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文檔簡(jiǎn)介

5月份工作總結(jié)5月份工作總結(jié)

5月份工作總結(jié)

一田間工作

這個(gè)月在田間主要幫張師兄測(cè)株高,劉師兄育苗和掛牌。二試驗(yàn)室

1遺傳差異試驗(yàn)

(1)發(fā)苗5.2號(hào)總在育苗盤中發(fā)了33個(gè)親本和雜交組合(詳見下表)的苗,每個(gè)組合五穴,每穴丟三顆種子。CMo17Mo1718白C478478自330C黃早四*A619C48-248-2A619C黃早四黃早四C478C48-2*18白C黃早四Mo17C黃早四*47848-248-2*18白CMo17黃早四C478*自330C48-2C黃早四Mo17478C478*48-2CMo17*48-2黃早四黃早四Mo17C48-2*478黃早四目前在這個(gè)擴(kuò)大后的群體CMo17Mo17C478478C48-248-2C黃早四黃早四C478C48-2*18白C黃早四Mo17C黃早四*47848-218白自330A619C478C48-2*A619C黃早四47848-2*自330黃早四Mo17C48-2*478黃早四478CMo1748-2*18白C478*自330黃早四C48-2C黃早四Mo17478C478*48-2CMo17*48-2黃早四黃早四中,只有以下六個(gè)組合C47848-2C48-2*A619待多營取材478*自330待多營取材黃早四478*18白無種子還沒有發(fā)苗,預(yù)備讓徐浩師兄幫我取樣。478*18白這個(gè)組合無種子,臨時(shí)待找到種子。(2)DNA提取

以下是育苗20天后的生長(zhǎng)狀況圖片

圖一育苗結(jié)果圖二育苗結(jié)果

圖三育苗結(jié)果圖四育苗結(jié)果將這33組合中得C48-2和48-2全部提取DNA,其他組合隨即選取三株提取DNA,編號(hào)如下:組合提取個(gè)數(shù)編號(hào)C48-238S148-234S2A6193S3C48-2*18白3S4C478*18白3S5C黃早四*18白3S6黃早四*18白3S7C478*黃早四3S8C478*Mo173S9C478*48-23S10CMo17*48-23S11CMo17*4783S12CMo17*黃早四3S21C48-2*黃早四3S14C48-2*4783S13C48-2*Mo173S15C黃早四*4783SC黃早四*48-23S17C黃早四*Mo173S18CMo173S19C4783S20C黃早四3S22Mo173S234783S24黃早四3S2518白3S26自3303S27C黃早四*A6193S2848-2*18白3S29CMo17*自3303S30C478*自3303S31C黃早四*自3303S32C48-2*自3303S33選取所提取的局部DNA對(duì)其濃度進(jìn)展測(cè)定和1%的瓊脂糖電泳檢測(cè),結(jié)果如下:

圖五DNA檢測(cè)結(jié)果

2RNA提取

RNA的提取和DNase處理

試驗(yàn)前預(yù)備:為防止RNA降解,金屬、玻璃器皿180℃高溫處理6h以上,塑料制品用0.1%的DEPC水浸泡處理,高溫滅菌后烘干使用,所用試劑溶解液需用0.1%的DEPC水溶解,試驗(yàn)過程中需帶滅菌的手套進(jìn)展。RNA的提取使用Trizol法,步驟嚴(yán)格根據(jù)說明書要求進(jìn)展。

(1)取0.1g的葉片于液氮預(yù)冷的研缽中,參加液氮,快速研磨,參加1ml的Trizol掩蓋,待液體完全溶化后,連續(xù)研磨直至液體透亮清亮。將液體轉(zhuǎn)入1.5ml離心管,室溫放置5min,使其充分裂解,4℃下1201*rpm離心5min;

(2)取上清于另一1.5ml的離心管中,參加0.2ml氯仿,充分振蕩混勻30~40s,室溫放置5min,4℃下1201*rpm離心10min;

(3)棄沉淀,取上清于另一1.5ml的離心管中,參加等體積的異丙醇,混勻后室溫放置5~10min,4℃下1201*rpm離心10min;

(4)棄上清,RNA沉于管底,用75%乙醇洗滌RNA沉淀,溫柔振蕩離心管,懸浮沉淀,4℃下1201*rpm離心3min;

(5)盡量棄上清,室溫晾干或真空枯燥5~10min,枯燥后參加40μlDEPC水溶解RNA;

(6)RNA的DNase處理。反響體系如表4:

表4.PCR反響體系Table4PCRreactionsystem

藥品

RNA

DNaseI(5U/μl)RNase-FreeH20RNasin(40U/μl)10×DNaseI緩沖液

用量10-20μg

2μl

加至50μl0.5μl5μl

以上成分37℃溫浴30min后,適量的RNase-Free水溶解,并于-70℃保存。且用核酸蛋白儀測(cè)定RNA樣品的OD260/OD280值,測(cè)定其純度和濃度。用1.0%瓊脂糖凝膠電泳,更換新的0.5%TBE緩沖液,電壓140V,快速檢測(cè)RNA。結(jié)果如下列圖:

從圖中可以看出RNA提取結(jié)果不好,RNA發(fā)生降解,主要緣由可能是操作的緣由,也可能是試驗(yàn)前預(yù)備工作沒做好,以后肯定要花大力氣改良,爭(zhēng)取提取出可用的RNA。三文獻(xiàn)閱讀

本月由于田間勞動(dòng)的緣由,只讀了三篇中文文獻(xiàn),兩篇英文文獻(xiàn),中文文獻(xiàn)

1基因表達(dá)調(diào)控與選擇性剪接機(jī)制討論

這篇文章是201*年發(fā)表在電子學(xué)報(bào)上的文章,由于當(dāng)時(shí)還沒有高通量測(cè)序技術(shù),所以是以cds序列通過EST來討論RNA可變剪接的機(jī)制以及影響因素,這篇文章的兩點(diǎn)就是建立了AsMaIndb并進(jìn)展了多序列比對(duì)算法ASALIGN,沒有進(jìn)展任何試驗(yàn)驗(yàn)證,所以是一片生物信息學(xué)文章。由于距現(xiàn)在時(shí)間較遠(yuǎn),所以試驗(yàn)方法不具備參考價(jià)值。

2擬南芥SDIR1基因轉(zhuǎn)錄的選擇性剪接

這篇文章是201*年發(fā)表在云南植物討論上的一篇文章,他采納PCR及RT-PCR法分別克隆了擬南芥SDIR1基因的DNA和CDNA,并通過序列比照發(fā)覺了三種轉(zhuǎn)錄本,并對(duì)已報(bào)道的SDRI1基因的序列進(jìn)展比照,發(fā)覺三個(gè)轉(zhuǎn)錄本編碼產(chǎn)物不同,并用RT-PCR討論了SDRI1基因的表達(dá)量。這篇文章對(duì)我討論RNA可變剪接作用很大,我可以參考他的試驗(yàn)方法以及思路,用我們測(cè)序的結(jié)果和玉米B73的序列設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增出目的基因,并反轉(zhuǎn)錄成cDNA后通過轉(zhuǎn)化測(cè)序和B73序列比照,證明發(fā)生了可變剪接和發(fā)生可變剪接后的編碼產(chǎn)物的變化。3小麥光周期基因PPd-B1的選擇性剪接分析這篇文章是201*年發(fā)表在作物學(xué)報(bào)上的文章,是我們學(xué)校小麥所做的。他們也是通過提取RNA后反轉(zhuǎn)錄成cDNA,并通過序列比照討論可變剪接的,試驗(yàn)方法沒有公開,不能借鑒,但他們發(fā)覺同一個(gè)基因可以存在多種可變剪接方式,并且將剪接位點(diǎn)詳細(xì)到第幾外顯子,還是對(duì)我的討論有很大幫忙的。英文文獻(xiàn)

1Genome-wideDetectionandAnalysisofAlternativeSplicingforNucleotideBindingSite-Leucine-RichRepeatsSequencesinRice

這篇文章是201*年發(fā)表在JournalofGeneticsandGenomics上的,這是一篇生物信息學(xué)分析的文章,其中涉及到幾個(gè)軟件,Sim4,AIR,Spidey,BLAT,EST_GENOME,EXALIN,GeneSeqer,MGAlignIt可以識(shí)別可變剪接和內(nèi)含子多態(tài)性。他們是從生物信息學(xué)角度動(dòng)身通過不同的數(shù)據(jù)庫建立了HMM(隱馬爾科夫模

型)然后通過不同軟件分析可變剪接。這些軟件對(duì)我討論可變剪接還是很有意義的。

2SurveyofthetranscriptomeofAspergillusoryzaeviamassivelyparallelmRNAsequencing

這篇文章是201*年發(fā)表在NucleicAcidsResearch上的一篇文章,這篇文章和我們的測(cè)序報(bào)告完全一樣,他們也是201*年華大基因測(cè)序,測(cè)序后依據(jù)測(cè)序報(bào)告對(duì)差異表達(dá)、可變剪接、新轉(zhuǎn)錄本、新外顯子、新基因進(jìn)展了驗(yàn)證,他們?cè)O(shè)計(jì)引物隨機(jī)選取一個(gè)驗(yàn)證勝利后即可確定測(cè)序報(bào)告的正確性,里面有驗(yàn)證的試驗(yàn)方法,值得借鑒。

6月份工作規(guī)劃已經(jīng)提取出遺傳差異試驗(yàn)所需的大局部DNA,并已經(jīng)合成了AC204515.3-10CGTGTCGTGTGCAATTTCTTGGGTGGGATTGTTTAAGCCTBAC-SSR這個(gè)引物,所以要在最快的時(shí)間內(nèi)提取剩余五個(gè)組合的DNA,爭(zhēng)取在六月份完成遺傳差異試驗(yàn)。

擴(kuò)展閱讀:生產(chǎn)部5月份工作總結(jié)及6月份工作規(guī)劃

生產(chǎn)部5月份工作總結(jié)及6月份工作規(guī)劃

一、5月份工作總結(jié)

1.生產(chǎn)部對(duì)廠部值班、周檢進(jìn)展跟蹤、催促,對(duì)存在的問題進(jìn)展指出、批判。對(duì)車間的故障臺(tái)帳等各種臺(tái)帳進(jìn)展檢查、考核。完成生產(chǎn)部制度的初次匯編。2.調(diào)度初步做好了全廠水、電、煤的消耗、甲醇產(chǎn)量的統(tǒng)計(jì)臺(tái)帳,為我們的本錢核算供應(yīng)了初步數(shù)據(jù)。

3.和區(qū)域銷售部相關(guān)領(lǐng)導(dǎo)溝通,完成銷售前期預(yù)備局部工作,勝利打通銷售流程,進(jìn)展了液氧和甲醇的充裝和銷售演練。完成了空分灌區(qū)充裝安全條件的落實(shí)。

4.給排水:完成了新增外排污水管的改造;對(duì)生產(chǎn)用水,污水排放、濃鹽水等排放進(jìn)展合理掌握,保證了生產(chǎn)正常運(yùn)行。

5.燃料動(dòng)力:兩臺(tái)鍋爐根本實(shí)現(xiàn)較長(zhǎng)周期運(yùn)行,保障了生產(chǎn)穩(wěn)定運(yùn)行。人員離職較多,準(zhǔn)時(shí)做了思想工作及聘請(qǐng)、培訓(xùn)。

6.空分實(shí)現(xiàn)了較長(zhǎng)周期的穩(wěn)定運(yùn)行;氬系統(tǒng)調(diào)試合格,產(chǎn)出了合格的氬氣;完成產(chǎn)品銷售的各項(xiàng)安全工作,實(shí)現(xiàn)了液氧、液氮的銷售。完成氧泵聯(lián)鎖的調(diào)試及投用。

7.氣化:?jiǎn)闻_(tái)氣化爐實(shí)現(xiàn)了較長(zhǎng)周期運(yùn)行,兩臺(tái)氣化爐也初步實(shí)現(xiàn)了滿負(fù)荷運(yùn)行(20小時(shí)左右)。準(zhǔn)時(shí)停車處理了705兩個(gè)蒸汽發(fā)生器E1503、E1504漏點(diǎn)。8.合成:產(chǎn)出了合格的甲醇,系統(tǒng)初步實(shí)現(xiàn)了穩(wěn)定運(yùn)行;504灌裝站投用正常;精餾加壓塔再沸器、常壓塔水冷器漏點(diǎn)準(zhǔn)時(shí)進(jìn)展了檢修處理。對(duì)精餾常壓塔進(jìn)口管高度進(jìn)展了改造。正在對(duì)804裝置進(jìn)展調(diào)試。

9.質(zhì)檢中心協(xié)作全系統(tǒng)開車做好了分析工作;協(xié)作人力加緊人員聘請(qǐng)的工作;督促備品配件和化學(xué)試劑到貨,但此工作進(jìn)展不順當(dāng),已影響到正常生產(chǎn)。二、6月份工作規(guī)劃

1.生產(chǎn)部連續(xù)抓好工藝紀(jì)律、生產(chǎn)記錄、工藝指標(biāo)、交接班檢查、考核工作;對(duì)廠部值班、周檢進(jìn)展跟蹤、催促。匯總生產(chǎn)部車間臺(tái)帳名目,對(duì)格式、名稱等進(jìn)展標(biāo)準(zhǔn)。

2.完成生產(chǎn)部制度的匯編審核。完成迷你操作手冊(cè)的定稿工作,并報(bào)選購規(guī)劃。3.打通甲醇銷售流程,完成甲醇銷售任務(wù)。4.調(diào)度做好生產(chǎn)的組織和協(xié)調(diào)、調(diào)度工作;做好兩臺(tái)氣化爐滿負(fù)荷運(yùn)行,全系統(tǒng)考核工作;做好6月份停電1天的開停車規(guī)劃工作。做好全廠水、電、煤的消耗、甲醇產(chǎn)量的統(tǒng)計(jì)工作,積存出比擬有代表性的數(shù)據(jù)。

5.給排水:做好節(jié)能降耗工作,保證脫鹽水質(zhì)及水量、保證循環(huán)水壓力、溫度正常,保證消防水正常。污水調(diào)試正常,合格排放,同時(shí)做好應(yīng)急預(yù)案。6.燃料動(dòng)力:保證2臺(tái)鍋正常穩(wěn)定運(yùn)行,降低消耗;完成成品磅協(xié)調(diào)投運(yùn);做好新進(jìn)員工的安全教育及上崗培訓(xùn)工作。改善現(xiàn)場(chǎng)環(huán)境衛(wèi)生。

7.空分:保證系統(tǒng)安全穩(wěn)定運(yùn)行,產(chǎn)品合格;保證產(chǎn)品銷售安全準(zhǔn)時(shí)。提高負(fù)荷,保證氣化兩臺(tái)爐滿負(fù)荷運(yùn)行。

8.氣化:做好2臺(tái)氣化爐滿負(fù)荷運(yùn)行的各項(xiàng)工作,實(shí)

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