第十一章吩噻嗪類抗精神病藥物分析

第十一章吩噻嗪類抗精神病

藥物的分析吩噻嗪類藥物分子結(jié)構(gòu)中均含有硫氮雜蒽母核通常為－H、－Cl、－CF3、－SCH3等為具有2-3個(gè)碳鏈的二甲胺基，或?yàn)楹s環(huán)等一、基本結(jié)構(gòu)第一節(jié)基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì)典型藥物分子結(jié)構(gòu)鹽酸異丙嗪典型藥物分子結(jié)構(gòu)鹽酸氯丙嗪典型藥物分子結(jié)構(gòu)奮乃靜典型藥物分子結(jié)構(gòu)鹽酸氟奮乃靜典型藥物分子結(jié)構(gòu)氟奮乃靜典型藥物分子結(jié)構(gòu)鹽酸三氟拉嗪典型藥物分子結(jié)構(gòu)鹽酸硫利達(dá)嗪還原性UV、IR結(jié)構(gòu)分析（1）三環(huán)共軛的大體系

硫、氮雜原子上未共用電子對(duì)與苯環(huán)形成p-

共軛，具有強(qiáng)紫外吸收1.硫氮雜蒽母核200300254205300～325紫外吸收光譜受取代基的影響，特別是S被氧化的程度不同，有不同的改變，在紫移的同時(shí)在270附近產(chǎn)生一新的吸收。270吩噻嗪吩噻嗪氧化產(chǎn)物300取代基：-X-SCH3、-COCH3（2）硫氮雜蒽環(huán)上硫原子為-2價(jià)，具有還原性，易氧化呈色。（3）硫氮雜蒽環(huán)上硫原子有兩對(duì)孤對(duì)電子，易與金屬離子絡(luò)合呈色。2.取代基R：脂烴胺基、哌嗪基、哌啶基，具堿性R：鹵素1.弱堿性二、主要理化性質(zhì)具有弱堿性，極弱脂肪烴氨基、呱嗪及呱啶等衍生物所含氮原子堿性較強(qiáng)，可用于鑒別和含量測(cè)定2.易氧化性易被硫酸、硝酸、過氧化氫、三氯化鐵氧化，可用于鑒別和含量測(cè)定，過程與產(chǎn)物比較復(fù)雜3.與金屬離子配合呈色可與靶離子配合生成有色化合物，可用于鑒別和含量測(cè)定。氧化產(chǎn)物亞砜和砜無此反應(yīng)機(jī)理4.紫外光吸收特性藥物溶劑C(μg/ml)λmax(nm)A百分吸收系數(shù)鹽酸氯丙嗪鹽酸(9→1000)52540.46915306－－鹽酸異丙嗪鹽酸(0.1mol/L)6249－883~937奮乃靜無水乙醇72580.65－鹽酸氟奮乃靜鹽酸(9→1000)10255－553~593鹽酸三氟拉嗪鹽酸(1→20)10256－630鹽酸硫利達(dá)嗪乙醇8264與315－－5.紅外光吸收特性第二節(jié)鑒別試驗(yàn)化學(xué)法吩噻嗪類藥物具有弱堿性、易氧化性、與金屬離子配合呈色的特性可采用與生物堿沉淀劑、氧化顯色反應(yīng)、與鈀離子配合呈色反應(yīng)來鑒別本類藥物化學(xué)法——與生物堿沉淀劑反應(yīng)JP15鹽酸氯丙嗪的鑒別方法三硝基苯酚沉淀、再用丙酮重結(jié)晶JP15鹽酸氯丙嗪片的鑒別同上化學(xué)法——氧化顯色反應(yīng)常用氧化劑硫酸硝酸過氧化氫三氯化鐵藥物硫酸硝酸過氧化氫鹽酸氯丙嗪－顯紅色，漸變?yōu)榈S色－鹽酸異丙嗪顯櫻桃紅色，放置后顏色漸變深生成紅色沉淀，加熱即溶解，溶液由紅色轉(zhuǎn)變?yōu)槌赛S色－奮乃靜－－顯深紅色，放置后紅色漸褪去鹽酸氟奮乃靜顯淡紅色，溫?zé)岷笞兂杉t褐色－－鹽酸三氟拉嗪－生成微帶紅色的白色沉淀；放置后，紅色變深，加熱后變黃色－鹽酸硫利達(dá)嗪顯藍(lán)色－－化學(xué)法——與鈀離子配合顯色反應(yīng)奮乃靜綠色Cu焰色反應(yīng)化學(xué)法——含鹵素取代基的反應(yīng)（如氟奮乃靜等含氟有機(jī)藥物）紅色黃色顯色反應(yīng)化學(xué)法——含鹵素取代基的反應(yīng)與硝酸銀的反應(yīng)二氧化錳氧化反應(yīng)化學(xué)法——氯化物的鑒別反應(yīng)紅外光譜法紫外可見鹽酸氯丙嗪標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照硫氮雜蒽205nm254nm300nm光譜法TLCRf供試品斑點(diǎn)對(duì)照品斑點(diǎn)HPLC供試品對(duì)照品tR色譜法測(cè)定熔點(diǎn)其他方法第三節(jié)有關(guān)物質(zhì)檢查吩噻嗪類藥物的有關(guān)物質(zhì)主要包括：殘留的原料及中間產(chǎn)物副產(chǎn)物藥物的氧化產(chǎn)物檢查方法高效液相色譜法（HPLC）薄層色譜法（TLC）一、鹽酸氯丙嗪及其制劑的有關(guān)物質(zhì)檢查（一）合成路線與有關(guān)物質(zhì)1、合成路線2、有關(guān)物質(zhì)及其編號(hào)代碼

殘留的中間產(chǎn)物：

貯藏不當(dāng)或存放時(shí)間過長(zhǎng)而產(chǎn)生的有關(guān)物質(zhì)：

（二）有關(guān)物質(zhì)檢查方法1、鹽酸氯丙嗪的有關(guān)物質(zhì)檢查【示例11-23】ChP2010檢查方法：HPLC高低濃度法色譜條件色譜柱：C8(0.25m4.0mm，5μm)流動(dòng)相：乙腈-0.5%三氟乙酸(pH5.3)(50∶50)檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm

判斷標(biāo)準(zhǔn)：供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積(0.5%)，各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對(duì)照溶液主峰面積的2倍(1.0%)。2、鹽酸氯丙嗪(糖衣)片的有關(guān)物質(zhì)檢查【示例11-26】ChP2010檢查法

檢查方法：HPLC高低濃度對(duì)比法判斷標(biāo)準(zhǔn)：供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積(0.5%)。①采用過濾法排除片劑輔料的干擾；

說明：②取消了對(duì)雜質(zhì)總量的控制，在一定程度上減弱了控制。第四節(jié)含量測(cè)定含量測(cè)定酸堿滴定法分光光度法HPLC法HPLC-MS酸堿滴定法非水滴定法乙醇-水溶液滴定法高氯酸+冰醋酸醋酐的作用溫度的影響NaOH滴定法電位滴定法指示終點(diǎn)一、酸堿滴定法1.非水溶液滴定法【示例11-31】鹽酸氯丙嗪的含量測(cè)定溶劑：冰醋酸與醋酐的混合溶液由于醋酐解離生成的醋酐合乙酰離子[CH3CO+·(CH3CO)2O]比醋酸解離生成的醋酸合質(zhì)子[H+·CH3COOH]酸性強(qiáng)，更利于增強(qiáng)氯丙嗪的堿性，因此能夠顯著增大滴定突躍范圍。滴定劑：高氯酸滴定液(0.1mol/L)指示終點(diǎn)方法：電位法指示電極：玻璃電極參比電極：飽和甘汞電極(玻璃套管內(nèi)裝氯化鉀的飽和無水甲醇溶液)空白試驗(yàn)：一定程度上校正溶劑等對(duì)測(cè)定的影響高氯酸滴定液溫度校正：①若滴定供試品與標(biāo)定高氯酸滴定液時(shí)的溫度差>10℃，應(yīng)重新標(biāo)定；②若≤10℃，則用下式校正：式中：0.0011為冰醋酸的膨脹系數(shù)；t0為標(biāo)定高氯酸滴定液時(shí)的溫度；t1為滴定供試品時(shí)的溫度；N0為t0時(shí)高氯酸滴定液的濃度；N1為t1時(shí)高氯酸滴定液的濃度?！臼纠?1-32】鹽酸氯丙嗪注射液的含量測(cè)定（JP15）說明：通過堿化、有機(jī)溶劑提取游離堿氯嗪，排除了水的干擾(為減少水分對(duì)測(cè)定的干擾，在乙醚提取液中加入無水硫酸鈉脫水)。例題：鹽酸三氟拉嗪的含量測(cè)定：精密稱取本品0.2089g，加無水甲酸l0ml與醋酐40ml溶解后，依照電位滴定法，用高氯酸滴定液(0.1023mol/L)滴定，消耗高氯酸滴定液8.46ml，另取無水甲酸l0ml與醋酐40ml，同法測(cè)定，消耗高氯酸滴定液0.06ml，請(qǐng)計(jì)算鹽酸三氟拉嗪的含量。每1ml高氯酸滴定液(O.1mol/L)相當(dāng)于24.02mg的C21H24F3N3S．2HCI。

吩噻嗪類藥物鹽酸鹽的水溶液顯酸性，在乙醇-水溶液中，用氫氧化鈉滴定液測(cè)定其含量。

反應(yīng)體系中加入適量的鹽酸，采用電位法指示滴定終點(diǎn)。

2.乙醇-水溶液中的氫氧化鈉滴定法第一個(gè)等當(dāng)點(diǎn)：

第二個(gè)等當(dāng)點(diǎn)：

根據(jù)兩個(gè)等當(dāng)點(diǎn)間相應(yīng)的氫氧化鈉滴定液的體積，即可計(jì)算吩噻嗪類藥物的鹽酸鹽的含量。

【示例11-35】鹽酸氯丙嗪注射液的含量測(cè)定分光光度法直接分光光度法提取后分光光度法提取后雙波長(zhǎng)分光光度法二階導(dǎo)數(shù)分光光度法純度較高,雜質(zhì)、輔料無干擾或干擾易排除測(cè)定此類藥物制劑，可應(yīng)用提取排除輔料干擾提取不能完全排除干擾，而藥物的氧化物同樣能被提取，這時(shí)可用在一定條件下可以方便地消除前兩種藥物中所產(chǎn)生的干擾鈀離子比色法鈀離子配位特性二、分光光度法1.直接分光光度法

本法適用于純度較高、雜質(zhì)及輔料無干擾或干擾易排除的吩噻嗪類藥物的含量測(cè)定?！臼纠?1-34】鹽酸氯丙嗪(糖衣)片的含量測(cè)定（ChP2010）【示例11-35】鹽酸氯丙嗪注射液的含量測(cè)定（ChP2010）2.提取后分光光度法

通過提取排除輔料等干擾以測(cè)定吩噻嗪類藥物制劑【示例11-36】鹽酸異丙嗪口服液的含量測(cè)定(USP32-NF27)提取方法：在堿性條件下采用三氯甲烷提取分離游離堿異丙嗪樣品溶解：揮干三氯甲烷后，用稀硫酸溶解異丙嗪殘?jiān)鼫y(cè)定：波長(zhǎng)：298nm空白對(duì)照液：稀硫酸計(jì)算：式中：C(mg/ml)為對(duì)照品溶液的濃度；V(ml)為所取供試品的體積；AU和AS分別為供試品溶液及對(duì)照品溶液的吸光度。3.提取后雙波長(zhǎng)分光光度法

提取后分光光度法能夠除去一些干擾物質(zhì)，但卻不能除去吩噻嗪類藥物的氧化物。提取時(shí)，氧化物隨游離堿進(jìn)入有機(jī)相；測(cè)定時(shí)，因結(jié)構(gòu)相近，氧化物在吩噻嗪類藥物的測(cè)定波長(zhǎng)處產(chǎn)生吸收，干擾測(cè)定。【示例11-37】鹽酸氯丙嗪注射液的含量測(cè)定（USP32-NF27）測(cè)定波長(zhǎng)：

254nm（最大吸收波長(zhǎng)）及277nm（等吸收波長(zhǎng)）空白對(duì)照液：0.1mol/L鹽酸溶液計(jì)算公式：12.5C(A254?A277)U

/V(A254?A277)S式中：C(mg/ml)為對(duì)照品溶液的濃度；V(ml)為所取供試品的體積；括號(hào)內(nèi)的公式分別為供試品溶液(U)和對(duì)照品溶液(S)在下標(biāo)所示波長(zhǎng)處的吸光度差。4.二階導(dǎo)數(shù)分光光度法

吩噻嗪類藥物制劑中其他成分對(duì)含量測(cè)定的干擾，雖然可以采用提取后分光光度法或提取后雙波長(zhǎng)分光光度法消除，但操作煩瑣。5.鈀離子比色法

吩噻嗪類藥物在pH2±0.1的緩沖溶液中，與鈀離子(Pd2+)形成紅色配合物，在500nm波長(zhǎng)附近具有最大吸收，由于鈀離子僅與未被氧化的硫元素配合顯色，消除了藥物中氧化物對(duì)測(cè)定的干擾。比色液的濃度：50-250μg/mL顯色穩(wěn)定性：10分鐘后可穩(wěn)定約2小時(shí)【示例11-38】鹽酸異丙嗪片的含量測(cè)定（USP32-NF27）操作步驟：略計(jì)算公式：50C（AU/AS）式中：C(mg/ml)為對(duì)照品溶液的濃度；AU和AS分別為供試品溶液及對(duì)照品溶液的吸光度三、高效液相色譜法1.反相高效液相色譜法在分離具有弱堿性的吩噻嗪類藥物時(shí)，未硅烷化的硅醇基與吩噻嗪類藥物發(fā)生吸附或離子交換作用，使分離效能下降，表現(xiàn)為吩噻嗪類藥物的色譜峰拖尾、保留時(shí)間過長(zhǎng)(甚至不能被洗脫)。通常在流動(dòng)相中加入含氮堿性競(jìng)爭(zhēng)試劑(掃尾劑)，以抑制堿性藥物與未硅烷化的硅醇基作用。常用的掃尾劑：醋酸銨、三乙胺、二乙胺、乙腈等。【示例11-39】鹽酸氯丙嗪片的含量測(cè)定（JP15）色譜條件：（1）色譜柱：ODS柱(15cm×4.6mm,5μm)（2）流動(dòng)相：0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液的稀釋液(1→2)-乙腈(27∶13)（3）柱溫：25℃（4）檢測(cè)波長(zhǎng)：256nm系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：（1）內(nèi)標(biāo)物質(zhì)與氯丙嗪分離度不得小于10（2）氯丙嗪與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰面積比值的RSD不得大于1.0%（n=6)定量方法：內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量分析內(nèi)標(biāo)物：對(duì)羥基苯甲酸乙酯計(jì)算公式：

(C17H19ClN2S?HCl)=Ws

×(QT

/QS

)×2式中：WS為鹽酸氯丙嗪對(duì)照品的量(mg)；QT和QS分別為供試品溶液及對(duì)照品溶液中氯丙嗪與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積比值。

【示例11-40】氟奮乃靜注射液的含量測(cè)定（ChP2010）

色譜條件：（1）色譜柱：ODS柱（2）流動(dòng)相：碳酸銨甲醇溶液(1%碳酸銨溶液-甲醇(75∶450)，用醋酸調(diào)節(jié)pH至7.5±0.1)-乙腈(525∶450)（3）檢測(cè)波長(zhǎng)：260nm系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：①出峰順序依次為降解物Ⅰ、Ⅱ與氟奮乃靜，降解物Ⅰ、Ⅱ兩峰的分離度應(yīng)大于2.0；②理論板數(shù)按氟奮乃靜峰計(jì)算不低于5000。2.離子對(duì)高效液相色譜法在分析具有堿性的吩噻嗪類藥物時(shí)，常用的離子試劑為烷基磺酸鹽陰離子對(duì)試劑，如戊烷磺酸鈉、庚烷磺酸鈉、十二烷磺酸鈉等。影響離子對(duì)形成的條件——影響待測(cè)組分的保留（1）pH（2）反離子的性質(zhì)與濃度（3）流動(dòng)相的組成（4）離子強(qiáng)度等【示例11-42】鹽酸異丙嗪注射液的含量（USP32-NF27）色譜條件：（1）色譜柱：苯基柱（30cm×4.6mm）（2）流動(dòng)相：0.2%戊烷磺酸鈉溶液-乙腈-冰醋酸(100∶100∶1)（3）流速：1.5mL/min（4）檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：（1）異丙嗪與吩噻嗪色譜峰的分離度不得小于3.0；（2）重復(fù)進(jìn)樣的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不得