中藥材及其制劑的顯微鑒別操作規(guī)程

標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程標(biāo)題：中藥材及其制劑顯微鑒定法生效日期 年月曰頁(yè)次：1/10編號(hào)：SOP^QC05801頒發(fā)部門(mén)：質(zhì)量管理部新訂口修訂口原文件號(hào)：編制：部門(mén)審核：QA審核：批準(zhǔn)：分發(fā)部門(mén)：QC。目的：建立中藥材及制劑顯微鑒定方法操作規(guī)程。范圍：所有購(gòu)進(jìn)的中藥材及正式生產(chǎn)的含原藥粉的制劑品種。責(zé)任者：QC主任、檢驗(yàn)員對(duì)本OP的實(shí)施負(fù)責(zé)。規(guī)程：藥材及成方制劑顯微鑒定法是應(yīng)用動(dòng)植物細(xì)組胞織、和礦物晶體光學(xué)等知識(shí)鑒別中藥材或中成藥的一種方法。通常是借助顯微鏡進(jìn)行觀察，故稱(chēng)“顯微鑒別法”主要適用于：藥材性狀鑒別特征不明顯或外形相似而組織構(gòu)造不同；藥材破碎不易辨別或區(qū)分；藥材呈粉末狀態(tài)或?yàn)槌煞街苿?；用顯微方法確定藥材中有效成份在組織中的分布狀況及其特征。顯微標(biāo)本片的分類(lèi)臨時(shí)性制片操作簡(jiǎn)單，制作方便，主要用于藥材檢驗(yàn)。切制片采用滑走切片或徒手切片法制片。適用于植物根、莖類(lèi)藥材的鑒別。表面片采用剪、撕等方法制片。適用于葉類(lèi)、花類(lèi)及全草類(lèi)藥材的葉片、花冠、萼片、苞片等的鑒別。解離組織片用適當(dāng)?shù)慕M織解離液使組織細(xì)胞相互適度解離后裝片，適用于觀察比較堅(jiān)硬的細(xì)胞組織，如導(dǎo)管、纖維、石細(xì)胞等的形態(tài)。磨制片適用于礦物藥或有些堅(jiān)硬的動(dòng)物類(lèi)藥材如珍珠、石決明及動(dòng)物骨骼的鑒別。粉末片適用于花粉粒、孢子等的形態(tài)特征或構(gòu)造觀察。石蠟片亦稱(chēng)永久片制成的石蠟切片外形較完整，厚薄均勻，且可制得連續(xù)切片，觀察方便，能長(zhǎng)期保存。適用于藥材鑒定研究工作。以上各臨時(shí)裝片均可按規(guī)定和制備方法制成永久性的石蠟切片。標(biāo)題中藥材及其制劑顯微鑒定法頒發(fā)部門(mén)質(zhì)量管理部編號(hào)SOI—QC—058—01頁(yè)次：2/103.儀器和用具儀器生物光學(xué)顯微鏡、鏡臺(tái)測(cè)微尺、離心機(jī)。3.2.用具放大鏡、刀片、解剖刀、鑷子、剪、解剖針。3.2.2.載玻片、蓋玻片。吸濕器、培養(yǎng)皿或小燒杯、酒精燈、鐵三角架、石棉網(wǎng)、滴瓶、試管、試管架、滴管、玻璃棒、乳缽、量筒等。毛筆、鉛筆、帶蓋搪瓷盤(pán)、紗布、吸水紙、火柴等。4.試液及配制水合氯醛試液取水合氯醛50g加水15ml與甘油10ml使溶解，即得。此液為透化劑，可使干縮的細(xì)胞壁膨脹而透明并，能溶解淀粉粒、樹(shù)脂、蛋白質(zhì)及揮發(fā)油。甘油醋酸試液（斯氏液）取甘油、50%醋酸與水各等份混，合即得。此液專(zhuān)用于觀察淀粉粒形態(tài)可，使淀粉粒不膨脹變形便，于測(cè)量其大小。甘油－乙醇液取甘油1份，50％乙醇1份，混合即得。此液為封藏液，用于保存植物配料及臨時(shí)切片，有軟化組織的作用。蘇丹III試液取蘇丹III0.01g加90%乙醇5ml溶解后，加甘油5ml搖勻即得。本液應(yīng)置棕色玻璃瓶?jī)?nèi)保存，2個(gè)在月內(nèi)應(yīng)用。釘紅試液取10%醋酸鈉溶液一2ml,加釘紅適量使呈酒紅色即得，本液應(yīng)臨用時(shí)新配。間苯三酚試液取間苯三酚1g,加90%乙醇100m,使溶解，濾過(guò)即得。應(yīng)置棕色玻璃瓶?jī)?nèi)，在暗處保存。此液與濃鹽酸合用，可使木化細(xì)胞染成紅色或紫紅色。碘試液取碘化鉀）.5g溶于少量水中加碘1g,使溶解加水至00ml即得。硝酸鉻試液取硝酸鉻10m,加入100ml水中，混勻。另取鉻酸10g加水100ml使溶解。用時(shí)二液等份混合，即得。此液為常用的“植物組織解離液”。檢品的解離浸泡時(shí)間，依材料的質(zhì)地不同而異。a—萘酚試液取15%的a—萘酚乙醇溶液0.5ml緩緩加入硫酸6.5m，混勻后再加乙醇0.5ml及水4ml混勻即得。標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程標(biāo)題中藥材及其制劑顯微鑒定法頒發(fā)部門(mén)質(zhì)量管理部編號(hào)SOLQC—058—01頁(yè)次：/10硝酸汞試液（米隆氏試液取汞4.5g加發(fā)煙硝酸ml,待作用完畢，加等量水稀釋即得本。液應(yīng)置棕色玻璃塞瓶?jī)?nèi)在暗處保存。用于檢查糊粉粒，染成磚紅色。氯化鋅碘試液取碘化鉀8g,加入8.5ml水使溶解，再加無(wú)水氯化鋅2.5g使溶解，加碘適量至飽和即得。本液應(yīng)置棕色玻璃瓶塞內(nèi)用于檢查木質(zhì)化與纖維素細(xì)胞壁，前者顯黃棕色，后者顯藍(lán)色或紫色。5.顯微標(biāo)本片的制做切片（橫片或縱片）5.1.1.藥材的預(yù)處理先將藥材表面泥沙刷洗干凈將應(yīng)觀察的部位，切成大小適當(dāng)?shù)膲K或段一般以寬1cm長(zhǎng)3cm為宜，厚10?20um,切面削平整。質(zhì)地軟硬適中的藥材可直接進(jìn)行切片。質(zhì)地堅(jiān)硬的則須先使其軟化后再切片。軟化方法可放在吸濕（器即干燥器底部盛蒸餾水并滴數(shù)滴苯酚防霉，上部瓷板上置藥材樣品吸濕）中悶潤(rùn)，或在水中浸軟。有些根、根莖、莖及木類(lèi)藥材，質(zhì)地雖堅(jiān)實(shí)，可將削平的切面浸水中片刻表面潤(rùn)濕時(shí)取出，直接切片也能切成較完整的薄片過(guò)。于柔軟的材料，可將其浸入70％－95％乙醇中，約20min后可變硬些，即可進(jìn)行切片。對(duì)于細(xì)小、柔軟而薄的藥材，如種子或葉片，不能直接手持切片，種子類(lèi)可置軟木中塞或橡膠片中（一側(cè)切一窄縫，將種子嵌入其中）葉類(lèi)藥材可用質(zhì)地松軟的通草或向日葵的莖髓作夾持物進(jìn)行切片藥。材在預(yù)處理時(shí)應(yīng)注意不能影響要觀察的顯微鑒別特征。徒手切片具有操作簡(jiǎn)便、迅速，方便，制成片能保持其內(nèi)含物的固有特征，便于進(jìn)行各種顯微化學(xué)反應(yīng)觀察的特點(diǎn)，是顯微鑒別中最為常用的方法。切片右手持刀片，左手拇指和食指關(guān)節(jié)夾持藥材，中指托著藥材的底部，使藥材略高出食拇二指肘關(guān)節(jié)應(yīng)固定，使材料的切面保持水平，刀口向內(nèi)并使刀刃自左前方向右后方切削，即可切得薄片。操作時(shí)，材料的切面須經(jīng)常加水或50％乙醇保持濕潤(rùn)，防止切片粘在刀片上切。好的切片用毛筆蘸水輕輕從刀片上推入盛有水5或0％乙醇的培養(yǎng)皿中。徒手圓筒生物切片器切片將藥材用通草或軟木夾持，固定于切片器持物筒中；具有一定硬度的藥材可直接固定于持物筒中；左手持切片器，拇指與小拇指持底盤(pán)的邊緣，食指端頂動(dòng)中柱上的固定螺帽，使切片整體方向不變，以保持材料的切片方向固定；右手持刀片，刀柄靠于拇指與食指部，標(biāo)題中藥材及其制劑顯微鑒定法頒發(fā)部門(mén)質(zhì)量管理部編號(hào)SOP^QC-058-01頁(yè)次：4/10食指與中指輕壓于刀片的上面，刀片平貼于刀片器圓臺(tái)上，由左上方至右下方迅速滑動(dòng)，切下的切片用毛筆沾水取下置盛水的培養(yǎng)皿中。裝片選取薄而平整的切片置載玻片上，根據(jù)所要觀察的內(nèi)容要求，滴加適宜的試液1~2滴，蓋好蓋玻片，即可在顯微鏡下觀察。如加水合氯醛試液透化，將切片移載玻片上滴1~加2滴水合氯醛試液，在酒精燈上微微加熱，至邊緣起小泡即停止加熱，繼續(xù)補(bǔ)充試液再加熱，以不燒干為度，直至透化完全為止；加熱溫度不能過(guò)高，以防水合氯醛試液沸騰，使組織內(nèi)帶入氣泡，加熱時(shí)應(yīng)將載玻片不斷移動(dòng)，不宜對(duì)準(zhǔn)一處燒，以免受熱不勻而炸裂，透化后放冷，加甘油乙醇試1液~2滴后加封蓋片，貼上標(biāo)簽，冬日室溫較低時(shí)，透化后不待放冷即加甘油乙醇試液，以防水合氯醛試液結(jié)晶析出而防礙觀察。水合氯醛試液有潔凈作用，并能使已收縮的細(xì)胞膨脹，能清楚觀察組織構(gòu)造，可溶解淀粉粒、蛋白質(zhì)、葉綠素、揮發(fā)油、樹(shù)脂等，對(duì)草酸鈣結(jié)晶無(wú)作用，為觀察草酸鈣結(jié)晶的良好試劑。如需觀察菊糖等一些多糖物質(zhì)則加水合氯醛試液不加熱?；咔衅瑱C(jī)切片此法不需要較高的技巧，只要了解掌握操作方法，短期內(nèi)即可學(xué)會(huì)并切出較薄的切片，適用于質(zhì)地堅(jiān)實(shí)、形狀較大的藥材切片。柔軟的材料經(jīng)冷凍處理后便可切得較薄的的切片。材料制備經(jīng)軟化處理的材料，檢查軟化是否合適，可用刀片切割材料，若較容易切下薄片，則軟化適宜。柔軟的藥材可直接用胡蘿卜或土豆作夾持物。新鮮材料則直接浸入石蠟中，使材料外面包上一層石蠟。切片機(jī)調(diào)試及材料安裝切片前，先安裝好要片機(jī)使穩(wěn)固，進(jìn)行調(diào)試檢查。將切片刀夾持在夾刀器上夾緊，調(diào)整刀的角度0（0~約150）；調(diào)整厚度調(diào)節(jié)器至所需厚度。把制備好的材料用兩塊軟木塞夾住或直接放在切片機(jī)的材料固定器上夾正，使材料露出軟木塞或固定器上端cm調(diào)整好材料高度，使刀機(jī)刀刃靠近材料的切面，使材料切面與刀刃平等并略高于刀刃約0.5~1mm。切片用右手所握夾刀器柄。往操作者方向迅速拉動(dòng)，便切下切片，且附著于刀的表面上，用毛筆蘸水把切片取下放入盛水的培養(yǎng)皿中。將刀推回原處，轉(zhuǎn)動(dòng)厚度推進(jìn)器，用毛筆蘸水潤(rùn)濕材料切面及刀刃，再拉切片刀，往返推動(dòng)，可得到許多厚度均勻完整的切片。若切片不成功，應(yīng)檢查切片刀是否太鈍，則應(yīng)磨刀或換鋒銳的切片刀，若切得太薄而破碎，則逐漸增標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程標(biāo)題中藥材及其制劑顯微鑒定法頒發(fā)部門(mén)質(zhì)量管理部編號(hào)SOLQC—058—01頁(yè)次：/10加厚度至切得完整的薄片為度。注意：夾持在材料固定器上的材料切面接近于固定上端時(shí)，必須注意防止切片刀刃碰撞固定器而損毀切片刀。裝片為防止切片彎曲可，選取理想的切片用，兩張載玻片夾住，浸于水中4小時(shí)使材料壓平，放入95％乙醇中固定，甘油裝片觀察。粉末標(biāo)本片的制做主要用于粉末狀的藥材及藥材粉末制成的成方制劑觀察。粉末制備藥材要先干燥，磨或挫成細(xì)粉，裝瓶，貼上標(biāo)簽。粉末制備時(shí)，注意取樣的代表性和全面性如，根要切取根頭、根中及根尾等部位，必須全部磨成粉，不得丟棄渣頭。并需4過(guò)號(hào)篩，混合均勻。干燥時(shí)，一般不能超過(guò)60°C,避免經(jīng)受高溫，使淀粉粒糊化，難以觀察其完整者。制片法用解剖針挑取粉末少許置，載玻片的中央位置加，適宜的試液1滴，用針攪勻（如為酸或堿時(shí)應(yīng)用細(xì)玻璃棒代替，針待）液體滲入粉末時(shí)，用左手食指與拇夾持蓋片的邊緣，使其與左側(cè)藥液層接觸，再用右手持小鑷子或解剖刀托住蓋玻片的右側(cè)，輕輕下放，則液體逐漸擴(kuò)延充滿(mǎn)蓋玻片下方，如液體未充滿(mǎn)蓋玻片，應(yīng)從空隙相對(duì)邊緣滴加液體，以防產(chǎn)生氣泡；若液體過(guò)多，用濾紙吸去溢出的液體，最后在載玻片的左端貼上標(biāo)簽或做上標(biāo)記。中藥成方制劑的鑒別散劑、膠囊劑，可直接取粉末裝片或透化裝片；片劑，可取2~3片研細(xì)后，取粉末適量裝片或透化裝片；5.2.3.3.水丸劑，可取數(shù)粒丸置乳缽中（若系包衣水丸，可刮去包衣）研細(xì)，取粉末適量裝片或，取粉末適量置小容器內(nèi)加，水合氯醛試液透（化加適量甘油以防水合氯醛結(jié)晶析出，）攪勻，用吸管吸取混懸液裝片。5.2.3.4.蜜丸劑樣品可用二種方法處理（1）用解剖刀沿蜜丸正中切開(kāi)，從切面由外至內(nèi)刮取少許樣品，置載玻璃片中央偏右，滴加適宜的試液，用玻璃棒攪勻。按上述粉末制片法制片，或透化裝片。（2）將樣品切碎放入容器加，水?dāng)嚢柘礈?，然后置離心管中離心沉淀，如此反復(fù)以除盡蜂蜜后，取沉淀或透化后裝片。含揮發(fā)油性成分的制劑，取其粉末進(jìn)行微量升華裝片。標(biāo)題中藥材及其制劑顯微鑒定法頒發(fā)部門(mén)質(zhì)量管理部編號(hào)SOP^QC-058-01頁(yè)次：6/105.2.4.粉末制片的注意事項(xiàng)粉末加液體攪拌及加蓋處理時(shí)容易產(chǎn)生氣如泡用。水或甘油裝片時(shí)，可先加少量乙醇使其潤(rùn)濕，可避免或減少氣泡的形成，或反復(fù)將蓋片沿一側(cè)輕抬，可使多數(shù)氣泡逸出。攪拌時(shí)產(chǎn)生的氣泡可隨時(shí)用針將其移出。裝片用的液體如易揮發(fā)應(yīng)，裝片后立即觀察用，水裝片也較易蒸發(fā)而干涸，通常滴加少許甘油可延長(zhǎng)保存時(shí)間。5.2.4.3需用水合氯醛試液透化時(shí)應(yīng)，注意掌握操作方法裝，片后用手執(zhí)其一端，保持水平置小火焰上約Ecm處加熱，并緩緩左右移動(dòng)使之微沸，見(jiàn)氣泡逸出時(shí)離開(kāi)火焰，待氣泡停止逸出，再放在小火上，并隨時(shí)補(bǔ)充蒸發(fā)的試液，如此反復(fù)操作，直至粉末呈透明為止，放涼后滴加甘油鏡檢。5.2.4.4.粉末藥材制片時(shí)，每片取用量宜少不宜多為，使觀察方便，可多做些制片。如取量多，顯微特征單一輪廓不清，反而費(fèi)時(shí)，不易得出準(zhǔn)確結(jié)論。中藥制劑的粉末檢查，因在多味藥材粉末中尋找某一味藥材某一顯微特征，有時(shí)較難查見(jiàn)，可以取粉末量多些，置試管或小燒杯中，加入水合氯醛試液，加熱透化。透化好后再用吸管吸出，滴在載玻片上，加蓋玻片，即可觀察。表面標(biāo)本片的制做主要用于葉類(lèi)、花類(lèi)（萼片、花、瓣果）實(shí)、草質(zhì)莖及鱗莖等藥材的表面特征如毛茸、氣孔、表皮細(xì)胞等的觀察。質(zhì)地菲薄的藥材可以整體裝片；較厚的藥材則須撕下表皮然后裝片。1.整體裝片適用于較薄的葉類(lèi)、萼片和花瓣。剪取欲觀察部位約4mm2的兩小片，一反一正放在載玻片上，加水合氯醛試液，加熱透化至透明為至，蓋好蓋玻片即得。另法，剪取欲觀察薄片8mm2，置試管中加水合氯醛試液，加熱透化，然后移至載玻片上，切成相等兩部分，將其中一片反過(guò)來(lái)，與另一片并列，再加1~2滴封藏液，蓋好玻片即得。表面撕離裝片凡較厚的或新鮮藥材用，上法不能使之透化或不便于整體裝片。將軟化了的或新鮮材料固定住，然后用鑷子夾住要?jiǎng)內(nèi)∷弘x的部分，小心的撕離，或用解剖刀輕輕割（刮）去不需要的各層組織，只保留表面層（上層或下層，）將欲觀察的表皮表面朝上置，載玻片上，加透化劑透化后，放冷，加稀甘油1滴，貼上標(biāo)簽，即得。標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程標(biāo)題中藥材及其制劑顯微鑒定法頒發(fā)部門(mén)質(zhì)量管理部編號(hào)SOP^QC-058-01頁(yè)次：7/10解離組織片制做適用厚壁組織或輸導(dǎo)組織的單個(gè)細(xì)胞的顯微觀察。將樣品切成段（長(zhǎng)約mm寬約2mm）或片（厚約1mm）,對(duì)于木類(lèi)或莖類(lèi)木質(zhì)，最好切成縱長(zhǎng)的小段，然后根據(jù)細(xì)胞壁的性質(zhì)，按照下列方法之一進(jìn)行處理；如樣品堅(jiān)硬，木化組織較多或集成較大群束，可用硝鉻酸法或氯酸鉀法；對(duì)于薄壁組織占大部分，木化組織少或分散存在的樣品，可用氫氧化鉀法。氫氧化鉀法置樣品于試管中，加1%氫氧化鉀溶液2?3m,加熱至用玻璃棒擠壓能離散為止，傾去堿液，用水洗滌后，取出少量，置載玻片上，用解剖針?biāo)洪_(kāi)，以稀甘油裝片觀察。硝鉻法置樣品于小杯中，加20%硝酸與20%鉻酸的等量混合液適量，浸沒(méi)樣品，旋轉(zhuǎn)約30?60分鐘，堅(jiān)硬的樣品需時(shí)要長(zhǎng)些，也可在水浴上微溫，至用玻璃棒擠壓能離散為止，傾去酸液，用水洗滌后，取出少量，置載玻片上，用解剖針?biāo)洪_(kāi)，以稀甘油裝片觀察。氯酸鉀法置樣品于試管中加硝酸溶液（1?2mD及氯酸鉀少量，緩緩加熱，待產(chǎn)生的氣飽和時(shí)，再及時(shí)加入氯酸鉀少量，以維持氣泡穩(wěn)定地發(fā)生，至用玻璃棒擠壓能離散為止。傾去酸液，用水洗滌后，撕開(kāi)，封藏。注意事項(xiàng)用氯酸鉀法制片時(shí)，每次加入的氯酸鉀不可過(guò)多加，熱溫度不宜過(guò)高，否則突沸容易使液體逸出管外。加熱時(shí)間長(zhǎng)短因樣品的硬度和木化程度而異，通常約需5?15分鐘。操作過(guò)程中產(chǎn)生的氯氣有毒，應(yīng)注意通風(fēng)。用硝鉻酸法解離也可在載玻片上進(jìn)行。即取一塊厚度適當(dāng)?shù)那衅?，置載玻片上，滴加氯硝鉻酸液使之浸沒(méi)放，置約20分鐘，輕輕壓下或移動(dòng)蓋片使之分離，其余操作同前，此法解離的細(xì)胞，可以看清其分離的組織部位?；ǚ哿Ｅc孢子片制做取花粉、花藥（或小的花）或孢子囊群（干燥樣品浸于冰醋酸中軟化，）用玻璃棒搗碎，紗布過(guò)濾，濾液置離心試管中離，心，取沉淀加新配制的醋酐與硫酸:1）的混合液1?3m,置水浴上加熱2?3分鐘，離心，取沉淀，用水洗2滌次，加50%甘油與1%苯酚3?4滴，用品紅甘油膠封藏觀察也。可直接用水合氯醛試液裝片具，體操作同粉末標(biāo)本片。磨片凡需要觀察斷面以，一般切片法無(wú)法制做的標(biāo)本如，堅(jiān)硬的動(dòng)物藥材珍珠、石決明、動(dòng)物骨骼、礦物藥材等可采用磨片法。片的厚度一般為20~50um。磨片方法有手工磨制與機(jī)器磨制。標(biāo)題中藥材及其制劑顯微鑒定法頒發(fā)部門(mén)質(zhì)量管理部編號(hào)SOLQC—058—01頁(yè)次：8/105.6.1手工磨片選取合適的材料一般以1?2mm為度,先置粗磨石（或磨砂玻璃）上，加適量水，用食指、中指夾住材料，在磨石上往返研磨，待兩面磨均勻，厚度約數(shù)百m后，改用軟木塞壓在上面，再在細(xì)磨石上加水磨，磨至透明時(shí)20?50um）,用水沖洗，再用5%乙醇圭寸藏。5.6.2.機(jī)器磨制地質(zhì)礦產(chǎn)部門(mén)有專(zhuān)門(mén)人員機(jī)構(gòu)與設(shè)備制做。6.顯微測(cè)量顯微鑒定時(shí)應(yīng)用測(cè)量方法以細(xì)胞內(nèi)含物等的大小，應(yīng)用最多的是長(zhǎng)度測(cè)量，常用的是目鏡測(cè)微尺與載物臺(tái)測(cè)微尺。目鏡測(cè)微尺又稱(chēng)目鏡量尺或目鏡尺它。是在目鏡內(nèi)的一種標(biāo)尺是，一個(gè)直徑18?20mm圓形玻璃片，中央刻有精確等距的平行線(xiàn)刻度，常為或100條。目鏡測(cè)微尺是用以直接測(cè)量物體的，但其刻度所代表的長(zhǎng)度是根據(jù)顯微鏡放大倍數(shù)不同而改變，故使用前必須用載物臺(tái)測(cè)微尺來(lái)標(biāo)化。載物臺(tái)測(cè)微尺又稱(chēng)鏡臺(tái)測(cè)微尺或臺(tái)微尺。它是一種特制的載玻片，中央粘有一小圓形玻片上刻有將1mm（或2mm）精確等分為100（或200）小格的細(xì)線(xiàn)，每一小格長(zhǎng)為um，它是用以標(biāo)化目鏡測(cè)微尺的。6.3目鏡測(cè)微尺的標(biāo)化以確定使用同一顯微鏡及特定的物鏡目、鏡和鏡簡(jiǎn)長(zhǎng)度時(shí)，目鏡測(cè)微尺上每一格所代表的實(shí)際長(zhǎng)度。標(biāo)化方法將載物臺(tái)測(cè)微尺置于顯微鏡臺(tái)上按，常規(guī)對(duì)光調(diào)焦并，移動(dòng)測(cè)微尺象于視野中央；從鏡簡(jiǎn)中取下目鏡，旋下接目鏡的鏡蓋，將目鏡測(cè)微尺放入目鏡簡(jiǎn)中部的光欄上（應(yīng)正面向上）旋上目鏡蓋后返置鏡簡(jiǎn)上，此時(shí)在視野中，除鏡臺(tái)測(cè)微尺的象外，還同時(shí)可觀察到目鏡測(cè)微尺的分度小格，移動(dòng)鏡臺(tái)測(cè)微尺和旋轉(zhuǎn)目鏡，使兩種量尺的刻度平行。左邊0”的刻“度重合，尋找第二條重合刻度。記錄兩刻度的讀數(shù)，并根據(jù)比值計(jì)算出目鏡測(cè)微尺每小格在該物鏡條件下所相當(dāng)?shù)拈L(zhǎng)度m）例如：接目鏡頭為0X，接物鏡為40X時(shí)，目鏡測(cè)微尺每7小格相當(dāng)于載物臺(tái)測(cè)微尺小格，則目鏡測(cè)微尺每小格的長(zhǎng)度為X10umF17=2.35umo測(cè)定細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)容物的方法將載物臺(tái)測(cè)微尺取下?lián)Q以裝有待測(cè)的標(biāo)本片對(duì)光、調(diào)焦，移動(dòng)載片，使需測(cè)量的目的物置于目鏡測(cè)微尺范圍內(nèi)，調(diào)清物象，計(jì)數(shù)出目的物占測(cè)微尺的小格數(shù)，乘以目鏡測(cè)微尺每一小格的長(zhǎng)度值即得。標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程標(biāo)題中藥材及其制劑顯微鑒定法頒發(fā)部門(mén)質(zhì)量管理部編號(hào)SOP^QC-058-01頁(yè)次：9/10計(jì)算公式：待測(cè)物長(zhǎng)度（pm）=x所測(cè)物體占有目鏡測(cè)微尺的格數(shù)待測(cè)物長(zhǎng)度（pm）=x所測(cè)物體占有目鏡測(cè)微尺的格數(shù)例如：則得淀粉粒長(zhǎng)20小格，每小格長(zhǎng)2.35um,20X2.35um=47um注意事項(xiàng)測(cè)量通常是在高倍鏡下進(jìn)行因，目鏡量尺的每一小格的長(zhǎng)度較大，結(jié)果較為準(zhǔn)確。但如測(cè)量較長(zhǎng)的物體如纖維、非腺毛等時(shí)，則在低倍鏡下較為方便。6.5.2.每次測(cè)量記錄下數(shù)據(jù)并分析數(shù)據(jù)最小值、最大值和多見(jiàn)值卩m）。如浙貝母淀粉粒直系J6~56um,表示最小值和最大值如為6?40?56um,中間的數(shù)值表示多見(jiàn)值。測(cè)量直徑時(shí)，應(yīng)以物體中部為準(zhǔn)。目鏡測(cè)微尺所代表的長(zhǎng)度隨不同目鏡與物鏡配合而異，因此在檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)將專(zhuān)用的目鏡測(cè)微尺，在所用顯微鏡不同倍數(shù)的目鏡與物鏡組合后進(jìn)行測(cè)量其長(zhǎng)度值全，部測(cè)量后記載于檢驗(yàn)記錄或?qū)?shù)值貼在顯微鏡鏡座上，備用。測(cè)量時(shí)，如有大小與規(guī)定有差異時(shí)，允許有少數(shù)略高于或略低于規(guī)定的數(shù)值。顯微鑒別法注意事項(xiàng)粉碎用具用畢后，必須清理干凈，干燥后才能使用于另一藥材。所用蓋玻