高三一輪復(fù)習(xí)生物：生物技術(shù)實踐知識清單

大一輪復(fù)習(xí)※選修一《生物技術(shù)實踐》★基礎(chǔ)過關(guān)專題1.1果酒和果醋的制作1.果酒制作菌種是真核生殖。酵母菌在有氧條件下進行呼吸，無氧條件下進行發(fā)酵產(chǎn)生。（1）有氧呼吸反應(yīng)式：)2.果醋制作菌種是生物，代謝類型為，以方式增殖。原理如下：（1）當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將果汁中的分解成。（2）當(dāng)時，醋酸菌將變?yōu)?，再變?yōu)椤?.葡萄酒的自然發(fā)酵，菌種來自；工業(yè)釀酒可在條件下人工接種4.葡萄酒呈現(xiàn)深紅色的原因：。。。7.喝剩的果酒放置一段時間后會變酸，原因是。8.制作果醋時，變酸的酒表面常常有一層白色菌膜，這層白色菌膜是形成的。（2）沖洗的目的是，但不能，以。1/3的空間，目的是。（4）果酒制作溫度控制在，時間為，時間為。（5）果酒制作，果醋制作。10.果酒和果醋制作的發(fā)酵裝置（見右圖）（1）充氣口：在酒精發(fā)酵時應(yīng)；在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵泵入。（2）排氣口：酒精發(fā)酵時排出；醋酸發(fā)酵時排出。排氣口連接長而彎曲的膠管目的是。注：若使用帶蓋的瓶子制果酒果醋：在發(fā)酵過程中，每隔12h左右將瓶蓋一次，以放出，此后再將瓶蓋擰緊。當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)生后，再將瓶蓋，蓋上一層，進行制果醋的發(fā)酵。11.酒精檢測：在與酒精反應(yīng)呈。專題1.2腐乳的制作1.腐乳制作的菌種主要是，絲狀生殖。3.腐乳制作流程：讓豆腐上長出毛霉→→裝瓶→密封腌制。 （1）豆腐含水量為左右為宜。含水量過高，豆腐；含水量過低，不利于。，保持一定后豆腐塊表面布滿菌絲；現(xiàn)代腐乳生產(chǎn)是在嚴格條件下將優(yōu)良（3）加鹽方法：，隨層數(shù)加高而鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些，以有效。不足以(苦咸)。（4）鹵湯由及各種組成。鹵湯中酒的含量一般控制在左右，酒具有香辛料具有，可能導(dǎo)致豆腐。（5）密封腌制：創(chuàng)造環(huán)境，利用產(chǎn)生的酶繼續(xù)發(fā)酵，促進腐乳的后熟。專題1.3制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量1.泡菜制作的菌種是，來自。常見乳酸菌有和，其中常用于生產(chǎn)酸奶。2.乳酸菌屬于生物，代謝類型為，以方式增殖。3.泡菜制作原理：乳酸菌在條件下進行發(fā)酵，將分解成。（反應(yīng)式：）4.含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶，是因為。5.選用的蔬菜要易被還原為。膳食中的絕大部分亞硝酸鹽在人體內(nèi)以“”。6.配制鹽水：清水與鹽的質(zhì)量比為，鹽水要。煮沸的目的是。9.泡菜中亞硝酸鹽的含量與。一般在腌制后，亞硝酸鹽的含量開始。10.亞硝酸鹽含量的測定（1）方法：。（2）原理：在酸化條件下，亞硝酸鹽與發(fā)生反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成色染料。將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的進行目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。（3）步驟：配制溶液→制備→制備→。11.發(fā)酵過程中應(yīng)定期測定亞硝酸鹽的含量，原因是。，原因是。專題2.1微生物的實驗室培養(yǎng)1.培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分為培養(yǎng)基和培養(yǎng)基，區(qū)別是固體培養(yǎng)基中加入了凝固劑；按用途分為培養(yǎng)基和培養(yǎng)基。微生物可在培養(yǎng)基表面形成肉眼可見的，固體培養(yǎng)基可用于微生物的和。液體培養(yǎng)基可用于細菌的，目的是。2.各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有。另外，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對、以及pH，培養(yǎng)細菌時需將pH3.無菌技術(shù)的目的是，關(guān)鍵是創(chuàng)造。4.消毒和滅菌（1）消毒：用的物理或化學(xué)方法殺死物體微生物，芽孢和孢子。常用方法：法；牛奶用法，既殺死牛奶中，又使牛奶中的不被破壞；用擦拭雙手、消毒水源是法；接種室、接種箱或超凈工作臺用法。（2）滅菌：用的理化因素殺死物體常用方法：滅菌：在火焰的層灼燒，可的滅菌，如。滅菌：工具為，如等耐高溫、需保持干燥的物品。滅菌：工具為高壓蒸汽滅菌鍋，如。此法。5.制備培養(yǎng)基的步驟：計算→稱量→→(調(diào)節(jié))→滅菌→。（1）在pHpH易（2）培養(yǎng)基滅菌，培養(yǎng)皿滅菌。（3）平板冷卻凝固后需，目的是。（6）微生物接種方法(分離純化細菌方法)（1）到培養(yǎng)基表面。在數(shù)次劃線后，可以分離到由；劃線結(jié)束灼燒：。灼燒次數(shù)＝劃線次數(shù)＋。②在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進行劃線，以免。③每次從上一次劃線的末端開始，目的是。（2）：用(工具)將的菌液分別地涂布到培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)。在的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成，從而能在培養(yǎng)基表面形成。②梯度稀釋中，每次取樣前需用手指輕壓移液管橡皮頭，吹吸三次，目的是。③涂布器浸在酒精中的主要目的是；為保證菌液均勻分布，應(yīng)在涂布時。注：①以上操作均在旁進行，防止。②若要分離并統(tǒng)計活菌數(shù)，應(yīng)選用。③平板劃線法不能用于活菌計數(shù)的原因是。（7）菌種保藏：頻繁使用的菌種用(冷藏室)，但保存時間不長，因為；需長期保存的菌種用(冷凍箱)。專題2.2土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)等)，同時2.選擇培養(yǎng)基：允許的微生物生長，同時其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。例如：以為唯一氮源的培養(yǎng)基可篩選出尿素分解菌；以為唯一碳源的培養(yǎng)基可篩選出纖維素分解菌；以為唯一碳源的培養(yǎng)基可篩選出石油分解菌；缺乏有機碳源的培養(yǎng)基可篩選出；缺乏氮源的培養(yǎng)基可篩選出；加入抗生素的培養(yǎng)基可篩選出等真菌。3.微生物計數(shù)方法（1）（活菌計數(shù)法），就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②原則：設(shè)置，同一稀釋度下至少涂布個平板，增強實驗說服力和準(zhǔn)確性；重復(fù)組結(jié)果應(yīng)一致。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在的平板進行計數(shù)。＝(個/mL代表某一稀釋度下平板上生長的，V代表涂布平板時所用的(一般為)，M代表。。⑤需要設(shè)置作為空白對照，目的是。 （2）顯微鏡直接計數(shù)法①主要用具：和。③計算公式：1mL培養(yǎng)液中細胞個數(shù)＝(個/mL)④結(jié)果：估算值比實際值偏大，因為4.實驗流程：土壤取樣→→涂布培養(yǎng)與觀察→計數(shù)。pH接近的、距地表約的土壤層。取一定量土溶于（2）將樣品進行24h下至少計算出樣品中細菌的數(shù)目。用記號筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時，應(yīng)標(biāo)記在。5.的培養(yǎng)基(空白對照)上有菌落生長，說明培養(yǎng)基被雜菌污染。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落的遠大于選擇培養(yǎng)基時，說明選擇培養(yǎng)基具有作用。6.分解尿素的細菌合成的能將尿素分解為，使培養(yǎng)基的增強，pH為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基中加入pH伊紅美藍培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基，大腸桿菌代謝產(chǎn)物會和伊紅、美藍發(fā)生反應(yīng)，使菌落呈現(xiàn)色。專題2.3分解纖維素的微生物的分離1.纖維素是一種多糖，其組成單位是為。纖維素酶是一種，它至少包括三種組分，即。纖維素水解：。2.纖維素分解菌的篩選方法是CR)是一種染料，能與纖維素形成。（1）土壤取樣：選擇的土壤環(huán)境采集土樣。取一定量土溶于中，制成土壤溶液。（2）選擇培養(yǎng)(擴大培養(yǎng)/培養(yǎng)基(用（3）梯度稀釋：目的是。（4）涂布培養(yǎng)：用培養(yǎng)基(物理性質(zhì))、培養(yǎng)基(用途)。為需將培養(yǎng)皿呈狀態(tài)放置。此步也可用法。4.以為唯一碳源的培養(yǎng)基可初步篩選出纖維素分解菌，為進一步確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行實驗。纖維素酶的發(fā)酵方法有和兩種。專題4.1果膠酶在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用1.果膠：（1）作用：組成植物細胞壁以及胞間層的主要組成成分之一。（2）成分：由半乳糖醛酸聚合而成的一種高分子化合物。（3）特點：不溶于水。在果汁加工中，果膠的存在易導(dǎo)致果汁出汁率低，果汁渾濁。2.果膠酶：來源：、和發(fā)酵生產(chǎn)的。（2）作用：①將不溶性的果膠分解成可溶性的，使渾濁的果汁變得②瓦解植物細胞的和，使榨取果汁變得更加容易，提高。（3）組成：是分解果膠的一類酶的總稱，包括等。（4）化學(xué)本質(zhì)：果膠酶是，能被水解掉。3.酶的活性與影響酶活性的因素（1）酶的活性：①概念：指酶②表示方法：酶活性的高低可以用在一定條件下，酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的來表示。③酶反應(yīng)速度的表示方法：來表示。（2）影響酶活性的因素：、等。4.實驗設(shè)計【實驗一】探究溫度(pH)對酶活性的影響（1）實驗變量：自變量：； 因變量：；無關(guān)變量：等。（2）操作方法：在不同下，將一定量的加入一定量的中，反應(yīng)，再將反應(yīng)液。②探究溫度(pH)對酶活性的影響時，不同的溫度(pH)梯度之間就可以作為。（3）判斷果膠酶活性高低的方法①測定單位時間內(nèi)產(chǎn)生果汁的(或)來判斷。獲得的果汁越多，說明果膠酶的活性。②比較果汁的來判斷果膠酶的活性。果汁越澄清，表明果膠酶的活性?！緦嶒灦刻骄抗z酶的用量（1）實驗變量：自變量：；因變量：；無關(guān)變量：等。（2）判斷果膠酶用量是否合適的思路①如果隨著酶的用量增加，過濾得到的果汁體積也增加，說明酶的；②當(dāng)酶的用量增加到某個值后，再增加酶的用量，過濾得到的果汁的體積，說明酶的用量已經(jīng)足夠，那么，這個值就是。專題4.2探討加酶洗衣粉的洗滌效果1.加酶洗衣粉（1）概念：加酶洗衣粉是指含有的洗衣粉。（2）酶制劑①常用種類：、、和四類。②應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的種類是：和。③作用原理：酶制劑能將分解為，使污跡易從衣物上脫落。如堿性蛋白酶能將血漬、奶漬中含有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的或小分子，脂肪酶將脂肪水解成和。④影響酶活性的因素：、和。⑤生產(chǎn)方式：通過生產(chǎn)出能夠、、忍受和的酶。（3）優(yōu)點：加酶洗衣粉降低了和的用量，使洗滌劑朝的方向發(fā)展，減少對的污染。普通洗衣粉中含有磷，含污水的排放可能導(dǎo)致和的大量繁殖，造成水體的(富營養(yǎng)化)。2.實驗設(shè)計【問題1】普通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬洗滌效果的區(qū)別①變量分析：自變量：；因變量：。②對照實驗：對照組：普通洗衣粉＋污染物；實驗組：＋污染物。【問題2】加酶洗衣粉的最適洗滌溫度①變量分析：自變量：；因變量：。②對照實驗：不同實驗組之間的洗滌效果形成?！締栴}3】不同類型的加酶洗衣粉的洗滌效果①變量分析：自變量：；因變量：；無關(guān)變量：污漬的、等。②對照實驗：不同加酶洗衣粉的互為對照。3.判斷洗滌效果的方法和標(biāo)準(zhǔn)：。。專題4.3酵母細胞的固定化和，不能被；反應(yīng)后酶會混在產(chǎn)物中，可能影響。2.固定化酶的應(yīng)用實例——生產(chǎn)高果糖漿（1）反應(yīng)原理：高果糖漿的生產(chǎn)需要使用，它能將葡萄糖轉(zhuǎn)化成。固定在一種顆粒狀的內(nèi)，柱子底端裝上分布著許多小孔的可以自由出入。（3）生產(chǎn)過程：①將與（見右圖）（4）固定化酶的優(yōu)缺點①優(yōu)點：。②缺點：一種酶只能催化一種反應(yīng)，不能催化的酶促反應(yīng)。3.固定化酶和固定化細胞技術(shù)（1）概念：利用方法將固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)。固定。 圖A： 圖B： 圖C：（3）固定化細胞技術(shù)的優(yōu)缺點①優(yōu)點：。②缺點：，大分子物質(zhì)不易進入細胞，反應(yīng)時需要為固定化細胞提供。、、等。本實驗選用4.固定化酵母細胞的實驗操作（1）制備固定化酵母細胞①酵母細胞的活化：向干酵母中加入，調(diào)成糊狀，使其。注：活化就是讓處于的微生物重新狀態(tài)。②配制溶液：濃度為。③配制溶液：溶解海藻酸鈉采用加熱，邊加熱邊。加熱時要用，或者，反復(fù)幾次，直到完全溶化。如果加熱太快，海藻酸鈉會發(fā)生。海藻酸鈉溶液采用法滅菌。④海藻酸鈉溶液與的海藻酸鈉溶液中加入使其混合均勻，再轉(zhuǎn)移至中。注：“冷卻至室溫”的目的是防止。⑤固定化酵母細胞：以恒定的速度CaCl2液形成CaCl2左右。注：CaCl2作用：?！敖?in。（2）用固定化酵母細胞發(fā)酵固定好的酵母細胞()用蒸餾水2～325℃下24h。。葡萄糖溶液作用：。5.固定化酵母細胞實驗操作的結(jié)果分析與評價如果制作的凝膠珠顏色膠珠不是作對照。CaCl2溶液、海藻酸鈉溶液需滅菌。在工業(yè)生產(chǎn)中，細胞的固定化是在嚴格的條件下進行的。專題5.3血紅蛋白的提取和分離1.蛋白質(zhì)分離的理論依據(jù)：蛋白質(zhì)各種，如分子的和、所帶電荷的、溶解度、和對其他分子的等，可以用來分離不同種類的。2.分離蛋白質(zhì)的方法（1）凝膠色譜法①概念：也稱做，是根據(jù)相分離蛋白質(zhì)的有效方法。②凝膠：是一些微小的，這些球體大多數(shù)由構(gòu)成，如或。在小球體內(nèi)部有許多。③原理：當(dāng)不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時，相對分子質(zhì)量的蛋白質(zhì)容易進入的通道，路程較長，移動速度，通過凝膠的時間；相對分子質(zhì)量的蛋白質(zhì)進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程，移動速度，通過凝膠的時間。因此可將分離。④分離過程：蛋白質(zhì)混合物上柱→→大分子流動、小分子流動→先收集→后收集。（2）電泳①概念：指帶電粒子在電場作用下發(fā)生的過程。②原理：在一定的下，多肽、核酸等生物大分子的可會帶上或，在電場的作用下，這些帶電分子會向著與其所的電極移動。③影響電泳速率的因素：待分離樣品中各種分子的差異以及分子本身的、的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的。帶電性質(zhì)決定，分子大小決定。④方法：常用的電泳方法有電泳和電泳。A.瓊脂糖凝膠電泳：由于瓊脂糖本身不帶電荷，所以，各種分子在電場中的取決于各種分子所帶的差異及、的不同，從而得以分離。B.聚丙烯酰胺凝膠電泳：蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶及等因素。為了消除凈電荷對遷移率的影響，可以在凝膠中加入。SDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)－SDS復(fù)合物，SDS所帶的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，因而掩蓋了電荷差別，使電泳遷移率完全取決于。SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中，小分子的移動速度，大分子的移動速度，分子向移動。注：在測定蛋白質(zhì)分子量時通常使用電泳。SDS能使蛋白質(zhì)發(fā)生。由幾條肽鏈組成的蛋白質(zhì)復(fù)合體在SDS的作用下會解聚成，因此測定的結(jié)果只是的分子量。3.緩沖溶液（1）作用：在一定范圍內(nèi)，抵制外界的和對溶液pH的影響，維持基本不變。（2）配制：通常由1～2種溶解于水中配制而成，通過調(diào)節(jié)緩沖劑的就可以得到不同pH范圍內(nèi)使用的緩沖液。4.蛋白質(zhì)提取和分離一般分為四步：、、。（1）樣品處理①紅細胞的洗滌目的：(含)，將下層暗紅色的倒入燒杯→加入倍體積的→再離心→重復(fù)次，直至上清液不再呈現(xiàn)→得到純凈紅細胞。注：為防止，在采血容器中要預(yù)先加入抗凝血劑。生理鹽水作用：。洗滌次數(shù)，無法除去血漿蛋白；離心速度和時間②血紅蛋白的釋放a.目的：。40%體積的→磁力攪拌器上攪拌→紅細胞注：蒸餾水作用：。甲苯作用：③分離血紅蛋白溶液a.目的：。b.過程：混合液過濾，除去中靜置片刻→分離出下層的。1層：無色透明的2白色薄層固體，是3層：紅色透明液體，是液；第4層：暗紅色的。（2）粗分離——透析①目的：。②原理：。③方法：將溶液裝入透析袋中，將放入一定量適宜濃度的中，透析12h。（3）純化——凝膠色譜操作①目的：通過法將相對分子質(zhì)量不同于的雜蛋白除去。②過程a.凝膠色譜柱的制作b.凝膠色譜柱的裝填：本實驗使用的是充分溶脹，配成裝填完后，立即用緩沖液洗滌平衡凝膠，使凝膠。c.樣品的加入和洗脫：在色譜柱頂端滴加50cm高操作壓下用緩沖液洗脫，待紅色的5mL。（4）純度鑒定——對分離的蛋白質(zhì)樣品進行純度鑒定，使用最多的方法是電泳。專題6.1植物芳香油的提取1.植物芳香油具有很強的，其組成比較復(fù)雜，主要包括及其。2.植物芳香油的提取方法有和來決定。（1）重新分出和和等揮發(fā)性強的芳香油。水中蒸餾不適用于柑橘和檸檬，因為會導(dǎo)致等問題。（2）壓榨法：通過，壓榨出果皮中的芳香油，主要適用于的提取。3.玫瑰精油的提?。?）玫瑰精油性質(zhì)：化學(xué)性質(zhì)，能隨（2）提取方法：鮮玫瑰花采用法，干玫瑰花采用法。（3）實驗流程：鮮玫瑰花＋清水→蒸餾→油水混合物→玫瑰油。①鮮玫瑰花與清水的質(zhì)量比為。玫瑰花要在花開的采收，因為在此階段花朵最高。②提取效率主要受和在操作中需要通過控制來實現(xiàn)。③蒸餾得到的乳濁液是玫瑰油與水的混合物，加入可增加鹽濃度，促進，分層原因是因為。④油水分層后可用分出油層。⑤油層中有一定的水分，可以加入除水。⑥過濾的目的是(固體Na2SO4)。（3）蒸餾裝置中冷凝管的作用：。4.橘皮精油的提?。?）提取方法：不適于使用水中蒸餾法，因為會產(chǎn)生和等問題，一般采用法。（2）實驗流程：→漂洗→壓榨→→靜置→→橘皮油。①橘皮處理：為了，需要將柑橘皮，并用浸泡10h以上。石灰水浸泡的目的是。②橘皮的壓榨：為了0.25%5%。