葉綠體色素的提取、分離及定量測(cè)定

葉綠體色素的提取、分離及定量測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果濾紙帶紙層析：推動(dòng)劑邊緣胡蘿卜素葉黃素葉綠素b（黃綠色）葉綠素a（藍(lán)綠色）推動(dòng)劑邊緣胡蘿卜素葉黃素葉綠素b（黃綠色）葉綠素a（藍(lán)綠色）圓形濾紙層析：葉黃素胡蘿卜素推動(dòng)劑邊緣葉綠素b（黃綠色）葉綠素a（藍(lán)綠色）葉黃素胡蘿卜素推動(dòng)劑邊緣葉綠素b（黃綠色）葉綠素a（藍(lán)綠色）葉綠素a、b含量的測(cè)定Ca=12.7A663—2.69A645Cb=22.9A645—4.68A663分光計(jì)測(cè)量數(shù)據(jù)：組數(shù)次數(shù)波長(zhǎng)組數(shù)次數(shù)66364512平均12平均12.8462.8462.8461.3081.3311.319522.6482.6442.6461.1371.1381.137532.6862.6842.6851.1801.1901.1852.7261.214Ca=31.35（稀釋后數(shù)據(jù)計(jì)算）Cb=15.04（稀釋后數(shù)據(jù)計(jì)算）問(wèn)題思考大部分植物依靠光合作用合成自身生長(zhǎng)繁殖所需的有機(jī)物。光合作用所需色素主要有類胡蘿卜素和葉綠素。其中直接參與光合的是葉綠素a，中心色素，其余為天線色素。葉綠素為雙羧酸的酯，一個(gè)羧基被甲醇酯化，另一個(gè)羧基被葉綠醇酯化。不溶于水而溶于有機(jī)溶劑如酒精、丙酮、石油醚。葉綠素a為藍(lán)綠色，葉綠素b為黃綠色。結(jié)構(gòu)的基本特點(diǎn)為擁有一個(gè)卟啉環(huán)頭部及一條葉醇鏈尾部。其卟啉環(huán)頭部由四個(gè)甲烯基和四個(gè)吡咯環(huán)連接而成，大環(huán)中央有一個(gè)鎂原子和四個(gè)氮原子結(jié)合。鎂原子帶正電荷，相連的氮原子偏于帶負(fù)電荷，因此卟啉環(huán)呈極性親水，可以與蛋白質(zhì)結(jié)合。尾部葉醇基具有疏水性，為脂溶性物質(zhì)。葉綠素a、b結(jié)構(gòu)基本相同，以-CHO代替CH3即為葉綠素b。葉綠素吸收光譜紙層析可行原因：色素可提取色素可以溶解于某些溶劑中不同類型色素在同一溶劑中溶解度不同色素分子不會(huì)吸附濾紙纖維上色素分子可以在體外條件下穩(wěn)定存在本次實(shí)驗(yàn)葉綠素a、b含量比值偏低，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)有誤差。而由于葉綠素a含有醛基，易于被氧化，亦可導(dǎo)致a的含量下降。同時(shí)由于實(shí)驗(yàn)在11月末進(jìn)行，植物中葉綠素含量下降，a，b的比值可能會(huì)受影響。實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：葉片要選取綠色較深的部位，去除葉脈；盡量先剪碎，便于之后的研磨；研磨前加入二氧化硅和碳酸鈉，注意用量。量少研磨不充分，葉綠素會(huì)被液泡中的有機(jī)酸破壞；量大不易過(guò)濾完全且會(huì)使色素層析時(shí)顏色變淡；過(guò)濾時(shí)所用棉花不可過(guò)多，否則濾液完全被棉花吸收。注意濾液不可用濾紙過(guò)濾，否則色素難以透過(guò)濾紙；劃線時(shí)需要