標準解讀

《GB/T 25165-2010 明膠中牛、羊、豬源性成分的定性檢測方法 實時熒光PCR法》是一項國家標準，該標準詳細規(guī)定了使用實時熒光PCR技術對明膠產(chǎn)品中的牛、羊、豬源性成分進行定性分析的方法。其主要目的是為了確保食品及藥品安全，避免由于未標注或錯誤標注動物源性成分而引發(fā)的安全問題。

根據(jù)此標準，首先需要從待測樣品（即含有或疑似含有牛、羊、豬源性成分的明膠制品）中提取DNA。然后通過設計針對特定物種線粒體DNA序列的高度特異性引物與探針組合來進行擴增反應。這里提到的“高度特異性”意味著這些引物和探針能夠準確地識別并結合到目標物種特有的DNA片段上，從而保證檢測結果的準確性。

在實際操作過程中，將準備好的樣本加入到含有上述引物、探針以及必要酶和其他試劑的反應體系中，在特定條件下進行熱循環(huán)擴增。隨著每個循環(huán)的完成，如果存在相應的動物源性成分，則會產(chǎn)生熒光信號，并且這種信號強度會隨擴增產(chǎn)物數(shù)量增加而增強。通過監(jiān)測整個過程中熒光強度的變化情況，可以判斷出樣品中是否含有指定的動物源性成分及其相對含量。


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....

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  • 2010-09-26 頒布
  • 2011-05-01 實施
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GB/T 25165-2010明膠中牛、羊、豬源性成分的定性檢測方法實時熒光PCR法_第1頁
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文檔簡介

ICS6502030

B43..

中華人民共和國國家標準

GB/T25165—2010

明膠中牛羊豬源性成分的定性檢測方法

、、

實時熒光PCR法

Protocolofidentificationofbovinecarineovineandorcinederived

,p,p

materialsingelatin—RealtimePCRmethod

2010-09-26發(fā)布2011-05-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國

國家標準

明膠中牛羊豬源性成分的定性檢測方法

、、

實時熒光PCR法

GB/T25165—2010

*

中國標準出版社出版發(fā)行

北京復興門外三里河北街號

16

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網(wǎng)址

電話

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中國標準出版社秦皇島印刷廠印刷

各地新華書店經(jīng)銷

*

開本印張字數(shù)千字

880×12301/160.57

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201011201011

*

書號

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:()

GB/T25165—2010

前言

本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本標準由全國畜牧業(yè)標準化技術委員會歸口

。

本標準起草單位中國檢驗檢疫科學研究院

:。

本標準主要起草人陳穎吳亞君袁飛王晶徐寶梁張舒亞楊海榮王斌趙勇勝

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T25165—2010

明膠中牛羊豬源性成分的定性檢測方法

、、

實時熒光PCR法

1范圍

本標準規(guī)定了明膠中牛羊豬源性成分的實時熒光檢測方法

、、PCR。

本標準適用于明膠中牛羊豬源性成分的定性檢測

、、。

該方法的檢出限為

0.1%。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款凡是注日期的引用文件其隨后所有

。,

的修改單不包括勘誤的內(nèi)容或修訂版均不適用于本標準然而鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究

(),,

是否可使用這些文件的最新版本凡是不注日期的引用文件其最新版本適用于本標準

。,。

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

食品添加劑明膠

GB6783

飼料采樣

GB/T14699.1

實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品分子生物學檢測

GB/T27403—2008

3術語和定義

下列術語和定義適用于本標準

。

31

.

實時熒光PCRrealtimePCR

在反應體系中加入熒光基團利用熒光信號的積累實時監(jiān)控整個擴增過程

PCR,PCR。

32

.

Ct值cyclethreshold

每個反應管內(nèi)的熒光信號達到設定的閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)

。

4原理

利用實時熒光技術根據(jù)不同物種的特異性基因序列對牛羊豬源性成分進行鑒定利用裂

PCR,、、。

解液破碎細胞酚三氯甲烷抽提蛋白質(zhì)異丙醇沉淀得到以提取的為模板進行內(nèi)參照基

,、,DNA;DNA

因的實時熒光檢測以確定樣品的提取效率通過特異性引物和標記熒光物質(zhì)探針進行牛

PCR,DNA;、

羊豬源性成分的實時熒光擴增根據(jù)擴增反應中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的強弱判定實

、PCR,PCR,

現(xiàn)對明膠中牛羊豬源性成分的定性分析

、、

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