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實(shí)驗(yàn)室生物安全管理
實(shí)驗(yàn)室生物安全管理
1內(nèi)容緒論國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)法律、法規(guī)生物安全實(shí)驗(yàn)室的管理和實(shí)驗(yàn)室安全操作技術(shù)菌(毒)種管理
醫(yī)療廢棄物的管理
內(nèi)容緒論2一、緒論(1)微生物實(shí)驗(yàn)室是開(kāi)展微生物檢驗(yàn)活動(dòng)的特別場(chǎng)所,而且是很獨(dú)特的工作環(huán)境,具有使工作其中或其附近的人們感染相關(guān)傳染病的危險(xiǎn)。1941年Meyer和Eddie發(fā)表了對(duì)美國(guó)74例受布魯氏菌病感染的實(shí)驗(yàn)室工作人員的調(diào)查情況,結(jié)論是:對(duì)培養(yǎng)物、標(biāo)本的操作及吸入含有布魯氏桿菌的灰塵對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員是極其危險(xiǎn)的。多數(shù)病例是由在處理傳染性材料時(shí)不小心或技術(shù)欠佳引起的。一、緒論(1)微生物實(shí)驗(yàn)室是開(kāi)展微生物3一、緒論(2)1949年,Sulkin和Pike發(fā)表了第一篇關(guān)于實(shí)驗(yàn)室感染的系列調(diào)查報(bào)告,總結(jié)了222個(gè)病毒感染病例,其中21例死亡。至少三分之一的病例感染的可能與操作已感染的動(dòng)物和組織有關(guān)。1951年Sulkin和Pike對(duì)5000名實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行了問(wèn)卷調(diào)查,發(fā)表了第二篇系列調(diào)查報(bào)告,在發(fā)病的1342個(gè)病例中,只有三分之一在文章進(jìn)行了分析報(bào)告。在所有報(bào)告的實(shí)驗(yàn)室感染中,布魯氏桿菌病病例最多,連同結(jié)核病、兔熱病、傷寒病和鏈球菌感染占總細(xì)菌感染病例數(shù)的72%,占總感染病例數(shù)的31%,全部病例數(shù)的平均病死率是3%。16%與已知的意外事故有關(guān),主要是嘴吸吸管、針頭和注射器的使用不當(dāng)。1965年對(duì)這一調(diào)查重新做了修訂,增加了641例新的或以前沒(méi)有報(bào)告的病例。1976年再次修訂,共搜集3921例病例。其中布魯氏桿疾病、傷寒、兔熱病、肺結(jié)核、肝炎和委內(nèi)瑞拉馬腦炎是最多見(jiàn)的病例,與已知意外事故有關(guān)的病例不到20%。那些在工作中接觸病原體感染的病例中,80%以上的感染懷疑與暴露在含有傳染因子的氣溶膠有關(guān)。一、緒論(2)1949年,Sulkin和Pike發(fā)表了第4一、緒論(3)1967年Hanson等報(bào)告了428例明顯與實(shí)驗(yàn)室相關(guān)的蟲(chóng)媒病毒感染。原因?qū)嶒?yàn)人員無(wú)意中受感染所致。最常見(jiàn)的傳播途徑是暴露于傳染性氣溶膠。1974年Skinholj發(fā)表的調(diào)查報(bào)告的結(jié)果顯示,丹麥的臨床化驗(yàn)室工作人員肝炎的感染率(2~3/1000),比正常人群高7倍。以上報(bào)告顯示實(shí)驗(yàn)室工作人員發(fā)生相關(guān)病原體感染的危險(xiǎn)性在增加,與正常人群相比實(shí)驗(yàn)室工作人員染患肺結(jié)核、痢疾和肝炎的幾率較高。一、緒論(3)1967年Hanson等報(bào)告了428例明顯5二、國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)法律、法規(guī)(1)人間傳染的高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室和實(shí)驗(yàn)活動(dòng)生物安全審批管理辦法(2006年7月10日衛(wèi)生部部務(wù)會(huì)議通過(guò)2006年8月15日衛(wèi)生部令第50號(hào)發(fā)布自發(fā)布之日起施行)病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全環(huán)境管理辦法(2006年3月2日國(guó)家環(huán)??偩?006年第二次局務(wù)會(huì)議通過(guò)2006年3月8日國(guó)家環(huán)保總局第32號(hào)公布自2006年5月1日起施行)人間傳染的病原微生物名錄(2006年1月11日衛(wèi)科教發(fā)[2006]15號(hào))可感染人類(lèi)的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定(2005年11月24日衛(wèi)生部部務(wù)會(huì)議通過(guò)2005年12月28日衛(wèi)生部令45號(hào)發(fā)布自2006年2月1日起施行)病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例(2004年11月5日國(guó)務(wù)院第69次常務(wù)會(huì)議通過(guò)2004年11月12日國(guó)務(wù)院令第424號(hào)公布自公布之日起施行)二、國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)法律、法規(guī)(1)人間傳染的高致病性6二、國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)法律、法規(guī)(2)醫(yī)療廢物管理行政處罰辦法(2004年5月27日衛(wèi)生部、環(huán)保總局令第21號(hào)公布自2004年6月1日起施行)衛(wèi)生部、勞動(dòng)和社會(huì)保障部“關(guān)于保障接觸病毒或細(xì)菌科研人員醫(yī)療服務(wù)有關(guān)問(wèn)題的通知”(2004年5月9日衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2004]144號(hào))醫(yī)療廢物集中處置技術(shù)規(guī)范(2003年12月26日環(huán)發(fā)[2003]206號(hào))醫(yī)療廢物專(zhuān)用包裝物、容器標(biāo)準(zhǔn)和警示標(biāo)示規(guī)定(2003年11月20日環(huán)發(fā)[2003]188號(hào))醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法(2003年8月14日衛(wèi)生部部務(wù)會(huì)議通過(guò)2003年10月15日衛(wèi)生部令地6號(hào)發(fā)布自發(fā)布之日起施行)醫(yī)療廢物分類(lèi)目錄(2003年10月10日衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2003]287號(hào))醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例(2003年6月4日國(guó)務(wù)院第十次常務(wù)會(huì)議通過(guò)2003年6月16日國(guó)務(wù)院令第380號(hào)公布自公布之日起施行)二、國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)法律、法規(guī)(2)醫(yī)療廢物管理行政處7三、生物安全實(shí)驗(yàn)室的管理和安全操作技術(shù)(1)
(一)、微生物危害程度分級(jí)1、我國(guó)規(guī)定病原微生物分類(lèi):在我國(guó)的《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》和《人間傳染病原微生物名錄》中,根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對(duì)個(gè)體或群體的危害程度,將病原微生物分為4類(lèi):第一類(lèi):是指能夠引起人類(lèi)或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物,以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。第二類(lèi):是指能夠引起人類(lèi)或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病,比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。第三類(lèi):是指能夠引起人類(lèi)或者動(dòng)物疾病,但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害,傳播風(fēng)險(xiǎn)有限,實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病,并且有效治療和預(yù)防措施的微生物。第四類(lèi):是指在通常情況下不會(huì)引起人類(lèi)或者動(dòng)物疾病的微生物。第一類(lèi)、第二類(lèi)病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。三、生物安全實(shí)驗(yàn)室的管理和安全操作技術(shù)(1)(一)、微生物82、有害微生物的分類(lèi)類(lèi)別危害程度代表性微生物1高度危害性霍亂弧菌鼠疫耶爾森菌2中度危害性肉毒梭菌、假單胞菌、葡萄球菌、鏈球菌、沙門(mén)氏菌、志賀氏菌、致病性大腸桿菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌、空腸彎曲菌、副溶血性弧菌、變形桿菌、李斯特菌、銅綠色假單胞菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌。3低度危害性黃曲霉4微度危害性無(wú)2、有害微生物的分類(lèi)類(lèi)別危害程度代表性微生物1高度危害性9中文名危害程度分類(lèi)運(yùn)輸包裝分類(lèi)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)所需生物安全實(shí)驗(yàn)室級(jí)別大量活菌操作樣本檢測(cè)非感染性材料的實(shí)驗(yàn)A/BUN編號(hào)粘質(zhì)沙雷菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1志賀菌屬第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1金黃色葡萄球菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1表皮葡萄球菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1念珠狀鏈球菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1肺炎鏈球菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1化膿鏈球菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1鏈球菌屬第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1豬鏈球菌第三類(lèi)BUN2814BSL-2BSL-2BSL-1奇異變形菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-13、人間傳染病源微生物名錄摘錄表中文名危害程度分類(lèi)運(yùn)輸包裝分類(lèi)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)所需生物安全實(shí)驗(yàn)室級(jí)別10中文名危害程度分類(lèi)運(yùn)輸包裝分類(lèi)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)所需生物安全實(shí)驗(yàn)室級(jí)別大量活菌操作樣本檢測(cè)非感染性材料的實(shí)驗(yàn)A/BUN編號(hào)普通變形菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1銅綠假單胞菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1霍亂弧菌第二類(lèi)AUN2814BSL-2BSL-2BSL-1甲、乙、丙型副傷寒沙門(mén)菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1傷寒沙門(mén)菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1鼠傷寒沙門(mén)菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1產(chǎn)氣腸桿菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1致病性大腸埃希氏菌第三類(lèi)BUN2814BSL-2BSL-2BSL-1肺炎克雷伯菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1嗜肺軍團(tuán)菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1中文名危害程度分類(lèi)運(yùn)輸包裝分類(lèi)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)所需生物安全實(shí)驗(yàn)室級(jí)別114、世界衛(wèi)生組織的規(guī)定
世界衛(wèi)生組織規(guī)定的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和等級(jí)劃分與我國(guó)的規(guī)定基本一致,但危害程度由1級(jí)至4級(jí)遞減,即1級(jí)危害度最低,4級(jí)危害度最高。4、世界衛(wèi)生組織的規(guī)定
世界衛(wèi)生組織規(guī)定的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和等級(jí)劃分12(二)、生物安全實(shí)驗(yàn)室分類(lèi)、分級(jí)和技術(shù)指標(biāo)
1、生物安全實(shí)驗(yàn)室的分類(lèi)生物安全實(shí)驗(yàn)室可分為一般生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室和試驗(yàn)脊椎動(dòng)物生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室兩類(lèi)。2、生物安全實(shí)驗(yàn)室的分級(jí)每類(lèi)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室根據(jù)實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)、安全設(shè)備和實(shí)驗(yàn)設(shè)施組合的不同而分為四級(jí)生物安全水平。即BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4。BSL-1和BSL-2實(shí)驗(yàn)室稱為基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室,BSL-3稱為生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室,BSL-4稱為高度生物安全實(shí)驗(yàn)室。(二)、生物安全實(shí)驗(yàn)室分類(lèi)、分級(jí)和技術(shù)指標(biāo)1、生物安全實(shí)13生物安全實(shí)驗(yàn)室的適用微生物范圍:
1、一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室(BSL-1):結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)健康成年人已知無(wú)致病作用的微生物,如用于教學(xué)的普通微生物實(shí)驗(yàn)室等。2、二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室(BSL-2):適用于對(duì)人和環(huán)境具有中等潛在危險(xiǎn)的微生物3、三級(jí)身亡安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室(BSL-3):適用于主要通過(guò)呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素,通常已有預(yù)防傳染的疫苗。艾滋病病毒的研究(血清學(xué)試驗(yàn)除外)應(yīng)在三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。4、四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室(BSL-4):適用于對(duì)人體具有高度的危險(xiǎn)性,通過(guò)氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明,目前尚無(wú)有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。不明微生物,也必須在四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。生物安全實(shí)驗(yàn)室的適用微生物范圍:1、一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)143、生物安全實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)指標(biāo)名稱潔凈度級(jí)別最小換氣次數(shù)與又室內(nèi)向室外方向上相鄰相同房間的最小負(fù)壓差(Pa)溫度℃相對(duì)濕度%噪聲.
dB(A)最低照度Ix一級(jí)二級(jí)三級(jí)四級(jí)——7或87或8可開(kāi)窗可開(kāi)窗15或1215或12——-10-1018~2818~2718~2518~24≤7030~7030~6030~60≤60≤60≤60≤603003005005003、生物安全實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)指標(biāo)名稱潔凈度級(jí)別最小換氣次數(shù)與又室15三)生物安全柜的選擇和使用
生物安全柜的種類(lèi)Ⅰ級(jí)生物安全柜Ⅱ級(jí)A型生物安全柜Ⅱ級(jí)B型生物安全柜Ⅲ級(jí)生物安全柜生物安全柜的擺放遠(yuǎn)離實(shí)驗(yàn)室門(mén)口,空調(diào)出風(fēng)口,減少外部其他氣流的干擾;三)生物安全柜的選擇和使用生物安全柜的種類(lèi)16生物安全柜操作的注意事項(xiàng)可產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備(例如混勻器、離心機(jī)等)應(yīng)靠近安全柜的后部放置;有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤(pán)子以及吸濾瓶等體積較大的物品,應(yīng)該放在安全柜內(nèi)的某一側(cè);將工作區(qū)域內(nèi)的污染物質(zhì)與潔凈物質(zhì)分開(kāi)放置,在工作臺(tái)面上的實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進(jìn)行;耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤(pán)不應(yīng)放在安全柜的外面,否則在使用這些物品時(shí)雙臂就必須頻繁進(jìn)出安全柜,這樣會(huì)干擾安全柜空氣屏障的完整性,從而影響對(duì)人員和物品的防護(hù);不要過(guò)載;在操作過(guò)程中,如果有物質(zhì)溢出或液體濺出,在將物品移出安全柜前,一定要對(duì)其表面進(jìn)行消毒,實(shí)驗(yàn)結(jié)束對(duì)安全柜內(nèi)表面全部消毒;生物安全柜操作的注意事項(xiàng)可產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備(例如混勻器、離心17(四)、實(shí)驗(yàn)室感染80%是不明原因的感染。20%感染的原因是明確的。80%是由工作人員操作失誤引起的;20%是由設(shè)備故障引起的。導(dǎo)致感染最多的4種實(shí)驗(yàn)室事故溢出和潑灑針頭和注射器銳器、碎玻璃動(dòng)物或動(dòng)物體外寄生蟲(chóng)的咬傷或抓傷(四)、實(shí)驗(yàn)室感染80%是不明原因的感染。181、感染因子的種類(lèi):1含有感染因子氣溶膠吸入2銳器針頭和注射器、銳器、碎玻璃等刺傷3接觸溢出和潑灑的感染因子4染菌動(dòng)物或動(dòng)物體外寄生蟲(chóng)的咬傷或抓傷1、感染因子的種類(lèi):1含有感染因子氣溶膠吸入192、感染途徑:呼吸道、消化道、血液和皮膚接觸等2、感染途徑:呼吸道、消化道、血液和皮膚接觸等203、實(shí)驗(yàn)室感染的原因除與實(shí)驗(yàn)室建筑、設(shè)置、制度、人員素質(zhì)、清潔、消毒等有關(guān)外,檢驗(yàn)標(biāo)本含有大量的、種類(lèi)繁多的隱匿病原體。檢驗(yàn)操作時(shí)形成氣溶膠檢驗(yàn)器材、儀器和環(huán)境等被污染一些偶然事故也會(huì)造成實(shí)驗(yàn)室人員感染工作人員易感性免疫力低下微生物大量侵入3、實(shí)驗(yàn)室感染的原因除與實(shí)驗(yàn)室建筑、設(shè)置、制度、人員素質(zhì)、清214、實(shí)驗(yàn)室感染的預(yù)防一般防護(hù)禁止非工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)操作必須穿工作服,手有傷口時(shí)戴手套試驗(yàn)區(qū)域內(nèi)禁止飲食、吸煙、化妝、儲(chǔ)存食物等制定實(shí)驗(yàn)室生物安全程序移液禁止口吸實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常保持清潔嚴(yán)格銳器管理,防止利器損傷所以培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室之前必須高壓滅菌有效的防鼠防蟲(chóng)措施必要的預(yù)防接種特殊防護(hù)不同微生物在相應(yīng)實(shí)驗(yàn)室的生物安全設(shè)備中操作4、實(shí)驗(yàn)室感染的預(yù)防一般防護(hù)22(五)、實(shí)驗(yàn)室生物安全管理
1、成立生物安全委員會(huì)生物安全委員會(huì)主任由單位法人擔(dān)任生物安全委員會(huì)的主要職責(zé)保證生物安全制度管理制度監(jiān)督有關(guān)法規(guī)和操作規(guī)程的執(zhí)行決定進(jìn)入生物安全實(shí)驗(yàn)室的工作人員(五)、實(shí)驗(yàn)室生物安全管理1、成立生物安全委員會(huì)232、生物安全實(shí)驗(yàn)室的管理(1)生物安全實(shí)驗(yàn)室入口處必須張貼生物危險(xiǎn)標(biāo)志,注明危險(xiǎn)因子、生物安全級(jí)別、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和相關(guān)負(fù)責(zé)人姓名和電話。生物危險(xiǎn)標(biāo)志的顏色應(yīng)為黑色,背景為黃色。(2)生物安全實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)人制度外來(lái)進(jìn)修、學(xué)習(xí)和參觀人員必須學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)室的一切規(guī)章制度和有關(guān)操作規(guī)程,并經(jīng)實(shí)驗(yàn)室之人批準(zhǔn),(3)實(shí)驗(yàn)室主任為該實(shí)驗(yàn)室的第一生物安全責(zé)任人,有權(quán)決定參加實(shí)驗(yàn)的人員數(shù)量和開(kāi)展實(shí)驗(yàn)的種類(lèi)。(4)每次進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須填寫(xiě)工作日志,并嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室的一切操作規(guī)程。(5)加班工作必須事先征得實(shí)驗(yàn)室主任同意并通知安全員盡量避免單獨(dú)工作,以減少偶然事件發(fā)生的危險(xiǎn)性。2、生物安全實(shí)驗(yàn)室的管理24
3、實(shí)驗(yàn)室人員管理(1)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人的職責(zé)組織實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)工作,保證實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行的安全和實(shí)驗(yàn)室工作質(zhì)量的準(zhǔn)確可靠組織對(duì)新工作人員的培訓(xùn),對(duì)培訓(xùn)的結(jié)果進(jìn)行考核,包括實(shí)驗(yàn)室安全知識(shí)和實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)考核,以決定工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室控制區(qū)域工作的資格。定期檢查實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)技術(shù)參數(shù),組織對(duì)實(shí)驗(yàn)室裝備的常規(guī)保養(yǎng)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)發(fā)生事故或緊急情況時(shí),決定并采取緊急處置措施,并報(bào)告上級(jí)。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人由高級(jí)職稱的人員承擔(dān),必須具有如下資質(zhì):具有強(qiáng)毒微生物實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)對(duì)所操作的病因微生物有全面、完整的了解具有組織實(shí)驗(yàn)室工作的能力對(duì)工作有高度責(zé)任心3、實(shí)驗(yàn)室人員管理25(2)實(shí)驗(yàn)室工作人員的一般行為規(guī)范生物安全實(shí)驗(yàn)室為專(zhuān)用實(shí)驗(yàn)室,只允許進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡囊?guī)定操作,與此無(wú)關(guān)的活動(dòng)一律不得進(jìn)行。必須按規(guī)定著裝,方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室控制區(qū)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)禁止吸煙、飲食、訪客和喧嘩保持實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的整潔,每項(xiàng)工作完成之后,必須清潔臺(tái)面,恢復(fù)實(shí)驗(yàn)室的待運(yùn)轉(zhuǎn)狀態(tài)。注意個(gè)人的健康狀況,出現(xiàn)身體不適情況,應(yīng)及時(shí)向負(fù)責(zé)人報(bào)告(2)實(shí)驗(yàn)室工作人員的一般行為規(guī)范26(3)實(shí)驗(yàn)室工作人員的技術(shù)要求必須了解實(shí)驗(yàn)室的安全原理,熟悉安全手冊(cè)的各項(xiàng)規(guī)定,收集緊急情況下的正確應(yīng)對(duì)措施。必須熟悉微生物學(xué)技術(shù)和感染性病原菌的知識(shí),正確、安全地使用菌毒株,避免污染,已獲得準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。必須熟悉所研究疾病的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),能夠完成標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的任務(wù)。(3)實(shí)驗(yàn)室工作人員的技術(shù)要求27(4)實(shí)驗(yàn)室工作人員的培訓(xùn)新工作人員必須經(jīng)過(guò)培訓(xùn),方可取得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室控制區(qū)域工作的資格。培訓(xùn)由實(shí)驗(yàn)室組織進(jìn)行,由負(fù)責(zé)人指定熟悉實(shí)驗(yàn)室工作的人員擔(dān)任輔導(dǎo)。培訓(xùn)內(nèi)容包括:閱讀并理解微生物操作規(guī)程以及安全手冊(cè) 實(shí)驗(yàn)室各種設(shè)備的使用方法著裝方法微生物學(xué)基本技術(shù)及無(wú)菌操作方法實(shí)驗(yàn)室清潔及消毒方法(4)實(shí)驗(yàn)室工作人員的培訓(xùn)28(5)實(shí)驗(yàn)室工作人員的資格考試新工作人員經(jīng)過(guò)培訓(xùn)后,由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人組織考試。包括口試、筆試與實(shí)際操作考核。通過(guò)考核后,還須與有資格的工作人員一同工作三個(gè)月,才能獲得進(jìn)行強(qiáng)毒微生物操作的正式資格。(5)實(shí)驗(yàn)室工作人員的資格考試29(6)實(shí)驗(yàn)室工作人員的適合工作狀態(tài)實(shí)驗(yàn)室工作人員必須在身體狀況良好的情況下,才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的控制區(qū)域工作。出現(xiàn)下列情況不應(yīng)進(jìn)入上述區(qū)域:身體出現(xiàn)開(kāi)放性損傷患發(fā)熱性疾病、感冒、上呼吸道感染、或其他導(dǎo)致抵抗力下降的情況妊娠六個(gè)月以上已經(jīng)在控制區(qū)域連續(xù)工作4個(gè)小時(shí)以上,或其他原因造成的疲勞狀態(tài)(6)實(shí)驗(yàn)室工作人員的適合工作狀態(tài)304、實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備管理儀器設(shè)備作業(yè)指導(dǎo)書(shū)儀器設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)儀器設(shè)備使用記錄包括儀器使用前后狀況、使用時(shí)間、使用人、使用日期等儀器設(shè)備的維修送修前的消毒儀器設(shè)備的鑒定專(zhuān)業(yè)機(jī)構(gòu)4、實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備管理31(六)樣本的采集運(yùn)輸和接收1、標(biāo)本采集人員的防護(hù)(1)所有采集標(biāo)本的操作要戴手套,穿工作外套、口罩、甚至護(hù)目鏡。(2)所有標(biāo)本容器必須防漏,運(yùn)送也應(yīng)裝入密封防漏的塑料袋中,袋上附有一表格用于填寫(xiě)日期、時(shí)間、姓名之用。(3)決不能將針頭暴露的注射器送到實(shí)驗(yàn)室。應(yīng)將注射器中的標(biāo)本注入無(wú)菌試管中。或采用防護(hù)手段取掉針頭,再蓋上注射器并放入密封防漏的塑料袋中送檢。(4)不得將裝有標(biāo)本的破損容器送往實(shí)驗(yàn)室,也不能對(duì)其進(jìn)一步處理。應(yīng)該及時(shí)向醫(yī)生通報(bào)容器滲漏,解釋如果留用標(biāo)本,會(huì)帶來(lái)的潛在危害性并要求重新送檢。如果新標(biāo)本送來(lái),則將泄漏的標(biāo)本高溫高壓處理后再?gòu)U棄掉。(5)采集標(biāo)本污染器材的處理對(duì)所有采集標(biāo)本的污染器材均應(yīng)按照《實(shí)驗(yàn)室廢物處理制度》進(jìn)行處理。(六)樣本的采集運(yùn)輸和接收1、標(biāo)本采集人員的防護(hù)322、生物標(biāo)本運(yùn)送、接收安全要求生物危險(xiǎn)材料不僅包括來(lái)自病菌人的各種標(biāo)本,而且包括來(lái)自生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的各種材料,這些來(lái)自人體的標(biāo)本和來(lái)自實(shí)驗(yàn)室的材料都可能含有傳染性病原體或其毒素,為保障對(duì)環(huán)境、對(duì)人體的安全,保障原體不向外擴(kuò)散,做到安全運(yùn)輸和安全接受標(biāo)本和材料,在整個(gè)實(shí)施過(guò)程中必須遵守如下操作規(guī)則。2、生物標(biāo)本運(yùn)送、接收安全要求333、生物危險(xiǎn)材料的運(yùn)輸(1)運(yùn)輸器材:運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料必須使用專(zhuān)業(yè)專(zhuān)用的器材,以防止造成傳染性物質(zhì)和有毒有害物質(zhì)擴(kuò)散。經(jīng)常使用的工具有計(jì)劃免疫專(zhuān)用冷藏包、冷藏箱和大小不等的冰瓶(廣口保溫瓶)。無(wú)論是冷藏包還是冷藏箱,在使用時(shí)一般都必須帶冰排,而冰瓶在使用時(shí)常常放入冰塊或碎冰。由于冷藏包和冷藏箱是通過(guò)箱壁的泡沫保溫,所以運(yùn)輸過(guò)程中不怕磕碰;而對(duì)于冰瓶來(lái)說(shuō),由于它是通過(guò)雙層玻璃抽真空保溫,玻璃易碎,所以運(yùn)輸過(guò)程中需輕拿輕放。3、生物危險(xiǎn)材料的運(yùn)輸(1)運(yùn)輸器材:運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料必34(2)包裝傳染性物品的方法:在運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料之前必須進(jìn)行適當(dāng)?shù)臋z查和準(zhǔn)備工作。首先要認(rèn)真檢查所運(yùn)輸?shù)牟牧鲜欠褚呀?jīng)裝好,如檢查瓶口、試管口、離心管口的旋蓋或蓋子是否施緊或蓋緊,容器是否完好,是否存在不易查出的破損等等,然后再進(jìn)行包裝。目的是減少被運(yùn)輸物與運(yùn)輸工具之間的震蕩和摩擦,減少被運(yùn)輸物破損的機(jī)會(huì),保證對(duì)人員和環(huán)境的安全。(2)包裝傳染性物品的方法:在運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料之前必須進(jìn)行35第一層包裝:將病原樣品裝入事先檢查好的容器中,如帶旋蓋的試管、離心管或培養(yǎng)瓶中,然后擰緊旋蓋并使用封口膜封好。不要使用膠帶,因?yàn)槟z帶遇液體后會(huì)張開(kāi);每一個(gè)容器應(yīng)分別密封包裝。一個(gè)包裝中樣品不能超過(guò)50ml或50毫克。第二層包裝:使用足夠的吸水性材料(如衛(wèi)生紙或棉花)包裝容器,目的是,如果容器破碎,能夠保證所有滲漏的樣品被吸收。一般最好是一個(gè)容器—包裝。如果是小型容器,還可以把它們最后再匯集到一起,相互之間使用緩沖減壓材料隔開(kāi),最后再在外面包上緩沖材料并套上至少兩層塑料帶。放入冷藏箱、冷藏包或冰瓶后,用緩沖材料填充,防止撞擊破碎。在包裝過(guò)程中一定要帶兩層乳膠手套,當(dāng)套上第一層塑料帶時(shí),就可以脫掉外層手套,套第二層塑料帶。使用消毒液擦試運(yùn)輸器材的外表面,作好消毒工作。以上包裝只適合于專(zhuān)人專(zhuān)車(chē)的運(yùn)輸。當(dāng)需要借助于公共設(shè)施進(jìn)行運(yùn)輸時(shí),還必須把上面提到的運(yùn)輸器材再放入木質(zhì)箱子中,并填充大量緩沖保溫材料,箱外貼上生物危險(xiǎn)標(biāo)志。第一層包裝:將病原樣品裝入事先檢查好的容器中,如帶旋蓋的試管36A類(lèi)感染性物質(zhì)的包裝A類(lèi)感染性物質(zhì)的包裝37B類(lèi)感染性物質(zhì)的包裝B類(lèi)感染性物質(zhì)的包裝38(3)運(yùn)輸條件:一般情況下運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料都需要在低溫條件下。需要冷凍(-20以下)的樣本應(yīng)放入干冰,冷藏(4℃)的樣品放入冰排、或冰袋,以確保樣本的質(zhì)量。(3)運(yùn)輸條件:一般情況下運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料都需要在低溫條件下39(4)樣品登記和清單:被運(yùn)輸?shù)纳镂kU(xiǎn)材料一定要做好登記工作,詳細(xì)登記被運(yùn)輸樣品名稱、病原名、危險(xiǎn)級(jí)別、數(shù)量、聯(lián)系電話、聯(lián)系人等詳細(xì)信息,把該清單放在箱子里面和外面各一份,同時(shí)備好一份以備查驗(yàn)。(4)樣品登記和清單:被運(yùn)輸?shù)纳镂kU(xiǎn)材料一定要做好登記工作40(5)生物危險(xiǎn)材料的接受查驗(yàn):拿出放在運(yùn)輸箱外面的運(yùn)輸清單,根據(jù)運(yùn)輸清單上標(biāo)明的運(yùn)輸樣本的性質(zhì)、病原體種類(lèi)和危險(xiǎn)級(jí)別,決定把該運(yùn)輸設(shè)備放在幾級(jí)實(shí)驗(yàn)室或是否需要放在生物安全柜內(nèi)。由于液體運(yùn)輸物會(huì)因運(yùn)輸途中震蕩而產(chǎn)生氣溶膠,故應(yīng)把該運(yùn)輸箱放置在合適位置靜止至少1小時(shí),再打開(kāi)。開(kāi)箱:打開(kāi)運(yùn)輸箱時(shí)應(yīng)空好隔離衣裳和防護(hù)用品。在開(kāi)箱前先預(yù)備好盛包裝材料的塑料袋,準(zhǔn)備好消毒液。開(kāi)箱后先檢查盛樣品的容器是否有破損,如容器有破損首先應(yīng)使用含消毒液的濕紗布覆蓋,過(guò)一段時(shí)間后再擦拭消毒處理;如果無(wú)破損可直接擦拭容器外壁,近需要的溫度條件保存樣品。檢查樣品是否與清單所列樣品一致。最后,注意將廢棄的包裝材料高壓滅菌,并對(duì)運(yùn)輸設(shè)備進(jìn)行消毒。(5)生物危險(xiǎn)材料的接受414、實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本的安全操作移液管、移液、接種針等輔助器材的使用離心管的選擇離心速度、攪拌、樣品稀釋吸吹力度適中。血清凝集防止外濺污染環(huán)境盡量使用一次性器,4、實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本的安全操作42(七)高壓蒸汽滅菌器的使用1、高壓蒸汽滅菌的原理就是利用高壓和高熱釋放的潛熱進(jìn)行滅菌。高溫能使微生物的蛋白質(zhì)和酶變性或凝固(結(jié)構(gòu)改變導(dǎo)致功能喪失),新陳代謝受到障礙而死亡,從而達(dá)到消毒與滅菌的目的。(七)高壓蒸汽滅菌器的使用1、高壓蒸汽滅菌的原理432、高壓蒸氣滅菌器的種類(lèi)下排氣上排氣預(yù)真空3、高壓滅菌器的基本操作4、不同樣品的滅菌要求注意:密封的廢物袋中的溫度有可能比滅菌艙溫度低最高達(dá)10℃2、高壓蒸氣滅菌器的種類(lèi)44冷空氣排除量對(duì)溫度(℃)的影響
壓力(磅)
冷空氣排除量全排除2/31/21/3全未排5109.100949072101151091051009015121115.511210910020126121.5118115109冷空氣排除量對(duì)溫度(℃)的影響
壓力(磅)冷空氣排除量全455、壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè)化學(xué)指示劑:利用其顏色及性狀的改變判斷是否達(dá)到滅菌條件。指示卡或指示膠帶的顏色或性狀均變至規(guī)定的條件,可認(rèn)為該滅菌過(guò)程已完成。只能指示滅菌溫度,指示物品是否經(jīng)過(guò)滅菌處理,不能表明滅菌物品是否達(dá)到滅菌要求。生物指示劑:是最關(guān)鍵的滅菌測(cè)試。化學(xué)指示劑≠生物指示劑的監(jiān)測(cè)嗜熱脂肪桿菌芽胞(ATCC7953或SSIK31),監(jiān)測(cè)建議:化學(xué)指示劑要求每鍋進(jìn)行;生物監(jiān)測(cè)每月進(jìn)行一次;5、壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè)466、壓力蒸汽滅菌失敗的原因冷空氣排除不徹底,在同一溫度下進(jìn)行滅菌,熱空氣比蒸汽所需時(shí)間延長(zhǎng)3-10倍;滅菌時(shí)間不夠;包裝形式、擺放位置及裝載量不正確。包裝材料應(yīng)用帶氣孔的器具,允許物品包內(nèi)部的空氣排出和蒸汽的透入;裝載量小于80%;滅菌物品不能貼靠門(mén)和四壁;6、壓力蒸汽滅菌失敗的原因47(八)消毒劑的合理使用1、消毒劑的合理使用高效消毒劑:過(guò)氧乙酸、甲醛、戊二醛、二氧化氯、含氯消毒劑中效消毒劑:碘類(lèi)、醇類(lèi)、酚類(lèi)低效消毒劑:苯扎溴胺、醋酸氯己腚等雙胍類(lèi)2、微生物對(duì)消毒劑的抗性(由低到高依次為):細(xì)菌繁殖體、親脂病毒、真菌、親水病毒、細(xì)菌芽孢、朊蛋白3、實(shí)驗(yàn)室消毒常用的消毒劑(八)消毒劑的合理使用1、消毒劑的合理使用484、實(shí)驗(yàn)室消毒常用的消毒方法皮膚表面及手的消毒:碘類(lèi)、醇類(lèi)、雙胍類(lèi)、季胺鹽類(lèi)物體表面的消毒:含氯消毒劑金屬器材的消毒:戊二醛玻璃器皿的消毒:過(guò)氧乙酸、含氯消毒劑4、實(shí)驗(yàn)室消毒常用的消毒方法49(九)實(shí)驗(yàn)室污染性材料和廢棄物處理
1、定義醫(yī)療廢物是指醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)在醫(yī)療、預(yù)防、保健以及其他相關(guān)活動(dòng)中產(chǎn)生的具有直接或者間接感染性、毒性以及其他危害性的廢物。(九)實(shí)驗(yàn)室污染性材料和廢棄物處理
1、定義502、處理方法
包裝物和容器污染性材料專(zhuān)用包裝袋或容器(防滲漏),應(yīng)當(dāng)有明顯的警示標(biāo)識(shí)說(shuō)明。消毒滅菌處理對(duì)盛放感染性廢棄物進(jìn)行高壓滅菌處理,包裝袋口不要扎得過(guò)緊。對(duì)經(jīng)高壓滅菌處理后重復(fù)使用的感染性材料,要先消毒后清洗。對(duì)盛放銳器的感染性廢棄物要進(jìn)行焚燒或經(jīng)高壓滅菌處理后,使用防遺撒的專(zhuān)用運(yùn)送工具,按照本單位確定的內(nèi)部醫(yī)療廢物運(yùn)送時(shí)間、路線,將醫(yī)療廢物收集、運(yùn)送至?xí)簳r(shí)貯存地點(diǎn);醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)根據(jù)就近集中處置的原則,及時(shí)將醫(yī)療廢物交由醫(yī)療廢物集中處置單位處置;2、處理方法
包裝物和容器51四、病原微生物菌(毒)種的管理(一)、感染性物質(zhì)1、定義:是指那些已知或有理由認(rèn)為含有致病原的物質(zhì)。致病原是指能使人或動(dòng)物感染疾病的微生物。2、感染性物質(zhì)的分類(lèi)A類(lèi)感染性物質(zhì)當(dāng)人或動(dòng)物與之接觸時(shí),能導(dǎo)致永久性的殘疾構(gòu)成生命威脅或致死疾病。B類(lèi)感染性物質(zhì)未達(dá)到A級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的感染性物質(zhì)。四、病原微生物菌(毒)種的管理(一)、感染性物質(zhì)52(二)、感染性物質(zhì)的包裝感染性物質(zhì)在運(yùn)輸過(guò)程中需使用三層包裝系統(tǒng)1、三層包裝標(biāo)準(zhǔn)主容器:玻璃、金屬或塑料,防漏密封。但菌種管最好用塑料進(jìn)口的。輔助包裝:在-40℃至+55℃溫度范圍內(nèi)必須能承受不低于95kPa內(nèi)部壓力而無(wú)滲漏外包裝:強(qiáng)度滿足其容積、重量及使用要求。(二)、感染性物質(zhì)的包裝532、包裝要求除固體感染性物質(zhì),必須在主容器和輔助包裝之間填充足量的吸附材料,能夠吸收所有內(nèi)裝物;多個(gè)主容器裝入一個(gè)輔助包裝時(shí),應(yīng)將它們分別包裹或隔離,以防彼此接觸;在冷藏或冷凍條件下運(yùn)輸物質(zhì):冰、干冰或其它冷凍劑必須放在輔助包裝周?chē)瑑?nèi)部有支撐物固定輔助包裝。必須在輔助包裝和外包裝之間放置一份所有內(nèi)裝物的詳細(xì)清單A類(lèi)感染性物質(zhì)A類(lèi)感染性物質(zhì)的包裝B類(lèi)感染性物質(zhì)的包裝
2、包裝要求543、標(biāo)簽和標(biāo)識(shí)(1)標(biāo)簽直接寫(xiě)在容器上
直接寫(xiě)在標(biāo)簽上手寫(xiě)標(biāo)簽存在的一些問(wèn)題油墨容易被擦涂,造成難于閱讀或無(wú)法閱讀;浪費(fèi)標(biāo)簽空間;高壓或長(zhǎng)期低溫保藏墨水容易褪色;化學(xué)溶劑腐蝕墨水;(2)熱轉(zhuǎn)移打印標(biāo)簽可連接電腦支持中英文打印可手持文本圖象,條形碼,序列號(hào)可打印各種規(guī)格的標(biāo)簽3、標(biāo)簽和標(biāo)識(shí)55(3)標(biāo)識(shí)1)內(nèi)標(biāo)簽寫(xiě)明感染物質(zhì)名稱、編號(hào)、來(lái)源接種日期菌毒種代數(shù)2)外包裝托運(yùn)人姓名地址收運(yùn)人姓名及地址編碼感染性物質(zhì)緊急聯(lián)系人姓名電話液體物質(zhì)要外層包裝上用上箭頭標(biāo)明,液體總量小于30ml的可不標(biāo)明。(3)標(biāo)識(shí)56(三)感染性物質(zhì)的運(yùn)輸運(yùn)輸高致病性病原微生物菌(毒)種或者樣本,應(yīng)當(dāng)經(jīng)省級(jí)以上人們政府為誰(shuí)主管部門(mén)批準(zhǔn):在省、自治區(qū)、直轄市行政區(qū)域內(nèi)運(yùn)輸?shù)模沙霭l(fā)地的省、自治區(qū)、直轄市人們政府衛(wèi)生主管部門(mén)批準(zhǔn);需要跨省、自治區(qū)、直轄市運(yùn)輸或者運(yùn)往國(guó)外的,由出發(fā)地的省、自治區(qū)、直轄市人們政府衛(wèi)生主管部門(mén)初審后分別報(bào)國(guó)務(wù)院衛(wèi)生主管部門(mén)批準(zhǔn);根據(jù)疾病控制工作的需要,應(yīng)當(dāng)向中國(guó)疾病預(yù)防控制中心運(yùn)送高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本的,向中國(guó)疾病預(yù)防控制中心直接提出申請(qǐng),由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心審批;符合法定條件的,頒發(fā)《可感染人類(lèi)的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本準(zhǔn)運(yùn)證書(shū)》;不符合法定條件的,應(yīng)當(dāng)出具不予批準(zhǔn)的決定并說(shuō)明理由。中國(guó)疾病預(yù)防控制中心應(yīng)當(dāng)將審批情況3日內(nèi)報(bào)衛(wèi)生部備案。路陸運(yùn)輸:專(zhuān)用汽車(chē)。不能乘坐出租車(chē)或公共汽車(chē)等交通工具。水路運(yùn)輸和鐵路運(yùn)輸不行航空運(yùn)輸:國(guó)航、東航專(zhuān)人護(hù)送:不得少于2人(三)感染性物質(zhì)的運(yùn)輸57類(lèi)別特征常見(jiàn)組分或廢物名稱感染性廢物攜帶病原微生物,具有引發(fā)感染性疾病傳播危險(xiǎn)的醫(yī)療廢物被病人血液、體液、排泄物污染的物品,包括:——棉球、棉簽、引流棉條,紗布及其他各種敷料;——一次性使用衛(wèi)生用品,一次性使用醫(yī)療用品及一從性醫(yī)療器械;——廢棄的被服;——其他被病人血液、體液、排泄物污染的物品。2、醫(yī)療機(jī)構(gòu)收治的隔離傳染病病人或疑似傳染病病人產(chǎn)生的生活垃圾。3、病原體的培養(yǎng)基、標(biāo)本和菌種、毒種保存液。4、各種廢棄的醫(yī)學(xué)標(biāo)本5、各種廢棄的血液、血清。6、使用后的一次性使用醫(yī)療用品及一次性使用醫(yī)療器械視為感染性廢物。病理性廢物診療過(guò)程中產(chǎn)生的人體廢棄物和醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尸體等。1、手術(shù)及其他診療過(guò)程中產(chǎn)生的廢棄的人體組織、器官等。2、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的組織、尸體。3、病理切片后廢棄的人體組織、病理蠟塊等醫(yī)療廢物分類(lèi)目錄醫(yī)療廢物分類(lèi)目錄五、醫(yī)療廢棄物的管理
1、醫(yī)療廢物分類(lèi)目錄類(lèi)別特征常見(jiàn)組分或廢物名稱感染性廢物攜帶病原微生物,具有引發(fā)58損傷性廢物能夠刺傷或者割傷人體的廢棄的義醫(yī)用銳器。1、醫(yī)用針頭縫合針。2、各類(lèi)醫(yī)用銳器,包括:解剖刀、手術(shù)刀、備皮刀、手術(shù)鋸等。3、載玻片、玻璃試管、玻璃安王瓿等。藥物性廢物過(guò)期、淘汰、變質(zhì)或著被污染的廢棄的藥品。1、廢棄的一般性藥品,如:抗生素、非處方類(lèi)藥品等。廢棄的細(xì)胞毒性藥物和遺傳毒性藥物,包括:——致癌性藥物,如:硫唑嘌呤、苯丁酸氮芥、環(huán)孢霉素、環(huán)磷酰胺、苯斌丙氨酸氮芥、丁斯莫斯等?!梢芍掳┬运幬铮纾航z裂霉素、阿霉素等。——免疫抑制劑。3、廢棄的疫苗、血液制品等?;瘜W(xué)性廢物具有毒性、腐蝕性、易燃性的廢棄的化學(xué)物品。1、醫(yī)學(xué)影像室、實(shí)驗(yàn)室廢棄的化學(xué)試劑。2、廢棄的過(guò)氧乙酸、戊二醛等化學(xué)消毒劑。3、廢棄的汞血壓計(jì)、汞溫度計(jì)。損傷性廢物能夠刺傷或者割傷人體的廢棄的義醫(yī)用銳器。1、醫(yī)用針592、實(shí)驗(yàn)室廢棄物可以分成以下幾類(lèi):可以再次使用的污染材料污染銳器污染的培養(yǎng)基和一次性器材3、實(shí)驗(yàn)室廢棄物的處理可以再次使用的污染材料,經(jīng)過(guò)高壓滅菌后,洗刷消毒后,可再次使用。污染銳器,如一次性使用注射器,應(yīng)回套針頭護(hù)套,完整的置于盛放銳器的一次性容器中,高壓后方可運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。污染的培養(yǎng)基和一次性器材,包裝在帶有危險(xiǎn)標(biāo)志的耐高壓塑料袋中,經(jīng)高壓滅菌后方可運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。2、實(shí)驗(yàn)室廢棄物可以分成以下幾類(lèi):604、醫(yī)療廢棄物存放點(diǎn)專(zhuān)門(mén)的房間,地面硬化,有圍護(hù)結(jié)構(gòu)和防鼠防蠅設(shè)施。必要的帶蓋密封存放桶和冷藏設(shè)備。明顯的生物安全危險(xiǎn)標(biāo)志5、醫(yī)療廢棄物的交接實(shí)驗(yàn)室和存放點(diǎn)管理人員的交接,包括:廢棄物的種類(lèi),數(shù)量,高壓蒸汽滅菌情況,交接日期和交接人員簽字。必要時(shí)還要加注實(shí)驗(yàn)樣品的號(hào)段。4、醫(yī)療廢棄物存放點(diǎn)61
謝謝!謝謝!62實(shí)驗(yàn)室生物安全管理
實(shí)驗(yàn)室生物安全管理
63內(nèi)容緒論國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)法律、法規(guī)生物安全實(shí)驗(yàn)室的管理和實(shí)驗(yàn)室安全操作技術(shù)菌(毒)種管理
醫(yī)療廢棄物的管理
內(nèi)容緒論64一、緒論(1)微生物實(shí)驗(yàn)室是開(kāi)展微生物檢驗(yàn)活動(dòng)的特別場(chǎng)所,而且是很獨(dú)特的工作環(huán)境,具有使工作其中或其附近的人們感染相關(guān)傳染病的危險(xiǎn)。1941年Meyer和Eddie發(fā)表了對(duì)美國(guó)74例受布魯氏菌病感染的實(shí)驗(yàn)室工作人員的調(diào)查情況,結(jié)論是:對(duì)培養(yǎng)物、標(biāo)本的操作及吸入含有布魯氏桿菌的灰塵對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員是極其危險(xiǎn)的。多數(shù)病例是由在處理傳染性材料時(shí)不小心或技術(shù)欠佳引起的。一、緒論(1)微生物實(shí)驗(yàn)室是開(kāi)展微生物65一、緒論(2)1949年,Sulkin和Pike發(fā)表了第一篇關(guān)于實(shí)驗(yàn)室感染的系列調(diào)查報(bào)告,總結(jié)了222個(gè)病毒感染病例,其中21例死亡。至少三分之一的病例感染的可能與操作已感染的動(dòng)物和組織有關(guān)。1951年Sulkin和Pike對(duì)5000名實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行了問(wèn)卷調(diào)查,發(fā)表了第二篇系列調(diào)查報(bào)告,在發(fā)病的1342個(gè)病例中,只有三分之一在文章進(jìn)行了分析報(bào)告。在所有報(bào)告的實(shí)驗(yàn)室感染中,布魯氏桿菌病病例最多,連同結(jié)核病、兔熱病、傷寒病和鏈球菌感染占總細(xì)菌感染病例數(shù)的72%,占總感染病例數(shù)的31%,全部病例數(shù)的平均病死率是3%。16%與已知的意外事故有關(guān),主要是嘴吸吸管、針頭和注射器的使用不當(dāng)。1965年對(duì)這一調(diào)查重新做了修訂,增加了641例新的或以前沒(méi)有報(bào)告的病例。1976年再次修訂,共搜集3921例病例。其中布魯氏桿疾病、傷寒、兔熱病、肺結(jié)核、肝炎和委內(nèi)瑞拉馬腦炎是最多見(jiàn)的病例,與已知意外事故有關(guān)的病例不到20%。那些在工作中接觸病原體感染的病例中,80%以上的感染懷疑與暴露在含有傳染因子的氣溶膠有關(guān)。一、緒論(2)1949年,Sulkin和Pike發(fā)表了第66一、緒論(3)1967年Hanson等報(bào)告了428例明顯與實(shí)驗(yàn)室相關(guān)的蟲(chóng)媒病毒感染。原因?qū)嶒?yàn)人員無(wú)意中受感染所致。最常見(jiàn)的傳播途徑是暴露于傳染性氣溶膠。1974年Skinholj發(fā)表的調(diào)查報(bào)告的結(jié)果顯示,丹麥的臨床化驗(yàn)室工作人員肝炎的感染率(2~3/1000),比正常人群高7倍。以上報(bào)告顯示實(shí)驗(yàn)室工作人員發(fā)生相關(guān)病原體感染的危險(xiǎn)性在增加,與正常人群相比實(shí)驗(yàn)室工作人員染患肺結(jié)核、痢疾和肝炎的幾率較高。一、緒論(3)1967年Hanson等報(bào)告了428例明顯67二、國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)法律、法規(guī)(1)人間傳染的高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室和實(shí)驗(yàn)活動(dòng)生物安全審批管理辦法(2006年7月10日衛(wèi)生部部務(wù)會(huì)議通過(guò)2006年8月15日衛(wèi)生部令第50號(hào)發(fā)布自發(fā)布之日起施行)病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全環(huán)境管理辦法(2006年3月2日國(guó)家環(huán)??偩?006年第二次局務(wù)會(huì)議通過(guò)2006年3月8日國(guó)家環(huán)保總局第32號(hào)公布自2006年5月1日起施行)人間傳染的病原微生物名錄(2006年1月11日衛(wèi)科教發(fā)[2006]15號(hào))可感染人類(lèi)的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定(2005年11月24日衛(wèi)生部部務(wù)會(huì)議通過(guò)2005年12月28日衛(wèi)生部令45號(hào)發(fā)布自2006年2月1日起施行)病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例(2004年11月5日國(guó)務(wù)院第69次常務(wù)會(huì)議通過(guò)2004年11月12日國(guó)務(wù)院令第424號(hào)公布自公布之日起施行)二、國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)法律、法規(guī)(1)人間傳染的高致病性68二、國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)法律、法規(guī)(2)醫(yī)療廢物管理行政處罰辦法(2004年5月27日衛(wèi)生部、環(huán)保總局令第21號(hào)公布自2004年6月1日起施行)衛(wèi)生部、勞動(dòng)和社會(huì)保障部“關(guān)于保障接觸病毒或細(xì)菌科研人員醫(yī)療服務(wù)有關(guān)問(wèn)題的通知”(2004年5月9日衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2004]144號(hào))醫(yī)療廢物集中處置技術(shù)規(guī)范(2003年12月26日環(huán)發(fā)[2003]206號(hào))醫(yī)療廢物專(zhuān)用包裝物、容器標(biāo)準(zhǔn)和警示標(biāo)示規(guī)定(2003年11月20日環(huán)發(fā)[2003]188號(hào))醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法(2003年8月14日衛(wèi)生部部務(wù)會(huì)議通過(guò)2003年10月15日衛(wèi)生部令地6號(hào)發(fā)布自發(fā)布之日起施行)醫(yī)療廢物分類(lèi)目錄(2003年10月10日衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2003]287號(hào))醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例(2003年6月4日國(guó)務(wù)院第十次常務(wù)會(huì)議通過(guò)2003年6月16日國(guó)務(wù)院令第380號(hào)公布自公布之日起施行)二、國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)法律、法規(guī)(2)醫(yī)療廢物管理行政處69三、生物安全實(shí)驗(yàn)室的管理和安全操作技術(shù)(1)
(一)、微生物危害程度分級(jí)1、我國(guó)規(guī)定病原微生物分類(lèi):在我國(guó)的《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》和《人間傳染病原微生物名錄》中,根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對(duì)個(gè)體或群體的危害程度,將病原微生物分為4類(lèi):第一類(lèi):是指能夠引起人類(lèi)或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物,以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。第二類(lèi):是指能夠引起人類(lèi)或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病,比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。第三類(lèi):是指能夠引起人類(lèi)或者動(dòng)物疾病,但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害,傳播風(fēng)險(xiǎn)有限,實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病,并且有效治療和預(yù)防措施的微生物。第四類(lèi):是指在通常情況下不會(huì)引起人類(lèi)或者動(dòng)物疾病的微生物。第一類(lèi)、第二類(lèi)病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。三、生物安全實(shí)驗(yàn)室的管理和安全操作技術(shù)(1)(一)、微生物702、有害微生物的分類(lèi)類(lèi)別危害程度代表性微生物1高度危害性霍亂弧菌鼠疫耶爾森菌2中度危害性肉毒梭菌、假單胞菌、葡萄球菌、鏈球菌、沙門(mén)氏菌、志賀氏菌、致病性大腸桿菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌、空腸彎曲菌、副溶血性弧菌、變形桿菌、李斯特菌、銅綠色假單胞菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌。3低度危害性黃曲霉4微度危害性無(wú)2、有害微生物的分類(lèi)類(lèi)別危害程度代表性微生物1高度危害性71中文名危害程度分類(lèi)運(yùn)輸包裝分類(lèi)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)所需生物安全實(shí)驗(yàn)室級(jí)別大量活菌操作樣本檢測(cè)非感染性材料的實(shí)驗(yàn)A/BUN編號(hào)粘質(zhì)沙雷菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1志賀菌屬第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1金黃色葡萄球菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1表皮葡萄球菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1念珠狀鏈球菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1肺炎鏈球菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1化膿鏈球菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1鏈球菌屬第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1豬鏈球菌第三類(lèi)BUN2814BSL-2BSL-2BSL-1奇異變形菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-13、人間傳染病源微生物名錄摘錄表中文名危害程度分類(lèi)運(yùn)輸包裝分類(lèi)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)所需生物安全實(shí)驗(yàn)室級(jí)別72中文名危害程度分類(lèi)運(yùn)輸包裝分類(lèi)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)所需生物安全實(shí)驗(yàn)室級(jí)別大量活菌操作樣本檢測(cè)非感染性材料的實(shí)驗(yàn)A/BUN編號(hào)普通變形菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1銅綠假單胞菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1霍亂弧菌第二類(lèi)AUN2814BSL-2BSL-2BSL-1甲、乙、丙型副傷寒沙門(mén)菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1傷寒沙門(mén)菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1鼠傷寒沙門(mén)菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1產(chǎn)氣腸桿菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1致病性大腸埃希氏菌第三類(lèi)BUN2814BSL-2BSL-2BSL-1肺炎克雷伯菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1嗜肺軍團(tuán)菌第三類(lèi)BUN3373BSL-2BSL-2BSL-1中文名危害程度分類(lèi)運(yùn)輸包裝分類(lèi)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)所需生物安全實(shí)驗(yàn)室級(jí)別734、世界衛(wèi)生組織的規(guī)定
世界衛(wèi)生組織規(guī)定的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和等級(jí)劃分與我國(guó)的規(guī)定基本一致,但危害程度由1級(jí)至4級(jí)遞減,即1級(jí)危害度最低,4級(jí)危害度最高。4、世界衛(wèi)生組織的規(guī)定
世界衛(wèi)生組織規(guī)定的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)和等級(jí)劃分74(二)、生物安全實(shí)驗(yàn)室分類(lèi)、分級(jí)和技術(shù)指標(biāo)
1、生物安全實(shí)驗(yàn)室的分類(lèi)生物安全實(shí)驗(yàn)室可分為一般生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室和試驗(yàn)脊椎動(dòng)物生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室兩類(lèi)。2、生物安全實(shí)驗(yàn)室的分級(jí)每類(lèi)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室根據(jù)實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)、安全設(shè)備和實(shí)驗(yàn)設(shè)施組合的不同而分為四級(jí)生物安全水平。即BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4。BSL-1和BSL-2實(shí)驗(yàn)室稱為基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室,BSL-3稱為生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室,BSL-4稱為高度生物安全實(shí)驗(yàn)室。(二)、生物安全實(shí)驗(yàn)室分類(lèi)、分級(jí)和技術(shù)指標(biāo)1、生物安全實(shí)75生物安全實(shí)驗(yàn)室的適用微生物范圍:
1、一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室(BSL-1):結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)健康成年人已知無(wú)致病作用的微生物,如用于教學(xué)的普通微生物實(shí)驗(yàn)室等。2、二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室(BSL-2):適用于對(duì)人和環(huán)境具有中等潛在危險(xiǎn)的微生物3、三級(jí)身亡安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室(BSL-3):適用于主要通過(guò)呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素,通常已有預(yù)防傳染的疫苗。艾滋病病毒的研究(血清學(xué)試驗(yàn)除外)應(yīng)在三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。4、四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室(BSL-4):適用于對(duì)人體具有高度的危險(xiǎn)性,通過(guò)氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明,目前尚無(wú)有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。不明微生物,也必須在四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。生物安全實(shí)驗(yàn)室的適用微生物范圍:1、一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)763、生物安全實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)指標(biāo)名稱潔凈度級(jí)別最小換氣次數(shù)與又室內(nèi)向室外方向上相鄰相同房間的最小負(fù)壓差(Pa)溫度℃相對(duì)濕度%噪聲.
dB(A)最低照度Ix一級(jí)二級(jí)三級(jí)四級(jí)——7或87或8可開(kāi)窗可開(kāi)窗15或1215或12——-10-1018~2818~2718~2518~24≤7030~7030~6030~60≤60≤60≤60≤603003005005003、生物安全實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)指標(biāo)名稱潔凈度級(jí)別最小換氣次數(shù)與又室77三)生物安全柜的選擇和使用
生物安全柜的種類(lèi)Ⅰ級(jí)生物安全柜Ⅱ級(jí)A型生物安全柜Ⅱ級(jí)B型生物安全柜Ⅲ級(jí)生物安全柜生物安全柜的擺放遠(yuǎn)離實(shí)驗(yàn)室門(mén)口,空調(diào)出風(fēng)口,減少外部其他氣流的干擾;三)生物安全柜的選擇和使用生物安全柜的種類(lèi)78生物安全柜操作的注意事項(xiàng)可產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備(例如混勻器、離心機(jī)等)應(yīng)靠近安全柜的后部放置;有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤(pán)子以及吸濾瓶等體積較大的物品,應(yīng)該放在安全柜內(nèi)的某一側(cè);將工作區(qū)域內(nèi)的污染物質(zhì)與潔凈物質(zhì)分開(kāi)放置,在工作臺(tái)面上的實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)的方向進(jìn)行;耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤(pán)不應(yīng)放在安全柜的外面,否則在使用這些物品時(shí)雙臂就必須頻繁進(jìn)出安全柜,這樣會(huì)干擾安全柜空氣屏障的完整性,從而影響對(duì)人員和物品的防護(hù);不要過(guò)載;在操作過(guò)程中,如果有物質(zhì)溢出或液體濺出,在將物品移出安全柜前,一定要對(duì)其表面進(jìn)行消毒,實(shí)驗(yàn)結(jié)束對(duì)安全柜內(nèi)表面全部消毒;生物安全柜操作的注意事項(xiàng)可產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備(例如混勻器、離心79(四)、實(shí)驗(yàn)室感染80%是不明原因的感染。20%感染的原因是明確的。80%是由工作人員操作失誤引起的;20%是由設(shè)備故障引起的。導(dǎo)致感染最多的4種實(shí)驗(yàn)室事故溢出和潑灑針頭和注射器銳器、碎玻璃動(dòng)物或動(dòng)物體外寄生蟲(chóng)的咬傷或抓傷(四)、實(shí)驗(yàn)室感染80%是不明原因的感染。801、感染因子的種類(lèi):1含有感染因子氣溶膠吸入2銳器針頭和注射器、銳器、碎玻璃等刺傷3接觸溢出和潑灑的感染因子4染菌動(dòng)物或動(dòng)物體外寄生蟲(chóng)的咬傷或抓傷1、感染因子的種類(lèi):1含有感染因子氣溶膠吸入812、感染途徑:呼吸道、消化道、血液和皮膚接觸等2、感染途徑:呼吸道、消化道、血液和皮膚接觸等823、實(shí)驗(yàn)室感染的原因除與實(shí)驗(yàn)室建筑、設(shè)置、制度、人員素質(zhì)、清潔、消毒等有關(guān)外,檢驗(yàn)標(biāo)本含有大量的、種類(lèi)繁多的隱匿病原體。檢驗(yàn)操作時(shí)形成氣溶膠檢驗(yàn)器材、儀器和環(huán)境等被污染一些偶然事故也會(huì)造成實(shí)驗(yàn)室人員感染工作人員易感性免疫力低下微生物大量侵入3、實(shí)驗(yàn)室感染的原因除與實(shí)驗(yàn)室建筑、設(shè)置、制度、人員素質(zhì)、清834、實(shí)驗(yàn)室感染的預(yù)防一般防護(hù)禁止非工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)操作必須穿工作服,手有傷口時(shí)戴手套試驗(yàn)區(qū)域內(nèi)禁止飲食、吸煙、化妝、儲(chǔ)存食物等制定實(shí)驗(yàn)室生物安全程序移液禁止口吸實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常保持清潔嚴(yán)格銳器管理,防止利器損傷所以培養(yǎng)物、廢棄物在運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室之前必須高壓滅菌有效的防鼠防蟲(chóng)措施必要的預(yù)防接種特殊防護(hù)不同微生物在相應(yīng)實(shí)驗(yàn)室的生物安全設(shè)備中操作4、實(shí)驗(yàn)室感染的預(yù)防一般防護(hù)84(五)、實(shí)驗(yàn)室生物安全管理
1、成立生物安全委員會(huì)生物安全委員會(huì)主任由單位法人擔(dān)任生物安全委員會(huì)的主要職責(zé)保證生物安全制度管理制度監(jiān)督有關(guān)法規(guī)和操作規(guī)程的執(zhí)行決定進(jìn)入生物安全實(shí)驗(yàn)室的工作人員(五)、實(shí)驗(yàn)室生物安全管理1、成立生物安全委員會(huì)852、生物安全實(shí)驗(yàn)室的管理(1)生物安全實(shí)驗(yàn)室入口處必須張貼生物危險(xiǎn)標(biāo)志,注明危險(xiǎn)因子、生物安全級(jí)別、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和相關(guān)負(fù)責(zé)人姓名和電話。生物危險(xiǎn)標(biāo)志的顏色應(yīng)為黑色,背景為黃色。(2)生物安全實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)人制度外來(lái)進(jìn)修、學(xué)習(xí)和參觀人員必須學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)室的一切規(guī)章制度和有關(guān)操作規(guī)程,并經(jīng)實(shí)驗(yàn)室之人批準(zhǔn),(3)實(shí)驗(yàn)室主任為該實(shí)驗(yàn)室的第一生物安全責(zé)任人,有權(quán)決定參加實(shí)驗(yàn)的人員數(shù)量和開(kāi)展實(shí)驗(yàn)的種類(lèi)。(4)每次進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必須填寫(xiě)工作日志,并嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室的一切操作規(guī)程。(5)加班工作必須事先征得實(shí)驗(yàn)室主任同意并通知安全員盡量避免單獨(dú)工作,以減少偶然事件發(fā)生的危險(xiǎn)性。2、生物安全實(shí)驗(yàn)室的管理86
3、實(shí)驗(yàn)室人員管理(1)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人的職責(zé)組織實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)工作,保證實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行的安全和實(shí)驗(yàn)室工作質(zhì)量的準(zhǔn)確可靠組織對(duì)新工作人員的培訓(xùn),對(duì)培訓(xùn)的結(jié)果進(jìn)行考核,包括實(shí)驗(yàn)室安全知識(shí)和實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)考核,以決定工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室控制區(qū)域工作的資格。定期檢查實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)技術(shù)參數(shù),組織對(duì)實(shí)驗(yàn)室裝備的常規(guī)保養(yǎng)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)發(fā)生事故或緊急情況時(shí),決定并采取緊急處置措施,并報(bào)告上級(jí)。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人由高級(jí)職稱的人員承擔(dān),必須具有如下資質(zhì):具有強(qiáng)毒微生物實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)對(duì)所操作的病因微生物有全面、完整的了解具有組織實(shí)驗(yàn)室工作的能力對(duì)工作有高度責(zé)任心3、實(shí)驗(yàn)室人員管理87(2)實(shí)驗(yàn)室工作人員的一般行為規(guī)范生物安全實(shí)驗(yàn)室為專(zhuān)用實(shí)驗(yàn)室,只允許進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡囊?guī)定操作,與此無(wú)關(guān)的活動(dòng)一律不得進(jìn)行。必須按規(guī)定著裝,方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室控制區(qū)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)禁止吸煙、飲食、訪客和喧嘩保持實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的整潔,每項(xiàng)工作完成之后,必須清潔臺(tái)面,恢復(fù)實(shí)驗(yàn)室的待運(yùn)轉(zhuǎn)狀態(tài)。注意個(gè)人的健康狀況,出現(xiàn)身體不適情況,應(yīng)及時(shí)向負(fù)責(zé)人報(bào)告(2)實(shí)驗(yàn)室工作人員的一般行為規(guī)范88(3)實(shí)驗(yàn)室工作人員的技術(shù)要求必須了解實(shí)驗(yàn)室的安全原理,熟悉安全手冊(cè)的各項(xiàng)規(guī)定,收集緊急情況下的正確應(yīng)對(duì)措施。必須熟悉微生物學(xué)技術(shù)和感染性病原菌的知識(shí),正確、安全地使用菌毒株,避免污染,已獲得準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。必須熟悉所研究疾病的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),能夠完成標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的任務(wù)。(3)實(shí)驗(yàn)室工作人員的技術(shù)要求89(4)實(shí)驗(yàn)室工作人員的培訓(xùn)新工作人員必須經(jīng)過(guò)培訓(xùn),方可取得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室控制區(qū)域工作的資格。培訓(xùn)由實(shí)驗(yàn)室組織進(jìn)行,由負(fù)責(zé)人指定熟悉實(shí)驗(yàn)室工作的人員擔(dān)任輔導(dǎo)。培訓(xùn)內(nèi)容包括:閱讀并理解微生物操作規(guī)程以及安全手冊(cè) 實(shí)驗(yàn)室各種設(shè)備的使用方法著裝方法微生物學(xué)基本技術(shù)及無(wú)菌操作方法實(shí)驗(yàn)室清潔及消毒方法(4)實(shí)驗(yàn)室工作人員的培訓(xùn)90(5)實(shí)驗(yàn)室工作人員的資格考試新工作人員經(jīng)過(guò)培訓(xùn)后,由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人組織考試。包括口試、筆試與實(shí)際操作考核。通過(guò)考核后,還須與有資格的工作人員一同工作三個(gè)月,才能獲得進(jìn)行強(qiáng)毒微生物操作的正式資格。(5)實(shí)驗(yàn)室工作人員的資格考試91(6)實(shí)驗(yàn)室工作人員的適合工作狀態(tài)實(shí)驗(yàn)室工作人員必須在身體狀況良好的情況下,才能進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的控制區(qū)域工作。出現(xiàn)下列情況不應(yīng)進(jìn)入上述區(qū)域:身體出現(xiàn)開(kāi)放性損傷患發(fā)熱性疾病、感冒、上呼吸道感染、或其他導(dǎo)致抵抗力下降的情況妊娠六個(gè)月以上已經(jīng)在控制區(qū)域連續(xù)工作4個(gè)小時(shí)以上,或其他原因造成的疲勞狀態(tài)(6)實(shí)驗(yàn)室工作人員的適合工作狀態(tài)924、實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備管理儀器設(shè)備作業(yè)指導(dǎo)書(shū)儀器設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)儀器設(shè)備使用記錄包括儀器使用前后狀況、使用時(shí)間、使用人、使用日期等儀器設(shè)備的維修送修前的消毒儀器設(shè)備的鑒定專(zhuān)業(yè)機(jī)構(gòu)4、實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備管理93(六)樣本的采集運(yùn)輸和接收1、標(biāo)本采集人員的防護(hù)(1)所有采集標(biāo)本的操作要戴手套,穿工作外套、口罩、甚至護(hù)目鏡。(2)所有標(biāo)本容器必須防漏,運(yùn)送也應(yīng)裝入密封防漏的塑料袋中,袋上附有一表格用于填寫(xiě)日期、時(shí)間、姓名之用。(3)決不能將針頭暴露的注射器送到實(shí)驗(yàn)室。應(yīng)將注射器中的標(biāo)本注入無(wú)菌試管中?;虿捎梅雷o(hù)手段取掉針頭,再蓋上注射器并放入密封防漏的塑料袋中送檢。(4)不得將裝有標(biāo)本的破損容器送往實(shí)驗(yàn)室,也不能對(duì)其進(jìn)一步處理。應(yīng)該及時(shí)向醫(yī)生通報(bào)容器滲漏,解釋如果留用標(biāo)本,會(huì)帶來(lái)的潛在危害性并要求重新送檢。如果新標(biāo)本送來(lái),則將泄漏的標(biāo)本高溫高壓處理后再?gòu)U棄掉。(5)采集標(biāo)本污染器材的處理對(duì)所有采集標(biāo)本的污染器材均應(yīng)按照《實(shí)驗(yàn)室廢物處理制度》進(jìn)行處理。(六)樣本的采集運(yùn)輸和接收1、標(biāo)本采集人員的防護(hù)942、生物標(biāo)本運(yùn)送、接收安全要求生物危險(xiǎn)材料不僅包括來(lái)自病菌人的各種標(biāo)本,而且包括來(lái)自生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的各種材料,這些來(lái)自人體的標(biāo)本和來(lái)自實(shí)驗(yàn)室的材料都可能含有傳染性病原體或其毒素,為保障對(duì)環(huán)境、對(duì)人體的安全,保障原體不向外擴(kuò)散,做到安全運(yùn)輸和安全接受標(biāo)本和材料,在整個(gè)實(shí)施過(guò)程中必須遵守如下操作規(guī)則。2、生物標(biāo)本運(yùn)送、接收安全要求953、生物危險(xiǎn)材料的運(yùn)輸(1)運(yùn)輸器材:運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料必須使用專(zhuān)業(yè)專(zhuān)用的器材,以防止造成傳染性物質(zhì)和有毒有害物質(zhì)擴(kuò)散。經(jīng)常使用的工具有計(jì)劃免疫專(zhuān)用冷藏包、冷藏箱和大小不等的冰瓶(廣口保溫瓶)。無(wú)論是冷藏包還是冷藏箱,在使用時(shí)一般都必須帶冰排,而冰瓶在使用時(shí)常常放入冰塊或碎冰。由于冷藏包和冷藏箱是通過(guò)箱壁的泡沫保溫,所以運(yùn)輸過(guò)程中不怕磕碰;而對(duì)于冰瓶來(lái)說(shuō),由于它是通過(guò)雙層玻璃抽真空保溫,玻璃易碎,所以運(yùn)輸過(guò)程中需輕拿輕放。3、生物危險(xiǎn)材料的運(yùn)輸(1)運(yùn)輸器材:運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料必96(2)包裝傳染性物品的方法:在運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料之前必須進(jìn)行適當(dāng)?shù)臋z查和準(zhǔn)備工作。首先要認(rèn)真檢查所運(yùn)輸?shù)牟牧鲜欠褚呀?jīng)裝好,如檢查瓶口、試管口、離心管口的旋蓋或蓋子是否施緊或蓋緊,容器是否完好,是否存在不易查出的破損等等,然后再進(jìn)行包裝。目的是減少被運(yùn)輸物與運(yùn)輸工具之間的震蕩和摩擦,減少被運(yùn)輸物破損的機(jī)會(huì),保證對(duì)人員和環(huán)境的安全。(2)包裝傳染性物品的方法:在運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料之前必須進(jìn)行97第一層包裝:將病原樣品裝入事先檢查好的容器中,如帶旋蓋的試管、離心管或培養(yǎng)瓶中,然后擰緊旋蓋并使用封口膜封好。不要使用膠帶,因?yàn)槟z帶遇液體后會(huì)張開(kāi);每一個(gè)容器應(yīng)分別密封包裝。一個(gè)包裝中樣品不能超過(guò)50ml或50毫克。第二層包裝:使用足夠的吸水性材料(如衛(wèi)生紙或棉花)包裝容器,目的是,如果容器破碎,能夠保證所有滲漏的樣品被吸收。一般最好是一個(gè)容器—包裝。如果是小型容器,還可以把它們最后再匯集到一起,相互之間使用緩沖減壓材料隔開(kāi),最后再在外面包上緩沖材料并套上至少兩層塑料帶。放入冷藏箱、冷藏包或冰瓶后,用緩沖材料填充,防止撞擊破碎。在包裝過(guò)程中一定要帶兩層乳膠手套,當(dāng)套上第一層塑料帶時(shí),就可以脫掉外層手套,套第二層塑料帶。使用消毒液擦試運(yùn)輸器材的外表面,作好消毒工作。以上包裝只適合于專(zhuān)人專(zhuān)車(chē)的運(yùn)輸。當(dāng)需要借助于公共設(shè)施進(jìn)行運(yùn)輸時(shí),還必須把上面提到的運(yùn)輸器材再放入木質(zhì)箱子中,并填充大量緩沖保溫材料,箱外貼上生物危險(xiǎn)標(biāo)志。第一層包裝:將病原樣品裝入事先檢查好的容器中,如帶旋蓋的試管98A類(lèi)感染性物質(zhì)的包裝A類(lèi)感染性物質(zhì)的包裝99B類(lèi)感染性物質(zhì)的包裝B類(lèi)感染性物質(zhì)的包裝100(3)運(yùn)輸條件:一般情況下運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料都需要在低溫條件下。需要冷凍(-20以下)的樣本應(yīng)放入干冰,冷藏(4℃)的樣品放入冰排、或冰袋,以確保樣本的質(zhì)量。(3)運(yùn)輸條件:一般情況下運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料都需要在低溫條件下101(4)樣品登記和清單:被運(yùn)輸?shù)纳镂kU(xiǎn)材料一定要做好登記工作,詳細(xì)登記被運(yùn)輸樣品名稱、病原名、危險(xiǎn)級(jí)別、數(shù)量、聯(lián)系電話、聯(lián)系人等詳細(xì)信息,把該清單放在箱子里面和外面各一份,同時(shí)備好一份以備查驗(yàn)。(4)樣品登記和清單:被運(yùn)輸?shù)纳镂kU(xiǎn)材料一定要做好登記工作102(5)生物危險(xiǎn)材料的接受查驗(yàn):拿出放在運(yùn)輸箱外面的運(yùn)輸清單,根據(jù)運(yùn)輸清單上標(biāo)明的運(yùn)輸樣本的性質(zhì)、病原體種類(lèi)和危險(xiǎn)級(jí)別,決定把該運(yùn)輸設(shè)備放在幾級(jí)實(shí)驗(yàn)室或是否需要放在生物安全柜內(nèi)。由于液體運(yùn)輸物會(huì)因運(yùn)輸途中震蕩而產(chǎn)生氣溶膠,故應(yīng)把該運(yùn)輸箱放置在合適位置靜止至少1小時(shí),再打開(kāi)。開(kāi)箱:打開(kāi)運(yùn)輸箱時(shí)應(yīng)空好隔離衣裳和防護(hù)用品。在開(kāi)箱前先預(yù)備好盛包裝材料的塑料袋,準(zhǔn)備好消毒液。開(kāi)箱后先檢查盛樣品的容器是否有破損,如容器有破損首先應(yīng)使用含消毒液的濕紗布覆蓋,過(guò)一段時(shí)間后再擦拭消毒處理;如果無(wú)破損可直接擦拭容器外壁,近需要的溫度條件保存樣品。檢查樣品是否與清單所列樣品一致。最后,注意將廢棄的包裝材料高壓滅菌,并對(duì)運(yùn)輸設(shè)備進(jìn)行消毒。(5)生物危險(xiǎn)材料的接受1034、實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本的安全操作移液管、移液、接種針等輔助器材的使用離心管的選擇離心速度、攪拌、樣品稀釋吸吹力度適中。血清凝集防止外濺污染環(huán)境盡量使用一次性器,4、實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本的安全操作104(七)高壓蒸汽滅菌器的使用1、高壓蒸汽滅菌的原理就是利用高壓和高熱釋放的潛熱進(jìn)行滅菌。高溫能使微生物的蛋白質(zhì)和酶變性或凝固(結(jié)構(gòu)改變導(dǎo)致功能喪失),新陳代謝受到障礙而死亡,從而達(dá)到消毒與滅菌的目的。(七)高壓蒸汽滅菌器的使用1、高壓蒸汽滅菌的原理1052、高壓蒸氣滅菌器的種類(lèi)下排氣上排氣預(yù)真空3、高壓滅菌器的基本操作4、不同樣品的滅菌要求注意:密封的廢物袋中的溫度有可能比滅菌艙溫度低最高達(dá)10℃2、高壓蒸氣滅菌器的種類(lèi)106冷空氣排除量對(duì)溫度(℃)的影響
壓力(磅)
冷空氣排除量全排除2/31/21/3全未排5109.100949072101151091051009015121115.511210910020126121.5118115109冷空氣排除量對(duì)溫度(℃)的影響
壓力(磅)冷空氣排除量全1075、壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè)化學(xué)指示劑:利用其顏色及性狀的改變判斷是否達(dá)到滅菌條件。指示卡或指示膠帶的顏色或性狀均變至規(guī)定的條件,可認(rèn)為該滅菌過(guò)程已完成。只能指示滅菌溫度,指示物品是否經(jīng)過(guò)滅菌處理,不能表明滅菌物品是否達(dá)到滅菌要求。生物指示劑:是最關(guān)鍵的滅菌測(cè)試。化學(xué)指示劑≠生物指示劑的監(jiān)測(cè)嗜熱脂肪桿菌芽胞(ATCC7953或SSIK31),監(jiān)測(cè)建議:化學(xué)指示劑要求每鍋進(jìn)行;生物監(jiān)測(cè)每月進(jìn)行一次;5、壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè)1086、壓力蒸汽滅菌失敗的原因冷空氣排除不徹底,在同一溫度下進(jìn)行滅菌,熱空氣比蒸汽所需時(shí)間延長(zhǎng)3-10倍;滅菌時(shí)間不夠;包裝形式、擺放位置及裝載量不正確。包裝材料應(yīng)用帶氣孔的器具,允許物品包內(nèi)部的空氣排出和蒸汽的透入;裝載量小于80%;滅菌物品不能貼靠門(mén)和四壁;6、壓力蒸汽滅菌失敗的原因109(八)消毒劑的合理使用1、消毒劑的合理使用高效消毒劑:過(guò)氧乙酸、甲醛、戊二醛、二氧化氯、含氯消毒劑中效消毒劑:碘類(lèi)、醇類(lèi)、酚類(lèi)低效消毒劑:苯扎溴胺、醋酸氯己腚等雙胍類(lèi)2、微生物對(duì)消毒劑的抗性(由低到高依次為):細(xì)菌繁殖體、親脂病毒、真菌、親水病毒、細(xì)菌芽孢、朊蛋白3、實(shí)驗(yàn)室消毒常用的消毒劑(八)消毒劑的合理使用1、消毒劑的合理使用1104、實(shí)驗(yàn)室消毒常用的消毒方法皮膚表面及手的消毒:碘類(lèi)、醇類(lèi)、雙胍類(lèi)、季胺鹽類(lèi)物體表面的消毒:含氯消毒劑金屬器材的消毒:戊二醛玻璃器皿的消毒:過(guò)氧乙酸、含氯消毒劑4、實(shí)驗(yàn)室消毒常用的消毒方法111(九)實(shí)驗(yàn)室污染性材料和廢棄物處理
1、定義醫(yī)療廢物是指醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)在醫(yī)療、預(yù)防、保健以及其他相關(guān)活動(dòng)中產(chǎn)生的具有直接或者間接感染性、毒性以及其他危害性的廢物。(九)實(shí)驗(yàn)室污染性材料和廢棄物處理
1、定義1122、處理方法
包裝物和容器污染性材料專(zhuān)用包裝袋或容器(防滲漏),應(yīng)當(dāng)有明顯的警示標(biāo)識(shí)說(shuō)明。消毒滅菌處理對(duì)盛放感染性廢棄物進(jìn)行高壓滅菌處理,包裝袋口不要扎得過(guò)緊。對(duì)經(jīng)高壓滅菌處理后重復(fù)使用的感染性材
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