第22章抗原或抗體的檢測(cè)

第二十章腫瘤免疫

（tumorimmunity）

概述

腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、診斷、治療均與免疫有關(guān)腫瘤是僅次于心腦血管病的第二大死亡原因。一.腫瘤抗原1、概念：指細(xì)胞在癌變過(guò)程中新出現(xiàn)或過(guò)度表達(dá)的物質(zhì)總稱。

在腫瘤發(fā)生、發(fā)展、機(jī)體抗腫瘤、診斷、治療中有重要作用。2、腫瘤抗原的分類：1、根據(jù)抗原的特異性分類1）腫瘤相關(guān)抗原（tumorassociatedantigen,TAA)：無(wú)嚴(yán)格腫瘤特異性，正常細(xì)胞也可表達(dá)，但有量的變化。2）腫瘤特異性抗原（tumorspecificantigen,TSA）：僅表達(dá)于腫瘤細(xì)胞組織，不存在于正常組織中。2、根據(jù)腫瘤發(fā)生的情況分類1）理化因素誘發(fā)的腫瘤抗原具有高度的異質(zhì)性2）病毒誘發(fā)的腫瘤抗原由病毒基因編碼，此類抗原具有病毒特異性，但無(wú)器官、種屬特異性。既同一病毒誘發(fā)的不同類型的腫瘤均表達(dá)相同的腫瘤抗原。3）自發(fā)性腫瘤抗原無(wú)明確誘發(fā)原因，大多數(shù)腫瘤抗原屬此類。抑癌基因失活或原癌基因活化編碼的蛋白質(zhì)，如P53的突變蛋白等。4）癌胚抗原或分化抗原胚胎時(shí)產(chǎn)生，出生后極少或無(wú)，癌變時(shí)量增加或分泌極性改變。如：AFP、CEA等。惡性腫瘤細(xì)胞在形態(tài)、代謝和功能方面類似未分化的胚胎細(xì)胞（返祖、去分化），可表達(dá)幼稚細(xì)胞的分化抗原，但不能刺激免疫應(yīng)答。

二、機(jī)體抗腫瘤免疫機(jī)制（一）非特異性抗腫瘤免疫

1、NK細(xì)胞特點(diǎn)：廣譜抗瘤作用，無(wú)需抗原致敏，不受

MHC限制作用：1）直接殺傷（釋放穿孔素、顆粒酶）2）通過(guò)fas/fasL誘導(dǎo)瘤細(xì)胞凋亡3）通過(guò)ADCC作用4）釋放細(xì)胞因子（IL-1、IL-2、

IFN-γ）擴(kuò)大殺瘤作用ADCCADCC2、巨噬細(xì)胞只有激活的巨噬細(xì)胞才有殺瘤作用作用：1）ADCC作用2）非特異膜受體與瘤細(xì)胞結(jié)合3）分泌TNF、IFN、蛋白水解酶4）與致敏T細(xì)胞、抗體、補(bǔ)體等共同作用3、γδTL

（二）特異性抗腫瘤免疫體液免疫機(jī)制

1激活補(bǔ)體系統(tǒng)溶解腫瘤細(xì)胞

2ADCC3抗體的調(diào)理作用

4抗體封閉腫瘤細(xì)胞上的某些受體

5抗體使腫瘤細(xì)胞的粘附特性改變或喪失轉(zhuǎn)鐵蛋白R(shí)Tumor+—Anti-R細(xì)胞免疫機(jī)制1、CD4+Th細(xì)胞：釋放多種細(xì)胞因子：

IL-2、IFN-γ--激活單核-巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞

IL-2—活化CTLIFN-γ—促進(jìn)腫瘤細(xì)胞表達(dá)MHC-I類分子，利于腫瘤抗原的提成，激活CTL，

TNF—直接殺傷腫瘤細(xì)胞2、CD8+CTL

腫瘤免疫的主要效應(yīng)細(xì)胞通過(guò)通過(guò)細(xì)胞毒作用，直接殺傷腫瘤細(xì)胞。

Howcanweharnesstheimmuneresponse?TumourcellpresentBrokenuptoreleaseantigensAPCAPCrecruitsTcellsabletorecognisetumourantigensTTThCTLCTLrecogniseanddestroyothertumourcellsCTLThcellseducateotherT/BcellsBAb/ADCC/cytokineattack*淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（LAK）病人淋巴細(xì)胞（體外）IL-2激活回輸病人*腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（TIL）激活病人Tumor分離淋巴細(xì)胞IL-2回輸

三、腫瘤的免疫逃逸機(jī)制

1、腫瘤細(xì)胞的抗原缺失和抗原調(diào)變

*腫瘤抗原和正常組織蛋白差異小---免疫原性弱*腫瘤細(xì)胞表面抗原表位減少或缺失--不易被免疫系統(tǒng)識(shí)別2、腫瘤細(xì)胞的“漏逸”腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)迅速超越了機(jī)體抗腫瘤的限度，機(jī)體不能有效清除腫瘤細(xì)胞。3、腫瘤細(xì)胞MHC-I類分子表達(dá)異常4、腫瘤細(xì)胞分泌免疫抑制因子5、腫瘤細(xì)胞缺乏協(xié)同刺激因子6、可溶性抗原封閉抗體7、腫瘤細(xì)胞可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞凋亡腫瘤細(xì)胞可高表達(dá)fasL，與腫瘤特異性T細(xì)胞表達(dá)的fas結(jié)合后，可引起T細(xì)胞凋亡五、腫瘤的實(shí)驗(yàn)室診斷和免疫治療檢測(cè)注意點(diǎn)：1.多數(shù)為非特異性2.常檢測(cè)異常表達(dá)的一些物質(zhì)（又稱腫瘤標(biāo)志物）：細(xì)胞分化抗原、胚胎抗原、激素、酶、受體、生物活性物質(zhì)3.常用聯(lián)合檢測(cè)方法

（一)免疫學(xué)診斷1、血清腫瘤相關(guān)標(biāo)志物檢測(cè)免疫標(biāo)記技術(shù)（ELISA、放免）、化學(xué)發(fā)光等。結(jié)果快、特異，敏感可達(dá)0.01μg/ml2、免疫組化法3、體內(nèi)免疫成像診斷Monoclonalantibodies:

useasadiagnostictool乳腺癌（二）免疫治療目的：激發(fā)和增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，控制和殺滅腫瘤細(xì)胞方法：1、主動(dòng)免疫治療

應(yīng)用腫瘤疫苗或基因工程疫苗免疫，激發(fā)機(jī)體增強(qiáng)抗瘤免疫應(yīng)答。采用自體或異體癌細(xì)胞制成活或死瘤苗（盡可能保持、增強(qiáng)其免疫原性）

細(xì)胞疫苗

★基因修飾的腫瘤細(xì)胞細(xì)胞因子的基因或MHCI分子的基因，B7基因等轉(zhuǎn)移入腫瘤細(xì)胞，降低致瘤性，增強(qiáng)免疫原性。

★基因修飾的樹(shù)突狀細(xì)胞

分子疫苗

★胚胎抗原疫苗

★人工合成肽疫苗腫瘤抗原多肽+佐劑（如HSP）蛋白多肽瘤苗

★與腫瘤發(fā)生有關(guān)的病毒疫苗

★癌基因產(chǎn)物的分子疫苗

★抗獨(dú)特型抗體疫苗核酸疫苗Dendritoma免疫治療的抗腫瘤效應(yīng)DCs高表達(dá)CD1α,CD83和募集Th細(xì)胞的共刺激分子CD80、CD86和MHCⅡ(HLADR)抗原。腫瘤細(xì)胞與DCs融合，可獲得既具有獨(dú)特腫瘤特異性抗原又具有DCs協(xié)同刺激作用的雜合體-DendritomaDendritoma-雜合體細(xì)胞表達(dá)腫瘤特異性抗原、MHCⅠ、Ⅱ類抗原和協(xié)同刺激分子，回輸體內(nèi)具有抗瘤作用。2、被動(dòng)免疫治療給機(jī)體外源性免疫效應(yīng)物質(zhì)：抗體、細(xì)胞因子、免疫細(xì)胞等，使機(jī)體發(fā)揮抗腫瘤作用。

1）抗瘤抗體介導(dǎo)的靶向治療‘Passive’immunotherapyAdminstrationofmonoclonalantibodieswhichtargeteithertumour-specificorover-expressedantigens.Killtumourcellsinavarietyofways:ApoptosisinductionComplement-mediatedcytotoxicityADCCNKM?Conjugatedtotoxin/isotope2）過(guò)繼性免疫治療（adoptiveimmuno-therapy)*細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CTL）：患者T細(xì)胞在體外與自體瘤細(xì)胞共同培養(yǎng)，建立特異的CTL*淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（LAK）：外周血淋巴細(xì)胞在IL-2刺激下，體外培養(yǎng)后回輸*腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（TIL）：浸入腫瘤組織的淋巴細(xì)胞，取出后用IL-2

刺激后回輸。比LAK好。增加MHC-I分子的表達(dá)，可能為抗腫瘤機(jī)制緩解毛細(xì)胞白血病,對(duì)癌癥有弱的效應(yīng)IFN-αβIFN-β增加MHC-I分子的表達(dá),激活Tc

和NK細(xì)胞緩解卵巢癌IL-2使T細(xì)胞活化和增殖,激活NK細(xì)胞緩解腎細(xì)胞癌和黑色素瘤TNF-α

激活巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞減少惡性腹水3）細(xì)胞因子用于免疫治療CompleteregressionofalargelivermetastasisfromkidneycancerinapatienttreatedwithIL-2.RegressionisongoingsevenyearslaterEffectivetherapiesRosenberg(2001)Nature,411;381-4胸腺素產(chǎn)生干擾素吡喃,多聚I:C激活巨噬