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細菌鑒定中應注意的問題細菌是自然界中數(shù)量最大、分布最廣、種類最多的病原體,其不僅代謝活力強,繁殖也非???,并且易于變異,這些特性使得臨床進行細菌鑒定時面臨著較大的困難。雖然臨床在微生物檢驗方面不斷更新技術(shù)、采取各種質(zhì)量控制措施,但細菌鑒定過程中依然存在許多問題,檢驗人員若是不加以注意,將很難獲得正確的鑒定結(jié)果,自然也談不上對患者病情的準確診斷和有效治療。本文試分析闡述細菌鑒定各個環(huán)節(jié)中應該注意的一些問題。一、標本采集環(huán)節(jié)我國有超過8成的醫(yī)院在細菌標本的采集上存在問題。以痰液標本為例,大部分痰液標本不合格的原因都是標本中存在除了痰液之外的其他呼吸道分泌物,這些分泌物污染了痰液標本,使其達不到痰液標本要求的質(zhì)量標準,檢驗人員不得不將不合格的標本打回,由采集人員再次采集標本,這不僅浪費時間,還會給患者帶來不適。再以尿液標本為例,臨床檢驗要求尿液標本應為患者晨起后的新鮮中段尿,若是剛剛排出的尿液,容易受到膀胱、尿道下段等泌尿器官中其他菌群的污染。此外,對于術(shù)后感染分泌物或外傷分泌物,應采集深部的分泌物,醫(yī)院要求細菌常規(guī)培養(yǎng)不得檢出厭氧菌,否則會影響對厭氧菌的診斷準確性,若是采集淺表位置的分泌物,標本將會與空氣接觸,進而被污染。此外,細菌標本應確保采集足量,以免需要二次采集。二、標本送檢環(huán)節(jié)細菌鑒定結(jié)果不僅與標本采集質(zhì)量有關(guān),與送檢環(huán)節(jié)是否合乎規(guī)范也有密切聯(lián)系,送檢的過程中若是保存的容器開放,與外界空氣和微生物接觸,將會導致標本被污染。此外,尿液標本應在采集后盡快送交實驗室進行檢驗,以免因為尿液營養(yǎng)豐富而在較長的時間內(nèi)有細菌大量繁殖,導致鑒定結(jié)果出現(xiàn)偏差。血液標本也要盡快送檢,若是保存時間過長、保存環(huán)境溫度過高,血液標本將有可能發(fā)生凝血、溶血、變質(zhì)等問題,也會影響鑒定結(jié)果的準確性。三、分離鑒定環(huán)節(jié)(一)分離培養(yǎng)環(huán)節(jié)在進行細菌的分離培養(yǎng)時,應該基于標本的來源、病原菌可能的類型來選擇適合的孵育環(huán)境和培養(yǎng)基,若有特殊需要,還需要選擇特殊的培養(yǎng)基。上個世紀中葉,致病菌主要為金黃色葡萄球菌,上個世紀后半葉,致病菌主要為厭氧菌、微球菌、腸球菌,革蘭氏陰性菌反而較少,而在進入21世紀后,致病菌則呈現(xiàn)2~3育環(huán)境。目前,志賀氏菌屬、沙門氏菌屬、大腸埃希菌都選用伊紅美藍或SS等培養(yǎng)基進行鑒定,經(jīng)過接種和孵育后,按照生化反應進行鑒定,以血清學方法進行分析,若是隨意選擇培養(yǎng)基,不按照相關(guān)要求進行接種和孵育,那么檢驗結(jié)果將會出現(xiàn)偏差。L應為其選擇高滲培養(yǎng)基進行接種,否則將會影響鑒定結(jié)果。嗜血桿菌屬于容易漏檢的苛養(yǎng)菌,為其采用的培養(yǎng)基必須做到組分規(guī)范,若是分離不到,可能是漏診。(二)鑒定環(huán)節(jié)細菌種類鑒定,不僅要求種型鑒定準確,還要求鑒定速度盡可能快,否則一些急性感染患者會因為鑒定時間過長而錯失最佳治療時機,進而出現(xiàn)感染性休克或死亡等嚴重結(jié)果?,F(xiàn)階段我國醫(yī)院實驗室中有多種培養(yǎng)基、孵育箱、細菌鑒定儀器,但如何進行合理的選擇、如何正確使用,依然是我國許多醫(yī)院實驗室難以只會導致錯誤的發(fā)生。此外,不同設(shè)備和培養(yǎng)基對不同病原體有不同的鑒定符合率,若是二者不搭配,只會影響鑒定的準確性;鑒定后應該與標準菌株或典型菌株進行對照,不可憑主觀想法做出決定;許多儀器是與細菌鑒定套組相配套的,共同應用可以顯著提高鑒定的準確性,而在實際應用過程中許多檢驗人員并沒有配套使用,也會影響鑒定結(jié)果的準確性。四、藥敏試驗環(huán)節(jié)在明確具體的菌株類型后,便要為患者用藥,但不同病原菌對不同抗菌藥物有著不同的藥物敏感度,若是盲目用藥,不僅達不到治療效果,還有可能引發(fā)不目前,常規(guī)用藥原則是根據(jù)藥敏試驗結(jié)果選擇高敏感性的藥物,MICK-BK-BK-BMICK-BpH值等也有非常高的要求,若是方法不夠標準,試驗結(jié)果也會出現(xiàn)偏差,而這些問題可以通過嚴格的質(zhì)量控制來進行管控。五、質(zhì)量控制環(huán)節(jié)細菌鑒定需要嚴格的質(zhì)量控制

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