標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 34331-2017 黃瓜綠斑駁花葉病毒透射電子顯微鏡檢測(cè)方法》是一項(xiàng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，主要規(guī)定了使用透射電子顯微鏡（TEM）對(duì)黃瓜綠斑駁花葉病毒進(jìn)行檢測(cè)的具體步驟和技術(shù)要求。該標(biāo)準(zhǔn)適用于植物檢疫、科研以及生產(chǎn)實(shí)踐中對(duì)該病毒的快速準(zhǔn)確鑒定。

根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)，首先需要準(zhǔn)備待檢樣品，包括從疑似感染黃瓜綠斑駁花葉病毒的植株上采集新鮮葉片或其他適宜部位作為樣本材料。接著，通過(guò)特定的方法處理這些樣本以提取病毒顆粒，如采用機(jī)械研磨結(jié)合磷酸緩沖液等手段制備病毒懸浮液，并對(duì)其進(jìn)行超速離心濃縮處理。為了便于觀察，還需將濃縮后的病毒溶液滴加到銅網(wǎng)上并用重金屬鹽類(lèi)（例如磷鎢酸或醋酸鈾）負(fù)染色，這樣可以在電子顯微鏡下更清晰地看到病毒粒子形態(tài)。

在完成上述準(zhǔn)備工作之后，利用透射電子顯微鏡觀察經(jīng)處理過(guò)的樣品，在放大倍數(shù)足夠高的情況下尋找具有特征性的病毒粒子結(jié)構(gòu)。黃瓜綠斑駁花葉病毒屬于長(zhǎng)線(xiàn)形病毒，其典型特征為細(xì)長(zhǎng)且兩端尖銳的桿狀顆粒，長(zhǎng)度大約在650納米左右。如果在顯微照片中發(fā)現(xiàn)符合描述的病毒粒子，則可初步判斷該植物樣本中存在黃瓜綠斑駁花葉病毒感染。


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....

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  • 正在執(zhí)行有效
  • 2017-10-14 頒布
  • 2018-09-01 實(shí)施
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GB/T 34331-2017黃瓜綠斑駁花葉病毒透射電子顯微鏡檢測(cè)方法_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

ICS7104040

G04..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T34331—2017

黃瓜綠斑駁花葉病毒透射電子顯微鏡

檢測(cè)方法

TestmethodofCucumbergreenmottlemosaicvirus

bytransmissionelectronmicroscopy

2017-10-14發(fā)布2018-09-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T34331—2017

目次

前言

…………………………Ⅰ

引言

…………………………Ⅱ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

術(shù)語(yǔ)和定義

3………………1

儀器設(shè)備試劑和材料環(huán)境條件

4、、………………………1

試樣

5………………………2

透射電子顯微鏡檢測(cè)步驟

6………………4

血清學(xué)和分子生物學(xué)驗(yàn)證

7………………4

檢測(cè)結(jié)果發(fā)布

8……………4

除害處理

9…………………5

附錄資料性附錄黃瓜綠斑駁花葉病毒相關(guān)資料

A()…………………6

附錄資料性附錄常用試劑的配方

B()…………………8

附錄資料性附錄黃瓜綠斑駁花葉病毒電鏡照片

C()…………………11

GB/T34331—2017

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)微束分析標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC38)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位浙江大學(xué)浙江省植物保護(hù)檢疫局浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院

:、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人洪健黎軍英吳建祥周雪平王榮洲謝禮宋西嬌

:、、、、、、。

Ⅰ

GB/T34331—2017

引言

黃瓜綠斑駁花葉病毒Cucumbergreenmottlemosaicvirus是侵染西瓜黃瓜甜瓜葫

(,CGMMV)、、、

蘆等葫蘆科作物的重要檢疫性病毒病原被列入中華人民共和國(guó)進(jìn)境植物檢疫性有害生物名錄該

,《》。

病毒侵染西瓜引起的褪綠斑駁病給西瓜產(chǎn)業(yè)造成嚴(yán)重威脅典型的為直徑長(zhǎng)度

,。CGMMV18nm,

的剛直桿狀粒子在病毒分類(lèi)學(xué)上歸屬于植物桿狀病毒科Virgaviridae煙草花葉病毒屬

300nm,()、

Tobamovirus附錄應(yīng)用透射電子顯微鏡可觀察其形態(tài)結(jié)構(gòu)以及在細(xì)胞內(nèi)的分布特征是輔助

()(A)。,

于血清學(xué)檢測(cè)和分子生物學(xué)檢測(cè)的重要形態(tài)學(xué)診斷依據(jù)為了正確指導(dǎo)黃瓜綠斑駁花葉病毒形態(tài)學(xué)檢

。

測(cè)診斷工作有必要制定該病毒的透射電子顯微鏡檢測(cè)方法國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

,。

Ⅱ

GB/T34331—2017

黃瓜綠斑駁花葉病毒透射電子顯微鏡

檢測(cè)方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了應(yīng)用透射電子顯微鏡對(duì)黃瓜綠斑駁花葉病毒進(jìn)行形態(tài)學(xué)檢測(cè)的技術(shù)要求和規(guī)范

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于黃瓜綠斑駁花葉病毒的檢驗(yàn)檢疫與鑒定

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

黃瓜綠斑駁花葉病毒檢疫鑒定方法

GB/T28071—2011

進(jìn)出境植物及植物產(chǎn)品檢疫抽樣方法

SN/T2122—2015

植物病毒檢測(cè)規(guī)范

SN/T2964—2011

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件

。

31

.

病毒virus

一種由核酸和蛋白質(zhì)外殼組成具有侵染活性并能夠自我復(fù)制的細(xì)胞內(nèi)寄生病原生物

,。

32

.

病毒粒子virion

復(fù)制裝配完善的成熟病毒顆粒

、。

33

.

負(fù)染色negativestain

利用高密度的重金屬鹽染色液如磷鎢酸醋酸鈾等染色后將微小的試樣顆粒包圍起來(lái)在暗背

(、),,

景下顯示試樣的形態(tài)及微細(xì)結(jié)構(gòu)

。

34

.

超薄切片ultrathinsection

應(yīng)用超薄切片機(jī)將樹(shù)脂包埋的生物試樣切成厚度

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