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免疫血液學(xué)第五章血液成分制備第一頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日輸血前檢查的目的和要求選擇與患者血型配合的各種血液成分,使之能在患者體內(nèi)有效地存活,無(wú)不良反應(yīng)。即輸入的紅細(xì)胞在患者體內(nèi)必須不溶血,輸入的血漿成份不導(dǎo)致患者紅細(xì)胞破壞,也就是供者與患者之間的血液在免疫血液學(xué)方面“相溶”從而達(dá)到安全、有效輸血的目的。第二頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日二、輸血前檢查的內(nèi)容包括以下幾個(gè)方面:1、患者的病史和標(biāo)本等的檢查、核對(duì)及處理。2、受血者、獻(xiàn)血者ABO和Rh血型鑒定。3、不規(guī)則抗體的篩選和鑒定。4、交叉配血試驗(yàn)5、標(biāo)簽和發(fā)血。第三頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日(一)標(biāo)本的要求1、標(biāo)本必須經(jīng)鑒定和標(biāo)記,確實(shí)來(lái)自患者和獻(xiàn)血者。2、符合患者體內(nèi)狀態(tài),能代表患者當(dāng)前的免疫學(xué)情況,3、防止血樣的稀釋和溶血的產(chǎn)生。(輸液患者對(duì)側(cè)抽血)4、最好用血清(血漿有纖維蛋白原的干擾)配血5、輸血后所有標(biāo)本(患者及供者)保存2-8℃一周。第四頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日(二)ABO血型鑒定用抗A和抗B試劑檢測(cè)紅細(xì)胞抗原,稱之正定型,用A型和B型、O型紅細(xì)胞檢測(cè)血清中抗體稱之反定型人ABO血型由紅細(xì)胞抗原和血清抗體所決定,其正、反定型相符。見(jiàn)表ABO血型常規(guī)定型

正定型(檢查紅細(xì)胞抗原)反定型(檢查血清中抗體)血型紅細(xì)胞標(biāo)本+抗體試劑血清標(biāo)本+標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞試劑抗A抗BA細(xì)胞B細(xì)胞O細(xì)胞A型+--+-B型-++--O型--++-AB型++---第五頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日2、ABO血型正反定型不符及其原因可能因?yàn)椴僮骷夹g(shù),管理上問(wèn)題也可能是紅細(xì)胞和血清標(biāo)本問(wèn)題第六頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日(1)技術(shù)操作、管理錯(cuò)誤假陰性結(jié)果:試管中未加入抗體試劑或血清未能認(rèn)識(shí)溶血也是陽(yáng)性反應(yīng)血清或試劑與紅細(xì)胞比例太小離心速度時(shí)間不夠使用了失效的抗體和紅細(xì)胞試劑沒(méi)能正確地記錄和解釋試驗(yàn)結(jié)果。假陽(yáng)性結(jié)果:離心速度過(guò)大和離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)使用了受到細(xì)菌污染的試劑使用了不干凈的試管、器皿錯(cuò)誤記錄、解釋試驗(yàn)結(jié)果第七頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日(2)紅細(xì)胞標(biāo)本相關(guān)問(wèn)題①某些ABO亞型、白血病或其它惡性疾病病人紅細(xì)胞ABO抗原太弱(或缺乏),抗A抗B試劑未能出現(xiàn)預(yù)期的凝集反應(yīng)。②紅細(xì)胞獲得性或遺傳性的異常,如獲得性B抗原紅細(xì)胞或Tn/T多凝集紅細(xì)胞,試劑可與這些異常的紅細(xì)胞反應(yīng)③懸浮紅細(xì)胞的血清或血漿中含的型物質(zhì)濃度高,中和了抗體試劑,出現(xiàn)假陰性,如卵巢囊腫病例。④病人紅細(xì)胞自凝,病人血清中高活性,高濃度自身凝集嚴(yán)重致敏(包被)自身紅細(xì)胞,以至在稀釋液存在下,自發(fā)地發(fā)生凝集,而不是抗體試劑的特異性作用。⑤近期輸血:輸入過(guò)與自身血型不一致的血液,使標(biāo)本成為“混合外觀凝集”第八頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日(3)血清標(biāo)本的問(wèn)題①異常的血漿蛋白:受檢查血漿中異常的白蛋白,球蛋白比例(某些肝病、傳染病如結(jié)核、多發(fā)性骨髓瘤等疾病患者球蛋白增加)高濃度的纖維蛋白原(心梗、感染、外傷、腫瘤患者)均易使紅細(xì)胞發(fā)生緡錢狀凝集現(xiàn)象。②免疫抑制疾病或免疫抑制治療的病人血清中ABO抗體減少或消失。③年齡:老年人隨年齡增高,ABO抗體減弱,嬰兒血清抗體是陰性或很弱(0-6月不做反定型)④不規(guī)則抗體的存在:反復(fù)多次輸血者妊娠者血清中有ABO血型以外的同種異型抗體,如鹽水抗M、高效價(jià)冷凝集素抗I。第九頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日(三)Rh(D)定型和定型中應(yīng)注意的問(wèn)題假陽(yáng)性結(jié)果:受檢細(xì)胞已被免疫球蛋白致敏,受檢細(xì)胞與血清孵育的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)多凝集細(xì)胞造成定型的假陽(yáng)性器材或抗血清被污染,造成的假陽(yáng)性假陰性結(jié)果:受檢細(xì)胞濃度太高,與抗血清比例失調(diào)漏加或錯(cuò)加定型血清定型血清使用方法錯(cuò)誤抗血清保存不當(dāng),導(dǎo)致失效第十頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日關(guān)于弱D(傳統(tǒng)稱Du型)弱D型(Du型)是D的弱抗原,這種抗原與大部分鹽水抗D試劑不產(chǎn)生直接凝集反應(yīng),而與部分的IgG抗D血清用間接抗球蛋白試驗(yàn)反應(yīng)陽(yáng)性弱D(Du型)鑒定:三種不同批號(hào)的IgG抗D定型—如果全部陰性方可認(rèn)定患者為RhD陰性,否則為弱D弱D臨床意義:作為供血者Du→RhD陽(yáng)性作為受血者Du→RhD陰性第十一頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日(四)不規(guī)則抗體篩選和鑒定1對(duì)受血者的血清做抗體篩選,以發(fā)現(xiàn)有臨床意義的不規(guī)則抗體,不規(guī)則抗體是指抗A抗B以外的血型抗體抗體篩選的原則讓受檢血清與已知的試劑紅細(xì)胞起反應(yīng),以發(fā)現(xiàn)在37℃中有反應(yīng)的抗體方法:鹽水法、凝膠法、聚凝胺法、抗球蛋白試驗(yàn)等抗體篩選陽(yáng)性的,則須做鑒定試驗(yàn),以確定其特異性第十二頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日(五)交叉配血試驗(yàn)1、要求及內(nèi)容主側(cè):受血者血清+供者紅細(xì)胞——檢測(cè)對(duì)供者紅細(xì)胞起反應(yīng)的抗體。次側(cè):供者血清+受者紅細(xì)胞——檢測(cè)對(duì)受者紅細(xì)胞起反應(yīng)的抗體。自身對(duì)照:Rs+Rc——顯示自身抗體、直抗陽(yáng)性。第十三頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日2、方法

鹽水交叉配血試驗(yàn):檢出IgM類抗體。檢測(cè)不完全抗體的交叉配血試驗(yàn)蛋白酶(木瓜酶、波蘿酶)傳統(tǒng)抗人球蛋白試驗(yàn)新方法:促凝劑(凝聚胺)微柱凝膠試驗(yàn)第十四頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日3、配血中異常原因與處理①緡線狀假凝集特點(diǎn):顯微鏡下紅細(xì)胞膜完整,細(xì)胞界限清晰地成線串聚集37℃、室溫結(jié)果一樣,不受溫度影響,但加鹽水即可散開(kāi)。解決方法:被檢細(xì)胞用鹽水洗滌后再配血。②自身抗體造成配血不合,共同特點(diǎn)是患者血清能凝集自身紅細(xì)胞天然自身冷凝激素獲得性病理性自身冷抗體:直抗陽(yáng)性/室溫較37℃強(qiáng)/Rs+Oc>Rs+Rc自免溶貧血清中的溫型自身抗體,直抗陽(yáng)性/37℃≥室溫③血清中的不規(guī)則凝集素第十五頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日三、常規(guī)和緊急情況下的發(fā)血程序血液的申請(qǐng):醫(yī)生填寫(xiě)輸血申請(qǐng)單護(hù)士抽取血樣,送至血庫(kù)檢驗(yàn)師進(jìn)行血型鑒定、抗體篩選選擇血液,交叉配血填寫(xiě)輸血記錄單發(fā)血給護(hù)士第十六頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日第七節(jié)新生兒溶血病一、新生兒溶血病的發(fā)病機(jī)制二、新生兒溶血病的臨床癥狀三、新生兒溶血病的血清學(xué)檢查四、新生兒溶血病治療與預(yù)防五、新生兒換血和輸血第十七頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日什么是新生兒溶血???新生兒溶血?。╤emolyticdiseaseofthenewborn)簡(jiǎn)稱HDN。指母嬰血型不合,孕母體內(nèi)存在著與胎兒紅細(xì)胞不配合的IgG性質(zhì)的血型抗體,該抗體通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒體內(nèi),作用于胎兒紅細(xì)胞使之產(chǎn)生不同程度溶血。第十八頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日二、臨床癥狀

被IgG抗體體致敏的胎兒紅細(xì)胞在分娩前后加速破壞,這在臨床上有多種表現(xiàn),嚴(yán)重可致胎兒宮內(nèi)死亡,輕者只在血清學(xué)中有所表現(xiàn),嬰兒卻很健康,HDN的病理變化主要同紅細(xì)胞溶解所引起的,大量紅細(xì)胞破壞使紅細(xì)胞數(shù)目減少,引起貧血,組織和臟器因供氧減少而發(fā)生缺氧、并可影響其功能主要表現(xiàn)為水腫、黃疸、貧血、肝脾腫大、核黃疸。第十九頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日水腫——全身性、伴低蛋白血癥;胸水、腹水、心包積液。黃疸——進(jìn)行性黃疸增高膽紅素51.3mol/L(3mg%)臍帶膠質(zhì)黃疸(4-6mg%)面部淡黃(15-18mg%)面部+軀干橙黃,手心足底、呈淡黃

>342(>20mg%)手足橙黃色第二十頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日貧血——組織缺氧:心律快、組織增高、嗜睡、少吃、少哭、心衰。肝脾腫大——骨髓外造血組織來(lái)代償引起核黃疸——未結(jié)合膽紅素是對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有毒害的物質(zhì),嬰兒大腦發(fā)育未成熟,血腦屏障不健全,過(guò)多的未結(jié)合膽紅素可影響腦組織——腦神經(jīng)基底核,使腦神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生變性——表現(xiàn)為發(fā)熱、嗜睡、吸吮反射弱、痙攣、肌張力病死率高,存活后有智力不全,運(yùn)動(dòng)障礙。第二十一頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日三、血清學(xué)檢查1、測(cè)母子(父)ABO血型,確定ABO相合/不相合2、患兒標(biāo)本檢查:(1)直接抗球蛋白試驗(yàn):ABO溶血病患兒紅細(xì)胞上抗體結(jié)合得很少,常得到陰性結(jié)果(2)釋放試驗(yàn):陽(yáng)性,紅細(xì)胞上有IgG抗體(3)游離抗體:陽(yáng)性,就證明新生兒病情會(huì)繼續(xù)加重第二十二頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日

新生兒血清中游離抗體檢查與指示紅細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果判定

AcBcOc

+--有游離的抗A抗體-+-有游離的抗B抗體++-有游離的抗A、抗B或抗A,B抗體+/-+/-+有游離的ABO系統(tǒng)以外抗體---無(wú)游離的抗體第二十三頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日

患兒紅細(xì)胞抗體釋放試驗(yàn)與指示紅細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果判定AcBcOc

+--釋放出IgG抗A抗體-+-釋放出IgG抗B抗體++-釋放出IgG抗A、抗B或抗A,B抗體---未釋放出抗體+++釋放出ABO血型系統(tǒng)以外的抗體第二十四頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日

新生兒ABO

HDN血清學(xué)試驗(yàn)直接抗球游離抗體抗體釋放結(jié)果意義蛋白試驗(yàn)試驗(yàn)試驗(yàn)判定+++確診ABO

HDN

+-+確診ABO

HDN

--+確診ABO

HDN

+--可疑可疑ABO

HDN

-+-可疑可疑ABO

HDN

---否定血清學(xué)試驗(yàn)未能證實(shí)HDN第二十五頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日四、治療(一)藥物治療:葡萄糖、白蛋白(二)光照(藍(lán)光照射):膽紅素能吸收光,以波長(zhǎng)450-460m作用最強(qiáng),未結(jié)合膽紅素(Z)轉(zhuǎn)化為異物體(E)后者不能進(jìn)入腦組織,為無(wú)毒水溶性,雙吡咯,易從尿內(nèi)排出,使血清膽紅素濃度降低。(三)換血:換出抗體和致敏紅細(xì)胞,減輕溶血,糾正貧血,防心衰,換血清膽紅素,防核黃疸。ABO系HDN:O型洗滌細(xì)胞加AB血漿/同型漿Rh系HDN:ABO血型同患兒,Rh血型同母親如子B型母Accdee血清含有抗D選B型D陰性血。第二十六頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日(一)宮內(nèi)輸血(二)提早分娩>64妊娠期內(nèi)的治療:(三)藥物治療孕婦服Vc、VE、VK注射葡萄糖,吸氧,苯巴比妥為酶的誘導(dǎo)劑,促進(jìn)肝臟清除膽紅素,新生兒輸白蛋白,能結(jié)合膽紅素防核黃疸。預(yù)防:對(duì)未致敏的Rh陰性婦女在分娩Rh陽(yáng)性嬰兒72小時(shí)內(nèi),肌注30mg(145-435mg)抗Rh(D)IgG,通常可預(yù)防Rh陰性婦女發(fā)生同種免疫。第二十七頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日第五章血液成份制備第一節(jié)血液的生理功能輸送氧氣和二氧化碳,在肺臟和人體組織間進(jìn)行氣體交換。輸送養(yǎng)分到組織,從組織帶走代謝產(chǎn)物。輸送激素,維生素和各種藥物。維持滲透壓、酸堿度以及電解質(zhì)平衡保持體溫恒定防御微生物或異物入侵有效的凝血和纖維蛋白溶解機(jī)制第二十八頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日細(xì)紅細(xì)胞——人體的內(nèi)呼吸,向機(jī)體組織運(yùn)送O2、帶走CO2、由

Hb完成胞白細(xì)胞——粒細(xì)胞——中性、嗜酸、嗜堿、免疫系統(tǒng),吞噬破壞入侵細(xì)胞成淋巴細(xì)胞——T細(xì)胞參與細(xì)胞免疫B細(xì)胞參與體液免疫分40-45%血小板——粘附,釋放凝固、收縮非(血漿)白蛋白保持滲透壓和體液平衡;載體蛋白的作用,傳遞運(yùn)輸細(xì)胞免疫球蛋白——血漿中具有抗體活性的球蛋白的統(tǒng)稱,它包括所有血液中的抗體。成分凝血因子共14個(gè)、血漿中含除組織因子(FIII)外所有因子55-60%凝血過(guò)程分三個(gè)階段,凝血酶原激活物的形成,凝血酶原激活形成凝血酶;纖維蛋白原分解形成纖維蛋白。分內(nèi)源性途徑、外源性途徑和共同途徑。第二十九頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日第二節(jié)全血保養(yǎng)液ACDCPDCPDA-1組成成分枸櫞酸-枸櫞酸三鈉、葡萄糖Acid-Cutrate-Dextrose枸櫞酸鹽、磷酸鹽、葡萄糖Citrate-Phosphate-Dextrose

添加腺嘌呤(A)枸櫞酸鹽:抗凝葡萄糖:維持紅細(xì)胞代謝枸櫞酸:降PH到5.0解決葡萄糖焦糖化磷酸鹽:調(diào)節(jié)PH到5.6以利于維持血液中2、3-DPC(2,3二磷酸甘油酸)維持細(xì)胞放氧能力。腺嘌呤(A)是ATP的一個(gè)成分,能增加ATP合成

保存期限*21天21天35天第三十頁(yè),共三十五頁(yè),2022年,8月28日

血液成分的最佳保存條件紅細(xì)胞:4℃±2℃血小板:22℃±2℃水平振蕩,如4℃貯存,24h50%以上喪失功能,48h減小顯著,72h基本無(wú)止血作用,5天全部遭破壞。白細(xì)胞:室溫,24h微量減弱,3-5天顯著減弱,7天完全消失凝血因子:-20℃以下冷凍保

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