實驗性腎衰竭

實驗性急性腎功能不全武漢大學基礎醫(yī)學院病生教研室

急性腎功能不全（AcuteRenalinsufficiency,ARI）

各種病因引起雙側腎臟在短期內泌尿功能急劇降低，導致機體內環(huán)境出現(xiàn)嚴重紊亂的病理生理過程。了解實驗性腎功能不全動物模型復制方法觀察升汞中毒家兔的一般狀態(tài)，尿的變化、血漿尿素氮水平以及腎臟大體形態(tài)改變根據(jù)實驗指標，分析討論急性腎功能不全的病理生理變化實驗目的實驗動物及模型復制的原理原理腎毒物HgCl2

引起家兔腎小管變性、壞死，導致嚴重的腎臟功能不全。觀察指標

臨床變化對象手術操作指標GFR下降、尿量下降尿液膀胱插管尿量尿成分改變蛋白尿、血尿和管型氮質血癥血液頸動脈插管血漿尿素氮水平腎臟形態(tài)改變腎臟兔尸體解剖腎臟色澤、體積、皮質條紋等與對照家兔做比較：實驗步驟1.復制模型（已完成）實驗組

HgCl2肌肉注射1.2ml/Kg24h

對照組

NaCl

肌肉注射1.2ml/Kg24h

(1)稱重麻醉:腹腔注射20%烏拉坦，5ml/kg2.手術及操作劍突恥骨聯(lián)合部位：左下腹近腹中線1cm方法：與腹壁呈45°進針，進入腹腔有落空感，回抽無血、腸內容物，緩慢推注效果判斷：肌肉松弛，自然臥倒，眼瞼反射遲鈍，鉗夾皮膚無反應等（2）固定備皮：固定：備皮：頸部正中：甲狀軟骨-胸骨上緣下腹正中：恥骨聯(lián)合上1～5cm（3）膀胱插管收集尿液下腹部切口，分離組織，暴露膀胱注射器抽膀胱內尿3ml(備用)荷包縫合（膀胱無血管區(qū)）膀胱插管C左頸總動脈迷走神經(jīng)頸內靜脈胸骨舌骨肌胸鎖乳突?。?）左頸總動脈插管分離抗凝耳緣靜脈肝素(1ml/kg)插管左頸總動脈插管3.遠心端，45o剪口，約為管徑的1/24.朝心臟方向插管2~3cm并固定頸總動脈1.結扎遠心端12.夾閉近心端2近心端心臟遠心端頭部（5）尿液鏡檢，計錄管型數(shù)和細胞數(shù)（10個視野）管型（低倍鏡）細胞（高倍鏡）（6）尿蛋白定性檢查取尿液3ml于試管中酒精燈上加熱至沸騰若混濁，加入5%醋酸3-5滴再煮沸尿變清，尿內有尿酸鹽

混濁加重，尿中有蛋白

程度等級蛋白含量（g%）清晰－<0.01輕度白色渾濁＋0.01~0.05乳樣渾濁＋＋0.05~0.2渾濁或少量碎片＋＋＋0.2~0.5絮狀渾濁＋＋＋＋>0.5（6）尿蛋白定性檢查（7）血漿尿素氮測定原理：血液中尿素在強酸條件下與二乙酰-肟和氨硫脲（DAM-TSC）共煮沸，生成紅色復合物，顏色深淺與尿素氮含量成正比例關系，用分光光度計測定OD值，可計算出尿素氮含量。方法①每組自頸總動脈取血10ml到離心管,離心,3000rpm10min,吸出上層血漿置于干凈試管中備用；②按下表加入試劑：試劑（ml）空白管標準管測定管(ABCD)血漿

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-0.02水0.50.10.5尿素氮標準液Ⅱ-0.4-DAM-TSC0.50.50.5酸混合液4.04.04.0③各管加好混勻后置沸水鍋中煮沸10min，流水中冷卻3min后測OD值（520nm波長）,先以空白管調零，再讀取測定管值；④計算：測定管光密度(Du)標準管光密度(Ds)×0.002×1000.02=DuDs×10血漿尿素氮(mg%)=（8）形態(tài)學觀察①將家兔處死（耳緣靜脈注入空氣5~10ml）,取出腎臟；②觀察并比較兩組家兔腎臟的大體形態(tài)，如體積大小，表面色澤，皮質條紋及色澤等。實驗流程概括1.復制模型（已完成）(1)稱重麻醉:腹腔注射20%烏拉坦，5ml/kg2.手術操作及檢測指標(2)固定備皮：(3)膀胱插管收集尿液(4)左頸總動脈插管(5)尿液鏡檢，計錄管型數(shù)和細胞數(shù)（10個視野）(6)尿蛋白定性檢查(7)血漿尿素氮測定實驗報告的書寫實驗目的實驗步驟（簡明扼要）實驗結果實驗項目

中毒家兔對照家兔