無菌檢驗(yàn)操作規(guī)程

醫(yī)療器械產(chǎn)品無菌檢驗(yàn)操作規(guī)程目的通過無菌檢驗(yàn)，確保滅菌后產(chǎn)品能夠到達(dá)無菌的要求。適用范圍適用于滅菌后醫(yī)療器械產(chǎn)品的無菌檢驗(yàn)。檢驗(yàn)依據(jù)〔2023年版〕GB14233.2-2023醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法其次局部：生物試驗(yàn)方法GB15980-1995一次性使用醫(yī)療用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)儀器、設(shè)備菌儀〔器、電子天平、PH計(jì)、冰箱、恒溫水浴鍋、酒精燈、三角燒瓶，接種環(huán)、無菌棉簽、鑷子，試管架，大試管假設(shè)干等。無菌檢驗(yàn)室的環(huán)境要求無菌檢驗(yàn)應(yīng)在環(huán)境干凈度10000級下的局部百級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)展。緩沖區(qū)與外界環(huán)境、無菌檢驗(yàn)室與緩沖區(qū)之間空氣應(yīng)保持正壓，陽性比照室與緩沖區(qū)之間空氣應(yīng)保持負(fù)壓。無菌檢驗(yàn)室與室外大氣之間靜壓差應(yīng)大于10Pa。無18～26℃，相對濕度：45～65%?！矃^(qū)〕懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)展懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的監(jiān)測。每年至少檢測一次。330min30～35℃培育1CFU/平板。無菌檢驗(yàn)前的預(yù)備器具滅菌、消毒滅菌：試驗(yàn)過程中與供試品接觸的全部器具必需承受牢靠方法滅菌。可經(jīng)160212130分鐘后使用〔依據(jù)滅菌效果驗(yàn)證打算滅菌參數(shù)。全部的滅菌物品不應(yīng)超過2周即用畢，否則應(yīng)重滅菌。消毒劑浸泡或擦拭。消毒劑應(yīng)每月更換，以防止產(chǎn)生耐藥菌株。效期。人員、物料進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室開啟紫外線燈或臭氧發(fā)生器進(jìn)展空間滅菌處理，消毒時間不得少于30min。物料進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室流程脫包：進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室的物品假設(shè)有雙重包裝的，需將外包裝在傳遞窗/緩沖間撤除后，傳入試驗(yàn)室。法進(jìn)展消毒處理，以避開將外包裝污染的微生物帶入無菌檢驗(yàn)室。期內(nèi)。符合要求的經(jīng)傳遞窗傳入無菌檢驗(yàn)室。人員進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室流程般區(qū)工作服。20秒，洗凈泡沫。等，要求褲子掖在上衣里，口罩掩住口鼻，帽子包裹全部頭發(fā)。手消毒：用消毒液浸泡雙手5毒液可用洗必泰、潔爾滅、碘伏、75%酒精等。人員進(jìn)入：經(jīng)緩沖間進(jìn)入無菌檢驗(yàn)室。7無菌檢驗(yàn)操作要求全過程必需嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，防止微生物污染。使用玻璃器皿應(yīng)輕取輕放，避開破損，以防培育物集中。中的塵埃微粒。使用金屬接種器具時，用前、用后均需灼燒滅菌。在接種培育物時，動作應(yīng)輕、準(zhǔn)，防止培育物濺出，產(chǎn)生汽溶膠，造成污染。隨用隨時放入消毒液缸內(nèi)浸泡或消毒桶內(nèi)，或在檢驗(yàn)完成后經(jīng)傳遞窗傳至一般區(qū)，12130分鐘。培育基制備需氣菌、厭氣菌培育基〔硫乙醇酸鹽流體培育基〕的制備所用試劑酸0.3ml〕5.0g2.5g0.11.0ml0.75g1000ml制備除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微溫溶解，調(diào)整pH為弱堿性，煮pH7.1±0.2。20分鐘〕快速冷卻，只限加熱一次，并應(yīng)防止被污染。霉菌培育基〔改進(jìn)馬丁培育基〕的制備所用試劑5.0g2.0g20.0g1.0g0.5g1000ml制備pH6.8，煮沸，加葡萄pH6.4±0.2。還可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培育基，依據(jù)使用說明書配制。121℃滅菌30分鐘。制備好的培育基應(yīng)在2～25℃保存，在3周內(nèi)使用?！部膳c產(chǎn)品無菌檢驗(yàn)同步進(jìn)展。檢查時，每批培育基隨機(jī)取不少于5支〔瓶〕培育14天，應(yīng)無菌生長。稀釋液、沖洗液的制備1.0g1000ml，微溫溶解，濾清，分裝后304℃保存?zhèn)溆谩?分裝后置入壓力121304℃保存?zhèn)溆?.56g7.23g、氯化1000ml。微溫溶解，濾清，分裝后置入壓力蒸汽滅菌121304℃保存?zhèn)溆?。浸提介質(zhì)：9g/L無菌氯化鈉溶液，可直接從有證單位選購大輸液。10比照菌液制備無菌檢驗(yàn)所用的菌株傳代次數(shù)不得超過5代。30～18～24h0.9%69.0ml0.9%12130min備用。將已配好1:10的菌液；1.0ml1:100的菌液，同法1:106〔ml含菌量≤100CFU〕即可。承受平皿計(jì)數(shù)法測定活菌數(shù)。無菌檢驗(yàn)培育溫度30～35℃培育。23～28℃培育。無菌檢驗(yàn)12.1項(xiàng)下各項(xiàng)。量菌片，滅菌后對菌片進(jìn)展無菌檢驗(yàn)。菌片貯存滅菌前、后菌片應(yīng)按菌片說明書規(guī)定條件保存。醇酸鹽流體培育基和未接種的改進(jìn)馬丁培育基作為陰性比照。培育30～3548～72小時。30～357天。23～287天。菌、厭氣菌和霉菌生長的為合格。如產(chǎn)品注冊標(biāo)準(zhǔn)中明確產(chǎn)品應(yīng)進(jìn)展無菌檢驗(yàn)，則執(zhí)行12.2.1～12.2.5。抽樣3～11個單位供試品。供試液預(yù)備試品不適宜直接投放，可按以下方法制備供試液，應(yīng)使浸提介質(zhì)充分洗供給試品的2小時內(nèi)使用。依據(jù)供試品具體特性選擇以下方法：管類器具：按管內(nèi)外表積每10cm2流過管內(nèi)腔1ml浸提介質(zhì)，流量約為10ml/min，收集到無菌的容器內(nèi)。10cm21ml的比例，振搖數(shù)集上述沖洗液或浸提介質(zhì)于無菌容器中。接種〔集菌器膜過濾器。濾膜孔經(jīng)不大于0.45μｍ。濾器和濾膜使用前應(yīng)承受適宜的方法滅菌，或直接承受無菌集菌器。120ml改進(jìn)馬丁培育基，120ml硫乙醇酸鹽培育基〔其中一只做陽性比照，內(nèi)加金黃色葡萄1ml120ml通過集菌儀過濾〔50ml120ml，另一只加改進(jìn)馬丁培育120ml分別作陰性比照。3等份，分別置50ml硫乙醇酸鹽流體培育基及改進(jìn)馬丁培育基的容器中，其中兩份作檢驗(yàn)，一份作陽性比照?！舶ㄝ斠浩鳌⑤斞?、注射器配套使用注射針。120mg1cm×3cm的供試品，接種于各管足以浸沒供試品的適量培育基中。b15ml以上硫乙醇酸鹽流體培育基及改進(jìn)馬丁培育基的容器中。c、一次性使用的材料：拆散或切成小碎斷，接種于各管足以浸沒供試品的適量培育基中。供試品按規(guī)定量分別接種至各含硫乙醇酸鹽流體培育基及改進(jìn)馬丁培育基的容器中，其中一份作陽性比照。每個容器中培育基的用量應(yīng)符合：接種的供試品體積不得大于培育基體積的10%，或培育基的裝量足以浸沒供試品。每管培育基的最低用量——硫乙醇酸鹽流體培育基每管裝量不少于15ml，改進(jìn)10ml.培育、觀看48～7214天。培育期間應(yīng)逐日觀看并記錄是否有菌生長。如在參加供試品后、或在培育過程中，培育基消滅渾濁，培育14天后，不能從外觀上推斷有無微生物生產(chǎn)，可取該培育液適量轉(zhuǎn)種至同種穎培育基中或劃線接種于斜面培育基上，細(xì)菌培育2天，真菌培育3天，觀看是否再消滅渾濁或斜面有無菌生長；或取培育液涂片，染色，鏡檢，推斷是否有菌。結(jié)果推斷全部供試品管均澄清，或雖顯渾濁但經(jīng)確證無菌生長，判供試品符合規(guī)定。假設(shè)供試品管中任何1管顯渾濁并確證有菌生長判供試品不符合規(guī)定。以一次檢出為準(zhǔn)，不得復(fù)試。當(dāng)符合以下至少一個條件時，可判試驗(yàn)結(jié)果無效