GB 15193.4-2003鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗

CS07.100C53中華人民共和國國家標準GB：15193.4一2003代替GB15193.4一1994鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗Salmonellatyphimurium/mammalsmicrosomalenzymetest(Amestest)2003-09-24發(fā)布2004-05-01實施中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布中國國家標準化管理委員會

GB15193.4—2003前本標準全文強制。本標準代替GB15193.4一1994《鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗》本標準與GB15193.4一1994相比主要修改如下：a）在"范圍”中增加了受試物的具體內容：食品生產(chǎn)、加工、保藏、運輸和銷售過程中所涉及的可能對健康造成危害的化學、生物和物理因素，檢驗對象包括食品添加劑(含營養(yǎng)強化劑）、食品新資源及其成分、新資源食品、輻照食品、食品容器與包裝材料、食品工具、設備、洗滌劑、消毒劑農藥殘留、獸藥殘留、食品工業(yè)用微生物等;增加本標準的不適用范圍：b增加對照組的設置；在“培養(yǎng)基制備及試劑的配制"中將-1.5%瓊脂培養(yǎng)基的配制方法中將“加蒸雷水400mL”改為“加蒸水至400mL"；-0.5mmol/L組氨酸-生物素溶液（誘變試驗用)配制方法中的L-組氨酸加入量由“17.4mg”改為"19.5mg”-頂層培養(yǎng)基制備方法中每100mL頂層瓊脂中"加10mL10.5mol/L”改為“加10mL0.5mmol/L";-將L-組氨酸溶液和0.5mol/LD-生物素溶液（鑒定菌株用)中的"0.5mol/L”改為“0.5mmol/L”,其后面內容中的“0.5mol/L生物素”的濃度均改為“0.5mmol/L”。將原標準"7受試物劑量、溶劑和特殊處理”標題改為“試驗設計及受試物的特殊處理”.并增加對照組設置內容；刪除"Ames試驗報告”的內容e）本標準的附錄A為規(guī)范性附錄。自本標準實施之日起,GB15193.4—1994同時廢止。本標準由中華人民共和國衛(wèi)生部提出并歸口。本標準起草單位：中國疾病預防控制中心營養(yǎng)與食品安全所、北京醫(yī)科大學、浙江醫(yī)科大學，本標準主要起草人：戴寅、丁蘭、金鐘初、郭世萍本標準于1994年首次發(fā)布，本次為第一次修訂。

GB15193.4—2003鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗范圍本標準規(guī)定了Ames試驗的基本技術要求本標準適用于評價食品生產(chǎn)、加工、保藏、運輸和銷售過程中所涉及的可能對健康造成危害的化學生物和物理因素的致突變作用，檢驗對象包括食品添加劑（含營養(yǎng)強化劑)食品新資源及其成分、新資源食品、輻照食品、食品容器與包裝材料、食品工具、設備、洗滌劑、消毒劑、農藥殘留、獸藥殘留、食品工業(yè)用微生物等。本標準不適用于具有殺菌和/或抑菌作用的受試物.不適用于具有妨礙哺乳動物細胞復制系統(tǒng)的受試物2原理鼠傷寒沙門氏菌的突變型(即組氨酸缺陷型)菌株在無組氨酸的培養(yǎng)基上不能生長,在有組氨酸的培養(yǎng)基上可以正常生長。但如在無組氨酸的培養(yǎng)基中有致突變物存在時,則沙門氏菌突變型可回復突變?yōu)橐吧?表現(xiàn)型),因而在無組氨酸培養(yǎng)基上也能生長，故可根據(jù)菌落形成數(shù)量，檢查受試物是否為致突變物。某些致突變物需要代謝活化后才能使沙門氏菌突變型產(chǎn)生回復突變,代謝活化系統(tǒng)可以用多氯聯(lián)苯(PCB)誘導的大鼠肝勾漿（S-9)制備的S-9混合液3儀器實驗室常用設備3.1低溫高速離心機，低溫冰箱（-3.2(－80℃)或液氮罐，潔凈工作臺，恒溫培養(yǎng)箱，恒溫水浴，蒸氣壓力鍋.勺漿器等。4試劑培養(yǎng)基成分或試劑除說明外至少應是化學純.無誘變性。避免重復高溫處理,選擇適當保存溫度和期限，如肉湯保存于4℃不超過六個月，其他詳見下述各培養(yǎng)基及溶液說明。4.1營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基牛肉膏2.58陜陳(或混合蛋白陳)5.0g氯化鈉2.5g磷酸氫二鉀(K.HPO，·3H.O)1.3g蒸餡水500mL加熱溶解,調pH至7.4.分裝后0.103MPa20min滅菌,普通冰箱保存?zhèn)溆?，保存期不超過半年4.2營養(yǎng)肉湯瓊脂培養(yǎng)基用作基因型鑒定