硫酸軟骨素的提取

蛋殼膜硫酸軟骨素的提取工藝及其優(yōu)化胰蛋白酶、胃蛋白酶的用量分別為１．５％、０．８％，ｐＨ值分別為８．２和５．５，酶的各自最適條件作用時(shí)間均為２．０ｈ。關(guān)鍵詞：硫酸軟骨素；蛋殼膜；胰蛋白酶；胃蛋白酶OptimizationofExtractionTechnologyofChondroitinSulfatefromEggshellMembraneLIUGuo-qing，LINGQing-zhi，SUNJun-fei(School of Biotechnology and Food Engineering, Hefei University of Technology,Heifei230009,China)Abstract：Chondroitinsulfatewasextractedfromtheeggshellmembranewithamethodofdilutealkali-enzymehydrolysis.Theproductofchondroitinsulfatewasgottenafterethanoldispositionanddesiccationbyeliminatingtheproteinwithtrypsinandpepsin.Theresultsshowedtheoptimumconditionsofweightproportion1:1.5(material:liquid),alkaliconcentration5%,temperature40℃.Dosageoftrypsinandpepsin1.5%and0.8%respectively,pHvalue8.2and5.5respectivelyandreactiontime2.0hrespectively.Keywords：chondroitinsulfate；eggshellmembrane；trypsin；pepsin(chondroitin是來(lái)自于動(dòng)物軟骨和鳥類卵的殼膜等組織的一類重要[1]80℃亦不分解。一般硫酸軟骨素約含有50～70個(gè)雙糖的基本結(jié)構(gòu)，按其化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)，可分為CSD三種同分異構(gòu)體，它們均由N-氨基半乳。研究發(fā)現(xiàn)，該物質(zhì)具有良好的抗衰老功能，可以制[1]源分散、不易收集、污染嚴(yán)重的現(xiàn)狀，同時(shí)也為生產(chǎn)硫酸軟骨素提供廣泛的原料來(lái)源。合考慮產(chǎn)率和純度，稀堿-酶解提取工藝是一種較實(shí)用的方法[2,4-6]。本實(shí)驗(yàn)以蛋殼膜為原料，通過(guò)研究稀堿-酶解提取工藝得到一條優(yōu)化且實(shí)用的提取硫酸軟骨素的技術(shù)路線，為實(shí)際生產(chǎn)提供參考。材料鹽酸(儀器721分光光度計(jì)；PHS-25精密pH計(jì)；DZKW電熱恒溫水浴鍋；101-1干燥箱；JA2002電子天平。方法蛋殼膜分離100g1000ml12mol/L的濃鹽酸300ml，攪拌后放置30min，用清水洗滌，除去殘留的酸液，干燥得到蛋殼膜。分離提取硫酸軟骨素與蛋白質(zhì)等成分結(jié)合在一起，用堿解提取有利于破壞硫酸軟骨素與蛋白質(zhì)之間吸附法除雜蛋白6mol/LpH6.8～7.0，在攪拌下按1:1(W/V)加入顆粒3%～4%1h53pH6.8～7.01h6mol/LpH5.2～5.42%(W/V)，并繼續(xù)(85)并保溫30min8層紗布過(guò)濾，濾液再用濾紙過(guò)濾兩次得澄清的硫酸軟骨素液。純化,至乙醇濃度為68%～72%2～360～65℃的真空干燥箱中干燥，即得白色的硫酸軟骨素粉。工藝流程：蛋殼膜提取液精提取液澄清液體黏稠沉淀濕產(chǎn)品 成品堿提取乙醇過(guò)濾丙酮脫水活性炭吸附胰蛋白酶胃蛋白酶圖1 工藝流程Fig.1 Processofextractionchondroitinsulfateof fromtheeggshell membrane蛋殼膜堿解實(shí)驗(yàn)中分解率的計(jì)算實(shí)驗(yàn)中蛋殼膜分解率的計(jì)算主要是看1g干蛋殼膜經(jīng)堿解后殘留物的多少，為此首先要將堿解后殘留物的重量計(jì)算出來(lái)，主要操作：①按實(shí)驗(yàn)號(hào)裁取9份4層紗布分別編號(hào)1～9；②將編號(hào)的紗布