輕輕的劃一條線，用毛細(xì)管在線上點(diǎn)一個(gè)已知樣和一個(gè)未知樣，樣品圈不能大于2mm.5.將點(diǎn)好樣的板放入層析缸，展開，在展開劑離頂部1cm的時(shí)刻取出，用鉛筆畫出前沿的位置，并劃出斑點(diǎn)的位置。6.在另一塊板上重復(fù)一次實(shí)驗(yàn)。7.計(jì)算順反偶氮苯的的比移值，并確定哪個(gè)斑點(diǎn)是順式偶氮苯。注意事項(xiàng)

1．層析缸不要洗，廢液要倒入廢液缸2．薄板要放平。3．注意觀察展開劑的位置，作好標(biāo)記。

A.會使點(diǎn)樣里的組份分不開B.可能會淹沒所劃出來的細(xì)線,從而溶解所點(diǎn)的樣C.展開劑會揮發(fā)出來D.展開劑與硅膠G發(fā)生反應(yīng)1.展開劑如果過多，會有何后果？(B)A.所點(diǎn)的試樣的樣點(diǎn)的圈太大B.鋪的薄板不均勻C.薄板放的不平衡D.薄板老化時(shí)間不夠2