GB/T 38165-2019人體外周血中循環(huán)游離DNA濃度檢測基于Alu序列實時熒光PCR法

ICS07080

A40.

中華人民共和國國家標準

GB/T38165—2019

人體外周血中循環(huán)游離DNA濃度檢測

基于Alu序列實時熒光PCR法

Detectionofcirculatingcell-freeDNAconcentrationinhumanperipheralblood—

Real-timePCRmethodbasedonAlusequence

2019-10-18發(fā)布2019-10-18實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T38165—2019

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由全國生化檢測標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC387)。

本標準起草單位成都中醫(yī)藥大學四川省腫瘤醫(yī)院上海市計量測試技術研究院

:、、。

本標準主要起草人何洋肖洪濤宋瑱李燕聞艷麗冷平劉剛李東梅

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T38165—2019

人體外周血中循環(huán)游離DNA濃度檢測

基于Alu序列實時熒光PCR法

1范圍

本標準規(guī)定了人體外周血中循環(huán)游離脫氧核糖核酸基于序列的實時熒光聚合酶鏈式

(DNA)Alu

反應定量檢測方法

(PCR)。

本標準適用于循環(huán)游離樣品中序列的定量檢測

DNAAlu。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

實驗室生物安全通用要求

GB19489

3術語和定義

下列術語和定義適用于本文件

。

31

.

循環(huán)游離DNAcirculatingcell-freeDNAcfDNA

;

血液中來源于細胞凋亡和壞死的細胞外游離狀態(tài)的短片段

DNA。

32

.

實時熒光PCRreal-timePCR

在反應體系中加入熒光基團通過熒光信號的積累實時監(jiān)控整個擴增過程實現對起始

PCR,PCR,

模板的定量及定性分析

。

33

.

Ct值cyclethreshold

每個反應管內的熒光信號達到設定的閾值時所經歷的循環(huán)數

。

34

.

Alu序列Alusequence

散在分布于靈長類動物基因組中的中度重復序列

。

注序列具有同源性占人類基因組序列的每個元件長度約為

:Alu70%~98%,5%~10%,300bp。

4原理

以提取的外周血循環(huán)游離作為檢測目標樣品以符合要求的人基因組定量標準物質為

DNA,DNA

標準品采用實時熒光技術設計特異性引物分別擴增序列中長度為和的片

,PCR,Alu115bp219bp

段以標準品起始模板濃度的對數為橫坐標值為縱坐標制作標準曲線根據標準曲線方程

,DNA,Ct,。