藥物的雜質(zhì)分析課件

有效性

針對某些藥效進(jìn)行檢查的項目利福平的結(jié)晶度，影響生物利用度均一性

含量均一性如“含量均勻度”試驗安全性

異常毒性、熱原、降壓物質(zhì)和無菌等純度要求

對雜質(zhì)限量進(jìn)行檢查

有效性針對某些藥效進(jìn)行檢查的項目1§1藥物的雜質(zhì)及其來源雜質(zhì)（impurity):藥物中存在的無治療作用影響藥物穩(wěn)定性和療效，對人體健康有害的物質(zhì);§1藥物的雜質(zhì)及其來源雜質(zhì)（impurity):2一.藥物的純度藥物的純凈程度；外觀性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢測和含量測定等綜合評定控制藥物純度的重要方面—雜質(zhì)檢查（純度檢查）一.藥物的純度藥物的純凈程度；3二.雜質(zhì)的來源與分類1.雜質(zhì)的來源主要來源生產(chǎn)過程中引入貯藏過程中引入二.雜質(zhì)的來源與分類主要來源生產(chǎn)過程中引入貯藏過程中引入4（1）生產(chǎn)過程中引入原料藥不純原料反應(yīng)不完全反應(yīng)中間體或副產(chǎn)物在精制時未除凈生產(chǎn)中所用溶劑、試劑的殘留與生產(chǎn)器皿接觸可能帶入雜質(zhì)化學(xué)原料精制不完全植物原料中的結(jié)構(gòu)類似物分離不完全由動物臟器提取的生物藥品中一些組織分離不完全（1）生產(chǎn)過程中引入原料藥不純原料反應(yīng)不完全化學(xué)原料精制不完5如：甾體激素類藥物由甾體母核或結(jié)構(gòu)類似的其他甾體激素經(jīng)結(jié)構(gòu)改造制備可能帶入原料、中間體、異構(gòu)體、降解產(chǎn)物及殘留溶劑

如：腎上腺素的合成經(jīng)過中間體腎上腺酮，精制時酮不能除盡。如：甾體激素類藥物6（2）貯存過程中引入

貯存時間過長包裝及保管不當(dāng)

如：青霉素遇堿易水解為青霉噻唑酸，受熱進(jìn)一步分解為青霉胺和青霉醛使青霉素失效。（2）貯存過程中引入貯存時間過長如：青霉素遇堿易水解72.雜質(zhì)的分類（1）按雜質(zhì)理化性質(zhì)分為

無機(jī)雜質(zhì)：Cl－、、S2－、CN－、重金屬等有機(jī)雜質(zhì)：有機(jī)藥物中引入的原料、中間體、副產(chǎn)物、分解物、異構(gòu)體、殘留溶劑等；

化學(xué)結(jié)構(gòu)與活性成分類似—有關(guān)物質(zhì)（relatedsubstance）殘留溶劑（residualsolvents）：生產(chǎn)過程中使用的有機(jī)或無機(jī)液體；具有已知毒性2.雜質(zhì)的分類無機(jī)雜質(zhì)：Cl－、、S2－、CN－、重金屬8（2）按來源分為一般雜質(zhì)：多種藥物生產(chǎn)或貯存過程中易引入雜質(zhì)。如：酸、堿、水分、氯化物、硫酸鹽、重金屬、砷鹽、硫化物、氰化物、鐵鹽、銨鹽、易炭化物、干燥失重、熾灼殘渣、溶液顏色與澄清度、有機(jī)溶劑殘留量等。特殊雜質(zhì)：該藥物生產(chǎn)或貯存過程中，據(jù)藥物性質(zhì)、生產(chǎn)方法和工藝條件，有可能引入的雜質(zhì)；隨藥物不同而改變?nèi)纾阂葝u素中含氮量、多糖類物質(zhì)中單糖等。（2）按來源分為9

⑶按雜質(zhì)毒性分為毒性雜質(zhì)：如重金屬、砷鹽信號雜質(zhì)：一般無毒，含量多少反映藥物的純度⑶按雜質(zhì)毒性分為10三.藥物的雜質(zhì)限量藥品的雜質(zhì)含量越少越好。藥物中雜質(zhì)完全除去，造成生產(chǎn)上操作困難，降低收率，增加成本。藥物的效用、調(diào)制和貯藏考慮沒必要。不對人體有害原則下，允許藥物中存在一定量雜質(zhì)，其最高量—“雜質(zhì)限量”。三.藥物的雜質(zhì)限量111.雜質(zhì)檢查的方法限量檢查（limittest）：檢查雜質(zhì)是否超過限量雜質(zhì)的定量測定1.雜質(zhì)檢查的方法12對照法：兩支納氏比色管平行試驗樣品管：一定量供試品對照管：限度量的待檢雜質(zhì)的對照品比較兩管對照法：兩支納氏比色管平行試驗樣品管：一定量供試品對照管：限132.雜質(zhì)限量藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量，即：

L：雜質(zhì)限量；S：供試品量；C,V：標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,體積；

2.雜質(zhì)限量L：雜質(zhì)限量；S：供試品量；14§2藥物中雜質(zhì)的檢查方法藥物與雜質(zhì)物理性質(zhì)差異：揮發(fā)性、顏色、溶解性、光學(xué)、色譜行為雜質(zhì)檢查原理藥物與雜質(zhì)化學(xué)性質(zhì)差異：酸堿性、氧化-還原性、雜質(zhì)專屬反應(yīng)（顏色，沉淀或氣體）§2藥物中雜質(zhì)的檢查方法15一.化學(xué)法利用藥物和雜質(zhì)在化學(xué)性質(zhì)上的差異來進(jìn)行的。如阿司匹林中游離水楊酸的檢查1.檢查原理阿司匹林+Fe3+—→×（無酚羥基）水楊酸+Fe3+—→紫堇色（有酚羥基）一.化學(xué)法16

30內(nèi)比色，防止操作時間過長造成阿司匹林水解；對照液中加1mL冰醋酸:與樣品液條件一致。

3.雜質(zhì)限量2.操作方法30內(nèi)比色，防止操作時間過長造成阿司匹林水解；2.操作17二.色譜法（TLC）

較靈敏、簡便、快速，不需特殊設(shè)備，各國藥典用于雜質(zhì)限量檢查1.雜質(zhì)對照品法：已知雜質(zhì)并能制備雜質(zhì)對照品供試品溶液;一定濃度雜質(zhì)對照品溶液;分別點樣于同一硅膠薄層板上，展開、定位、檢查；供試品中含雜質(zhì)斑點≯相應(yīng)雜質(zhì)對照斑點；須雜質(zhì)對照品，應(yīng)用上受限制。二.色譜法（TLC）182.供試品自身對照法:雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不確定或無雜質(zhì)對照品供試品溶液按限量要求稀釋至一定濃度作為對照溶液；供試品溶液和對照品溶液分別點樣于同一硅膠薄層板上，展開、定位、檢查；供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點≯對照溶液所顯主斑點顏色；簡便易行，不需制備對照品；可配制幾種限量對照品溶液，使用率很高。2.供試品自身對照法:雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不確定或無雜質(zhì)對照品19如：吡羅昔康中有關(guān)物質(zhì)的檢查供試液：20mg/mL對照液：0.2mg/mL(供試液稀釋100倍)供試液與對照液點于同一薄層板;判斷:供試品溶液雜質(zhì)斑點顏色≯對照液主斑點顏色供試液：20mg/mL203.對照藥物法：與供試品相同藥物作對照品。供試品與其相同藥物對照品分別點樣于同一薄層板上，展開顯色，供試品雜質(zhì)斑點≯對照藥物中雜質(zhì)斑點數(shù)，顏色不得更深。對照品與供試品相同，克服2法中對照品與雜質(zhì)斑點有時的不可比性。3.對照藥物法：與供試品相同藥物作對照品。21HPLC檢查有關(guān)物質(zhì)20世紀(jì)90年代末期，多數(shù)化學(xué)藥物用HPLC替代TLC進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢查UVorDAD,LC-MS,LC-NMRHPLC檢查有關(guān)物質(zhì)20世紀(jì)90年代末期，多數(shù)化學(xué)藥物用HP22有關(guān)物質(zhì)檢查用HPLC方法的建立了解原料藥物的合成路線或制劑工藝仿制藥：在各國藥典中檢索，以藥典方法為模板藥典收載該藥物或制劑的HPLC含量測定方法，據(jù)原料藥的合成路線或制劑工藝，對該含量方法改進(jìn)藥典或藥品標(biāo)準(zhǔn)不收載該藥物，文獻(xiàn)中選一個較通用方法新藥或仿制藥，文獻(xiàn)中無HPLC法檢查有關(guān)物質(zhì)，據(jù)藥物的結(jié)構(gòu)選取與該藥物結(jié)構(gòu)類似的藥物分析方法為模板對選定的色譜條件進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗有關(guān)物質(zhì)檢查用HPLC方法的建立了解原料藥物的合成路線或制劑23有關(guān)物質(zhì)檢查用HPLC方法的系統(tǒng)適用性試驗指標(biāo)：理論塔板數(shù)、分離度、拖尾因子和重現(xiàn)性國內(nèi)藥品標(biāo)準(zhǔn)中多以理論塔板數(shù)為評價標(biāo)準(zhǔn)原料藥：據(jù)藥物的合成工藝對主成分與起始原料、各中間體、副產(chǎn)物間的分離度進(jìn)行考察制劑：各輔料是否干擾對雜質(zhì)的檢出，如有干擾，用其他無干擾的輔料替代或?qū)ιV系統(tǒng)調(diào)整（流動相中水相和有機(jī)相的比例，流動相pH)有關(guān)物質(zhì)檢查用HPLC方法的系統(tǒng)適用性試驗指標(biāo)：理論塔板數(shù)、24供試品溶液的穩(wěn)定性將樣品在溶液中的降解產(chǎn)物錯判為樣品中的有關(guān)物質(zhì)樣品在溶液中的穩(wěn)定性影響有關(guān)物質(zhì)的檢查優(yōu)化流動相條件，選擇穩(wěn)定的分離系統(tǒng)較低的柱溫：溶液的穩(wěn)定性與溫度成正比樣品在反向色譜系統(tǒng)中不穩(wěn)定，采用正相色譜系統(tǒng)分離；優(yōu)化的流動相下，采用較短的色譜柱、較高的流速以減少分析時間臨用現(xiàn)制多份樣品溶液，每份樣品進(jìn)樣一次供試品溶液的穩(wěn)定性將樣品在溶液中的降解產(chǎn)物錯判為樣品中的有關(guān)25氧氟沙星中有關(guān)物質(zhì)的檢查檢查氧氟沙星在生產(chǎn)和貯藏過程中可能引入副產(chǎn)物及結(jié)構(gòu)不清的有關(guān)物質(zhì)Ch.P采用HPLC法供試品溶液：1.2mg/mL；對照溶液：2.4μg/mL。C18；NH4Ac,NaClO4(pH2.2)－乙腈(85:15)；294nm；10μL單個雜質(zhì)峰面積≯對照溶液主峰面積(0.2％)；各雜質(zhì)峰面積和≯2.5倍對照溶液主峰面積(0.5％)氧氟沙星中有關(guān)物質(zhì)的檢查檢查氧氟沙星在生產(chǎn)和貯藏過程中可能引26藥物的雜質(zhì)分析課件27

三.光學(xué)法1.UV藥物和雜質(zhì)對光的選擇吸收的差異；地蒽酚中二羥基蒽醌的檢查二羥基蒽醌：λmax432nm；地蒽酚：該波長下無吸收。三.光學(xué)法28二羥基蒽醌的

規(guī)定：A432≯0.12；雜質(zhì)限量≤2.0%。二羥基蒽醌的規(guī)定：A432≯0.12；292.IR藥物中無效或低效晶形的檢查晶形結(jié)構(gòu)不同，鍵長、鍵角發(fā)生不同程度變化某些特征峰的頻率、峰形和強(qiáng)度差異。2.IR30四．藥物中雜質(zhì)檢查示例（無機(jī)雜質(zhì)和殘留溶劑）（一）氯化物檢查法

1.原理

（白色渾濁）

與一定量標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液同條件下產(chǎn)生的AgCl比較渾濁程度;標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液濃度：10gCl/mL四．藥物中雜質(zhì)檢查示例（無機(jī)雜質(zhì)和殘留溶劑）312.操作方法樣品管對照管

2.操作方法樣品管對照管323.注意事項及討論(1)平行試驗(2)反應(yīng)最佳條件①硝酸酸性②氯化物檢測范圍:50mL供試液中含Cl0.05～

0.08mg（相當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液5.0～8.0mL）(3)觀察比較

①襯于黑色背景自上而下觀察；②暗處放置。3.注意事項及討論33二.重金屬檢查法1.重金屬的概念實驗條件下,與硫代乙酰胺或硫化鈉作用呈色的金屬。如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn實驗條件：溶液pH。硫代乙酰胺為顯色劑：溶于水、稀酸、乙醇的藥物，pH3.0～3.5；硫化鈉為顯色劑：溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中產(chǎn)生沉淀的藥物；檢查重金屬時以Pb為代表。二.重金屬檢查法342.檢查原理Ch.P規(guī)定四種重金屬檢查方法。第一種適用溶于水、稀酸、乙醇的藥物，最常用方法。原理：

（黃色到棕黑色）與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液同法處理所呈顏色比較2.檢查原理353.操作方法樣品管對照管3.操作方法樣品管對照管364.討論（1）標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液：Pb(NO3)2配制貯備液；加硝酸防鉛鹽水解；臨用前稀釋成10μgPb/mL。（2）硫代乙酰胺試液實驗條件下硫代乙酰胺水解產(chǎn)生H2S（3）溶液pHpH3.0～3.5，呈色較完全；（4）觀察比較：白色背景由上向下觀察。

4.討論37

三.砷鹽檢查法（古蔡氏法）1.原理金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)氫，與藥物中微量砷鹽反應(yīng)生成揮發(fā)性砷化氫，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑，與同條件下一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所生成的砷斑比較。反應(yīng)式如下：三.砷鹽檢查法（古蔡氏法）382.操作：砷鹽檢查在檢砷瓶中進(jìn)行。

HgBr2試紙PbAc2棉花樣品(or標(biāo)準(zhǔn)砷溶液),KITS、酸性SnCl2TS、HCl、Zn粒樣品對照2.操作：砷鹽檢查在檢砷瓶中進(jìn)行。HgBr2試紙樣品對393.討論(1)標(biāo)準(zhǔn)砷溶液As2O3配制貯備液，臨用前稀釋成1μgAs/mL(2)試劑的作用①KI作用：還原劑，As5+→As3+②酸性SnCl2作用a.As5+→As3+3.討論40

b.KI→I2→I－

Zn2+不斷被消耗使生成AsH3的反應(yīng)向右進(jìn)行。b.KI→I2→I－Zn2+不斷被消耗使生成AsH3的41③PbAc2棉花作用：排除硫化物干擾。樣品或Zn粒中含硫化物時，酸性溶液中產(chǎn)生H2S氣體能與HgBr2試紙作用產(chǎn)生色斑。H2S與PbAc2反應(yīng)生成PbS沉淀留在棉花上，不與HgBr2反應(yīng)。③PbAc2棉花作用：排除硫化物干擾。H2S與PbAc2反應(yīng)42(3)反應(yīng)最佳條件①Zn粒大?。和ㄟ^1號篩（850～2000m）；用量：2g；不含砷；②溶液酸度：2mol/LHCl；③反應(yīng)時間及溫度：25～40C，反應(yīng)45min。(3)反應(yīng)最佳條件43有效性

針對某些藥效進(jìn)行檢查的項目利福平的結(jié)晶度，影響生物利用度均一性

含量均一性如“含量均勻度”試驗安全性

異常毒性、熱原、降壓物質(zhì)和無菌等純度要求

對雜質(zhì)限量進(jìn)行檢查

有效性針對某些藥效進(jìn)行檢查的項目44§1藥物的雜質(zhì)及其來源雜質(zhì)（impurity):藥物中存在的無治療作用影響藥物穩(wěn)定性和療效，對人體健康有害的物質(zhì);§1藥物的雜質(zhì)及其來源雜質(zhì)（impurity):45一.藥物的純度藥物的純凈程度；外觀性狀、理化常數(shù)、雜質(zhì)檢測和含量測定等綜合評定控制藥物純度的重要方面—雜質(zhì)檢查（純度檢查）一.藥物的純度藥物的純凈程度；46二.雜質(zhì)的來源與分類1.雜質(zhì)的來源主要來源生產(chǎn)過程中引入貯藏過程中引入二.雜質(zhì)的來源與分類主要來源生產(chǎn)過程中引入貯藏過程中引入47（1）生產(chǎn)過程中引入原料藥不純原料反應(yīng)不完全反應(yīng)中間體或副產(chǎn)物在精制時未除凈生產(chǎn)中所用溶劑、試劑的殘留與生產(chǎn)器皿接觸可能帶入雜質(zhì)化學(xué)原料精制不完全植物原料中的結(jié)構(gòu)類似物分離不完全由動物臟器提取的生物藥品中一些組織分離不完全（1）生產(chǎn)過程中引入原料藥不純原料反應(yīng)不完全化學(xué)原料精制不完48如：甾體激素類藥物由甾體母核或結(jié)構(gòu)類似的其他甾體激素經(jīng)結(jié)構(gòu)改造制備可能帶入原料、中間體、異構(gòu)體、降解產(chǎn)物及殘留溶劑

如：腎上腺素的合成經(jīng)過中間體腎上腺酮，精制時酮不能除盡。如：甾體激素類藥物49（2）貯存過程中引入

貯存時間過長包裝及保管不當(dāng)

如：青霉素遇堿易水解為青霉噻唑酸，受熱進(jìn)一步分解為青霉胺和青霉醛使青霉素失效。（2）貯存過程中引入貯存時間過長如：青霉素遇堿易水解502.雜質(zhì)的分類（1）按雜質(zhì)理化性質(zhì)分為

無機(jī)雜質(zhì)：Cl－、、S2－、CN－、重金屬等有機(jī)雜質(zhì)：有機(jī)藥物中引入的原料、中間體、副產(chǎn)物、分解物、異構(gòu)體、殘留溶劑等；

化學(xué)結(jié)構(gòu)與活性成分類似—有關(guān)物質(zhì)（relatedsubstance）殘留溶劑（residualsolvents）：生產(chǎn)過程中使用的有機(jī)或無機(jī)液體；具有已知毒性2.雜質(zhì)的分類無機(jī)雜質(zhì)：Cl－、、S2－、CN－、重金屬51（2）按來源分為一般雜質(zhì)：多種藥物生產(chǎn)或貯存過程中易引入雜質(zhì)。如：酸、堿、水分、氯化物、硫酸鹽、重金屬、砷鹽、硫化物、氰化物、鐵鹽、銨鹽、易炭化物、干燥失重、熾灼殘渣、溶液顏色與澄清度、有機(jī)溶劑殘留量等。特殊雜質(zhì)：該藥物生產(chǎn)或貯存過程中，據(jù)藥物性質(zhì)、生產(chǎn)方法和工藝條件，有可能引入的雜質(zhì)；隨藥物不同而改變?nèi)纾阂葝u素中含氮量、多糖類物質(zhì)中單糖等。（2）按來源分為52

⑶按雜質(zhì)毒性分為毒性雜質(zhì)：如重金屬、砷鹽信號雜質(zhì)：一般無毒，含量多少反映藥物的純度⑶按雜質(zhì)毒性分為53三.藥物的雜質(zhì)限量藥品的雜質(zhì)含量越少越好。藥物中雜質(zhì)完全除去，造成生產(chǎn)上操作困難，降低收率，增加成本。藥物的效用、調(diào)制和貯藏考慮沒必要。不對人體有害原則下，允許藥物中存在一定量雜質(zhì)，其最高量—“雜質(zhì)限量”。三.藥物的雜質(zhì)限量541.雜質(zhì)檢查的方法限量檢查（limittest）：檢查雜質(zhì)是否超過限量雜質(zhì)的定量測定1.雜質(zhì)檢查的方法55對照法：兩支納氏比色管平行試驗樣品管：一定量供試品對照管：限度量的待檢雜質(zhì)的對照品比較兩管對照法：兩支納氏比色管平行試驗樣品管：一定量供試品對照管：限562.雜質(zhì)限量藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量，即：

L：雜質(zhì)限量；S：供試品量；C,V：標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,體積；

2.雜質(zhì)限量L：雜質(zhì)限量；S：供試品量；57§2藥物中雜質(zhì)的檢查方法藥物與雜質(zhì)物理性質(zhì)差異：揮發(fā)性、顏色、溶解性、光學(xué)、色譜行為雜質(zhì)檢查原理藥物與雜質(zhì)化學(xué)性質(zhì)差異：酸堿性、氧化-還原性、雜質(zhì)專屬反應(yīng)（顏色，沉淀或氣體）§2藥物中雜質(zhì)的檢查方法58一.化學(xué)法利用藥物和雜質(zhì)在化學(xué)性質(zhì)上的差異來進(jìn)行的。如阿司匹林中游離水楊酸的檢查1.檢查原理阿司匹林+Fe3+—→×（無酚羥基）水楊酸+Fe3+—→紫堇色（有酚羥基）一.化學(xué)法59

30內(nèi)比色，防止操作時間過長造成阿司匹林水解；對照液中加1mL冰醋酸:與樣品液條件一致。

3.雜質(zhì)限量2.操作方法30內(nèi)比色，防止操作時間過長造成阿司匹林水解；2.操作60二.色譜法（TLC）

較靈敏、簡便、快速，不需特殊設(shè)備，各國藥典用于雜質(zhì)限量檢查1.雜質(zhì)對照品法：已知雜質(zhì)并能制備雜質(zhì)對照品供試品溶液;一定濃度雜質(zhì)對照品溶液;分別點樣于同一硅膠薄層板上，展開、定位、檢查；供試品中含雜質(zhì)斑點≯相應(yīng)雜質(zhì)對照斑點；須雜質(zhì)對照品，應(yīng)用上受限制。二.色譜法（TLC）612.供試品自身對照法:雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不確定或無雜質(zhì)對照品供試品溶液按限量要求稀釋至一定濃度作為對照溶液；供試品溶液和對照品溶液分別點樣于同一硅膠薄層板上，展開、定位、檢查；供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點≯對照溶液所顯主斑點顏色；簡便易行，不需制備對照品；可配制幾種限量對照品溶液，使用率很高。2.供試品自身對照法:雜質(zhì)結(jié)構(gòu)不確定或無雜質(zhì)對照品62如：吡羅昔康中有關(guān)物質(zhì)的檢查供試液：20mg/mL對照液：0.2mg/mL(供試液稀釋100倍)供試液與對照液點于同一薄層板;判斷:供試品溶液雜質(zhì)斑點顏色≯對照液主斑點顏色供試液：20mg/mL633.對照藥物法：與供試品相同藥物作對照品。供試品與其相同藥物對照品分別點樣于同一薄層板上，展開顯色，供試品雜質(zhì)斑點≯對照藥物中雜質(zhì)斑點數(shù)，顏色不得更深。對照品與供試品相同，克服2法中對照品與雜質(zhì)斑點有時的不可比性。3.對照藥物法：與供試品相同藥物作對照品。64HPLC檢查有關(guān)物質(zhì)20世紀(jì)90年代末期，多數(shù)化學(xué)藥物用HPLC替代TLC進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢查UVorDAD,LC-MS,LC-NMRHPLC檢查有關(guān)物質(zhì)20世紀(jì)90年代末期，多數(shù)化學(xué)藥物用HP65有關(guān)物質(zhì)檢查用HPLC方法的建立了解原料藥物的合成路線或制劑工藝仿制藥：在各國藥典中檢索，以藥典方法為模板藥典收載該藥物或制劑的HPLC含量測定方法，據(jù)原料藥的合成路線或制劑工藝，對該含量方法改進(jìn)藥典或藥品標(biāo)準(zhǔn)不收載該藥物，文獻(xiàn)中選一個較通用方法新藥或仿制藥，文獻(xiàn)中無HPLC法檢查有關(guān)物質(zhì)，據(jù)藥物的結(jié)構(gòu)選取與該藥物結(jié)構(gòu)類似的藥物分析方法為模板對選定的色譜條件進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗有關(guān)物質(zhì)檢查用HPLC方法的建立了解原料藥物的合成路線或制劑66有關(guān)物質(zhì)檢查用HPLC方法的系統(tǒng)適用性試驗指標(biāo)：理論塔板數(shù)、分離度、拖尾因子和重現(xiàn)性國內(nèi)藥品標(biāo)準(zhǔn)中多以理論塔板數(shù)為評價標(biāo)準(zhǔn)原料藥：據(jù)藥物的合成工藝對主成分與起始原料、各中間體、副產(chǎn)物間的分離度進(jìn)行考察制劑：各輔料是否干擾對雜質(zhì)的檢出，如有干擾，用其他無干擾的輔料替代或?qū)ιV系統(tǒng)調(diào)整（流動相中水相和有機(jī)相的比例，流動相pH)有關(guān)物質(zhì)檢查用HPLC方法的系統(tǒng)適用性試驗指標(biāo)：理論塔板數(shù)、67供試品溶液的穩(wěn)定性將樣品在溶液中的降解產(chǎn)物錯判為樣品中的有關(guān)物質(zhì)樣品在溶液中的穩(wěn)定性影響有關(guān)物質(zhì)的檢查優(yōu)化流動相條件，選擇穩(wěn)定的分離系統(tǒng)較低的柱溫：溶液的穩(wěn)定性與溫度成正比樣品在反向色譜系統(tǒng)中不穩(wěn)定，采用正相色譜系統(tǒng)分離；優(yōu)化的流動相下，采用較短的色譜柱、較高的流速以減少分析時間臨用現(xiàn)制多份樣品溶液，每份樣品進(jìn)樣一次供試品溶液的穩(wěn)定性將樣品在溶液中的降解產(chǎn)物錯判為樣品中的有關(guān)68氧氟沙星中有關(guān)物質(zhì)的檢查檢查氧氟沙星在生產(chǎn)和貯藏過程中可能引入副產(chǎn)物及結(jié)構(gòu)不清的有關(guān)物質(zhì)Ch.P采用HPLC法供試品溶液：1.2mg/mL；對照溶液：2.4μg/mL。C18；NH4Ac,NaClO4(pH2.2)－乙腈(85:15)；294nm；10μL單個雜質(zhì)峰面積≯對照溶液主峰面積(0.2％)；各雜質(zhì)峰面積和≯2.5倍對照溶液主峰面積(0.5％)氧氟沙星中有關(guān)物質(zhì)的檢查檢查氧氟沙星在生產(chǎn)和貯藏過程中可能引69藥物的雜質(zhì)分析課件70

三.光學(xué)法1.UV藥物和雜質(zhì)對光的選擇吸收的差異；地蒽酚中二羥基蒽醌的檢查二羥基蒽醌：λmax432nm；地蒽酚：該波長下無吸收。三.光學(xué)法71二羥基蒽醌的

規(guī)定：A432≯0.12；雜質(zhì)限量≤2.0%。二羥基蒽醌的規(guī)定：A432≯0.12；722.IR藥物中無效或低效晶形的檢查晶形結(jié)構(gòu)不同，鍵長、鍵角發(fā)生不同程度變化某些特征峰的頻率、峰形和強(qiáng)度差異。2.IR73四．藥物中雜質(zhì)檢查示例（無機(jī)雜質(zhì)和殘留溶劑）（一）氯化物檢查法

1.原理

（白色渾濁）

與一定量標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液同條件下產(chǎn)生的AgCl比較渾濁程度;標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液濃度：10gCl/mL四．藥物中雜質(zhì)檢查示例（無機(jī)雜質(zhì)和殘留溶劑）742.操作方法樣品管對照管

2.操作方法樣品管對照管753.注意事項及討論(1)平行試驗(2)反應(yīng)最佳條件①硝酸酸性②氯化物檢測范圍:50mL供試液中含Cl0.05～

0.08mg（相當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液5.0～8.0mL）(3)觀察比較

①襯于黑色背景自上而下觀察；②暗處放置。3.注意事項及討論76二.重金屬檢查法1.重金屬的概念實驗條件下,與硫代乙酰胺或硫化鈉作用呈色的金屬。如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn實驗條件：溶液pH。硫代乙酰胺為顯色劑：溶于水、稀酸、乙醇的藥物，pH3.0～