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文檔簡(jiǎn)介
30年來(lái)我國(guó)豬病發(fā)展變化
與根治展望何啟蓋教授,陳煥春院士華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院武漢,430070取得的成績(jī)感謝幾代獸醫(yī)科學(xué)家的努力,提高了我國(guó)動(dòng)物疾病控制水平疫苗:我國(guó)生物制品數(shù)量達(dá)到200多種,其中某些弱毒疫苗達(dá)到了世界先進(jìn)水平。豬偽狂犬基因缺失疫苗,豬大腸桿菌病的基因工程疫苗已開(kāi)始推廣應(yīng)用。一批簡(jiǎn)便適用的診斷試劑研制成功促進(jìn)了養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展主要內(nèi)容1、近年來(lái)我國(guó)豬病發(fā)展變化多病原混合感染病原毒力增強(qiáng)疾病種類(lèi)增加:老病沒(méi)有消滅,新病增加
2、根治展望消費(fèi)者因素;養(yǎng)豬企業(yè)自身需求;獸醫(yī)生物制品研發(fā)技術(shù)的進(jìn)步;國(guó)際交流;法律法規(guī)保障一、豬病發(fā)展變化1、單純感染向多病原混合感染發(fā)展細(xì)菌之間:波氏桿菌-產(chǎn)毒性巴氏桿菌病毒之間:豬瘟-偽狂犬病毒混合感染細(xì)菌-病毒:豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒+副豬嗜血桿菌/胸膜肺炎放線桿菌/鏈球菌豬呼吸道綜合癥(PRDC),豬高熱綜合癥???可能存在的原因A.免疫抑制疾?。?/p>
偽狂犬病/藍(lán)耳病/圓環(huán)病毒....破壞淋巴細(xì)胞,降低免疫力,使繼發(fā)感染容易發(fā)生B.病原之間相互作用
PRRSV+細(xì)菌毒素C.使用霉變飼料(2)病原毒力發(fā)生變異或增強(qiáng)圓環(huán)病毒:PCV2b的毒力大于PCV2a
原因:在PCV2a基因組的1042核甘酸發(fā)生胸苷激酶(Thymidine,T)的缺失即為PCV2b。
豬呼吸與繁殖障礙綜合征病毒Nsp2基因的部分缺失ORF5基因糖基化位點(diǎn)的增加KegongTian1*,June,200730個(gè)氨基酸缺失(3)疾病種類(lèi)增加老病得到有效控制
豬瘟豬丹毒,黃白?。ù竽c桿菌)豬肺疫,仔豬副傷寒偽狂犬病新病增加
傳染性胸膜肺炎副豬嗜血桿菌病藍(lán)耳病,圓環(huán)病毒…..A.種豬流動(dòng)頻繁B.診斷技術(shù)更新水平提高明確疾病的種類(lèi)二、豬病根治展望(1)公眾因素:消費(fèi)者食品安全的需求對(duì)豬病控制提出了更高的要求;
藥物殘留人獸共患病病原:鏈球菌2型;乙型腦炎(2)企業(yè)內(nèi)部因素:經(jīng)濟(jì)效益的驅(qū)動(dòng),使豬病控制成為企業(yè)自身的追求;(3)高高效疫疫苗的研研發(fā)和使使用常規(guī)疫苗苗的改進(jìn)進(jìn)豬瘟疫苗苗:細(xì)細(xì)胞疫苗苗和脾淋淋苗,提提高免疫疫劑量.口蹄疫雙雙價(jià)苗:傳染性胃胃腸炎-流行性性腹瀉雙雙價(jià)苗多血清型型病原所所致疾病病傳染性胸胸膜肺炎炎三價(jià)疫疫苗(血血清型1,2,7)副豬嗜血血桿菌雙雙價(jià)疫苗苗(血清清4和5型)豬鏈球菌菌滅活疫疫苗基因(缺缺失)工工程疫苗苗偽狂犬病病基因缺缺失疫苗苗以該疫苗苗株為活活載體構(gòu)構(gòu)建的多多價(jià)基因因工程疫疫苗偽狂犬病病+乙型型腦炎細(xì)小病毒毒口蹄疫(VP1)藍(lán)耳病細(xì)菌基因因工程疫疫苗胸膜肺炎炎放線桿桿菌弱毒毒疫苗以此疫苗苗株為載載體的呼呼吸道疾疾病多價(jià)價(jià)基因工工程疫苗苗沙門(mén)氏菌菌為載體體的預(yù)防防腹瀉疾疾病的多多價(jià)疫苗苗(4)診診斷技術(shù)術(shù)進(jìn)展明確所發(fā)發(fā)生的疾疾病種類(lèi):傳傳染性因因素:細(xì)細(xì)菌、病病毒、支支原體、、其它微微生物;;非傳染性性因素單純感染染/混混合感染染是否為人人獸共患患病利于制定定及時(shí)合合理的控控制方案案診斷方法法包含:流行病學(xué)學(xué)方法病理組織織觀察血清學(xué)檢檢測(cè)病原學(xué)檢檢測(cè)分子生物物學(xué)檢測(cè)測(cè)抗體檢測(cè)測(cè)方法--血清學(xué)學(xué)凝集性反反應(yīng)沉淀性反反應(yīng)標(biāo)記抗體體技術(shù)有補(bǔ)體參參與的反反應(yīng)中和反應(yīng)應(yīng)檢測(cè)的目目的免疫狀況況評(píng)估::定性或定定量測(cè)定定免疫抗抗體水平平診斷疾病?。簠^(qū)分疫苗苗免疫動(dòng)動(dòng)物和自自然感染染動(dòng)物;常用的診診斷方法法快速診斷斷:適用用于個(gè)體體診斷平板凝集集試驗(yàn)::乳膠凝集集試驗(yàn)::免疫膠體體金技術(shù)術(shù)大量樣品品篩選::酶聯(lián)免疫疫吸附試試驗(yàn)(ELISA)平板凝集集試驗(yàn)培養(yǎng)的菌菌體滅活活后直接接與血清清混合,,觀察是是否出現(xiàn)現(xiàn)凝集顆顆粒,判判定陰陽(yáng)陽(yáng)性。乳膠顆粒粒(不同同直徑大大小)乳膠凝集集試驗(yàn)病毒或蛋蛋白致敏敏乳膠顆顆粒,制制備成診診斷抗原原現(xiàn)場(chǎng)圈舍舍旁邊檢檢測(cè)抗體體,主要要是檢測(cè)測(cè)IgM,使用用于感染染早期診診斷偽狂犬病病細(xì)細(xì)小病病毒乙乙型型腦炎技術(shù)特點(diǎn)點(diǎn)3-5分分鐘出現(xiàn)現(xiàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)條件件簡(jiǎn)單,,操作容容易,樣樣品處理理量大。。適合于動(dòng)動(dòng)物偽狂狂犬病毒毒感染的的早期檢檢測(cè)乳膠凝集集的陰性性和陽(yáng)性性反應(yīng)陽(yáng)性結(jié)果果陰性結(jié)果果顆粒聚于于液體邊邊緣,透透明呈原有的的均勻乳乳狀膠體金檢檢測(cè)技術(shù)術(shù)酶聯(lián)免疫疫吸附試試驗(yàn)將病毒、、純化的的蛋白質(zhì)質(zhì)等抗原原包被在在酶聯(lián)板板上,通通過(guò)間接接法、競(jìng)競(jìng)爭(zhēng)法等等程序檢檢測(cè)抗體體。
用途途免疫(感感染)抗抗體檢測(cè)測(cè):偽狂犬病病抗體檢檢測(cè)(gB-ELISA,PrV-ELISA,中中和試驗(yàn)驗(yàn),免疫疫熒光)豬呼吸與與繁殖障障礙綜合合癥:ELISA和IFA區(qū)分疫苗苗免疫與與自然感感染豬偽狂犬病病gE-ELISA鑒鑒別診斷斷盒傳染性胸胸膜肺炎炎ApxIV-ELISA鑒鑒別診斷斷口蹄疫3ABC-ELISA鑒別診診斷試劑劑盒鑒別診斷斷的原理理偽狂犬病病:gE基因因缺失后后,gE抗體不不能在gE基因因缺失疫疫苗免疫疫動(dòng)物中中檢測(cè),,而野毒毒感染豬豬可產(chǎn)生生此抗體體;傳染性胸胸膜肺炎炎毒素IV僅在感感染動(dòng)物物體內(nèi)表表達(dá),并并誘導(dǎo)動(dòng)動(dòng)物產(chǎn)生生抗體,,滅活苗苗不含有有毒素IV,所所以免疫疫動(dòng)物不不能產(chǎn)生生針對(duì)毒毒素IV的抗體體;口蹄疫:口蹄疫病病毒NS1為非非結(jié)構(gòu)蛋蛋白,僅僅在病毒毒復(fù)制時(shí)時(shí)產(chǎn)生;;在滅活活苗中不不存在((或含量量低),,動(dòng)物免免疫后體體內(nèi)不產(chǎn)產(chǎn)生抗NS1抗抗體,但但活病毒毒感染動(dòng)動(dòng)物可產(chǎn)產(chǎn)生此類(lèi)類(lèi)抗體。。抗原捕獲獲酶聯(lián)免免疫吸附附試驗(yàn)-適用于于大規(guī)模模樣本病病毒抗原原的檢測(cè)測(cè)肉品中偽狂犬病毒臨床樣本檢測(cè)結(jié)果近年來(lái)分分子生物物學(xué)與微微電子學(xué)學(xué)等多學(xué)學(xué)科交叉叉融合而而成的一一項(xiàng)高新新技術(shù),,用來(lái)快快速、準(zhǔn)準(zhǔn)確、高高通量地地檢測(cè)目目的基因因;BetsyPierson發(fā)展高通通量的檢檢測(cè)技術(shù)術(shù)基因芯片片技術(shù)(DNAmicroarrays,DNAchips))雜交(病病毒檢測(cè)測(cè))結(jié)果果HZ-VP1-2A-3DSX-VP1-2A-3DDQ-VP1-2A-3DLI-VP1-2A-3D在PCR儀中熱熱穩(wěn)定的的DNA聚合酶酶可使短短鏈的雙雙股靶DNA很很快地復(fù)復(fù)制成千千上萬(wàn)倍倍,可以以使DNA數(shù)量量急劇增增長(zhǎng)而達(dá)達(dá)到檢測(cè)測(cè)極限。。理論上,,可在2小時(shí)內(nèi)內(nèi)將一個(gè)個(gè)DNA分子擴(kuò)擴(kuò)增到106-109倍,從而而大大提提高了對(duì)對(duì)其進(jìn)行行分析研研究的速速度。聚合酶鏈鏈反應(yīng)((PCR)技術(shù)術(shù):檢測(cè)豬呼呼吸道5種病原原菌PCR方法法引物設(shè)計(jì)計(jì)菌株登錄號(hào)靶基因序列
位置
長(zhǎng)度HPSAPPBbPmMhp211664866711473947513180268743235145716SrRNAapxIVFlatoxAP365’-GTGATGAGGAAGGGTGGTGT-3’5’-GGCTTCGTCACCCTCTGT-3’5’-GCTCACCAACGTTTGCTCAT-3’5’-GGGGACGTAACTCGGTGATT-3’5’-GCTCCCAAGAGAGAAAGGCT-3’5’-GGTGGCGCCTGCCCTATC-3’5’-GGTCTTAGATGAGCGACAAGG-3’5’-GCGCTATTACTTCCTTCGTTC-3’5’-CCGTTGAAGCCTTGCTGTAT-3’5’-CGGTTAGTGTCTCCCGTTATG-3’438-12397-38361-2951879-2324176-462821377235442287檢測(cè)豬呼呼吸道5種病原原菌PCR方法法BbMhpAppPmHpsPRRSV-HCV-JEV多多重PCR123456789101112131415161718192021221234567101843028850025010007504302000100泳道1為Marker,泳道2為樣品2,泳道3為樣品3,泳道4為樣品4,泳道5為樣品9,6:PPRSV陽(yáng)性對(duì)照;7:為陰性對(duì)照1:Marker2~7:CSFV8~13:PRRSV14~19:JEV20:positivecontrol21:negativecontrolCSFVPRRSVJEV6、7、9號(hào)號(hào)血清清樣品品為PRSSV變異異株單單一感感染;;11,,12號(hào)樣樣品為為常規(guī)規(guī)毒株株和變變異毒毒株混混合感感染;;1,2,4,5,8,10,,13,14,,15號(hào)樣樣品為為PRRSV常常規(guī)毒毒株單單一感感染;;3,16號(hào)號(hào)樣品品為陰陰性部分ORF-7RT-PCR陽(yáng)陽(yáng)性性樣品品中,,變異毒毒株的的檢出出情況況PCV2-PCR404bp194bpPCV1-PCR多重PCR用途途:?jiǎn)为?dú)感感染多病原原混合合感染染胸膜肺肺炎--副豬豬嗜血血桿菌菌-巴巴氏桿桿菌--支原原體混混合感感染偽狂犬犬?。?xì)小小病毒毒-圓圓環(huán)病病毒感感染豬瘟--藍(lán)耳耳?。倚托湍X炎炎病毒毒感染染繁殖障障礙的的多重重PCR對(duì)流產(chǎn)產(chǎn)死胎胎進(jìn)行行檢測(cè)測(cè)對(duì)公豬豬精液液進(jìn)行行實(shí)時(shí)時(shí)監(jiān)控控(5)加加強(qiáng)國(guó)國(guó)際交交流,,結(jié)合合我國(guó)國(guó)實(shí)際際情況況,消消化吸吸收國(guó)國(guó)際先先進(jìn)經(jīng)經(jīng)驗(yàn)制訂長(zhǎng)長(zhǎng)期的的防疫疫規(guī)劃劃對(duì)對(duì)一一些危危害嚴(yán)嚴(yán)重的的畜禽禽傳染染病制制訂長(zhǎng)長(zhǎng)期的的防疫疫規(guī)劃劃,達(dá)達(dá)到最最后消消滅的的目標(biāo)標(biāo)。如如美國(guó)國(guó)通過(guò)過(guò)制訂訂防疫疫規(guī)劃劃,自自1962年至至1976年經(jīng)經(jīng)過(guò)14年年的努努力,,終于于消滅滅豬瘟瘟,就就是一一個(gè)成成功的的經(jīng)驗(yàn)驗(yàn)。我國(guó)的的豬瘟瘟偽狂狂犬病病根除除與凈凈化計(jì)計(jì)劃已已經(jīng)啟啟動(dòng)(6)).法法律法法規(guī)保保障2007年年8月月30日第第十屆屆全國(guó)國(guó)人民民代表表大會(huì)會(huì)常務(wù)務(wù)委員員會(huì)第第二十十九次次會(huì)議議修訂訂新的《《中華華人民民共和和國(guó)動(dòng)動(dòng)物防防疫法法》將將于2008年年1月月1號(hào)號(hào)實(shí)施施,為為動(dòng)物物疾病?。òi豬?。┑念A(yù)預(yù)防提提供了了法律律保障障全國(guó)人人大法法律委委員會(huì)會(huì)副主主任委委員王王以銘銘作關(guān)關(guān)于《《中華華人民民共和和國(guó)動(dòng)動(dòng)物防防疫法法(修修訂草草案))》審審議結(jié)結(jié)果的的報(bào)告告。中中新社社發(fā)廖廖文靜靜攝攝修訂的的《動(dòng)動(dòng)物防防疫法法》第一章章總總則第二章章動(dòng)動(dòng)物疫疫病的的預(yù)防防第三章章動(dòng)動(dòng)物疫疫情的的報(bào)告告、通通報(bào)和和公布布第四章章動(dòng)動(dòng)物疫疫病的的控制制和撲撲滅第五章章動(dòng)動(dòng)物和和動(dòng)物物產(chǎn)品品的檢檢疫第六章章動(dòng)動(dòng)物診診療第七章章監(jiān)監(jiān)督管管理第八章章保保障措措施第九章章法法律責(zé)責(zé)任第十章章附附則豬病類(lèi)類(lèi)型一類(lèi)動(dòng)動(dòng)物疫疫病口蹄疫疫、豬豬水泡泡病、、豬瘟瘟、非非洲豬豬瘟二類(lèi)動(dòng)動(dòng)物疫疫病:豬乙型型腦炎炎、豬豬細(xì)小小病毒毒病、、豬繁繁殖與與呼吸吸綜合合癥、、豬丹
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