蟾蜍腸系膜微循環(huán)標本制作以及在體微循環(huán)顯微觀察

基礎(chǔ)生物學技術(shù)試驗蟾蜍腸系膜微循環(huán)標本制作以及在體微循環(huán)顯微觀察；蟾蜍消化系統(tǒng)的解剖實習實驗目的1、熟練掌握“雙毀髓”手術(shù)技術(shù)。2、熟練使用手術(shù)器械。尤其是手術(shù)剪。3、蟾蜍腸系膜微循環(huán)標本的制作。4、用低倍、光鏡下觀察微循環(huán)（注意動脈、靜脈與毛細血管）。5、注意觀察蟾蜍體腔內(nèi)寄生蟲。6、盡可能完整取出“消化系統(tǒng)”，于解剖盤空白處，拍照后插入實驗報告。二、實驗原理1、四大基本系統(tǒng)：運動與支持（包括肌肉、骨骼、結(jié)締，有保護功能），神經(jīng)，循環(huán)，免疫2、內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)：免疫-神經(jīng)-內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)穩(wěn)定。3、疾病分類：內(nèi)環(huán)境失調(diào)，創(chuàng)傷，癌癥，外部致病原4、癌癥成因：原癌基因（細胞因子，控制細胞分裂）過度表達，抑癌基因（P53基因）表達不足。癌癥細胞間轉(zhuǎn)移，由于抑癌基因受癌癥部位切除而停止表達導致原癌基因在各處容易過量表達；或癌細胞隨血液轉(zhuǎn)移至各處。5、內(nèi)臟定義：有管道，直接或間接與體外連接。6、排泄與排異：泌尿?qū)儆谂判?，排除代謝產(chǎn)物。排便屬于排異，未經(jīng)過同化。7、循環(huán)系統(tǒng)維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，世代交替維持種系穩(wěn)態(tài)。8、循環(huán)系統(tǒng)：a、心血管系：心臟，動脈，毛細血管，靜脈。肝門靜脈收集營養(yǎng)血過肝臟。b、淋巴系：淋巴導管，器官脾臟（無導管非內(nèi)臟），淋巴結(jié)，毛細淋巴管9、消化系統(tǒng)：蟾蜍的消化系統(tǒng)由消化道及連附于消化道旁的各種消化腺所組成，直接或間接擔任食物的消化與吸收。其組成如下：（1）消化道食管，亦稱食道，長度不到一公分，位于喉的背面，身體正中線。外表光滑，內(nèi)壁有縱行褶皺，下端和胃相連。胃，是消化管中最龐大的部分，微微偏居體腔左側(cè)，有左向右形稍彎曲，前闊后狹。上連食道的一段稱賁門，其下為胃底，再下端連接小腸處稱幽門，有一圈括約肌所形成的幽門瓣，可以控制幽門開閉。背側(cè)有腹膜經(jīng)折疊而成的網(wǎng)膜，腹側(cè)有胃肝指腸韌帶，即小網(wǎng)膜，用以和十二指腸與肝維系。小腸：起于幽門之后，其彎向前方的一小段是十二指腸，長度約等于為的一半，胰臟即位于此套彎中。十二指腸末端折向后方，稱作回腸經(jīng)過幾個回旋之后，下通寬闊的大腸。大腸：小腸接近末端的部位向前方彎曲，接著是一根膨大陡直的大腸，位于正中線上。此大腸無各段結(jié)腸，如其直腸正中一段，常將蛙類大腸稱直腸。（2）消化腺肝：外形呈塊狀，體積與顏色隨季節(jié)不同有變化，夏季營養(yǎng)好，肝體積大顏色淺，出現(xiàn)紅褐色或淡褐色。冬季及早春營養(yǎng)不足，肝體積小顏色深，出現(xiàn)紫紅或深褐色。一般蛙類有三塊肝葉。肝門靜脈從肝指腸韌帶后方通入肝臟。膽囊：在肝的背面左右兩葉之間，用結(jié)締組織與腹膜和肝臟連接，近于圓形。儲存肝臟分泌暗綠色或黃綠色膽汁。向外有兩根膽囊管。一根與肝管連接，另一根與膽總管連接。胰：淡紅或黃白色管狀腺，外形不規(guī)則，靠近胃小彎一緣平滑，其他各緣有很多瓣狀缺刻。10、微循環(huán)：指微動脈和微靜脈之間血液循環(huán)，微循環(huán)區(qū)是血液與組織液直接進行物質(zhì)交換的場所，其血流情況可以借助于顯微鏡來觀察。蟾蜍的腸系膜部位的組織薄，適合于直接觀察微循環(huán)區(qū)血管的舒縮與血流情況。動物與器材實驗動物：大蟾蜍實驗器材：解剖盤，動物探針，解剖剪，骨剪，鑷子，眼科鑷，眼科剪，圖釘，光學顯微鏡方法與步驟1、握拿蟾蜍方法：將蟾蜍后腿夾于小指與無名指之間，前腿夾于中指與無名指之間，食指按住蟾蜍頭部，拇指將蟾蜍坐骨向上推。2、用金屬探針在兩耳腺中點沿頭背中線向后移動，直到觸到一凹陷，即枕骨大孔。食指按壓蟾蜍頭部同時探針由凹陷處垂直插入1mm，再將探針由枕骨大孔向前平行插入顱腔并攪動，摧毀腦組織。3、將解剖針從顱腔抽出，沿枕骨大孔刺入脊柱，破壞脊神經(jīng)使得蟾蜍麻醉。4、將蟾蜍腹部朝上置于解剖盤上，四肢伸展，用鑷子提起腹部中央皮膚后解剖剪剪出一小口，將解剖剪伸進小口，以前三分之一刃口向前剪開至下顎處，向后剪至泄殖孔前方。或從其左腹下側(cè)剪開至左前腿。5、用鑷子提起下腹部肌肉，以解剖剪剪開一小口后將解剖剪伸進，刃口提起肌肉，剪開蟾蜍左腹肌肉。6、用鑷子夾出蟾蜍胃部，以大頭針固定在硅膠板圓孔一側(cè)。再夾出胃下部十二指腸處，以大頭針固定在胃部下側(cè)，使腸系膜處于圓孔中央。7、將硅膠板置于顯微鏡下觀察腸系膜內(nèi)毛細血管及寄生于腸系膜的寄生蟲。8、去下硅膠板，剪開蟾蜍腹部肌肉，用骨剪剪斷蟾蜍胸骨。以解剖剪剪斷食管及乙狀結(jié)腸與身體連接處，再用鑷子提起各個部位，剪斷各器官下方網(wǎng)膜，去除消化呼吸系統(tǒng)。9、分離觀察各個器官。10、處理實驗蟾蜍，洗凈實驗器具，自身清潔。五、實驗結(jié)果血管動脈端毛細血管網(wǎng)靜脈段 血管動脈端毛細血管網(wǎng)靜脈段寄生蟲卵寄生蟲卵小腸胃乙狀結(jié)腸膽囊胰臟肝臟小腸胃乙狀結(jié)腸膽囊胰臟肝臟實驗結(jié)論1、毛細血管在顯微鏡下可明顯觀察到血液慢速流動，毛細血管動脈端流速快，血管壁厚，有搏動，靜脈端流速慢，紅細胞排列經(jīng)過，血管壁薄。2、蟾蜍的消化系統(tǒng)包括口咽腔，食道，肝，胃，胰腺，腸，泄殖腔。七、問題解答1、制作微循環(huán)標本注意點剪開肌肉及夾出胃部的時候不可使血管破裂出血，否則現(xiàn)象不明顯。2、蟾蜍消化過程：消化道平滑肌作有節(jié)奏收縮，發(fā)生波浪形蠕動，使食物在消化道中與消化液拌合，向后緩慢推進，利于消化吸收。在蛙類口腔中不進行消化，在胃中和胃腺分泌的胃液混合，以鹽酸和胃蛋白酶將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化為可溶性蛋白胨。細碎食物通過幽門后進入小腸。胃液遇堿性胰液膽液后被中和。未消化的蛋白質(zhì)和經(jīng)蛋白酶作用后的蛋白胨遇胰蛋白酶和腸胨酶開始消化，最后變成氨基酸。淀粉經(jīng)胰液腸液作用后轉(zhuǎn)化為單糖。脂肪和凝脂受膽液作用先行乳化，再經(jīng)胰液脂肪酶作用成為甘油和脂肪酸。食物殘渣經(jīng)大腸吸收水分后進入乙狀結(jié)腸儲存。3、脾臟屬于內(nèi)臟嗎：不屬于，脾沒有導管與外界連接。4、門靜脈：門靜脈起于腹腔消化器官、脾等的毛細血管，經(jīng)逐級匯集后形成門靜脈，是肝臟血的主要來源。肝門靜脈由脾靜脈（腸系膜下靜脈注入脾靜脈）、腸系膜上靜脈匯合而成、回收來自腹腔臟器的血液。門靜脈內(nèi)沒有瓣膜，因此當門靜脈高壓時，血液則可經(jīng)屬支逆流。5、復雜定義：結(jié)構(gòu)剩余，如線粒體，葉綠體共生學說。人類復雜源于中等重復基因。參考文獻蛙體解剖學科學出版社基礎(chǔ)動物學復旦大學出版社生物學形態(tài)實驗指導