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文檔簡介

第二章基因工程(jīyīngōngchéng)受體菌或細胞第一頁,共15頁。四、基因工程(jīyīngōngchéng)受體菌或細胞受體細胞應(yīng)具備的條件各種基因工程(jīyīngōngchéng)受體及其特性實驗室常用的基因工程(jīyīngōngchéng)受體第二頁,共15頁。受體細胞應(yīng)具備(jùbèi)的條件限制性缺陷(quēxiàn)型外切(wàiqiē)酶和內(nèi)切酶活性缺陷(recB-、recC-、hsdR-);重組整合缺陷型用于基因擴增或高效表達的受體細胞(recA-);具有較高的轉(zhuǎn)化效率具有與載體選擇標(biāo)記互補的表型感染寄生缺陷型防止重組細菌擴散污染,生物武器除外。第三頁,共15頁。用途:真核生物基因(jīyīn)的高效表達。是基因工程(jīyīngōngchéng)重要的真核受體菌。生長(shēngzhǎng)迅速具有合適的糖基化修飾系統(tǒng)是基因工程的主要(zhǔyào)哺乳動物受體。外源DNA克隆和擴增;原核基因(jīyīn)高效表達;哺乳動物細胞(xìbāo)(中國倉鼠卵巢細胞(xìbāo)CHO):細胞培養(yǎng)條件苛刻(kēkè)受體細胞應(yīng)具備(jùbèi)的條件生長(shēngzhǎng)迅速成本低廉(dīlián)具有與載體選擇標(biāo)記互補的表型用途(yòngtú):用途(yòngtú):抗生素生產(chǎn)菌株的改良。各種基因工程(jīyīngōngchéng)受體及其特性各種基因工程(jīyīngōngchéng)受體及其特性遺傳背景清楚載體受體系統(tǒng)完備生長(shēngzhǎng)迅速培養(yǎng)簡單重組子穩(wěn)定產(chǎn)結(jié)構(gòu)復(fù)雜、種類(zhǒnglèi)繁多的內(nèi)毒素大腸桿菌:優(yōu)點:缺點:第四頁,共15頁。外源DNA克隆和擴增;原核基因(jīyīn)高效表達;基因(jīyīn)文庫構(gòu)建。用途(yòngtú):是基因工程(jīyīngōngchéng)主要原核受體菌。第五頁,共15頁。遺傳背景清楚蛋白質(zhì)分泌(fēnmì)機制健全生長迅速培養(yǎng)簡單不產(chǎn)內(nèi)毒素遺傳欠穩(wěn)定(wěndìng)載體受體系統(tǒng)欠完備枯草桿菌:優(yōu)點:缺點:第六頁,共15頁。用途(yòngtú):原核基因的克隆與表達;重組蛋白(dànbái)多肽的分泌。第七頁,共15頁。鏈霉菌(méjūn):抗生素的主要(zhǔyào)生產(chǎn)者遺傳操作簡單不產(chǎn)內(nèi)毒素用途(yòngtú):抗生素生產(chǎn)菌株的改良。遺傳不穩(wěn)定生長相對緩慢優(yōu)點:缺點:第八頁,共15頁。酵母菌:具有真核生物的特征遺傳背景(bèijǐng)清楚生長迅速培養(yǎng)簡單外源基因表達系統(tǒng)完善遺傳穩(wěn)定內(nèi)源蛋白產(chǎn)物(chǎnwù)的種類多、含量高優(yōu)點:缺點:第九頁,共15頁。用途(yòngtú):外源DNA擴增和克隆真核基因高效表達(biǎodá)基因文庫構(gòu)建真核基因表達(biǎodá)調(diào)控研究是基因工程(jīyīngōngchéng)重要的真核受體菌。第十頁,共15頁。昆蟲細胞(xìbāo)(家蠶):具有真核生物的特征外源基因表達量高繁殖較快培養(yǎng)成本低遺傳(yíchuán)穩(wěn)定用途:真核生物基因(jīyīn)的高效表達。DNA重組操作系統(tǒng)欠完善優(yōu)點:缺點:第十一頁,共15頁。哺乳動物細胞(xìbāo)(中國倉鼠卵巢細胞(xìbāo)CHO):與人的親緣關(guān)系(guānxì)近分子重組表達系統(tǒng)健全具有合適的糖基化修飾系統(tǒng)細胞培養(yǎng)條件苛刻(kēkè)生長緩慢優(yōu)點:缺點:第十二頁,共15頁。用途(yòngtú):哺乳動物(bǔrǔdòngwù)和人基因表達調(diào)控研究基因藥物生產(chǎn)是基因工程的主要(zhǔyào)哺乳動物受體。第十三頁,共15頁。植物(zhíwù)細胞(擬南芥、煙葉):轉(zhuǎn)基因植物細胞易分化細胞培養(yǎng)簡單成本低廉(dīlián)具有光合作

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