人教版教學課件微生物的分離與計數(shù)

專題2:微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1我們學習了培養(yǎng)基的配制以及微生物的培養(yǎng)（接種技術(shù)）。T面我們來學習如何進行細菌的分禺，獲得所需要的目的微生物，并對目的微生物進行培養(yǎng)計數(shù)。一、研究思路篩選菌株自然界篩選：根據(jù)它對生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。實驗室篩選：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。選擇培養(yǎng)基：在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。目的是從眾多微生物中分離所需要的微生物。統(tǒng)計菌落數(shù)目測定微生物數(shù)量的方法：1、直接計數(shù)法：最常用的顯微鏡直接計數(shù)。先將待測樣品制成懸液，然后取一定量的懸液放在顯微鏡下進行計數(shù)。根據(jù)在顯微鏡下觀察到的微生物數(shù)目來計算出單位體積內(nèi)的微生物總數(shù)。優(yōu)點:設(shè)備簡單、能觀察微生物的形態(tài)特征。缺點：不能區(qū)分死菌和活菌；難以計數(shù)微小的細菌。一般用于純培養(yǎng)懸浮液中各種單細胞菌體的計數(shù)。

2、間接計數(shù)法：最常用稀釋涂布平板計數(shù)法應(yīng)用：統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目原理：當樣品的稀釋度足夠高時基表苗至長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。（注意）：一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進行記數(shù)。稀釋度很重要，一般選擇三個稀釋度中的第二稀釋度到平板所出現(xiàn)的平均菌落數(shù)在50個左右為最好。操作：設(shè)置重復組，增強實驗的說服力和準確性。將待測樣品經(jīng)過一系列的稀釋，然后選擇三個稀釋度的菌液均勻涂布在平板上，然后培養(yǎng)。(注意)：為了結(jié)果接近真實值，可將同一稀釋度菌液涂布到3個或3個以上的平板上，經(jīng)培養(yǎng)，計算出菌落的平均數(shù)。對照原則：判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染，將未接種的培養(yǎng)基同時進行培養(yǎng)。判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用，對照培養(yǎng)基接種后培養(yǎng)觀察菌落數(shù)目。計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=(C/V)*M1、實驗設(shè)計原理：尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，只有當土壤中的細菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。尿素細菌能合成月尿酶，在月尿酶的作用下尿素被分解成氨。CO(NH2)2+H2O—>CO2+2NH3實驗設(shè)計的內(nèi)容包括實驗方案、材料用具、買施步驟和時間安排等。實驗流程：土壤取樣I樣品系列稀釋涂布平板與培養(yǎng)觀察并記錄結(jié)果菌落計數(shù)1、土壤微生物主要分布在距地表3?8cm的近蟲性土壤中，

約70%?80%為細菌。2、分離不同的微生物采用不同的稀釋度，其原因是不同微生物在土壤中含量不同,其目的是保證獲得菌落數(shù)在30?300之間、適于計數(shù)的平板。細菌稀釋度為104、105、106,

放線菌稀釋度為103、104、105,

貢菌稀釋度為102、103、104。3、培養(yǎng)不同微生物往往需要不同培養(yǎng)溫度。

細菌一般在30?37弋培養(yǎng)1?2d,

放線菌一般在迓迦°C培養(yǎng)5?7d,

霉菌一般在25?28°C的溫度下培養(yǎng)3?4do4、在菌落計數(shù)時，每隔24h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目。選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果，以防止因培養(yǎng)吐間丕足而導致遺漏菌落的數(shù)目o點評：菌種中有些菌體增殖快，有些菌體增值慢，所以培養(yǎng)時間要充足，使得每個菌體都能形成肉眼可觀察到的菌落。5、菌落的特征包括形狀、大小、隆起程度、顏色等方面。22二、結(jié)果分析與評價矍的雑離的菌種作進-步的鑒定,還需要借助申尿素分解成了隼。氨一一★—…?…—十—亠十_因此，我們可觸碗測培養(yǎng)基衛(wèi)乩變化頼斷該化孚反應(yīng)是否發(fā)生。(3)在以處囂為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入璽紅指示劑。培莠某靜番后，如果PH升高，指示劑W&,說明該細曲能堿分解尿素。［思考1卽測定飲水中大腸桿巒量的方法是將一定體積的水用細曲過濾器過濾后，將菠膜放到伊紅羨藍心'腸桿菌CV9'八'E7AAYV課堂總結(jié)、點評五、課余作業(yè)活菌計數(shù)技術(shù)廣泛應(yīng)用于土壤含菌量的測、食品衛(wèi)生和水源污染度的檢測。選做：1＞空氣中微生物總數(shù)的檢測2、水中細菌總數(shù)的檢測3、牛奶中細菌的分離與計數(shù)4、土壤中真菌（或放線菌）的分離與技術(shù)數(shù)目，其結(jié)果與實際值相比（）比實際值高比實際值低和實際值一致比實際值可能高也可能低?有些細菌含有尿素分解酶，能將尿素瓊脂培養(yǎng)基中的尿素分解生成氨，氨溶于水變成氫氧化鞍，導致培養(yǎng)基變成堿性，使酚紅指示劑呈現(xiàn)紅色。練一練?下列能選擇岀分解尿素的細菌的爭穂是（）A.KH2PO4、NA2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄鐫、尿素、瓊脂、水B.KH2PO4、NA2HPO4.MgSO4