雙氯酚酸鉀醇質體的研究

雙氯酚酸鉀醇質體的研究班級姓名氯芬酸鉀又名凱扶蘭，凱扶蘭是新一代強力非甾體抗炎藥，為苯乙酸的衍生物。雙氯酚酸鉀醇質體的研究醇質體醇質體是一種新型經皮給藥載體，可以認為是一種特殊的脂質體。與普通脂質體相比，醇質體中添加了較高濃度（20%~45%）的醇（乙醇、異丙醇），形成滲透性和包封率更好的脂質囊泡，并具有優(yōu)良的穩(wěn)定性和皮膚耐受性。因此醇質體成為經皮給藥研究的熱點。雙氯芬酸鉀化學名，結構圖，英文名，藥理作用鄰-（2，6-二氯苯胺基）-苯乙酸鉀DiclofenacPotassium藥理作用是抑制環(huán)氧化酶，減少前列腺素的生物合成，而前列腺素在疼痛、炎癥及發(fā)熱過程中起重要作用。對下列急癥的短期治療可迅速起效，如創(chuàng)傷后的痛性炎癥、手術后炎癥和疼痛、婦科疼痛和（或）炎癥、各種脊柱疾病疼痛綜合征、關節(jié)和非關節(jié)的風濕和類風濕性病變；也可作為耳鼻喉科嚴重感染性痛性炎癥的輔助治療（如扁桃體炎、中耳炎等）。但對單純發(fā)熱病人不適用。藥物不良反應（1）偶見胃腸道上腹疼痛，各種胃腸道紊亂如惡心、嘔吐、腹瀉、腸道痙攣、消化不良、脹氣厭食等；（2）罕見消化道出血；（3）偶見頭痛、頭昏、眩暈，罕見嗜睡；（4）偶見有皮疹，罕見有蕁麻疹；（5）偶見血清轉氨酶升高，罕見黃疸性肝炎；（6）個別病人出現血小板、白細胞減少注意事項和禁忌證[注意事項]對患有胃腸道疾病包括消化性質瘍、潰瘍性結腸炎以及嚴重肝功能損害的病人禁用。禁忌癥：（1）對曾有潰瘍病史的老年病人，即使在治療中并無明顯先兆癥狀，仍有可能發(fā)生消化道出血。因此，必須嚴密觀察和慎用或禁用，治療亦應用最低有效劑量；（2）由于前列腺素對維持腎血流有重要作用，因而對老年病人、心腎功能損害者、服用利尿劑以及由于其它原因如接受大手術或術后發(fā)生細胞外液丟失的病人，在服用本品時應特別小心；（3）本品通常只用數日，如需延長治療期，應注意血像改變；（4）對其它NSAID有過敏史者應禁用；（5）妊娠期特別在臨產前服藥有可能引起宮縮無力，故不宜服用本品內外有關該藥物（含各種劑型）的研究報道及應用情況【新雙氯芬酸鉀凝膠劑】的臨床療效和安全性：方法:采用多中心的隨機對照,使用雙氯芬酸鉀凝膠劑治療各種急性疼痛患者104例,其中63例與扶他林乳膠劑治療同類患者,63例進行隨機對照,另設開放組41例。結果:雙氯芬酸鉀凝膠劑對疼痛的總臨床控制率為57.69%,總有效率為82.69%,與對照組比較無顯著性差異。其不良反應發(fā)生率為4.81%。結論:雙氯芬酸鉀凝膠劑是安全有效的外用鎮(zhèn)痛消炎藥?？傮w研制和檢驗所用儀器材料儀器ＬＣ－１０ＡＴＶＰ高效液相色譜儀（日本島津公司）；ＺｅｔａｓｉｚｅｒＮａｎｏＺＳ９０激光粒度儀（英國馬爾文公司）；Ｈ－６００透射電子顯微鏡（日本日立）；ＦＡ２５均質機（德國Ｆｌｕｋｏ公司）；ＴＫ－６Ｈ型透皮擴散試驗儀（上海鍇凱科技有限貿易有限公司）。試藥雙氯芬酸鉀（武漢圣天宇科技有限公司，批號１００６２０，含量：９９．５％，）；注射用大豆磷脂（上海太偉藥業(yè)有限公司，批號０９０３０９）；維生素Ｅ（康普達生物科技有限公司）；甲醇為色譜級；其余化學試劑為市售分析純。動物大鼠，♂，體質量（１９０±２０）ｇ。雙氯芬酸鉀醇質體的制備采用乙醇注入均質法制備。稱取處方量雙氯芬酸鉀、維生素Ｅ、大豆卵磷脂于燒杯中，加無水乙醇使其溶解并將其轉至１０ｍＬ針筒中。另取處方量磷酸緩沖液（ｐＨ６．８）于三頸燒瓶中，水?。常怠?，機械攪拌７００ｒ·ｍｉｎ－１，密封條件下，將針筒中的液體緩慢滴加到三頸瓶中，待滴加完后再持續(xù)攪拌５ｍｉｎ。冷卻至室溫，均質１ｍｉｎ。最后過０．２２μｍ微孔濾膜，將得到的樣品充氮后４℃保存?zhèn)溆谩Ａ鞒虉DA:處方量雙氯芬酸鉀+維生素Ｅ+大豆卵磷脂于燒杯中+無水乙醇→溶解１０ｍＬ針筒中。B:處方量磷酸緩沖液（ｐＨ６．８）于三頸燒瓶中，水?。常怠?，機械攪拌７００ｒ·ｍｉｎ－１，

A密封條件B持續(xù)攪拌5min將針筒中的液體緩慢滴加到三頸瓶中冷卻至室溫，均質１ｍｉｎ過０．２２μｍ微孔濾膜得到的樣品充氮后４℃保存?zhèn)溆谜辉囼炘O計與處方優(yōu)選確定影響醋氯芬酸醇質體包封率與累積滲透百分率［累積滲透百分率＝累積滲透量／（給藥劑量×藥物含量）×１００％］的主要因素：醋氯芬酸量（Ａ）、乙醇用量（Ｂ）、大豆卵磷脂用量（Ｃ）、均質轉速（Ｄ）。上述４種因素各?。硞€水平，按Ｌ９（３４）進行正交試驗優(yōu)化處方。因素水平見表１。包封率測定ＨＰＬＣ分析條件色譜柱：Ａｇｉｌｅｎｔ（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５μｍ）；流動相：甲醇－水－冰醋酸（７５∶２５∶０．１）；流速：１ｍＬ·ｍｉｎ－１；檢測波長：２７６ｎｍ；柱溫：２８℃；進樣量：２０μＬ。在此條件下醋氯芬酸與空白輔料色譜峰能很好分離，專屬性良好，方法可行。圖１高效液相色譜圖Ａ．空白醇質體；Ｂ．醋氯芬酸對照品；Ｃ．醋氯芬酸醇質體標準曲線的繪制精密稱取干燥至恒重的醋氯芬酸對照品２０．３ｍｇ，置于２５０ｍＬ量瓶中，加適量甲醇溶解，并加流動相稀釋至刻度配成質量濃度為８１．２μｇ·ｍＬ－１的儲備液。分別精密量?。埃?，０．５，１，２，４，６，８ｍＬ于１０ｍＬ量瓶中，加流動相稀釋至刻度。搖勻，過０．４５μｍ微孔濾膜，?。玻唉蹋汤m(xù)濾液進樣測定。以峰面積（Ａ）為縱坐標，以雙氯芬酸鉀濃度（Ｃ）為橫坐標進行線性回歸，得標準曲線：Ａ＝３１６４．３Ｃ＋６９３．７７（ｒ＝０．９９９９），結果表明雙氯芬酸鉀在１．６２４～６４．９６μｇ·ｍＬ－１范圍內，峰面積與濃度線性關系良好。雙氯芬酸鉀體外經皮滲透實驗離體鼠皮的制備：取雄性大鼠，斷頸處死，剔除腹毛，剝離腹部皮膚在玻璃板上小心擦除皮下脂肪，用新鮮生理鹽水洗凈，-20°C保存，備用。將解凍的大鼠皮膚固定在水平擴散池的2個半池之間，角質層朝向供給池，擴散池的有效神偷面積是0.785平方厘米，供給池和接受池容積均為5ml。接受池中加入20%乙醇緩沖液5ml，供給池中加入制備的載藥醇質體（0.35%,W/V)或與其投藥量相當的含藥乙醇緩沖液（0.35%，W/V)5ml,與皮膚緊密接觸，無間隙，溫度設定為32°C，轉速穩(wěn)定在200r/min。分別于1,2,4,6,8,10,12,24h取樣3ml(同時補充等量接受液3ml），過0.45μm微孔濾膜，取續(xù)濾液進樣測定，計算取樣溶液的濃度C1。按照以下計算單位面積藥物累計透過量Q：觀察醇質體將以制備的雙氯芬酸醇質體稀釋一定倍數后，滴至專用銅網上，用1%磷鎢酸負染，待自然揮干后用透射電鏡觀察醇體質形態(tài)。

體外經皮滲透實驗流程圖

式中Q:單位面積藥物累積透過量（μg·/cm2），Ci:第i次取樣時釋放介質中的藥物質量濃度(μg·ml