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文檔簡介
《細胞工程》復習題一、選擇題:在動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中,正確的選項是(B)結果是相同的雜種細胞的形成過程基本相同操作過程中酶的作用相同0.誘導融合的手段相同單克隆抗體制備過程中,骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導融合后,要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞,在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細胞是(C)淋巴細胞小鼠骨髓瘤細胞B淋巴細胞自身融合細胞小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞雜交瘤細胞②④B.①③⑤C.①②③④D.②③動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中,正確的有體溫相似⑤需要02,不需要C02⑥C02能調節(jié)培養(yǎng)液PHA、①②③④⑤⑥B、①②③④C、①③④⑤⑥D、①②③④⑥在動物細胞培養(yǎng)的有關表達中正確的選項是:(B)A、動物細胞培養(yǎng)的目的只是為了獲得大量的細胞分泌蛋白B、動物細胞培養(yǎng)前要用胰蛋白酶使細胞分散C、細胞的癌變發(fā)生在原代培養(yǎng)向傳代培養(yǎng)的過渡過程中D、培養(yǎng)至50代后傳代細胞遺傳物質沒有發(fā)生改變動物細胞工程技術的基礎是A.動物細胞融合B.單克隆抗體二、是非題植物體細胞雜交能夠在一定程度上克服遠緣雜交不親和的障礙,大大擴展了可用于雜交的親本組合范圍。(V)秋海棠的葉、馬鈴薯的塊莖'成熟的花粉、木質部中的導管細胞都能作為植物組織培養(yǎng)的材料(X)細胞的全能性是指生物體的細胞具有使后代細胞形成完整個體的潛能。但是不是生物體的每一個細胞都要包含有該物種所特有的全套遺傳物質?!瞂)愈傷組織的形成是離體植物細胞分裂的結果〔")組織的形成是離體植物細胞愈傷脫分化的結果(X)細胞工程操作主要對象是細胞(v)細胞工程研究的目的是改變細胞內的遺傳物質或獲得細胞產品。(V)細胞工程理論基礎是細胞的全能性(J)單克降抗體技術是植物細胞工程技術。(X)細胞融合技術是指把兩個或多個不同的細胞在融合劑的作用卜,其細胞膜發(fā)生分子重排,導致細胞合并,染色體等遺傳物質重組融合成一個細胞的技術。(J)單克隆抗體有產雖高,特異性強,靈敏度高的優(yōu)勢,主要應用在臨床診斷和作為藥物載體治療腫瘤.(V)細胞核移植是指將一種細胞的細胞核轉移到另一種去掉了細胞核的細胞質內,然后將不同來源的細胞核和細胞質融合組成新的細胞。(J)三、填空題:由A、B兩種細胞人工融合成C細胞的過程中,常用PEG(聚乙二醇)(或滅活的病毒)作為誘導劑。融合過程包括膜融合和核融合兩方面,D細胞稱為細胞。假設由D細胞培育成植株,可用一植物細胞培養(yǎng)—技術,這一培養(yǎng)過程要經過脫分化和再分化兩個階段。目前,植物體細胞雜交還有許多理論和技術問題沒有解決,如雜種植物還不能按照人們的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良性狀,從遺傳學角度分析,其內在因素很可能是o如需制備單克隆抗體,骨髓瘤細胞還應滿足兩個獨特的性質:為了防止雜交瘤細胞分泌的抗體不純,骨髓瘤細胞系自身不能具有產生抗體的能力;②用于融合的骨髓瘤細胞體內喋吟核昔酸合成的補救途徑必須喪失,即磷酸核糖轉移酶或嗜喋核昔酸激酶的活力喪失。細胞融合的方法有化學法,如〔PEG誘導融合),物理法,如脈沖),生物法,如(仙臺病毒誘導細胞融合法)人工種子的結構包括人工種皮外層、人工胚乳、胚狀體或芽干細胞的來源分為胚胎干細胞)和成體干細胞兩大類糖在植物組織培養(yǎng)中是不可缺少的,作用表達在碳源、能源、維持滲透壓常用的生長素有_NAA、IAA、2,4-D、__等,常用的細胞分裂素—6-BA、KT、ZT植物細胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是細胞離體、一定的營養(yǎng)物質、激素和其他外界條件植物單細胞培養(yǎng)的方法有:平板培養(yǎng);看護培養(yǎng);微室培養(yǎng);雙層濾紙培養(yǎng)動物細胞的融合方法主要有以下幾種植物體內的細胞為什么沒有表現(xiàn)出全能性,而是分化成不同的組織器官,原因是基因在特定時間和空間條件下選擇性表達的結果。細胞工程的技術手段包括細胞融合技術、細胞拆合技術、染色體導入技術、基因轉移技術、細胞器移也技術、胚胎移梢技術、細胞與組織培養(yǎng)技術。細胞工程的基本操作有無菌技術、細胞培養(yǎng)技術、細胞融合技術。四、名詞解釋:1.細胞的全能性:生物體的細胞具有使后代細胞形成完整個體的潛能,細胞的這種特性人工種子:任何一種經人工種皮包被或裸露的,具有形成完整植株能力的繁殖體均可稱之為人工種子。細胞融合:也稱體細胞雜交,又叫無性雜交,是指利用現(xiàn)代科學技術,分別取出兩種生物的單個細胞,然后使這兩種不同的生物細胞在同一培養(yǎng)器中,用無性的人工方法促使兩者互相凝集并發(fā)生細胞之間的融合,進而導致基因重組,產生能同時表達兩個親本細胞有益性狀的細胞雜交技術。花粉培養(yǎng):是將花粉從花藥中別離出來,接種到人工培養(yǎng)基上進行培養(yǎng),以形成花粉胚或愈傷組織進而分化成植株的過程?;ㄋ幣囵B(yǎng):是將花粉發(fā)育至一定階段的花藥接種到人工培養(yǎng)基上進行培養(yǎng),以形成花粉胚或愈傷組織進而分化成植株的技術。原生質體培養(yǎng):是將植物的體細胞經過纖維素酶等處理后去掉細胞壁,獲得的原生質體在無菌培養(yǎng)基上上長、分裂,最終長成植株。無血清培養(yǎng)基由基礎培養(yǎng)基和替代血清的補充成分組成。即:在基礎培養(yǎng)基中補充各種必需因子,如激素、生長因子、結合蛋白、貼壁和擴展因子等。單克隆抗體:如果把能分泌某種特異抗體的一個B型淋巴細胞別離出來,通過純種培養(yǎng),所產生的抗體則只有一種,可以特異地和體內一種抗原結合,這種單一的特異性抗體即為單一B細胞克隆抗體,即單克隆抗體,簡稱單抗。9.接觸抑制:細胞在貼壁生長過程中,隨著細胞分裂,數(shù)量不斷增加,最后形成一個單層,此時細胞間相互接觸,細胞分裂和生長停止,數(shù)量不再增加。五、問答題:什么是細胞的全能性?為什么?什么細胞的全能性最強?細胞的全能性是指生物體的細胞具有使后代細胞形成完整個體的潛能。原因是生物體的每一個細胞都要包含有該物種所特有的全套遺傳物質。受精卵的全能性最強。其次是生殖細胞,再次是體細胞為什么運用植物組織培養(yǎng)技術能把植物離體器官、組織或細胞培養(yǎng)成完整植物體?科學研究說明,當植物細胞脫離了原來所在植物體的器官或組織而處于離體狀態(tài)時,在一定的營養(yǎng)物質、激素和其他外界條件的作用下,就可能表現(xiàn)出全能性,發(fā)育成完整的植株。科學家用植物組織培養(yǎng)的方法,己經把許多種植物的離體的器官、組織或細胞,培養(yǎng)成了完整的植物體。表現(xiàn)全能性的基礎和條件基礎:生物體的每一個細胞都包含有該物種所特有的全套遺傳信息,都有發(fā)育成為完整個體所必需的全部基因,從理論上講,生物體的每一個活細胞都應該具有全能性。條件:①離體提供營養(yǎng)物質激素其他適宜條件〔如溫度等)蘿卜根細胞培養(yǎng)產生出完整植株,克隆羊“多莉”的誕生說明了什么?高度分化的植物細胞仍然有發(fā)育成完整植株的能力;高度特化的動物細胞的細胞核仍然有全能性。受精卵的全能性最高;卵細胞仍具有較高的潛在全能性;體細胞的全能性比生殖細胞低的多。決定植物細胞脫分化、再分化的關鍵因素是什么?影響脫分化的一個重要因素是植物激素。當細胞分裂素與生長素共同使用時,能強烈促進愈傷組織的形成,而兩者不同的濃度配比在再分化過程中,分別對誘導根或芽的產生起關鍵作用。當細胞分裂素與生長素濃度比高時,有利于芽的發(fā)生;濃度比低時,有利于根的發(fā)生。胚狀體是怎樣形成的?培養(yǎng)胚狀體有何意義?愈傷組織的形態(tài)發(fā)生主要有不定芽方式和胚狀體方式兩種。而后者需要在愈傷組織形成后,對其進行處理,形成分散的單個細胞,再誘導其分化出具有胚芽、胚軸、胚根的胚狀體,進而發(fā)育成完整植株。誘導離體的植物組織形成具有生根發(fā)芽能力的胚狀結構,包裹上人造種皮.制成人工種子可以解決有些作物品種繁殖能力差、結子困難或發(fā)芽率低等問題。如何大量生產單克隆抗體?利用B淋巴細胞產生抗體的功能;利用腫瘤細胞無限增殖的特性;利用細胞融合的技術將兩種細胞融合獲得具有B淋巴細胞和腫瘤細胞特性的雜交瘤細胞;利用動物細胞培養(yǎng)技術大量培養(yǎng)雜交瘤細胞。制備單克隆抗體時,為什么要選用B淋巳細胞和骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞?哺乳動物感染抗原后,其體內會形成相應的B淋巴細胞,B淋巴細胞能分泌相應的抗體凝聚或殺死這些抗原。動物在免疫反應的過程中,每一種B淋巴細胞能分泌一種特異性抗體,要想獲得大量的特異性抗體,必須使能分泌該單一抗體的B淋巴細胞大量增殖。B淋巴細胞具有產生單一抗體的能力,但不能在體外增殖;骨髓瘤細胞是一種癌細胞,它能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖,但不能產生抗體。因此,把一種B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行細胞融合,產生雜交瘤細胞,它會兼有兩個親本細胞的特性——在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖,同時能產生出某種特異性的抗體。一個成功的懸浮細胞培養(yǎng)體系應滿足什么樣的條件?懸浮培養(yǎng)物分散性良好,細胞團較小均一性好,細胞形狀和細胞團大小大致相同。細胞生長迅速,懸浮細胞的生長量一般2?3天甚至更短時間便可增加一倍。什么是HAT培養(yǎng)基?單克隆抗體制備過程中利用HAT培養(yǎng)基選擇雜交瘤細胞的原理是什么?IIAT是含一定濃度次黃噂吟〔II)、氨基喋吟(A)及胸腺嚅嚏核甘〔T)的一種選擇性培養(yǎng)基。DNA合成途徑有兩種:從頭合成和補救途徑。免疫牌細胞沒有培養(yǎng)特性,不能存活,瘤細胞從頭途徑被A阻斷,自身是HPRT-或(TK-),補救途徑被阻斷,雜交瘤細胞可以通過融合的脾細胞彌補瘤細胞缺陷,從而在HAT培養(yǎng)基上存活。動物細胞培養(yǎng)有什么特點?動物細胞無細胞壁,多數(shù)動物細胞需附著在固體或半固體外表才能生長;動物細胞培養(yǎng)除了需要與微生物、植物細胞一樣的培養(yǎng)基成分外,還需要血清成分,特別需要動物激素的存在;動物細胞培養(yǎng)對環(huán)境更敏感,培養(yǎng)條件的控制更為嚴格;反應器要適應無菌狀態(tài)高密度、長時間培養(yǎng)。7、何謂細胞工程?簡述細胞工程的技術。細胞工程操作的主要對象有哪兩大類細胞??細胞工程:是指應用細胞生物學和分子生物學的原理和方法,通過某種工程技術手段,在細胞整體水平或細胞器水平上,按照人們的意愿來改變細胞內的遺傳物質或獲得細胞產品的一門綜合科學技術。細胞工程的技術包括:細胞融合技術、細胞拆合技術、基因轉移技術、細胞器移植技術、胚胎移植技術、細胞與組織培養(yǎng)技術、染色體導入技術,從細胞結構的不同層次對細胞進行遺傳操作。細胞工程操作的主要對象有原核細胞如細菌、放射菌等細胞和真核細胞如酵母、動植物等細胞兩大類。簡述植物細胞的培養(yǎng)特性〔1)植物細胞較微生物細胞大得多,具有纖維素細胞壁。(2)培養(yǎng)過程生K速度緩慢,易受微生物污染、需要用抗生素?!?)在細胞生長的中期和對數(shù)期容易凝聚成直徑達350-4(X)um的團塊,懸浮培養(yǎng)比較困難。培養(yǎng)時需要供氧,培養(yǎng)液粘度較大,不能耐受強力通風攪拌。細胞具有群體效應、無錨地依賴性和接觸抑制性。細胞培養(yǎng)產物多數(shù)滯留于細胞內,產量較低。培養(yǎng)過程具有結構、功能上的全能性。誘導融合的方法完全相同B.所用的技術手段完全相同C.所采用的原理完全相同D.都能形成雜種細胞單克隆抗體是指〔C)單個骨髓瘤細胞增殖產生的抗體單個B淋巴細胞增殖產生的抗體單個雜交瘤細胞增殖產生的抗體單個抗體通過克隆化,產生大量抗體將小鼠骨髓瘤細胞與一種B淋巴細胞融合,可使融合的細胞經培養(yǎng)產生單克隆抗體,其依據(jù)是(多項選擇)(AC)B淋巴細胞可以產生抗體,但不能無限增殖B淋巴細胞只有與骨髓瘤細胞融合后才能產生抗體骨髓瘤細胞可以無限增殖,但不能產生抗體骨髓瘤細胞可以產生抗體,但不能無限增殖要想獲得大量的單克隆抗體就必須用單個的B淋巴細胞進行無性繁殖,形成細胞群。其原因是(D)在體外培養(yǎng)條件下B淋巴細胞可以無限增殖在動物體內B淋巴細胞可產生多達百萬種以上的抗體
每一個B淋巴細胞都參與特異性免疫反應每一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體關于單克隆抗體,以下表達不正確的選項是(DA、可以制成診斷盒.用于疾病的珍斷B、可以與藥物結合,用于病變細胞的定向治療C、可以利用基因工程技術生產D、可以在生物體內生產,不能體外生產8.以下不屬于生長素的是(D)AIAAA、可以制成診斷盒.用于疾病的珍斷B、可以與藥物結合,用于病變細胞的定向治療C、可以利用基因工程技術生產D、可以在生物體內生產,不能體外生產8.以下不屬于生長素的是(D)AIAABNAAC2,4-D植物細胞有而動物細胞沒有的結構是(D)A細胞質B線粒體C內質網D葉綠體擁有接觸抑制的是(B)A原核細胞B動物細胞C植物細胞D真核細胞產生自胸腺的淋巴細胞是(A)AT淋巴細胞BB淋巴細胞CC淋巴細胞DG淋巴細胞細胞直接攝取外源DNA的過程叫(B)A轉導B轉化C轉移D轉入世界上第一種克隆成功的生物是(C)A牛B人C羊D雞培養(yǎng)基中可能含有血清的是(A)A動物細胞培養(yǎng)基B植物細胞培養(yǎng)基C愈傷組織培養(yǎng)基D微生物培養(yǎng)基以下不是動物細胞生物制藥的是(D)A干擾素B單克隆抗體C病毒疫苗D人工胚乳以下不是干細胞特征的是(B)A對稱分裂B無限增殖C緩慢性D自穩(wěn)性離體培養(yǎng)的動物細胞分為以下類型,除了(B)A貼壁依賴型B瓶底依賴型C兼性貼壁細胞D懸浮型植物體細胞融合完成的標記是(A)A產生新的細胞壁B細胞質發(fā)生融合C細胞膜發(fā)生融合D細胞核發(fā)生融合人工獲得一個雜種植株,需要以下哪項步驟(A)A別離原生質體誘導原生質體融合組織培養(yǎng)得到雜種植株B別離原生質體原生質體融合雜種植株C獲取細胞原生質融合組織培養(yǎng)雜種植株D獲取細胞原生質直接融合組織培養(yǎng)植物體細胞雜交尚未解決的問題是C)A去掉細胞壁,別離出有活力的原生質體B將雜種細胞培育成植株C讓雜種細胞按照人們的需求表現(xiàn)出親代的優(yōu)良性狀D尚未培育出屬間雜種植物21.動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的重要區(qū)別在于:(A)培養(yǎng)基不同;動物細胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進行;動物細胞可以傳代培養(yǎng),而植物細胞不能;動物細胞能夠大量培養(yǎng),而植物細胞只能培養(yǎng)成植株。單克隆抗體與血清抗體相比,優(yōu)越之處在于:(C)單克隆抗體能夠制成“生物導彈”;單克隆抗體可以在體外制備;單克隆抗體的特異性強,靈敏度高,產量也大大高于血清抗體;單克隆抗體的制備過程簡單。誘導試管苗生根時,培養(yǎng)基的調整應(D)。A、加大鹽的濃度B、加活性炭C、加大分裂素的濃度D、加大生長素的濃度植物體細胞雜交可以解決不同生物之間的(B)問題。A、親緣關系遠B、生殖隔離C、地理隔離D、組織分化植物體細胞雜交尚未解決的問題有:(C)A、去掉細胞壁,別離出有活力的原生質體B、將雜種細胞培育成植株C、讓雜種植物按照人們的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良性D、尚未培育出屬間雜種植物不能人工誘導原生質體融合的方法是:(D)A、振動B、電刺激、D、重壓C、D、重壓植物組織培養(yǎng)形成的愈傷組織進行培養(yǎng),又可以分化形成根、芽等器官,這一過程稱為:(C)A、脫分化B、去分化C、再分化D、脫分化或去分化當植物細胞脫離了原來所在植物體的器官或組織而處于離體狀態(tài)時,以下有可能使其表現(xiàn)出全能性,發(fā)育成完整的植株的是(D)A、細胞分裂素B、生長素C、一定的營養(yǎng)物質D、以上三者均是細胞工程是一門綜合科學技術。以下哪項技術不屬于細胞工程(A)A、有性雜交B、體細胞雜交C、組織培養(yǎng)D、細胞核移植在生物
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