基因工程藥物研究進(jìn)展課件

基因工程藥物研究進(jìn)展

基因工程藥物研究進(jìn)展1outline一.基因工程藥物二.基因工程制藥概述三.我國基因工程藥物研究最新進(jìn)展四.發(fā)展前景outline一.基因工程藥物2一.基因工程藥物基因工程藥物是先確定對某種疾病有預(yù)防和治療作用的蛋白質(zhì)，然后將控制該蛋白質(zhì)合成過程的基因取出來，經(jīng)過一系列基因操作，最后將該基因放入可以大量生產(chǎn)的受體細(xì)胞中去，這些受體細(xì)胞包括細(xì)菌、酵母菌、動物或動物細(xì)胞、植物或植物細(xì)胞，在受體細(xì)胞不斷繁殖過程中，大規(guī)模生產(chǎn)具有預(yù)防和治療這些疾病的蛋白質(zhì)，即基因疫苗或藥物。在醫(yī)學(xué)和獸醫(yī)學(xué)中應(yīng)用正逐步推廣。

一.基因工程藥物基因工程藥物是先確定對某種疾3二.基因工程制藥概述基因工程制藥是隨著生物技術(shù)革命而發(fā)展以來的。1980年，美國通過Bayh-Dole法案，授予科學(xué)家HerbertBoyer和StanleyCohen基因克隆專利，這是現(xiàn)代生物制藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展的里程碑。1982年，第一個生物醫(yī)藥產(chǎn)品在美國上市銷售，標(biāo)志著生物制藥業(yè)從此走入市場。牛胰島素二.基因工程制藥概述基因工程制藥是隨著生物4生物制藥業(yè)有不同于傳統(tǒng)制藥業(yè)的特點(diǎn)1.生物制藥具有靶向治療作用2.生物制藥有利于突破傳統(tǒng)醫(yī)藥的專利保護(hù)到期等困境3.生物制藥具有高技術(shù)、高投入、高風(fēng)險、高收益特性4.生物制藥具有較長的產(chǎn)業(yè)鏈生物制藥這一系列的特點(diǎn)決定了其在21世紀(jì)國民經(jīng)濟(jì)中的重要地位，歷版中國藥典收錄的生物藥物品種也是逐漸增多。生物制藥業(yè)有不同于傳統(tǒng)制藥業(yè)的特點(diǎn)1.生物制藥具有靶向治療作5基因工程藥物研究進(jìn)展課件6三.我國基因工程藥物研究最新進(jìn)展近20年來,我國基因藥物與疫苗的研究、開發(fā)和產(chǎn)業(yè)化從無到有獲得了快速發(fā)展,逐步縮短了與先進(jìn)國家的差距。下面就近幾年來我國基因工程藥物在基礎(chǔ)和臨床研究方面取得的新進(jìn)展作一概述。1基因工程藥物治療腫瘤2基因工程藥物治療病毒感染3基因工程藥物治療心腦血管疾病4基因工程藥物治療其他疾病三.我國基因工程藥物研究最新進(jìn)展近20年71基因工程藥物治療腫瘤高麗等研究基因重組蕎麥胰蛋白酶抑制劑(rBTI)誘導(dǎo)HL260細(xì)胞凋亡的作用,結(jié)果表明來自蓼科植物的重組蕎麥胰蛋白酶抑制劑能夠有效的抑制HL260腫瘤細(xì)胞的生長。本研究為植物小分子蛋白酶抑制劑在抗腫瘤方面的應(yīng)用提供了新內(nèi)容,也為基因重組植物蛋白藥物的臨床應(yīng)用開創(chuàng)新的思路。進(jìn)一步研究這類藥物有望使其成為一種理想的抗腫瘤靶向治療藥物。蕎麥1基因工程藥物治療腫瘤高麗等研究基因重組蕎麥8韓明勇等采用Lipofectamine2000將攜帶人IL218基因的質(zhì)粒pCDNA3112hIL218轉(zhuǎn)導(dǎo)入Bcap37細(xì)胞中,并篩選出陽性克隆。裸鼠致瘤實(shí)驗(yàn)和抗瘤實(shí)驗(yàn)表明IL218基因轉(zhuǎn)染降低了Bcap37細(xì)胞的腫瘤原性,IL218基因修飾的Bcap37細(xì)胞具有明顯的抗腫瘤作用。該研究為乳腺癌基因工程腫瘤疫苗的研制提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。1基因工程藥物治療腫瘤韓明勇等采用Lipofectamine20092基因工程藥物治療病毒感染楊延梅等應(yīng)用安福隆(第二代基因工程A22b干擾素)治療慢性乙型病毒性肝炎患者45例,第1個月每天肌肉注射1次安福隆500萬u,后改為隔天肌肉注射1次,療程為6個月;與給予甘利欣、維生素C等保肝藥物治療的對照組47例進(jìn)行了比較。結(jié)果治療組肝功能復(fù)常率、HBV2DNA陰轉(zhuǎn)率、HBeAg陰轉(zhuǎn)率、HBeAb陽轉(zhuǎn)率均明顯高于對照組并有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0101)。該臨床研究證明安福隆治療慢性乙型病毒性肝炎療效確切。2基因工程藥物治療病毒感染楊延梅等應(yīng)用安福隆102基因工程藥物治療病毒感染胡立華等觀察了重組基因工程藥物干擾素(IF1Na2Ib)與胸腺肽al聯(lián)合治療慢性乙型肝炎的療效,結(jié)果顯示聯(lián)合用藥的強(qiáng)大抗病毒活性,是目前治療慢性乙型肝炎較為理想的方案。左冰采用A21型基因工程干擾素(rHuIF2N2a1)與無環(huán)鳥苷(ACV)聯(lián)合治療24單純皰疹病毒性角膜炎患者,獲得滿意效果,全組24例中(30只眼),治愈或基本治愈29只眼,治愈率為96.167%。該臨床研究證明應(yīng)用A21型基因工程干擾素可達(dá)到提高療效,縮短病程的目的。2基因工程藥物治療病毒感染胡立華等觀察了重組113基因工程藥物治療心腦血管疾病余蓉等通過計(jì)算機(jī)分子設(shè)計(jì),預(yù)測了水蛭素12肽通過柔性肽(Gly)3與r2PA連接形成的融合蛋白的空間結(jié)構(gòu)與功能,并構(gòu)建了表達(dá)該融合蛋白的工程菌,融合蛋白表達(dá)后通過復(fù)性,得到了分子設(shè)計(jì)預(yù)期的具有較高溶栓抗凝雙功能活性的新型蛋白。該研究首次將重組水蛭素HV3的C末端12肽與rPA基因融合,具有作用半衰期更長,選擇性更高,抗原性、出血性等副作用更小等特點(diǎn)。體外活性分析證實(shí)該工程融合蛋白具有良好的抗凝纖溶雙功能,具有成為新一代溶栓藥的潛力。3基因工程藥物治療心腦血管疾病余蓉等通過計(jì)算123基因工程藥物治療心腦血管疾病余榕捷等利用PCR方法擴(kuò)增納豆激酶酶原基因,并克隆到表達(dá)載體pET3c上,構(gòu)建表達(dá)pro2NK和載體上22氨基酸短肽的融合蛋白的表達(dá)質(zhì)粒pENK,表達(dá)質(zhì)粒pENK分別轉(zhuǎn)化溶源化宿主菌BL21(DE3)pLysS2和BL21(DE3)pLysS+,獲得表達(dá)菌pENK2(DE3)pLysS2和pENK2(DE3)pLysS+。SDS2PAGE結(jié)果顯示兩菌株均表達(dá)42kD的目的蛋白。纖維蛋白平板法顯示表達(dá)產(chǎn)物具溶栓的活性,本研究為開發(fā)納豆激酶成為新一代溶栓藥物奠定了基礎(chǔ)。3基因工程藥物治療心腦血管疾病余榕捷等利用134基因工程藥物治療其他疾病

成骨生長肽(OGP)是一種促進(jìn)體外成骨細(xì)胞增殖和體內(nèi)成骨的多肽。利用人工合成的人成骨生長肽基因,與質(zhì)粒pTYB2重組,轉(zhuǎn)化大腸桿菌E1coliBL21,經(jīng)異丙基硫代2B2D2半乳糖苷誘導(dǎo),融合蛋白在E1coli中得到表達(dá),經(jīng)一步親和層析純化得到重組人成骨生長肽(rhOGP)。體外實(shí)驗(yàn)證明rhOGP對成纖維細(xì)胞的增殖有促進(jìn)作用,體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明rhOGP加速兔移植骨成活,使血清中堿性磷酸酶活性增高,骨鈣素增高。rhOGP促進(jìn)成骨,有可能成為治療骨移植及骨折愈合的有效藥物。4基因工程藥物治療其他疾病成骨生長14四.發(fā)展前景

基因工程技術(shù)的運(yùn)用使藥品開發(fā)發(fā)生了根本性的轉(zhuǎn)變,治療性蛋白質(zhì)分子設(shè)計(jì)與工程化已取得突破性進(jìn)展,如今基因工程藥物已進(jìn)入第三代蛋白質(zhì)治療藥物發(fā)展階段。通過基因工程手段可以使過去一些生產(chǎn)困難的產(chǎn)品,如激素、酶、抗體等生物活性物質(zhì)明顯提高產(chǎn)品質(zhì)量與收率,同時大幅度降低生產(chǎn)成本,提高患者的用藥水平和生活質(zhì)量?；蚬こ碳夹g(shù)應(yīng)用于藥物研制是一項(xiàng)造福于人類的宏偉工程,隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,基因工程藥品必將會給人類帶來巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。四.發(fā)展前景基因工程技術(shù)的運(yùn)用使藥品開15

謝謝！謝謝！16基因工程藥物研究進(jìn)展

基因工程藥物研究進(jìn)展17outline一.基因工程藥物二.基因工程制藥概述三.我國基因工程藥物研究最新進(jìn)展四.發(fā)展前景outline一.基因工程藥物18一.基因工程藥物基因工程藥物是先確定對某種疾病有預(yù)防和治療作用的蛋白質(zhì)，然后將控制該蛋白質(zhì)合成過程的基因取出來，經(jīng)過一系列基因操作，最后將該基因放入可以大量生產(chǎn)的受體細(xì)胞中去，這些受體細(xì)胞包括細(xì)菌、酵母菌、動物或動物細(xì)胞、植物或植物細(xì)胞，在受體細(xì)胞不斷繁殖過程中，大規(guī)模生產(chǎn)具有預(yù)防和治療這些疾病的蛋白質(zhì)，即基因疫苗或藥物。在醫(yī)學(xué)和獸醫(yī)學(xué)中應(yīng)用正逐步推廣。

一.基因工程藥物基因工程藥物是先確定對某種疾19二.基因工程制藥概述基因工程制藥是隨著生物技術(shù)革命而發(fā)展以來的。1980年，美國通過Bayh-Dole法案，授予科學(xué)家HerbertBoyer和StanleyCohen基因克隆專利，這是現(xiàn)代生物制藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展的里程碑。1982年，第一個生物醫(yī)藥產(chǎn)品在美國上市銷售，標(biāo)志著生物制藥業(yè)從此走入市場。牛胰島素二.基因工程制藥概述基因工程制藥是隨著生物20生物制藥業(yè)有不同于傳統(tǒng)制藥業(yè)的特點(diǎn)1.生物制藥具有靶向治療作用2.生物制藥有利于突破傳統(tǒng)醫(yī)藥的專利保護(hù)到期等困境3.生物制藥具有高技術(shù)、高投入、高風(fēng)險、高收益特性4.生物制藥具有較長的產(chǎn)業(yè)鏈生物制藥這一系列的特點(diǎn)決定了其在21世紀(jì)國民經(jīng)濟(jì)中的重要地位，歷版中國藥典收錄的生物藥物品種也是逐漸增多。生物制藥業(yè)有不同于傳統(tǒng)制藥業(yè)的特點(diǎn)1.生物制藥具有靶向治療作21基因工程藥物研究進(jìn)展課件22三.我國基因工程藥物研究最新進(jìn)展近20年來,我國基因藥物與疫苗的研究、開發(fā)和產(chǎn)業(yè)化從無到有獲得了快速發(fā)展,逐步縮短了與先進(jìn)國家的差距。下面就近幾年來我國基因工程藥物在基礎(chǔ)和臨床研究方面取得的新進(jìn)展作一概述。1基因工程藥物治療腫瘤2基因工程藥物治療病毒感染3基因工程藥物治療心腦血管疾病4基因工程藥物治療其他疾病三.我國基因工程藥物研究最新進(jìn)展近20年231基因工程藥物治療腫瘤高麗等研究基因重組蕎麥胰蛋白酶抑制劑(rBTI)誘導(dǎo)HL260細(xì)胞凋亡的作用,結(jié)果表明來自蓼科植物的重組蕎麥胰蛋白酶抑制劑能夠有效的抑制HL260腫瘤細(xì)胞的生長。本研究為植物小分子蛋白酶抑制劑在抗腫瘤方面的應(yīng)用提供了新內(nèi)容,也為基因重組植物蛋白藥物的臨床應(yīng)用開創(chuàng)新的思路。進(jìn)一步研究這類藥物有望使其成為一種理想的抗腫瘤靶向治療藥物。蕎麥1基因工程藥物治療腫瘤高麗等研究基因重組蕎麥24韓明勇等采用Lipofectamine2000將攜帶人IL218基因的質(zhì)粒pCDNA3112hIL218轉(zhuǎn)導(dǎo)入Bcap37細(xì)胞中,并篩選出陽性克隆。裸鼠致瘤實(shí)驗(yàn)和抗瘤實(shí)驗(yàn)表明IL218基因轉(zhuǎn)染降低了Bcap37細(xì)胞的腫瘤原性,IL218基因修飾的Bcap37細(xì)胞具有明顯的抗腫瘤作用。該研究為乳腺癌基因工程腫瘤疫苗的研制提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。1基因工程藥物治療腫瘤韓明勇等采用Lipofectamine200252基因工程藥物治療病毒感染楊延梅等應(yīng)用安福隆(第二代基因工程A22b干擾素)治療慢性乙型病毒性肝炎患者45例,第1個月每天肌肉注射1次安福隆500萬u,后改為隔天肌肉注射1次,療程為6個月;與給予甘利欣、維生素C等保肝藥物治療的對照組47例進(jìn)行了比較。結(jié)果治療組肝功能復(fù)常率、HBV2DNA陰轉(zhuǎn)率、HBeAg陰轉(zhuǎn)率、HBeAb陽轉(zhuǎn)率均明顯高于對照組并有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0101)。該臨床研究證明安福隆治療慢性乙型病毒性肝炎療效確切。2基因工程藥物治療病毒感染楊延梅等應(yīng)用安福隆262基因工程藥物治療病毒感染胡立華等觀察了重組基因工程藥物干擾素(IF1Na2Ib)與胸腺肽al聯(lián)合治療慢性乙型肝炎的療效,結(jié)果顯示聯(lián)合用藥的強(qiáng)大抗病毒活性,是目前治療慢性乙型肝炎較為理想的方案。左冰采用A21型基因工程干擾素(rHuIF2N2a1)與無環(huán)鳥苷(ACV)聯(lián)合治療24單純皰疹病毒性角膜炎患者,獲得滿意效果,全組24例中(30只眼),治愈或基本治愈29只眼,治愈率為96.167%。該臨床研究證明應(yīng)用A21型基因工程干擾素可達(dá)到提高療效,縮短病程的目的。2基因工程藥物治療病毒感染胡立華等觀察了重組273基因工程藥物治療心腦血管疾病余蓉等通過計(jì)算機(jī)分子設(shè)計(jì),預(yù)測了水蛭素12肽通過柔性肽(Gly)3與r2PA連接形成的融合蛋白的空間結(jié)構(gòu)與功能,并構(gòu)建了表達(dá)該融合蛋白的工程菌,融合蛋白表達(dá)后通過復(fù)性,得到了分子設(shè)計(jì)預(yù)期的具有較高溶栓抗凝雙功能活性的新型蛋白。該研究首次將重組水蛭素HV3的C末端12肽與rPA基因融合,具有作用半衰期更長,選擇性更高,抗原性、出血性等副作用更小等特點(diǎn)。體外活性分析證實(shí)該工程融合蛋白具有良好的抗凝纖溶雙功能,具有成為新一代溶栓藥的潛力。3基因工程藥物治療心腦血管疾病余蓉等通過計(jì)算283基因工程藥物治療心腦血管疾病余榕捷等利用PCR方法擴(kuò)增納豆激酶酶原基因,并克隆到表達(dá)載體pET3c上,構(gòu)建表達(dá)pro2NK和載體上22氨基酸短肽的融合蛋白的表達(dá)質(zhì)粒pENK,表達(dá)質(zhì)粒pENK分別轉(zhuǎn)化溶源化宿主菌BL21(DE3)pLysS2和BL21(DE3)pLysS+,獲得表達(dá)菌pENK2(DE3)pLysS2和pENK2(DE3)pLysS+。SDS2PAGE結(jié)果顯示兩菌株均表達(dá)42kD的目的蛋白。纖維蛋白平板法顯示表達(dá)產(chǎn)物具溶栓的活性,本研究為開發(fā)納豆激酶成為新一代溶栓藥物奠定了基礎(chǔ)。