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關(guān)于人血涂片的制作第一頁(yè),共十三頁(yè),2022年,8月28日
血涂片的顯微檢查是血液細(xì)胞學(xué)檢查的基本方法,臨床上應(yīng)用極為廣泛,制備厚薄適宜,分布均勻,染色良好的血涂片是血液學(xué)檢查的重要基本技術(shù)之一。涂片法制片是生物顯微制片的基本方法之一。第二頁(yè),共十三頁(yè),2022年,8月28日可分5個(gè)步驟進(jìn)行消毒取血推片染色觀察步驟第三頁(yè),共十三頁(yè),2022年,8月28日消毒與取血
消毒
先按摩取血部位,使血流通暢;再用酒精消毒采血針和取血部位(如指尖)。
取血
待酒精干后,刺破皮膚,使血自然流出,勿擠。取干凈載片,讓血滴在離載片一端中4~5毫米處,注意手指持握載片的邊緣,勿觸及其表面。不能使載片接觸取血部位的皮膚。第四頁(yè),共十三頁(yè),2022年,8月28日推片
取一塊邊緣光滑的載片做推片。將其一端置于血滴前方,向后移動(dòng)到接觸血滴,使血液均勻分散在推片與載片的接觸處。然后使推片與載片呈30°~40°角,向另一端平穩(wěn)地推出,如右圖所示。涂片推好后,迅速在空氣中搖,使之自然干燥。第五頁(yè),共十三頁(yè),2022年,8月28日染色
用特種玻璃鉛筆在血膜兩側(cè)畫(huà)兩條線,防止染液外溢。再將瑞氏染液(伊紅-亞甲基藍(lán))滴在血膜上,至染液淹沒(méi)全部血膜,染半分鐘。加等量蒸餾水(或緩沖液)與染液混合再染5分鐘。最后用蒸餾水把染液沖掉,用吸水紙吸干,自然干燥后,即可觀察。第六頁(yè),共十三頁(yè),2022年,8月28日觀察紅細(xì)胞
淡紅色,無(wú)核的圓形細(xì)胞,因紅細(xì)胞為雙凹形,故邊緣部分染色較深,中心較淺,直徑7-8微米。
顆粒白細(xì)胞
嗜中性顆粒白細(xì)胞:體積略大于紅細(xì)胞,細(xì)胞核被染成紫色分葉狀,可分1-5葉。直徑10-12微米。
嗜酸性顆粒白細(xì)胞:略大于嗜中性白細(xì)胞,細(xì)胞核染成紫色,通常為2葉,胞質(zhì)充滿嗜酸性大圓顆粒,被染成鮮紅色。直徑10-15微米。
嗜堿性顆粒白細(xì)胞:體積略小于嗜酸性白細(xì)胞,細(xì)胞質(zhì)中有大小不等被染成紫色的顆粒,顆粒數(shù)目較嗜酸性白細(xì)胞的顆粒少,核1-2葉,染成淡藍(lán)色。直徑10-11微米。第七頁(yè),共十三頁(yè),2022年,8月28日
無(wú)顆粒白細(xì)胞
淋巴細(xì)胞:可觀察到中、小型兩種。小淋巴細(xì)胞與紅細(xì)胞大小相似,圓形,核致密,染成深紫色。周?chē)鷥H一薄層嗜堿性染成淡藍(lán)的細(xì)胞質(zhì)。中淋巴細(xì)胞較大,核圓形。直徑6-8微米。
單核細(xì)胞:體積最大,細(xì)胞圓形。胞質(zhì)染成灰藍(lán)色。核呈腎形或馬蹄形,染色略淺于淋巴細(xì)胞的核。直徑14-20微米。血小板血小板為不規(guī)則小體,直徑2-3微米。其周?chē)糠譁\藍(lán)色,中央有細(xì)小的紫紅色顆粒,聚集成群。
第八頁(yè),共十三頁(yè),2022年,8月28日第九頁(yè),共十三頁(yè),2022年,8月28日第十頁(yè),共十三頁(yè),2022年,8月28日第十一頁(yè),共十三頁(yè),2022年,8月28日注意事項(xiàng)玻片的清洗:新玻片常有游離堿質(zhì),因此應(yīng)用清洗液或10%鹽酸浸泡24h,然后再?gòu)氐浊逑?。用過(guò)的玻片可放入適量肥皂水或合成洗滌劑的清水中煮沸20min,再用熱水將肥皂和血膜洗去,用自來(lái)水反復(fù)沖洗,必要時(shí)再置95%乙醇中浸泡1h,然后擦干或烤干備用。使用玻片時(shí)只能手持玻片邊緣,切勿觸及玻片表面,以保持玻片清潔,干燥,中性、無(wú)油膩。一張良好的血片,要求厚薄適宜,頭體尾分明,分布均勻,邊緣整齊,兩側(cè)留有空隙。血片制好后最好立即固定染色,以免細(xì)胞溶解和發(fā)生退行性變。血膜未干透,細(xì)胞尚未牢固
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