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文檔簡(jiǎn)介

第2節(jié)

基因工程及其應(yīng)用

蛛絲是自然界最奇特的物質(zhì)之一,它具有極強(qiáng)的韌度,其韌度是同樣直徑鋼材的好幾倍。但與家蠶不同,蜘蛛不能家養(yǎng),因?yàn)樗鼈儠?huì)互相吞食,所以不可能建立人工飼養(yǎng)蜘蛛的農(nóng)場(chǎng)。30多年來(lái),科學(xué)家們一直試圖找到利用其他生物體來(lái)制造蛛絲的辦法。

細(xì)菌是在自然界分布最廣、個(gè)體數(shù)量最多的生物。細(xì)菌具有代謝旺盛,繁殖能力強(qiáng)的特點(diǎn)。思考:要把蜘蛛的合成絲蛋白的基因“嫁接”到細(xì)菌上,關(guān)鍵步驟是什么?關(guān)鍵步驟一:怎樣提取合成蠶絲蛋白的基因?

關(guān)鍵步驟二:怎樣將基因運(yùn)輸?shù)郊?xì)菌體內(nèi)?關(guān)鍵步驟三:怎樣將基因與運(yùn)載體連接起來(lái)?基因的剪刀——限制性核酸內(nèi)切酶基因的針線——DNA連接酶基因的運(yùn)載工具——運(yùn)載體原理:基因工程基因重組

基因工程:又叫做DNA重組技術(shù)或基因拼接技術(shù)。是把一種生物體內(nèi)的某種基因提取出來(lái),加以修飾改造,然后放到另一種生物的細(xì)胞里,定向地改造生物的遺傳性狀。1、基因的剪刀——限制性核酸內(nèi)切酶(簡(jiǎn)稱限制酶)

限制酶是在生物體(主要是微生物)內(nèi)的一種酶,能將外來(lái)的DNA切斷,由于這種切割作用是在DNA分子內(nèi)部進(jìn)行的,故名限制性核酸內(nèi)切酶。

特點(diǎn):(1)只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列(2)只能在特定的位點(diǎn)上切割DNA分子特異性(專一性)限制性內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)EcoRⅠ

XbaⅠ

XhoⅠ

NdeⅠG↓AATTC

T↓CTAGA

C↓TCGAG

CA↓TATG表:幾種常用限制性內(nèi)切酶及其酶切位點(diǎn)一、基因操作的工具

大腸桿菌(E.coli)的一種限制酶能識(shí)別GAATTC序列,并在G和A之間切開(kāi)。例如:限制酶黏性末端切割位置:磷酸二酯鍵如果把兩種來(lái)源不同的DNA用同一種限制酶來(lái)切割,會(huì)怎樣呢?

會(huì)產(chǎn)生相同的黏性末端,然后讓兩者的黏性末端黏合起來(lái),就似乎可以合成重組的DNA分子了。G

AA

TT

CC

TT

AA

GG

AA

TT

CC

TT

AA

GGC

TT

AA

AA

TT

C

GG

C

TT

AA

AA

TT

C

GGC

TT

AA

AA

TT

C

G用同種限制酶切割2、基因的針線——DNA連接酶黏性末端的黏合:連接位置:磷酸二酯鍵互補(bǔ)的堿基形成氫鍵連接黏性末端的連接:DNA連接酶連接缺口?如何將外源基因送入受體細(xì)胞呢?3、基因的運(yùn)載工具——運(yùn)載體:常用的運(yùn)載體主要有兩類:

1)質(zhì)粒

2)噬菌體或某些動(dòng)植物病毒原理:利用運(yùn)載體侵染宿主細(xì)胞的能力,將目的基因?qū)胨拗骷?xì)胞。質(zhì)粒:

質(zhì)粒是基因工程最常用的運(yùn)載體。

質(zhì)粒存在于細(xì)菌、酵母菌等生物中,是細(xì)胞染色體外能夠進(jìn)行自主復(fù)制的很小的環(huán)狀DNA分子。(1)能在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存;(2)具有多個(gè)限制酶的切點(diǎn),便于與不同的目的基因連接;(3)具有某些標(biāo)記基因,便于篩選成功導(dǎo)入的受體細(xì)胞。運(yùn)載體的特點(diǎn)普通細(xì)菌蜘蛛提取絲蛋白基因與運(yùn)載體DNA結(jié)合導(dǎo)入轉(zhuǎn)基因細(xì)菌(含蜘蛛絲蛋白基因)蜘蛛絲蛋白(二)基因工程的步驟如何讓細(xì)菌“吐蛛絲”呢?簡(jiǎn)述其過(guò)程?;蚬こ痰膭e名操作環(huán)境操作對(duì)象操作水平基本過(guò)程結(jié)果實(shí)質(zhì)基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)生物體外基因DNA分子水平定向改造生物的遺傳性狀基因重組棉花細(xì)胞(含抗蟲基因)基因工程培育抗蟲棉的簡(jiǎn)要過(guò)程:普通棉花(無(wú)抗蟲特性)蘇云金芽孢桿菌提取抗蟲基因與運(yùn)載體DNA結(jié)合導(dǎo)入棉花植株(有抗蟲特性)(三)基因工程的應(yīng)用基因工程與藥物研制許多藥品的生產(chǎn)是從生物組織中提取的。受材料來(lái)源限制產(chǎn)量有限,其價(jià)格往往十分昂貴。

微生物生長(zhǎng)迅速,容易控制,適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。若將生物合成相應(yīng)藥物成分的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞內(nèi),讓它們產(chǎn)生相應(yīng)的藥物,不但能解決產(chǎn)量問(wèn)題,還能大大降低生產(chǎn)成本。(三)基因工程的應(yīng)用胰島素從豬、牛等動(dòng)物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰島素,其產(chǎn)量之低和價(jià)格之高可想而知。將合成的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌,每2000L培養(yǎng)液就能產(chǎn)生100g胰島素!使其價(jià)格降低了30%-50%!(三)基因工程的應(yīng)用環(huán)境保護(hù):

基因工程做成的“超級(jí)細(xì)菌”能吞食和分解多種污染環(huán)境的物質(zhì)。通常一種細(xì)菌只能分解石油

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