感染免疫與疫苗課件

免疫學(xué)教學(xué)面臨的挑戰(zhàn)1學(xué)科發(fā)展和社會發(fā)展

Knowledgeupdate

每五年增加一倍:文獻(xiàn)、專著、教課書間的平衡

教什么？

教科書？

參考書？

KnowVSunderstand

2

本次會議

集體備課？

一桶和一瓢的關(guān)系

3

免疫防治

內(nèi)容很多

內(nèi)容很重要

內(nèi)容很有用免疫學(xué)教學(xué)面臨的挑戰(zhàn)1學(xué)科發(fā)展和社會發(fā)展

Knowledg1免疫防治的分類特異性非特異性預(yù)防主動特異性預(yù)防被動特異性預(yù)防隔離逃避藥物…治療主動特異性治療被動特異性治療非特異性免疫治療免疫防治的分類特異性非特異性主動特異性預(yù)防隔離主動特異性治療223免疫防治吳玉章

wuyuzhang@第三軍醫(yī)大學(xué)全軍免疫學(xué)研究所23免疫防治免疫預(yù)防現(xiàn)在的努力2面臨的問題33輝煌的歷史314我國疫苗研究使用現(xiàn)狀免疫預(yù)防現(xiàn)在的努力2面臨的問題33輝煌的歷史314我國疫苗研4歷史上天花曾經(jīng)肆虐3000年前在中國、印度、埃及的古醫(yī)書及僧侶經(jīng)文中，就有了天花的相關(guān)記錄公元前l(fā)160年統(tǒng)治古埃及的法老拉美西斯五世，從其木乃伊考證他面部有天花疤痕公元三～四世紀(jì)羅馬帝國出現(xiàn)大規(guī)模天花流行，飽受天花的肆虐約六世紀(jì)非洲暴發(fā)天花、八世紀(jì)歐洲暴發(fā)十七～十八世紀(jì)天花傳入大洋洲在西半球肆虐十八世紀(jì)末在歐洲的所有盲人中，三分之一以上是由天花引起的失明天花(smallpox)由天花病毒引起的急性傳染病。天花病毒繁殖速度快、傳染性強(qiáng)、死亡率高。潛伏期7～17天(平均約12天)歷史上天花曾經(jīng)肆虐3000年前在中國、印度、埃及的古醫(yī)書及僧5唐開元間（618～）江南趙氏：鼻苗種痘法（清《牛痘新書》）Preparationofsmallpox唐開元間（618～）Preparationofsmall6牛痘接種術(shù)的發(fā)明由于EdwardJenner首次用牛痘來預(yù)防天花而引起的恐慌牛痘接種術(shù)的發(fā)明由于EdwardJenner首次用牛痘來7我們，全球撲滅天花證實(shí)委員會委員，證實(shí)撲滅天花已經(jīng)在全世界實(shí)現(xiàn)。我們，全球撲滅天花證實(shí)委員會委員，證實(shí)撲滅天花已經(jīng)在全世界實(shí)8Jenner的貢獻(xiàn)看到：擠奶女工不容易得天花想到：牛痘可防人痘？做到：給Philips接種，證明安全

論文不接受，自行散發(fā)貢獻(xiàn)：-預(yù)防性疫苗研制策略

mimictheimmune

responseofnatural

infection

-天花在人類被消滅

-EPI計劃

-WHO評價1979年世界衛(wèi)生組織鄭重宣市“天花在地球上絕跡”這是人類對傳染病預(yù)防進(jìn)行人工免疫最優(yōu)秀的范例Jenner的貢獻(xiàn)看到：擠奶女工不容易得天花1979年世界衛(wèi)9人類使用各種疫苗的時間表開始使用年份可預(yù)防疾病疫苗類型1772天花天花活病毒1798天花自然減毒牛痘苗1885狂犬減毒活病毒和死病毒1896傷寒滅活全菌體1896霍亂滅活全菌體1897鼠疫滅活全菌體1923白喉粗制福爾馬林類毒素1927結(jié)核病卡介苗1955小兒麻痹癥滅活疫苗1963麻疹減毒活疫苗1981乙型肝炎滅活血漿功1991甲型肝炎減毒活苗和死疫苗人類使用各種疫苗的時間表開始使用年份可預(yù)防疾病疫苗類型17710美國疫苗使用前后的傳染病死亡人數(shù)比較傳染病最高死亡人數(shù)1997年死亡人數(shù)死亡降低百分?jǐn)?shù)白喉206939（1921）

599.99麻疹894134（1941）

13599.98腮腺炎152209（1968）

61299.60百日咳265269（1934）

551999.92小兒麻痹癥21269（1952）

499.98風(fēng)疹57686（1969）

0100.00破傷風(fēng)1560（1923）

4397.24流感嗜血桿菌20000（1984）

24298.70乙肝疫苗26611（1985）1612639.40美國疫苗使用前后的傳染病死亡人數(shù)比較傳染病最高死亡人數(shù)19911免疫預(yù)防的巨大貢獻(xiàn)WHO評論在生命科學(xué)還沒有一個領(lǐng)域?qū)θ祟惤】底鞒鋈绱酥卮蟮呢暙I(xiàn)：

一些重要傳染病得到控制或消滅改變了人類的疾病譜延長了人類的平均壽命我國：50年代初到現(xiàn)在平均壽命由35歲達(dá)到了73歲

免疫預(yù)防的巨大貢獻(xiàn)WHO評論我國：50年代初到現(xiàn)在平均壽命由12免疫預(yù)防現(xiàn)在的努力2面臨的問題33輝煌的歷史314我國疫苗研究使用現(xiàn)狀免疫預(yù)防現(xiàn)在的努力2面臨的問題33輝煌的歷史314我國疫苗研13世界衛(wèi)生組織的擴(kuò)大免疫措施

(ExpendProgramImmunizationEPI)1974年WHO在全球發(fā)起了EPI，經(jīng)35年的不懈的努力，全球的嬰兒免疫接種的覆蓋率已經(jīng)達(dá)到了80%以上EPI計劃包括：

卡介苗、白、百、破、麻疹、脊髓灰質(zhì)炎、乙肝、黃熱病、流感嗜血桿菌1990年世界兒童會議上提出

20世紀(jì)末麻疹發(fā)病率和死亡率分別降到90%和95%，基本消滅新生兒破傷風(fēng)和小麻痹癥，

2000年中國宣布消滅脊髓灰質(zhì)炎世界衛(wèi)生組織的擴(kuò)大免疫措施

(ExpendProgram14疫苗出生1月2月4月6月12月15月18月19－23月2－3歲4－6歲乙肝1HepBHepBHepBHepB輪狀2RotaRotaRota白喉、破傷風(fēng)、百日咳3DTaPDTaPDTaPDTaPDTaPb型流感嗜血桿菌4HibHibHibHibHib肺炎5PCVPCVPCVPCVPCVPPV脊灰滅活疫苗IPVIPVIPVIPV流感6Influenza(每年)麻疹、風(fēng)疹、腮腺炎7MMRMMR水痘8VaricellaVaricella甲肝9HepA(2劑)HepA腦膜炎10MPSV4美國兒童免疫接種計劃疫苗出生1月2月4月6月12月15月18月19－23月2－315我國兒童計劃免疫接種程序乙肝疫苗、卡介苗、脊灰疫苗、百白破疫苗、麻疹疫苗、乙型肝炎、結(jié)核病、脊髓灰質(zhì)炎、百日咳、白喉、破傷風(fēng)、麻疹、甲型肝炎、流行性腦脊髓膜炎、流行性乙型腦炎、風(fēng)疹、流行性腮腺炎、流行性出血熱、炭疽和鉤端螺旋體病我國兒童計劃免疫接種程序乙肝疫苗、卡介苗、脊灰疫苗、百白破疫16牛痘鼠疫霍亂乙肝結(jié)核疫苗改變世界傳染性疾病得到進(jìn)一步控制牛痘鼠疫霍亂乙肝結(jié)核疫苗改變世界傳染性疾病得到進(jìn)一步控制17免疫預(yù)防現(xiàn)在的努力2面臨的問題33輝煌的歷史314我國疫苗研究使用現(xiàn)狀免疫預(yù)防現(xiàn)在的努力2面臨的問題33輝煌的歷史314我國疫苗研18老的疾病尚未解決，新的傳染（感染）性疾病不斷出現(xiàn)

老的傳染病時有起伏：

bigthree：愛滋、結(jié)核、瘧疾

新的傳染病不斷出現(xiàn)*平均每年在動物發(fā)現(xiàn)2-3種新的病毒性疾?。?/p>

瘋牛病、瘋狗病、瘋羊病、瘋豬病…

*近20年出現(xiàn)了15種沒法治療的新的病毒性疾病

*1970年以來新發(fā)展的傳染病有20多種，如1977年的肺炎軍團(tuán)菌、1983

年幽門螺桿菌和艾滋病毒、1988年的丙型肝炎、2003年的SARS等傳染病的威脅仍然巨大

當(dāng)今世界上每年有1700萬人死于傳染病其中2/3是因為無疫苗可用1/3是因為疫苗本身的質(zhì)量或接種等原因造成

我國

乙肝2億AIDS：1999國家公布50萬,2010將達(dá)1000萬?老的疾病尚未解決，新的傳染（感染）性疾病不斷出現(xiàn)

老的傳染病19免疫預(yù)防面臨的問題提高“好苗”的接種率、普及率提高“差苗”的保護(hù)率研制針對“無苗”的疾病的疫苗從傳染病到非傳染病策略和技術(shù)改進(jìn)免疫預(yù)防面臨的問題提高“好苗”的接種率、普及率20面臨的技術(shù)困難天然感染不能產(chǎn)生終生免疫力的疾病保護(hù)性抗原高度變異黏膜感染性疾病非感染性疾病保護(hù)性抗原是非蛋白抗原減毒活疫苗毒力回復(fù)面臨的技術(shù)困難天然感染不能產(chǎn)生終生免疫力的疾病21傳統(tǒng)疫苗學(xué)

microorganism

Antigen

ClonegenesTestinanimalmodels

VaccinedevelopmentIdentifycomponentsPurifycomponentsTestimmunogenicityTestconvalecentsera5-15yearswholegenomesequencePredictionofnovelAginsilicoVaccinecandidatesexpressrecombinantproteinTestinAnimalmodelsVaccinedevelopment反向疫苗學(xué)1-2years疫苗研制策略傳統(tǒng)疫苗學(xué)microorganismAntigenCl22免疫預(yù)防現(xiàn)在的努力2面臨的問題33輝煌的歷史314我國疫苗研究使用現(xiàn)狀免疫預(yù)防現(xiàn)在的努力2面臨的問題33輝煌的歷史314我國疫苗研23我國預(yù)防性疫苗研究使用情況簡介理論研究有一定的差距，應(yīng)用研究與國際先進(jìn)水平差距不大

正在使用的疫苗、正在更新?lián)Q代的疫苗、正在研發(fā)的新疫苗，代表著我國現(xiàn)時狀況和發(fā)展趨勢現(xiàn)在使用的傳統(tǒng)疫苗

細(xì)菌性疫苗：

卡介菌、鼠疫、布氏桿菌、炭疽

病毒性疫苗：麻疹、腮腺炎、脊髓灰質(zhì)炎開始使用年份可預(yù)防疾病疫苗類型1772天花天花活病毒1798天花自然減毒牛痘苗1885狂犬減毒活病毒和死病毒1896傷寒滅活全菌體1896霍亂滅活全菌體1897鼠疫滅活全菌體1923白喉粗制福爾馬林類毒素1927結(jié)核病卡介苗1955小兒麻痹癥滅活疫苗1963麻疹減毒活疫苗1981乙型肝炎滅活血漿功1991甲型肝炎減毒活苗和死疫苗我國預(yù)防性疫苗研究使用情況簡介理論研究有一定的差距，應(yīng)用研究24因使用量小沒有進(jìn)一步研究現(xiàn)有機(jī)遇進(jìn)行研究炭疽活疫苗

-歷史1881年P(guān)asteur首創(chuàng)炭疽活疫苗1958年我國董樹林研究小組經(jīng)艱苦卓越的工作研究成功人用炭疽減毒活疫苗1961年生產(chǎn)，劃痕接種，每年加強(qiáng)美國和英國20世紀(jì)50年代開始使用鋁膠培養(yǎng)上清液疫苗，注射接種，18個月接種6針，每年加強(qiáng)因使用量小沒有進(jìn)一步研究現(xiàn)有機(jī)遇進(jìn)行研究25效果與安全性保護(hù)率在80%以上，但持續(xù)時間短，每年加強(qiáng)。副反應(yīng)較大中國疫苗與美國現(xiàn)用疫苗相比優(yōu)點(diǎn)為：

1.接種次數(shù)少

2.副反應(yīng)相對小發(fā)展改變先有疫苗接種方式如皮下或皮內(nèi)注射保護(hù)性抗原（PA）組分疫苗表達(dá)突變PA，純化后可得到一致的抗原表達(dá)PA的炭疽桿菌減毒活疫苗消除炭疽桿菌的質(zhì)粒、毒素和莢膜，然后表達(dá)PA效果與安全性26卡介苗歷史

1921開始用于兒童，1928年以后在全世界廣泛使用，至今已接種40億人，現(xiàn)在每年有1億兒童接種。接種方法早期為口服，二十世紀(jì)50年代后改為皮內(nèi)接種安全性

40億人接種，是世界上最安全的疫苗之一。但對免疫缺陷者不安全。對感染艾滋病毒者接種卡介菌要慎重。WHO建議可對無癥狀的感染艾滋病毒者接種卡介苗；而不能給有癥狀的患者接種急需有換代產(chǎn)品，但尚未有突破性進(jìn)展卡介苗急需有換代產(chǎn)品，但尚未有突破性進(jìn)展27使用效果

用卡介苗預(yù)防肺結(jié)核已超70年代，各種臨床觀察實(shí)驗有數(shù)十次。WHO綜合分析免疫保護(hù)力在50%，但這只是理論計算數(shù)據(jù)，根據(jù)每年發(fā)病人數(shù)估計，卡介苗預(yù)防肺結(jié)核的作用十分有限。從人類消滅天花的經(jīng)驗推測，疫苗的免疫保護(hù)力必須達(dá)到80%以上才有可能預(yù)防該種傳染病，并進(jìn)一步控制和消滅它。因此卡介苗的效果顯然不盡如意，研制和開發(fā)新的結(jié)核疫苗勢在必行

對于防止結(jié)核桿菌的播散，預(yù)防結(jié)核性腦膜炎和粟粒性結(jié)核等重癥結(jié)核病的免疫保護(hù)力十分顯著。在多次大規(guī)模臨床試驗中平均保護(hù)力在75%。數(shù)十年來它拯救了數(shù)百萬兒童的生命。對于預(yù)防腦膜炎和粟粒性結(jié)核來說，在發(fā)展中國家繼續(xù)廣泛接種卡介苗的計劃是有積極意義的

感染免疫與疫苗課件28新疫苗研究

*BCG重組疫苗和DNA疫苗

人型結(jié)核桿菌基因在BCG中表達(dá)，19X103和38X103脂蛋白質(zhì)

已經(jīng)表達(dá)，其他保護(hù)性抗原基因也在進(jìn)行嘗試。Ag85ADNA

疫苗在小鼠實(shí)驗中有保護(hù)效果

*營養(yǎng)缺陷型減毒活疫苗

牛型結(jié)核菌BCG營養(yǎng)缺陷型減毒活疫苗：甲硫氨酸或亮氨酸

生物合成缺陷

人型結(jié)核菌BCG營養(yǎng)缺陷型減毒活疫苗：亮氨酸生物合成缺

陷，有效，但毒力恢復(fù)頻率高新疫苗研究

*BCG重組疫苗和DNA疫苗

人型結(jié)29

-現(xiàn)在狀況

日本于1981年首先研究成功含有百日咳毒素（PT）和絲狀血凝素（FHA）的無細(xì)胞百日咳疫苗，并代替了百日咳菌體疫苗。我國于1991年研制成無細(xì)胞百日咳疫苗，1994年研制成DTaP。從臨床觀察來看，無細(xì)胞百日咳疫苗和Daap與老疫苗相當(dāng)或更高，副反應(yīng)明顯降低。目前全世界有十幾個國家推廣使用新疫苗，我國目前新老疫苗并存，也在逐步推廣百日咳疫苗-歷史

20世界30年代開始使用滅活百日咳菌體疫苗，百日咳的發(fā)病率明顯下降。我國百日咳的發(fā)病率從1978年到1999年下降了99.6%。HWO估計，每年有7000萬兒童接種該疫苗受到保護(hù)。但接種全菌體疫苗產(chǎn)生的嚴(yán)重副反應(yīng)使一些國家接種率下降，隨之又出現(xiàn)百日咳流行，重新接種疫苗后百日咳發(fā)病率又明顯下降。現(xiàn)處于更新階段-現(xiàn)在狀況現(xiàn)處于更新階段30已經(jīng)更新?lián)Q代的疫苗·多糖疫苗

傷寒Vi多糖疫苗·純化疫苗

精制狂犬疫苗、流感亞單位疫苗和裂解疫苗·基因工程疫苗

乙肝疫苗已經(jīng)更新?lián)Q代的疫苗·多糖疫苗31-歷史早期使用的傷寒疫苗主要是滅活的全菌體疫苗，經(jīng)工藝的多次改進(jìn)發(fā)展成為熱滅活-酚防腐或丙活全菌體疫苗，保護(hù)率為60-70%，但副反應(yīng)大。美國和法國聯(lián)合研究成功純化傷寒Vi多糖疫苗，商業(yè)化產(chǎn)品1989年問世

-使用現(xiàn)狀我國20世紀(jì)80年代開始傷寒Vi多糖疫苗研究，1996年開始生產(chǎn)。疫苗經(jīng)肌肉或皮下深部一次性接種，90%以上個體有4倍以上抗莢膜多糖抗體產(chǎn)生，抗體水平維持3年，但加強(qiáng)免疫沒有回憶反應(yīng)，誘生的抗體與首次接種相近。保護(hù)力十分顯著，統(tǒng)計的2200萬人接種人群，6人發(fā)生了傷寒，其中確認(rèn)免疫接種失敗的2人

-發(fā)展趨勢

傷寒Vi多糖疫苗缺點(diǎn)有兩個；其一是2歲以下兒童沒有保護(hù)性免疫反應(yīng)，其二是沒有再次接種的免疫記憶反應(yīng)，因為多糖是T細(xì)胞非依賴性抗原。因此發(fā)展多糖蛋白結(jié)合疫苗已在研究中。另外在各種傷寒減毒疫苗加以改造，引入Vi多糖基因傷寒Vi多糖疫苗傷寒Vi多糖疫苗32年代國外發(fā)狀況年代國內(nèi)發(fā)展?fàn)顩r1908成年腦組織苗1919成年腦組織苗1955幼年腦組織苗不詳幼年腦組織苗1960地鼠腎細(xì)胞苗1980地鼠腎細(xì)胞苗

1994濃縮苗

2000純化精制苗

2001Vero細(xì)胞純化苗狂犬疫苗國內(nèi)外發(fā)展比較

狂犬疫苗效果和安全評價

我國的地鼠腎細(xì)胞苗接種5針后有明顯的保護(hù)但與國外的二倍體細(xì)胞苗比較，抗體產(chǎn)生較晚，對嚴(yán)重復(fù)咬傷者或潛伏期短者不能保護(hù)。按WHO建議，狂犬滅活疫苗的效力必須在2.5U以上，由此研制了濃縮苗。解決了抗原量不足的問題。濃縮后的細(xì)胞雜質(zhì)增多，使副反應(yīng)加重，從而有研制了純化苗。純化苗的效果好，副反應(yīng)低，是我國目前使用的疫苗發(fā)展趨勢

當(dāng)前使用的地鼠腎細(xì)胞純化苗，可能隨著要求的不斷提高，可能對原代細(xì)胞的外源性因子進(jìn)行嚴(yán)格控制，生產(chǎn)成本可能要大幅提高，因此用傳代細(xì)胞生產(chǎn)的疫苗將有可能是下一步的換代產(chǎn)品。法國的基因工程口服疫苗已經(jīng)應(yīng)用到野生動物的免疫，我國也有同類產(chǎn)品在前期研究，但離市場化有較大距離

年代國外發(fā)狀況年代國內(nèi)發(fā)展?fàn)顩r1908成年腦組織苗1919成33發(fā)展史

1964年發(fā)現(xiàn)澳大利亞抗原，1971年將含有高滴度的HBsAg血漿稀釋后加熱，接種志原者，證明能產(chǎn)生抗體，有保護(hù)力。在此基礎(chǔ)上美國NIH作出了純化血源苗。我國19890年生產(chǎn)血源苗，多年的應(yīng)用表明，血源苗遙效果是理想的，抗體陽轉(zhuǎn)率在90%左右。但長期使用陽性有血安全性問題，而乙肝病毒無法在體外培養(yǎng)，因此發(fā)展基因工程疫苗成為乙肝疫苗換代產(chǎn)品的必然趨勢，國內(nèi)外相繼研制出了真核表達(dá)的乙肝疫苗

乙肝基因工程疫苗乙肝疫苗是目前國內(nèi)正式使用的唯一一個基因工程疫苗品種。國產(chǎn)的是中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院阮力研究員研制的CHO細(xì)胞表達(dá)的乙肝基因工程疫苗，從國外引進(jìn)的是酵母細(xì)細(xì)胞表達(dá)的乙肝基因工程疫苗，我國目前這兩種疫苗用于預(yù)防乙肝，血源疫苗已經(jīng)停止生產(chǎn)

發(fā)展趨勢怎么解決5-15%無反應(yīng)性

乙肝疫苗發(fā)展史1964年發(fā)現(xiàn)澳大利亞抗原，1971年將含有高滴度34輪狀病毒疫苗研究和使用現(xiàn)狀：到目前為止國外在嬰幼兒人群中使用過的源于動物的輪狀病

毒疫苗有兩種：兩株牛的和一株恒河猴的輪狀病毒疫苗。

其中牛的輪狀病毒疫苗因保護(hù)力不明確放棄，恒河猴的輪

狀病毒疫苗在Ⅱ、Ⅲ基臨床中發(fā)生腸套暫停試驗

我國蘭州生物制品研究所白值生研究員利用羊輪狀病毒株

研制了口服活疫苗。6-24個月齡嬰幼兒進(jìn)行臨床試驗證

明了安全性和有效性，1998年在我國獲得批準(zhǔn)生產(chǎn)，現(xiàn)大

規(guī)模生產(chǎn)

發(fā)展趨勢：4價的重配株疫苗：國外已完成用牛和猴株與人株重配，進(jìn)入

到臨床階段。我國尚有一株還未完成。

人輪狀病毒減毒活疫苗：尚未有結(jié)果，其原因是難以組織培

養(yǎng)傳代，有少數(shù)可能達(dá)到臨床試驗階段。

VLP：昆蟲細(xì)胞表達(dá)，形成類病毒顆粒有免疫原性，尚未完

成動物實(shí)驗

輪狀病毒疫苗研究和使用現(xiàn)狀：到目前為止國外在嬰幼兒人群中使用35Summary感染、免疫與疫苗免疫學(xué)的發(fā)展艾滋SARS天花霍亂乙肝結(jié)核禽流感哮喘脊髓灰質(zhì)炎麻疹鼠疫瘧疾Summary感染、免疫免疫學(xué)的發(fā)展艾滋SARS天花霍亂乙肝36特異性免疫治療基于抗體的治療

基于cytotoxicTlymphocyte(CTL)的治療特異性免疫治療37感染免疫與疫苗課件38感染免疫與疫苗課件39治療用抗體的歷史和發(fā)展治療用抗體的歷史和發(fā)展40

治療用單抗的應(yīng)用范圍

1.治療腫瘤

Rituxan[淋巴瘤]Herceptin[乳腺瘤]2.治療自身免疫疾病

抗CD3、CD4、MHC-2等淋巴細(xì)胞表面分子的抗體

3.預(yù)防和治療器官移植中排斥反應(yīng)

OrthocloneOKT3[腎]

4.抗感染、抗毒素所致的疾病

Respican[RSV]CroFab[抗蛇毒]

5.治療心血管疾病

AbciximabRePro[血栓]

41

美國已上市的部分治療用抗體

名稱治療病種生產(chǎn)公司

OKT3(CD3)腎移植OrthoBiotechRituxan(人源化)

淋巴瘤IDECHexceptin(人源化)

乳腺癌GenentechReopro(人源化)

溶血栓CentocorRespiGam(RSV)抗病毒MedlmmuneZenapax(人源化)

腎移植RocheCytoGam(人源化)CMV

感染MeclmmuneCroFab響尾蛇咬ProthericsReFacto血友病GeneticsIns.美國已上市的部分治療用抗體42

英國研究治療用抗體

名稱治療病種開發(fā)公司

抗CD3抗體

移植排異牛津大學(xué)抗CD33抗體白血病Celltech

(人源化)chiroscience

抗IL-5抗體哮喘等C.C.

抗IL-12抗體

自身免疫疾病CATBexxar腫瘤等SmithKlineTheragyn卵巢癌等AntisomaPDGF心臟病C.C.

注：CambridgeAntibodyTechnology(CAT)英國研究治療用抗體43

問題

1、鼠源單抗的異源性，“人源化”后活性降低

2、單抗“小型化”是研究方向，但與相應(yīng)抗原結(jié)合靶點(diǎn)也相對減少

3、基因工程單抗表達(dá)量低，臨床劑量大

4、導(dǎo)向藥物偶聯(lián)“彈頭”未到靶細(xì)胞之前解離，損傷健康組織

5、雙特異性抗體：親和力/動力學(xué)？問題44

主動特異性免疫治療－治療性疫苗一、基本原理二、研究進(jìn)展慢性持續(xù)性感染認(rèn)知性疾病自身免疫病腫瘤主動特異性免疫治療－治療性疫苗一、基本原理45感染免疫與疫苗課件46感染免疫與疫苗課件47感染免疫與疫苗課件48VaccinationagainstHIVVaccinationapproachViralproteininvaccine

EfficacyEfficacywithHAARTWhole,killedHIVHIV-1depletedofgp120

-

-,phaseIIIstudyVaxSynRecombinantgp120ofHIV-1IIIB

-

n.d.DefinedHIVcoreProtP24andp17

-

n.d.DNAvaccineHIV-1EnvandRev

+

+(human)LivevirusvectorsHIV-1Gag,Polandnef,andgp120

+(macaques)

+HSPHSP70andHSP72aloneorlinkedtogp120orp27

n.d.

n.d.Combinationwithimmune-basedtherapiesInactivatedHIVandGM-CSFandIL-2

+

n.d.VaccinationagainstHIVVaccina49TherapeuticHSVvaccinesVaccineorcompanyVaccinedescriptionInactivatedwhole-cellvirusvaccineEliLillyFormalin-inactivated;rabbitkidneycells“Lupidon”Heat-killedvirusDundarovvaccineFormalin-inactivated;rabbitkidneycellsSkinnervaccine

Formalin-inactivated;detergentextractionKutinivavaccineHSV1lectinpurifiedglycoproteinsonAl(OH)3CappelHSV2glycoproteinslederleGD1+alumRecombinantsubunitvaccineChiron-BiocineGD+alum/Mf-59GlaxoSmithKlineTruncatedgD2+alum+MPLGenetechTruncatedgD1TherapeuticHSVvaccinesVaccin50TherapeuticHSVvaccines(continued)Geneticallyengineered

HSVmutantsDISCVACCINEDeletionofnonstructuralproteinICP4-8-275BlackZvirusRecombinationofamutantHSV-1ICP8geneintoaHSV-2wildtypestrainSingle-cyclemutants

R7017-R7020DeletionofsequencesinHSV1toreducevirulenceandneutrotropinRAV9395DeletionofUL55,UL56andr134.5genes,functionasaliveattenuatedHSV-2vaccineOthervaccinesViralvectorsVaccinia:VgD52(HSV1),VP176(gD1),VP221(Gd2)DNAvaccinesPlasmidsencodingforgC,gD,gEfromHSV1TherapeuticHSVvaccines(cont51TherapeuticHBVvaccinesInactivatedpurifiedenvelopevaccinesMSDHBsAg+alumRecombinantproteinbasedvaccinesAventisPasteurS-pre-S2+alumBiotechnologyGeneralLtdS-pre-S1-pre-S2+alumChironCooperationS-pre-S2+MF-59MedevaLtdS-pre-S2+alumGlaxoSmithKlineBiologicalsS+AS2OthervaccinesCytelCorporationCorelipopeptidePowerjectHBS-DNAvaccineShanghaiInstBioProdHBsAg-anti-HBsAbcomplesInstituteofImmunology,PLAmimogenTherapeuticHBVvaccinesInacti52TherapeuticHPVvaccinesLivevectorvaccinesXenovaRecombinantvaccinia;modifiede6andE7fromHPV16and18Sig/E7/LAMP-1RecombinantvacciniaProtein-basedvaccinesXenova/GlaxoSmithKlineBiologicalsL2E7fusionprotein,HPV6MedImmuneHPV11L1VLPonalumCLS,AustraliaHPV-16E6-E7proteinwithchelating“Iscomatrix”StressGeneBiotechnologiesHPV16E7+BCGHS/65ChironPharmaceuticalsHPV16E2proteinwithMF59AdjuvantOthervaccinesPeptideHLAH2restrictedHPVE7peptide+PADREHPV16E7peptide+PADRE+MontanideISA51adjuvantHPV16E7peptideconjugatedwithISCARDNADNAplasmidsexpressedearlyproteinsDNAplasmid+goldmicroparticlesTherapeuticHPVvaccinesLivev53

認(rèn)知性疾病

“朊病毒”疾病

“朊病毒”：Creutzfeldt-Jakob?。–JD）等疾病

“朊病毒”是正常細(xì)胞朊蛋白（PrPc）的一種構(gòu)象亞型。體外實(shí)驗已經(jīng)證明抗朊蛋白抗體6H4可結(jié)合細(xì)胞表面的PrPc，抑制PrPsc的形成。提示可能用疫苗治療“朊病毒”疾病

采用編碼PrPc的基因Prnp在小鼠進(jìn)行免疫以誘導(dǎo)抗體產(chǎn)生，后者可防止疾病的發(fā)生。但由于PrPc在體內(nèi)廣泛分布，固有引發(fā)自身免疫性疾病的可能

認(rèn)知性疾病

“朊病毒”疾病

“朊病毒”：Creutz54Huntington氏病（HD）

雖然Huntington氏病的發(fā)病機(jī)理并不十分清楚，但已知富含β-片層的蛋白聚集是十分重要的。Huntingtin蛋白N-末端多聚谷氨酸異常延長可引起病理性蛋白相互作用和聚集

通過抗體庫技術(shù)得到了可特異性結(jié)合于臨近Huntingtin蛋白外顯子-1上多聚谷氨酸的17個氨基酸序列的單鏈抗體。將其作為一種內(nèi)抗體（intrabody）與異常Huntingtin蛋白-GFP共表達(dá)，可顯著降低蛋白聚集。目前正在動物模型進(jìn)行臨床前的評價Huntington氏病（HD）

雖然Huntington氏55

Alzheimer氏?。ˋD）AD的病理特征是細(xì)胞內(nèi)淀粉樣斑快的聚集導(dǎo)細(xì)胞死亡。斑塊內(nèi)的主要成分是Aβ肽（40-42個氨基酸）

1999年，在小鼠模型證明用Aβ肽免疫可抑制斑塊形成及相關(guān)的神經(jīng)病理變化。這一發(fā)現(xiàn)為用疫苗治療AD奠定了基礎(chǔ)。雖然其后有實(shí)驗證明接受此項治療的小鼠可恢復(fù)記憶和學(xué)習(xí)能力。主要的疑問是斑快的清除是否在人類與行為改善、神經(jīng)生理功能的恢復(fù)、及神經(jīng)細(xì)胞死亡的減少有關(guān)。新近，因為其副作用，都柏林的Elan已聲明終止了一項臨床試驗

另外的一種策略是基于免疫激發(fā)針對Aβ肽的EFRH表位（Aβ肽的3-6氨基酸序列）的抗體

Alzheimer氏病（AD）AD的病理特征是細(xì)胞內(nèi)淀粉56

自身免疫性疾病

1

多發(fā)性硬化癥（MS）

Copolymer1是丙氨酸、谷氨酰胺、賴氨酸、酪氨酸的隨機(jī)合成物以模擬MBP。Copolymer1進(jìn)入體內(nèi)首先結(jié)合MHC-II，和髓磷脂在結(jié)合MHC-II和結(jié)合TCR水平發(fā)生競爭。一方面，它可作為TCR拮抗劑，另一方面誘導(dǎo)Th2細(xì)胞產(chǎn)生、抑制病變器官炎性細(xì)胞因子如IFN-γ的產(chǎn)生。在臨床試驗中，證明有73%的有效率。目前已在歐共體、北美的40多個國家使用

自身免疫性疾病

1多發(fā)性硬化癥（MS）572重癥肌無力（MG）

MG是主要由T細(xì)胞調(diào)節(jié)失調(diào)性的疾病，主要由抗乙酰膽堿受體的抗體發(fā)揮病理效應(yīng)。有多項研究采用肽疫苗治療MG。其中，有三項研究證明有較好前景：

一是使用重組表達(dá)的多肽通過黏膜系統(tǒng)給藥有效誘導(dǎo)

了免疫耐受和免疫抑制效應(yīng)。

二是使用一組多肽通過口服和鼻腔給藥可預(yù)防實(shí)驗性

MG（EAMA）的發(fā)生。

三采用乙酰膽堿受體α-亞基的2個優(yōu)勢T細(xì)胞表位

（195-212，259-271），證明能抑制MG特異性T細(xì)胞

株的增殖，誘導(dǎo)T細(xì)胞失能。后者在動物模型已取得

良好效果，被認(rèn)為有希望成為治療性疫苗

2重癥肌無力（MG）MG是主要由T細(xì)胞調(diào)節(jié)失58

3系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）

基于自身抗體之CDR的多肽在體外試驗和SLE動物模型被證明能抑制SLE相關(guān)T、B細(xì)胞應(yīng)答、上調(diào)TGF-β，有希望用于SLE的臨床治療

4I型糖尿病

HSP60是NOD小鼠自身免疫性糖尿病模型的T細(xì)胞識別的靶蛋白?；贖SP60設(shè)計的多肽p277可抑制自身免疫過程和胰島的炎癥。它可將促炎的Th1型細(xì)胞因子轉(zhuǎn)換為Th2型細(xì)胞因子。一項隨機(jī)雙盲的II期臨床試驗證明可使病史較短I型糖尿病人恢復(fù)胰島素分泌

3系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）59CancerVaccinesinClinicalTrial

CategoryIIIIIITotalAdjuvant

44TumorCellVaccines98118CarbohydrateVaccines44Peptide/ProteinVaccines

25530DNAVaccines77RecombinantVectors18725Idiotype/Anti-idiotype3238Others105318Total80277114CancerVaccinesinClinicalTr60技術(shù)上存在的困難機(jī)體對天然抗原耐受傳統(tǒng)的主動免疫策略受到挑戰(zhàn)可溶性蛋白多不能在體內(nèi)啟動CTL反應(yīng)藥代動力學(xué)技術(shù)上存在的困難機(jī)體對天然抗原耐受61預(yù)防性疫苗與治療性疫苗的技術(shù)要求比較

預(yù)防性疫苗治療性疫苗研制策略Jenner的模擬自然感染不能采用Jenner策略抗原要求天然抗原保護(hù)性、保守性、優(yōu)勢性多不能采用天然抗原目的反應(yīng)在體高效價中和性抗體在體CTL應(yīng)答為主抗原形式可溶性蛋白特殊遞送系統(tǒng)Th極化Th2極化Th1極化關(guān)鍵問題減少不應(yīng)答、提高免疫記憶在體誘導(dǎo)CTL為主預(yù)防性疫苗與治療性疫苗的技術(shù)要求比較

預(yù)防性疫苗治療性疫苗研62ThankYou!ThankYou!免疫學(xué)教學(xué)面臨的挑戰(zhàn)1學(xué)科發(fā)展和社會發(fā)展

Knowledgeupdate

每五年增加一倍:文獻(xiàn)、專著、教課書間的平衡

教什么？

教科書？

參考書？

KnowVSunderstand

2

本次會議

集體備課？

一桶和一瓢的關(guān)系

3

免疫防治

內(nèi)容很多

內(nèi)容很重要

內(nèi)容很有用免疫學(xué)教學(xué)面臨的挑戰(zhàn)1學(xué)科發(fā)展和社會發(fā)展

Knowledg64免疫防治的分類特異性非特異性預(yù)防主動特異性預(yù)防被動特異性預(yù)防隔離逃避藥物…治療主動特異性治療被動特異性治療非特異性免疫治療免疫防治的分類特異性非特異性主動特異性預(yù)防隔離主動特異性治療6523免疫防治吳玉章

wuyuzhang@第三軍醫(yī)大學(xué)全軍免疫學(xué)研究所23免疫防治免疫預(yù)防現(xiàn)在的努力2面臨的問題33輝煌的歷史314我國疫苗研究使用現(xiàn)狀免疫預(yù)防現(xiàn)在的努力2面臨的問題33輝煌的歷史314我國疫苗研67歷史上天花曾經(jīng)肆虐3000年前在中國、印度、埃及的古醫(yī)書及僧侶經(jīng)文中，就有了天花的相關(guān)記錄公元前l(fā)160年統(tǒng)治古埃及的法老拉美西斯五世，從其木乃伊考證他面部有天花疤痕公元三～四世紀(jì)羅馬帝國出現(xiàn)大規(guī)模天花流行，飽受天花的肆虐約六世紀(jì)非洲暴發(fā)天花、八世紀(jì)歐洲暴發(fā)十七～十八世紀(jì)天花傳入大洋洲在西半球肆虐十八世紀(jì)末在歐洲的所有盲人中，三分之一以上是由天花引起的失明天花(smallpox)由天花病毒引起的急性傳染病。天花病毒繁殖速度快、傳染性強(qiáng)、死亡率高。潛伏期7～17天(平均約12天)歷史上天花曾經(jīng)肆虐3000年前在中國、印度、埃及的古醫(yī)書及僧68唐開元間（618～）江南趙氏：鼻苗種痘法（清《牛痘新書》）Preparationofsmallpox唐開元間（618～）Preparationofsmall69牛痘接種術(shù)的發(fā)明由于EdwardJenner首次用牛痘來預(yù)防天花而引起的恐慌牛痘接種術(shù)的發(fā)明由于EdwardJenner首次用牛痘來70我們，全球撲滅天花證實(shí)委員會委員，證實(shí)撲滅天花已經(jīng)在全世界實(shí)現(xiàn)。我們，全球撲滅天花證實(shí)委員會委員，證實(shí)撲滅天花已經(jīng)在全世界實(shí)71Jenner的貢獻(xiàn)看到：擠奶女工不容易得天花想到：牛痘可防人痘？做到：給Philips接種，證明安全

論文不接受，自行散發(fā)貢獻(xiàn)：-預(yù)防性疫苗研制策略

mimictheimmune

responseofnatural

infection

-天花在人類被消滅

-EPI計劃

-WHO評價1979年世界衛(wèi)生組織鄭重宣市“天花在地球上絕跡”這是人類對傳染病預(yù)防進(jìn)行人工免疫最優(yōu)秀的范例Jenner的貢獻(xiàn)看到：擠奶女工不容易得天花1979年世界衛(wèi)72人類使用各種疫苗的時間表開始使用年份可預(yù)防疾病疫苗類型1772天花天花活病毒1798天花自然減毒牛痘苗1885狂犬減毒活病毒和死病毒1896傷寒滅活全菌體1896霍亂滅活全菌體1897鼠疫滅活全菌體1923白喉粗制福爾馬林類毒素1927結(jié)核病卡介苗1955小兒麻痹癥滅活疫苗1963麻疹減毒活疫苗1981乙型肝炎滅活血漿功1991甲型肝炎減毒活苗和死疫苗人類使用各種疫苗的時間表開始使用年份可預(yù)防疾病疫苗類型17773美國疫苗使用前后的傳染病死亡人數(shù)比較傳染病最高死亡人數(shù)1997年死亡人數(shù)死亡降低百分?jǐn)?shù)白喉206939（1921）

599.99麻疹894134（1941）

13599.98腮腺炎152209（1968）

61299.60百日咳265269（1934）

551999.92小兒麻痹癥21269（1952）

499.98風(fēng)疹57686（1969）

0100.00破傷風(fēng)1560（1923）

4397.24流感嗜血桿菌20000（1984）

24298.70乙肝疫苗26611（1985）1612639.40美國疫苗使用前后的傳染病死亡人數(shù)比較傳染病最高死亡人數(shù)19974免疫預(yù)防的巨大貢獻(xiàn)WHO評論在生命科學(xué)還沒有一個領(lǐng)域?qū)θ祟惤】底鞒鋈绱酥卮蟮呢暙I(xiàn)：

一些重要傳染病得到控制或消滅改變了人類的疾病譜延長了人類的平均壽命我國：50年代初到現(xiàn)在平均壽命由35歲達(dá)到了73歲

免疫預(yù)防的巨大貢獻(xiàn)WHO評論我國：50年代初到現(xiàn)在平均壽命由75免疫預(yù)防現(xiàn)在的努力2面臨的問題33輝煌的歷史314我國疫苗研究使用現(xiàn)狀免疫預(yù)防現(xiàn)在的努力2面臨的問題33輝煌的歷史314我國疫苗研76世界衛(wèi)生組織的擴(kuò)大免疫措施

(ExpendProgramImmunizationEPI)1974年WHO在全球發(fā)起了EPI，經(jīng)35年的不懈的努力，全球的嬰兒免疫接種的覆蓋率已經(jīng)達(dá)到了80%以上EPI計劃包括：

卡介苗、白、百、破、麻疹、脊髓灰質(zhì)炎、乙肝、黃熱病、流感嗜血桿菌1990年世界兒童會議上提出

20世紀(jì)末麻疹發(fā)病率和死亡率分別降到90%和95%，基本消滅新生兒破傷風(fēng)和小麻痹癥，

2000年中國宣布消滅脊髓灰質(zhì)炎世界衛(wèi)生組織的擴(kuò)大免疫措施

(ExpendProgram77疫苗出生1月2月4月6月12月15月18月19－23月2－3歲4－6歲乙肝1HepBHepBHepBHepB輪狀2RotaRotaRota白喉、破傷風(fēng)、百日咳3DTaPDTaPDTaPDTaPDTaPb型流感嗜血桿菌4HibHibHibHibHib肺炎5PCVPCVPCVPCVPCVPPV脊灰滅活疫苗IPVIPVIPVIPV流感6Influenza(每年)麻疹、風(fēng)疹、腮腺炎7MMRMMR水痘8VaricellaVaricella甲肝9HepA(2劑)HepA腦膜炎10MPSV4美國兒童免疫接種計劃疫苗出生1月2月4月6月12月15月18月19－23月2－378我國兒童計劃免疫接種程序乙肝疫苗、卡介苗、脊灰疫苗、百白破疫苗、麻疹疫苗、乙型肝炎、結(jié)核病、脊髓灰質(zhì)炎、百日咳、白喉、破傷風(fēng)、麻疹、甲型肝炎、流行性腦脊髓膜炎、流行性乙型腦炎、風(fēng)疹、流行性腮腺炎、流行性出血熱、炭疽和鉤端螺旋體病我國兒童計劃免疫接種程序乙肝疫苗、卡介苗、脊灰疫苗、百白破疫79牛痘鼠疫霍亂乙肝結(jié)核疫苗改變世界傳染性疾病得到進(jìn)一步控制牛痘鼠疫霍亂乙肝結(jié)核疫苗改變世界傳染性疾病得到進(jìn)一步控制80免疫預(yù)防現(xiàn)在的努力2面臨的問題33輝煌的歷史314我國疫苗研究使用現(xiàn)狀免疫預(yù)防現(xiàn)在的努力2面臨的問題33輝煌的歷史314我國疫苗研81老的疾病尚未解決，新的傳染（感染）性疾病不斷出現(xiàn)

老的傳染病時有起伏：

bigthree：愛滋、結(jié)核、瘧疾

新的傳染病不斷出現(xiàn)*平均每年在動物發(fā)現(xiàn)2-3種新的病毒性疾?。?/p>

瘋牛病、瘋狗病、瘋羊病、瘋豬病…

*近20年出現(xiàn)了15種沒法治療的新的病毒性疾病

*1970年以來新發(fā)展的傳染病有20多種，如1977年的肺炎軍團(tuán)菌、1983

年幽門螺桿菌和艾滋病毒、1988年的丙型肝炎、2003年的SARS等傳染病的威脅仍然巨大

當(dāng)今世界上每年有1700萬人死于傳染病其中2/3是因為無疫苗可用1/3是因為疫苗本身的質(zhì)量或接種等原因造成

我國

乙肝2億AIDS：1999國家公布50萬,2010將達(dá)1000萬?老的疾病尚未解決，新的傳染（感染）性疾病不斷出現(xiàn)

老的傳染病82免疫預(yù)防面臨的問題提高“好苗”的接種率、普及率提高“差苗”的保護(hù)率研制針對“無苗”的疾病的疫苗從傳染病到非傳染病策略和技術(shù)改進(jìn)免疫預(yù)防面臨的問題提高“好苗”的接種率、普及率83面臨的技術(shù)困難天然感染不能產(chǎn)生終生免疫力的疾病保護(hù)性抗原高度變異黏膜感染性疾病非感染性疾病保護(hù)性抗原是非蛋白抗原減毒活疫苗毒力回復(fù)面臨的技術(shù)困難天然感染不能產(chǎn)生終生免疫力的疾病84傳統(tǒng)疫苗學(xué)

microorganism

Antigen

ClonegenesTestinanimalmodels

VaccinedevelopmentIdentifycomponentsPurifycomponentsTestimmunogenicityTestconvalecentsera5-15yearswholegenomesequencePredictionofnovelAginsilicoVaccinecandidatesexpressrecombinantproteinTestinAnimalmodelsVaccinedevelopment反向疫苗學(xué)1-2years疫苗研制策略傳統(tǒng)疫苗學(xué)microorganismAntigenCl85免疫預(yù)防現(xiàn)在的努力2面臨的問題33輝煌的歷史314我國疫苗研究使用現(xiàn)狀免疫預(yù)防現(xiàn)在的努力2面臨的問題33輝煌的歷史314我國疫苗研86我國預(yù)防性疫苗研究使用情況簡介理論研究有一定的差距，應(yīng)用研究與國際先進(jìn)水平差距不大

正在使用的疫苗、正在更新?lián)Q代的疫苗、正在研發(fā)的新疫苗，代表著我國現(xiàn)時狀況和發(fā)展趨勢現(xiàn)在使用的傳統(tǒng)疫苗

細(xì)菌性疫苗：

卡介菌、鼠疫、布氏桿菌、炭疽

病毒性疫苗：麻疹、腮腺炎、脊髓灰質(zhì)炎開始使用年份可預(yù)防疾病疫苗類型1772天花天花活病毒1798天花自然減毒牛痘苗1885狂犬減毒活病毒和死病毒1896傷寒滅活全菌體1896霍亂滅活全菌體1897鼠疫滅活全菌體1923白喉粗制福爾馬林類毒素1927結(jié)核病卡介苗1955小兒麻痹癥滅活疫苗1963麻疹減毒活疫苗1981乙型肝炎滅活血漿功1991甲型肝炎減毒活苗和死疫苗我國預(yù)防性疫苗研究使用情況簡介理論研究有一定的差距，應(yīng)用研究87因使用量小沒有進(jìn)一步研究現(xiàn)有機(jī)遇進(jìn)行研究炭疽活疫苗

-歷史1881年P(guān)asteur首創(chuàng)炭疽活疫苗1958年我國董樹林研究小組經(jīng)艱苦卓越的工作研究成功人用炭疽減毒活疫苗1961年生產(chǎn)，劃痕接種，每年加強(qiáng)美國和英國20世紀(jì)50年代開始使用鋁膠培養(yǎng)上清液疫苗，注射接種，18個月接種6針，每年加強(qiáng)因使用量小沒有進(jìn)一步研究現(xiàn)有機(jī)遇進(jìn)行研究88效果與安全性保護(hù)率在80%以上，但持續(xù)時間短，每年加強(qiáng)。副反應(yīng)較大中國疫苗與美國現(xiàn)用疫苗相比優(yōu)點(diǎn)為：

1.接種次數(shù)少

2.副反應(yīng)相對小發(fā)展改變先有疫苗接種方式如皮下或皮內(nèi)注射保護(hù)性抗原（PA）組分疫苗表達(dá)突變PA，純化后可得到一致的抗原表達(dá)PA的炭疽桿菌減毒活疫苗消除炭疽桿菌的質(zhì)粒、毒素和莢膜，然后表達(dá)PA效果與安全性89卡介苗歷史

1921開始用于兒童，1928年以后在全世界廣泛使用，至今已接種40億人，現(xiàn)在每年有1億兒童接種。接種方法早期為口服，二十世紀(jì)50年代后改為皮內(nèi)接種安全性

40億人接種，是世界上最安全的疫苗之一。但對免疫缺陷者不安全。對感染艾滋病毒者接種卡介菌要慎重。WHO建議可對無癥狀的感染艾滋病毒者接種卡介苗；而不能給有癥狀的患者接種急需有換代產(chǎn)品，但尚未有突破性進(jìn)展卡介苗急需有換代產(chǎn)品，但尚未有突破性進(jìn)展90使用效果

用卡介苗預(yù)防肺結(jié)核已超70年代，各種臨床觀察實(shí)驗有數(shù)十次。WHO綜合分析免疫保護(hù)力在50%，但這只是理論計算數(shù)據(jù)，根據(jù)每年發(fā)病人數(shù)估計，卡介苗預(yù)防肺結(jié)核的作用十分有限。從人類消滅天花的經(jīng)驗推測，疫苗的免疫保護(hù)力必須達(dá)到80%以上才有可能預(yù)防該種傳染病，并進(jìn)一步控制和消滅它。因此卡介苗的效果顯然不盡如意，研制和開發(fā)新的結(jié)核疫苗勢在必行

對于防止結(jié)核桿菌的播散，預(yù)防結(jié)核性腦膜炎和粟粒性結(jié)核等重癥結(jié)核病的免疫保護(hù)力十分顯著。在多次大規(guī)模臨床試驗中平均保護(hù)力在75%。數(shù)十年來它拯救了數(shù)百萬兒童的生命。對于預(yù)防腦膜炎和粟粒性結(jié)核來說，在發(fā)展中國家繼續(xù)廣泛接種卡介苗的計劃是有積極意義的

感染免疫與疫苗課件91新疫苗研究

*BCG重組疫苗和DNA疫苗

人型結(jié)核桿菌基因在BCG中表達(dá)，19X103和38X103脂蛋白質(zhì)

已經(jīng)表達(dá)，其他保護(hù)性抗原基因也在進(jìn)行嘗試。Ag85ADNA

疫苗在小鼠實(shí)驗中有保護(hù)效果

*營養(yǎng)缺陷型減毒活疫苗

牛型結(jié)核菌BCG營養(yǎng)缺陷型減毒活疫苗：甲硫氨酸或亮氨酸

生物合成缺陷

人型結(jié)核菌BCG營養(yǎng)缺陷型減毒活疫苗：亮氨酸生物合成缺

陷，有效，但毒力恢復(fù)頻率高新疫苗研究

*BCG重組疫苗和DNA疫苗

人型結(jié)92

-現(xiàn)在狀況

日本于1981年首先研究成功含有百日咳毒素（PT）和絲狀血凝素（FHA）的無細(xì)胞百日咳疫苗，并代替了百日咳菌體疫苗。我國于1991年研制成無細(xì)胞百日咳疫苗，1994年研制成DTaP。從臨床觀察來看，無細(xì)胞百日咳疫苗和Daap與老疫苗相當(dāng)或更高，副反應(yīng)明顯降低。目前全世界有十幾個國家推廣使用新疫苗，我國目前新老疫苗并存，也在逐步推廣百日咳疫苗-歷史

20世界30年代開始使用滅活百日咳菌體疫苗，百日咳的發(fā)病率明顯下降。我國百日咳的發(fā)病率從1978年到1999年下降了99.6%。HWO估計，每年有7000萬兒童接種該疫苗受到保護(hù)。但接種全菌體疫苗產(chǎn)生的嚴(yán)重副反應(yīng)使一些國家接種率下降，隨之又出現(xiàn)百日咳流行，重新接種疫苗后百日咳發(fā)病率又明顯下降?，F(xiàn)處于更新階段-現(xiàn)在狀況現(xiàn)處于更新階段93已經(jīng)更新?lián)Q代的疫苗·多糖疫苗

傷寒Vi多糖疫苗·純化疫苗

精制狂犬疫苗、流感亞單位疫苗和裂解疫苗·基因工程疫苗

乙肝疫苗已經(jīng)更新?lián)Q代的疫苗·多糖疫苗94-歷史早期使用的傷寒疫苗主要是滅活的全菌體疫苗，經(jīng)工藝的多次改進(jìn)發(fā)展成為熱滅活-酚防腐或丙活全菌體疫苗，保護(hù)率為60-70%，但副反應(yīng)大。美國和法國聯(lián)合研究成功純化傷寒Vi多糖疫苗，商業(yè)化產(chǎn)品1989年問世

-使用現(xiàn)狀我國20世紀(jì)80年代開始傷寒Vi多糖疫苗研究，1996年開始生產(chǎn)。疫苗經(jīng)肌肉或皮下深部一次性接種，90%以上個體有4倍以上抗莢膜多糖抗體產(chǎn)生，抗體水平維持3年，但加強(qiáng)免疫沒有回憶反應(yīng)，誘生的抗體與首次接種相近。保護(hù)力十分顯著，統(tǒng)計的2200萬人接種人群，6人發(fā)生了傷寒，其中確認(rèn)免疫接種失敗的2人

-發(fā)展趨勢

傷寒Vi多糖疫苗缺點(diǎn)有兩個；其一是2歲以下兒童沒有保護(hù)性免疫反應(yīng)，其二是沒有再次接種的免疫記憶反應(yīng)，因為多糖是T細(xì)胞非依賴性抗原。因此發(fā)展多糖蛋白結(jié)合疫苗已在研究中。另外在各種傷寒減毒疫苗加以改造，引入Vi多糖基因傷寒Vi多糖疫苗傷寒Vi多糖疫苗95年代國外發(fā)狀況年代國內(nèi)發(fā)展?fàn)顩r1908成年腦組織苗1919成年腦組織苗1955幼年腦組織苗不詳幼年腦組織苗1960地鼠腎細(xì)胞苗1980地鼠腎細(xì)胞苗

1994濃縮苗

2000純化精制苗

2001Vero細(xì)胞純化苗狂犬疫苗國內(nèi)外發(fā)展比較

狂犬疫苗效果和安全評價

我國的地鼠腎細(xì)胞苗接種5針后有明顯的保護(hù)但與國外的二倍體細(xì)胞苗比較，抗體產(chǎn)生較晚，對嚴(yán)重復(fù)咬傷者或潛伏期短者不能保護(hù)。按WHO建議，狂犬滅活疫苗的效力必須在2.5U以上，由此研制了濃縮苗。解決了抗原量不足的問題。濃縮后的細(xì)胞雜質(zhì)增多，使副反應(yīng)加重，從而有研制了純化苗。純化苗的效果好，副反應(yīng)低，是我國目前使用的疫苗發(fā)展趨勢

當(dāng)前使用的地鼠腎細(xì)胞純化苗，可能隨著要求的不斷提高，可能對原代細(xì)胞的外源性因子進(jìn)行嚴(yán)格控制，生產(chǎn)成本可能要大幅提高，因此用傳代細(xì)胞生產(chǎn)的疫苗將有可能是下一步的換代產(chǎn)品。法國的基因工程口服疫苗已經(jīng)應(yīng)用到野生動物的免疫，我國也有同類產(chǎn)品在前期研究，但離市場化有較大距離

年代國外發(fā)狀況年代國內(nèi)發(fā)展?fàn)顩r1908成年腦組織苗1919成96發(fā)展史

1964年發(fā)現(xiàn)澳大利亞抗原，1971年將含有高滴度的HBsAg血漿稀釋后加熱，接種志原者，證明能產(chǎn)生抗體，有保護(hù)力。在此基礎(chǔ)上美國NIH作出了純化血源苗。我國19890年生產(chǎn)血源苗，多年的應(yīng)用表明，血源苗遙效果是理想的，抗體陽轉(zhuǎn)率在90%左右。但長期使用陽性有血安全性問題，而乙肝病毒無法在體外培養(yǎng)，因此發(fā)展基因工程疫苗成為乙肝疫苗換代產(chǎn)品的必然趨勢，國內(nèi)外相繼研制出了真核表達(dá)的乙肝疫苗

乙肝基因工程疫苗乙肝疫苗是目前國內(nèi)正式使用的唯一一個基因工程疫苗品種。國產(chǎn)的是中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院阮力研究員研制的CHO細(xì)胞表達(dá)的乙肝基因工程疫苗，從國外引進(jìn)的是酵母細(xì)細(xì)胞表達(dá)的乙肝基因工程疫苗，我國目前這兩種疫苗用于預(yù)防乙肝，血源疫苗已經(jīng)停止生產(chǎn)

發(fā)展趨勢怎么解決5-15%無反應(yīng)性

乙肝疫苗發(fā)展史1964年發(fā)現(xiàn)澳大利亞抗原，1971年將含有高滴度97輪狀病毒疫苗研究和使用現(xiàn)狀：到目前為止國外在嬰幼兒人群中使用過的源于動物的輪狀病

毒疫苗有兩種：兩株牛的和一株恒河猴的輪狀病毒疫苗。

其中牛的輪狀病毒疫苗因保護(hù)力不明確放棄，恒河猴的輪

狀病毒疫苗在Ⅱ、Ⅲ基臨床中發(fā)生腸套暫停試驗

我國蘭州生物制品研究所白值生研究員利用羊輪狀病毒株

研制了口服活疫苗。6-24個月齡嬰幼兒進(jìn)行臨床試驗證

明了安全性和有效性，1998年在我國獲得批準(zhǔn)生產(chǎn)，現(xiàn)大

規(guī)模生產(chǎn)

發(fā)展趨勢：4價的重配株疫苗：國外已完成用牛和猴株與人株重配，進(jìn)入

到臨床階段。我國尚有一株還未完成。

人輪狀病毒減毒活疫苗：尚未有結(jié)果，其原因是難以組織培

養(yǎng)傳代，有少數(shù)可能達(dá)到臨床試驗階段。

VLP：昆蟲細(xì)胞表達(dá)，形成類病毒顆粒有免疫原性，尚未完

成動物實(shí)驗

輪狀病毒疫苗研究和使用現(xiàn)狀：到目前為止國外在嬰幼兒人群中使用98Summary感染、免疫與疫苗免疫學(xué)的發(fā)展艾滋SARS天花霍亂乙肝結(jié)核禽流感哮喘脊髓灰質(zhì)炎麻疹鼠疫瘧疾Summary感染、免疫免疫學(xué)的發(fā)展艾滋SARS天花霍亂乙肝99特異性免疫治療基于抗體的治療

基于cytotoxicTlymphocyte(CTL)的治療特異性免疫治療100感染免疫與疫苗課件101感染免疫與疫苗課件102治療用抗體的歷史和發(fā)展治療用抗體的歷史和發(fā)展103

治療用單抗的應(yīng)用范圍

1.治療腫瘤

Rituxan[淋巴瘤]Herceptin[乳腺瘤]2.治療自身免疫疾病

抗CD3、CD4、MHC-2等淋巴細(xì)胞表面分子的抗體

3.預(yù)防和治療器官移植中排斥反應(yīng)

OrthocloneOKT3[腎]

4.抗感染、抗毒素所致的疾病

Respican[RSV]CroFab[抗蛇毒]

5.治療心血管疾病

AbciximabRePro[血栓]

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美國已上市的部分治療用抗體

名稱治療病種生產(chǎn)公司

OKT3(CD3)腎移植OrthoBiotechRituxan(人源化)

淋巴瘤IDECHexceptin(人源化)

乳腺癌Gen