如何選配最適用的葉綠素?zé)晒獬上駜x器課件

如何選配最適用的

葉綠素?zé)晒獬上駜x器

EcoLab生態(tài)實(shí)驗(yàn)室葉綠素?zé)晒鈨x發(fā)展現(xiàn)狀連續(xù)激發(fā)式熒光儀DirectFluorometer，PEA脈沖調(diào)制式熒光儀

PulseAmplitudeModulatedFluorometer，PAM雙調(diào)制式熒光儀Double-ModulationFluorometer，F(xiàn)L3500只能獲得數(shù)據(jù)和動力學(xué)曲線圖一般只能測量葉片在進(jìn)行光合相關(guān)突變體篩選時工作量極大葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)的發(fā)展如何根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計選擇合適的葉綠素?zé)晒獬上駜x器型號和配置？如何分辨葉綠素?zé)晒獬上駜x器的優(yōu)劣？測量什么樣品成像面積3.5×3.5cm13×13cm或20×20cm35×35cm20倍/40倍顯微鏡分辨率與靈敏度的競爭關(guān)系分辨率越高越好嗎高靈敏度CCD高分辨率CCD分辨率靈敏度分辨率靈敏度720x56050幀/秒1392x10401幀/秒1024x76810幀/秒696x52025幀/秒464x34420幀/秒348x25650幀/秒Fan，2015Mao，2015光源的選擇光質(zhì)：一般為紅光、藍(lán)光或白光，特殊情況下可能需要綠光、青光、棕色光等光源光強(qiáng)：2000μmol?m–2?s–1的飽和脈沖可能足夠進(jìn)行Fm的測量，但是對于在較高的光照下測量Fm’則可能太低了（Murchie，2013）。Earl和Ennahli（2004）在研究玉米時甚至發(fā)現(xiàn)7500μmol?m–2?s–1以上的飽和脈沖才能測得最大的Fm’。actiniclightSaturatingpulse擬南芥50-1500700-4000水稻400-15006000冬小麥4003000大麥4000高粱2001250西紅柿2500,3500小立碗蘚8504000鱷梨4002000茅膏菜100-18003000室內(nèi)實(shí)驗(yàn)還是野外實(shí)驗(yàn)測量哪些參數(shù)葉綠素?zé)晒鈪?shù)Fv/Fm：測量參數(shù)包括F0，F(xiàn)m，F(xiàn)v，F(xiàn)v/Fm等Kautsky誘導(dǎo)效應(yīng)：F0，F(xiàn)p，F(xiàn)v，F(xiàn)t_Lss，QY，Rfd等熒光參數(shù)熒光淬滅分析：F0，F(xiàn)m，F(xiàn)p，F(xiàn)s，F(xiàn)v，F(xiàn)v/Fm，QY，ΦII，NPQ，qP，Rfd，qN，qL等光響應(yīng)曲線：F0，F(xiàn)m，F(xiàn)v/Fm，QY_Ln，ETR等熒光參數(shù)熒光成像可以測量OJIP嗎OJIP測量對檢測器的要求：100000次/秒目前商用儀器中僅有兩種可以進(jìn)行OJIP熒光成像Jedmowski，2015其他成像功能PAR吸收率成像GFP、YFP等熒光蛋白成像MCF多光譜熒光成像顯微多光譜成像與光譜分析PAR吸收率成像植物光合有效輻射吸收率（PARabsorptivity）：通過紅色光源與紅外光源照射植物樣品，測量植物樣品對每種光源的反射率，根據(jù)公式計算得出光合有效輻射吸收率。其計算公式為：Ulstrup，2007MCF多光譜熒光成像Chaerle，2006作物病害早期無損檢測與葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)結(jié)合共同研究Pérez-Bueno，2015FKM多光譜熒光動態(tài)顯微成像技術(shù)FluorCam熒光成像技術(shù)生物熒光顯微成像技術(shù)多光譜熒光測量技術(shù)光譜分析技術(shù)鎘、銅、鋅、鉻等重金屬脅迫可以嚴(yán)重影響植物的光合能力，F(xiàn)luorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)能夠研究重金屬對植物葉片或其他器官宏觀上的傷害，而FKM技術(shù)可以直觀地研究單個植物細(xì)胞里重金屬積累對葉綠體的影響及不同細(xì)胞之間的差異。（Küpper，2007）忍冬葉片橫切——

柵欄組織和海綿組織擬南芥表面成像——

細(xì)胞內(nèi)的葉綠體分布表皮細(xì)胞成像——

氣孔與葉綠體玉米表皮細(xì)胞熒光成像葉綠素?zé)晒獾墓庾V分析軟件基礎(chǔ)功能光源及CCD調(diào)節(jié)自動樣品識別計算參數(shù)及成像軟件高級功能圖像智能識別手動圖像識別熒光值分級無人值守自