第七章紫外-可見分光光度法2

紫外吸收光譜的基本概念1紫外-可見分光光度法的基本原理2紫外-可見分光光度計3分析條件的選擇456定性定量分析方法UV在有機(jī)藥物分析中的應(yīng)用21第七章紫外-可見分光光度法與檢測技術(shù)第七章紫外-可見分光光度法◆學(xué)習(xí)目標(biāo)⊙◆知識要求⊙◆能力要求⊙◆學(xué)習(xí)目標(biāo)通過學(xué)習(xí)光譜分析法概論、紫外-可見分光光度法的基本原理、分光光度計的基本構(gòu)造、降低測量誤差的方法、常用的定性、定量方法等知識，了解光學(xué)分析法的知識體系，熟悉紫外-可見分光光度法的實(shí)際應(yīng)用，會用紫外-可見分光光度計測定溶液的吸光度，并對有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行定性定量分析，為學(xué)習(xí)紅外分光光度法、熒光分光光度法、核磁共振波譜法及藥物分析課中有關(guān)藥品的定性鑒別、雜質(zhì)檢查和含量測定方法奠定基礎(chǔ)。

◆知識要求1．掌握光的吸收定律概念、表達(dá)式及條件，吸光系數(shù)和吸收光譜的意義，常用定量分析方法的原理和應(yīng)用。2．熟悉紫外-可見分光光度計的基本結(jié)構(gòu)、吸光度測量條件的選擇、偏離光的吸收定律的主要因素。3．了解光譜分析法的分類、紫外-可見吸收光譜的產(chǎn)生機(jī)制、定性分析的依據(jù)和方法?！裟芰σ?.能夠用光的吸收定律解決定量計算問題

。2.能夠繪制吸收光譜曲線，找出被測組分的最大吸收波長。3.能夠繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并能應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)曲線對樣品進(jìn)行定量分析。4.會使用常見的紫外-可見分光光度計測定溶液的吸光度。

案例導(dǎo)入

在夏天參加戶外活動時，如果天氣晴朗，就應(yīng)該注意保護(hù)皮膚，否則，暴露在火辣辣太陽之下的皮膚，數(shù)小時后就會出現(xiàn)紅腫、瘙癢、發(fā)熱、刺痛癥狀，數(shù)日后出現(xiàn)蛻皮現(xiàn)象，這表明太陽光中有一種光線能傷害生物細(xì)胞?？茖W(xué)家研究證實(shí)，這種光線是紫外線。

根據(jù)可見光、紫外光與物質(zhì)分子的相互作用建立了紫外-可見分光光度法。

第一節(jié)紫外吸收光譜的基本概念根據(jù)待測物質(zhì)（原子或分子）發(fā)射或吸收的電磁輻射，以及待測物質(zhì)與電磁輻射的相互作用而建立起來的定性、定量和結(jié)構(gòu)分析方法，統(tǒng)稱為光學(xué)分析法。利用光譜進(jìn)行定性、定量和結(jié)構(gòu)分析的方法稱為光譜分析法，簡稱光譜法。

第一節(jié)紫外吸收光譜的基本概念一、物質(zhì)對光的選擇性吸收從本質(zhì)上講，光是一種電磁輻射，又稱電磁波，具有波動性和粒子性，即波粒二象性。波動性：反射、折射、干涉、偏振粒子性：吸收、發(fā)射、光電效應(yīng)電磁波譜分區(qū)表輻射區(qū)段波長范圍輻射區(qū)段波長范圍射線10-3~0.1nm射線遠(yuǎn)紫外輻射紫外輻射可見光0.1~10nm10~200nm200~400nm400~760nm近紅外輻射中紅外輻射遠(yuǎn)紅外輻射微波無線電波0.76~2.5m2.5~50m50~300m0.3mm~1m1~1000m

電磁輻射電磁輻射是一種以電磁波的形式在空間高速傳播的粒子流，具有波動性和微粒性。磁場電場傳播方向電磁輻射的波動性電磁輻射與其它波，如聲波不同，電磁波不需傳播介質(zhì)，可在真空中傳輸。

c=λv電磁輻射的微粒性電磁輻射是由一顆顆不連續(xù)的光子構(gòu)成的粒子流。當(dāng)物質(zhì)吸收或發(fā)射一定波長的電磁波時，是以吸收或發(fā)射一顆顆量子化的光子形式進(jìn)行的。一、物質(zhì)對光的選擇性吸收

單色光:

單一波長的光束復(fù)合光:

含有多種波長的光束電磁波譜:

以波長大小順序排列的電磁波譜圖互補(bǔ)光：兩種適當(dāng)顏色單色光按一定比例混合，可以得到白光，則這兩種單色光互稱補(bǔ)色光。波長10pm300pm200nm400nm800nm500mm1cm1m光譜射線X射線紫外光可見光紅外光微波無線電波方法

光譜法分光光度法光譜法核磁共振可見光

一、物質(zhì)對光的選擇性吸收

綠560～500白光紫400～450青藍(lán)480～490橙610～650青480～500紅650～750黃560～610藍(lán)450～480光的互補(bǔ)色示意圖課堂互動1.硫酸銅能夠吸收白色光中的黃色光而呈現(xiàn)-------色2.一束白光透過高錳酸鉀溶液后，何種顏色的光被吸收了？

光的三原色白光的色散二、透光率與吸光度當(dāng)一束平行的單色光照射溶液時

I0＝Ia+It

二、透光率與吸光度透射光強(qiáng)度It與入射光強(qiáng)度I0的比值稱為透光率或透光度TT=It∕I0透光率的負(fù)對數(shù)為吸光度A

三、吸收光譜曲線

概念：以波長λ為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)所描繪的曲線，稱為吸收光譜曲線，簡稱吸收光譜，或A-λ曲線。特點(diǎn)：在相同條件下，同一物質(zhì)的不同濃度的溶液，其吸收光譜曲線相似，且λmax相同。這是定性分析的基礎(chǔ)。三、吸收曲線（吸收光譜）吸收光譜能準(zhǔn)確地描述物質(zhì)對光的選擇性吸收的情況最大吸收波長定性依據(jù)：不同物質(zhì)因分子結(jié)構(gòu)不同而具有不同的特征吸收曲線定量依據(jù)：同波長下吸光度隨濃度增大而增大一般情況下選擇最大吸收波長處測定動畫

三、吸收光譜曲線

吸收光譜曲線示意圖A480520560nmmax=515吸收曲線的討論1.同一種物質(zhì)對不同波長光的吸光度不同。吸光度最大處對應(yīng)的波長稱為最大吸收波長λmax2.不同濃度的同一種物質(zhì)，其吸收曲線形狀相似λmax不變。而對于不同物質(zhì)，它們的吸收曲線形狀和λmax則不同。3.③吸收曲線可以提供物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息，并作為物質(zhì)定性分析的依據(jù)之一。4.不同濃度的同一種物質(zhì)，在某一定波長下吸光度A有差異，在λmax處吸光度A的差異最大。此特性可作為物質(zhì)定量分析的依據(jù)5.在λmax處吸光度隨濃度變化的幅度最大，所以測定最靈敏。吸收曲線是定量分析中選擇入射光波長的重要依據(jù)。第一節(jié)紫外吸收光譜的基本概念四、紫外-可見分光光度的特點(diǎn)特點(diǎn)靈敏度高準(zhǔn)確度高精密度好選擇性好易于普及應(yīng)用廣泛儀器簡單操作簡便價格低廉測定快速點(diǎn)滴積累1.光的本質(zhì)是電磁波，物質(zhì)對光的吸收具有選擇性2.吸光度是透光率倒數(shù)的對數(shù)，或是透光率的負(fù)對數(shù)3.吸收曲線是溶液在一定條件下的吸收度隨入射光波長變化而變化的曲線。他與溶液的性質(zhì)有關(guān)，因此A-λ曲線的形狀和最大吸收波長可以作為物質(zhì)定性的輔助依據(jù)。課堂活動1．紫外-可見光的波長范圍是

A．200~400nmB．400~760nmC．200~760nmD．360~800nm2．下列敘述錯誤的是

A．光的能量與其波長成反比

B．有色溶液越濃，對光的吸收也越強(qiáng)烈

C．物質(zhì)對光的吸收有選擇性

D．光的能量與其頻率成反比第一節(jié)概述課堂活動3．紫外-可見分光光度法屬于A．原子發(fā)射光譜法B．原子吸收光譜法

C．分子發(fā)射光譜法D．分子吸收光譜法4．分子吸收可見-紫外光后，可發(fā)生哪種類型的分子能級躍遷

A．轉(zhuǎn)動能級躍遷B．振動能級躍遷

C．電子能級躍遷D．以上都能發(fā)生

第一節(jié)概述第二節(jié)紫外-可見分光光度法的基本原理一、光的吸收定律

當(dāng)一束平行的單色光通過均勻、無散射的含有吸光性物質(zhì)的溶液時，在入射光的波長、強(qiáng)度及溶液的溫度等條件不變的情況下，該溶液的吸光度A與溶液的濃度c及液層厚度L的乘積成正比，即：A＝K·L

·c

。稱為光的吸收定律（朗伯-比爾定律）。光的吸收定律是定量分析的理論依據(jù)。朗伯-比爾定律不僅適用于可見光，而且也適用于紫外光和紅外光；不僅適用于均勻、無散射的溶液，而且也適用于均勻、無散射的固體和氣體。實(shí)驗(yàn)證明：溶液對光的吸光度具有加和性。如果溶液中同時存在兩種或兩種以上的吸光性物質(zhì)，則測得的該溶液的吸光度等于溶液中各吸光性物質(zhì)吸光度的總和，即：

A（a+b+c）＝Aa＋Ab＋Ac

第二節(jié)紫外-可見分光光度法的基本原理課堂活動

某化合物溶液遵守光的吸收定律，當(dāng)濃度為c時，透光率為T，試計算：當(dāng)濃度為0.5c、2c時所對應(yīng)的透光率。

第二節(jié)紫外-可見分光光度法的基本原理第二節(jié)紫外-可見分光光度法的基本原理二、吸光系數(shù)摩爾吸光系數(shù)：在入射光波長一定時，溶液濃度為1mol/L，液層厚度為1cm時所測得的吸光度稱為摩爾吸光系數(shù)，常用ε表示。光吸收系數(shù)在入射光波長一定時，溶液濃度為1g/L，液層厚度為1cm時的吸光度，稱為光吸收系數(shù)，常用表示，其量綱為L/(g·cm)。

第二節(jié)紫外-可見分光光度法的基本原理百分吸光系數(shù)：在入射光波長一定時，溶液濃度為1﹪（W/V）、層厚度為1cm時所測得的吸光度稱為百分吸光系數(shù)，常用表示。

二者的關(guān)系：

課堂活動用雙硫腙測定Cd2+溶液的吸光度A時，Cd2+（Cd的原子量為112）的濃度為140μg/L，在λ＝525nm波長處，用L＝1cm的吸收池，測得吸光度A＝0.220，試計算摩爾吸光系數(shù)和百分吸收系數(shù)。

第二節(jié)紫外-可見分光光度法的基本原理課堂互動某有色溶液的物質(zhì)的量濃度濃度為c，在一定條件下用1cm比色杯測得吸光度為A，則摩爾吸光系數(shù)應(yīng)為：

A．cAB．cMC．A/CD．C/A第二節(jié)紫外-可見分光光度法的基本原理第二節(jié)紫外-可見分光光度法的基本原理三、偏離光的吸收定律的主要因素化學(xué)因素:(1)溶液的濃度(2)物質(zhì)的化學(xué)變化(3)溶劑的影響光學(xué)因素:(1)非單色光

(2)雜散光

(3)非平行光(4)反射現(xiàn)象

(5)散射現(xiàn)象第二節(jié)紫外-可見分光光度法的基本原理偏離光的吸收定律示意圖第二節(jié)紫外-可見分光光度法的基本原理點(diǎn)滴積累1．光的吸收定律表明了吸光度與液層厚度和濃度之間的關(guān)系，它是吸收光譜法定量分析的依據(jù)。2．吸光系數(shù)的表示方法有多種，隨待測溶液濃度的不同標(biāo)度而不同。3．偏離光的吸收定律的因素主要有化學(xué)因素和光學(xué)因素。第三節(jié)紫外-可見分光光度計一、紫外-可見分光光度計的主要部件：光源—單色器—吸收池—檢測器—訊號處理與顯示器

第三節(jié)紫外-可見分光光度計

二、紫外-可見分光光度計的光學(xué)性能1．測光方式2．波長范圍3．狹縫或光譜帶寬4．雜散光5．波長準(zhǔn)確度6．吸光度范圍7．波長重復(fù)性8．測光準(zhǔn)確度9．光度重復(fù)性10．分辨率

第三節(jié)紫外-可見分光光度計三、紫外-可見分光光度計的類型1.可見分光光度計721型

第三節(jié)紫外-可見分光光度計三、紫外-可見分光光度計的類型1.可見分光光度計

722型第三節(jié)紫外-可見分光光度計三、紫外-可見分光光度計的類型2.紫外-可見分光光度計（1）單波長分光光度計單光束分光光度計雙光束分光光度計第三節(jié)紫外-可見分光光度計課堂活動

1.試述紫外-可見分光光度計的主要部件及其作用？

2.紫外-可見分光光度計有哪些類型？第三節(jié)紫外-可見分光光度計第三節(jié)紫外-可見分光光度計點(diǎn)滴積累紫外-可見分光光度計的基本結(jié)構(gòu)相同，都由光源、單色器、吸收池、檢測器、訊號處理與顯示器等主要部件構(gòu)成，但不同型號儀器的外形差別很大，質(zhì)量和價格相差懸殊，操作方法迥異，使用之前應(yīng)仔細(xì)閱讀儀器使用說明書。

第四節(jié)分析條件的選擇一、儀器測量條件的選擇

1.應(yīng)選擇最大吸收波長作為入射光。

2.應(yīng)控制吸光度讀數(shù)范圍：吸光度在0.2~0.7之間；透光率在20%~65%之間。第四節(jié)分析條件的選擇二、顯色反應(yīng)條件的選擇1.對顯色劑及顯色反應(yīng)的要求

2.控制合適的顯色反應(yīng)條件

三、參比溶液的選擇1.溶劑參比溶液2.試樣參比溶液3.試劑參比溶液4.平行操作參比溶液第四節(jié)分析條件的選擇課堂活動測定試樣時，吸光度的讀數(shù)應(yīng)控制在0.2～0.7范圍內(nèi)。若吸光度讀數(shù)不在此范圍，可采用哪些方法進(jìn)行調(diào)整?第四節(jié)分析條件的選擇點(diǎn)滴積累1．選擇吸光性物質(zhì)的最大吸收波長作為測定波長。2．使用紫外-可見分光光度計時，讀數(shù)范圍應(yīng)控制在吸光度為0.2～0.7，透光率為65%～

20%之間。3．待測物質(zhì)在紫外-可見光區(qū)無吸收時，應(yīng)加顯色劑。顯色劑不得有干擾，反應(yīng)必須完全。4．一般用溶劑作參比溶液。必要時采用試樣參比溶液、試劑參比溶液或平行操作參比溶液。

第五節(jié)定性定量方法一、定性分析方法定性的基本依據(jù)：比較光譜的一致性。未知物和標(biāo)準(zhǔn)品的吸收光譜曲線，對比二者是否一致。

比較吸收光譜的特征數(shù)據(jù)及比值的一致性。二、雜質(zhì)檢查：將藥品光譜與藥品標(biāo)準(zhǔn)光譜相對照，利用雜質(zhì)的特征吸收，可以檢測出微量雜質(zhì)及其含量。案例分析貝諾酯的定性鑒別中國藥典(2010年版)規(guī)定：貝諾酯加無水乙醇制成每1ml約含7.5μg的溶液，在240nm處有最大吸收，相應(yīng)的百分吸光系數(shù)()應(yīng)為730～760。維生素B12也有三個吸收峰，分別在278nm、361nm、550nm波長處，它們的吸光度比值應(yīng)為：A361nm/A278nm在1.70～1.88之間，A361nm/A550nm在3.15～3.45之間。

第五節(jié)定性定量方法案例分析葡萄糖注射液是臨床上常用的藥品之一。制備時需要高溫滅菌，葡萄糖會轉(zhuǎn)化為5-羥甲基糠醛而引入雜質(zhì)?！吨袊幍洹罚?010年版）規(guī)定葡萄糖注射液在284nm波長處的吸收度不得過0.32，以此控制其雜質(zhì)5-羥甲基糠醛的量。在284nm波長處，葡萄糖無吸收，而雜質(zhì)5-羥甲基糠醛在此波長處有最大吸收，可以通過控制供試品溶液在此波長處的吸收度來控制雜質(zhì)的含量。

第五節(jié)定性定量方法第五節(jié)定性定量方法三、定量分析方法定量分析的依據(jù):A＝K·c·L（光的吸收定律）（一）單組分溶液的定量方法1.

標(biāo)準(zhǔn)曲線法：是紫外-可見分光光度法中最經(jīng)典的定量方法。

第五節(jié)定性定量方法標(biāo)準(zhǔn)曲線法的方法和步驟如下:（1）配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，選擇合適的參比溶液，在相同條件下，以待測組分的最大吸收波長作為入射光，分別測定各標(biāo)準(zhǔn)溶液對應(yīng)的吸光度。（2）以濃度c為橫坐標(biāo)、吸光度A為縱坐標(biāo)描繪標(biāo)準(zhǔn)曲線。第五節(jié)定性定量方法

（3）按照相同的實(shí)驗(yàn)條件和操作程序，用待測溶液配制未知試樣溶液并測定其吸光度A樣，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上找到與之對應(yīng)的未知試樣溶液的濃度c樣。

如右圖。

第五節(jié)定性定量方法2.標(biāo)準(zhǔn)對比法:在相同的條件下，配制濃度為cs的標(biāo)準(zhǔn)溶液和濃度為cx的試樣溶液，在最大吸收波長處，分別測定二者的吸光度值為As、Ax

，依據(jù)朗伯-比爾定律得：As=csLAx=cxL

則:第五節(jié)定性定量方法3.吸光系數(shù)法:吸光系數(shù)法直接利用朗伯-比爾定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式A＝KcL進(jìn)行計算的定量分析方法。在手冊中查出待測物質(zhì)在最大吸收波長處的吸光系數(shù)或,并在相同條件下測量樣品溶液的吸光度A，則其濃度為：

或第五節(jié)定性定量方法有時也可以將待測樣品溶液的吸光度換算成樣品組分的吸光系數(shù)，計算與標(biāo)準(zhǔn)品的吸光系數(shù)的比值，求出樣品中待測組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)?；虻谖骞?jié)定性定量方法實(shí)例：維生素B12水溶液在=361nm處的百分吸光系數(shù)=207。取維生素B12樣品30.0mg，加純化水溶解，用1L的容量瓶定容。將溶液盛于1cm的吸收池，測得361nm波長處的吸光度A=0.600，試求樣品中維生素B12的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。解：第五節(jié)定性定量方法（二）二元組分溶液的定量方法

1.解聯(lián)立方程組法

當(dāng)試樣溶液中各待測組分相互干擾不太嚴(yán)重時，可根據(jù)吸光度具有加和性的特點(diǎn)，在同一試樣溶液中同時測定兩個或兩個以上的待測組分。假設(shè)要測定試樣中有兩個待測組分a和b，如果分別繪制a、b兩個純物質(zhì)的吸收光譜，則有三種情況。

第五節(jié)定性定量方法第五節(jié)定性定量方法（Ⅰ）表明，兩個待測組分在各自的最大吸收波長處，另一組分沒有吸收，可以用測定單組分溶液的方法，分別在λ1和λ2波長處測定組分a、b的吸收度,由光的吸收定律求得ca、cb。測定時兩組分互不干擾。（Ⅱ）表明，在組分a的最大吸收波長λ1處，組分b對組分a的測定無干擾，而在組分b的最大吸收波長λ2處，組分a對組分b的測定有干擾。這時，先在λ1波長處單獨(dú)測量組分a；然后在λ2波長處測量組分a、b的總吸光度，根據(jù)吸光度的加和性，從而可以求出cb。

第五節(jié)定性定量方法（Ⅲ）表明，兩個待測組分彼此相互干擾，此時，在波長λ1和λ2處分別測定試樣溶液的總吸光度及，同時測定a、b純物質(zhì)的吸光系數(shù)、和、，根據(jù)吸光度的加和性，則由聯(lián)立方程組求得ca、cb。

第五節(jié)定性定量方法2.等吸收波長消去法（雙波長分光光度法）當(dāng)試樣中兩個待測組分的相互干擾比較嚴(yán)重時，用解聯(lián)立方程組的方法進(jìn)行定量分析會產(chǎn)生較大的誤差，這時可以用等吸收波長消去法進(jìn)行測定。在試樣中含有兩個待測組分a和b時，若要測定組分b，組分a有干擾，應(yīng)設(shè)法消除組分a的吸收干擾。首先選擇待測組分b的最大吸收波長λ2作為測量波長，然后用作圖的方法選擇參比波長λ1，使組分a在這兩個波長處的吸光度相等。

第五節(jié)定性定量方法試樣溶液在λ2和λ1兩個波長處的吸光度之差，只與待測組分b（a）的濃度成正比，而與干擾組分的濃度無關(guān)。

3.差示分光光度法當(dāng)待測組分含量過高時，吸光度超出了準(zhǔn)確測量的讀數(shù)范圍，可以采用差示分光光度法。具體方法是用一個比試樣溶液濃度稍低的標(biāo)準(zhǔn)溶液作為參比溶液，將分光光度計調(diào)零（透光率100%），測得的吸光度就是被測試樣溶液試液與參比溶液的吸光度差值（相對吸光度）。根據(jù)光的吸收定律得：△A＝Ax－As＝ΕL(cx－cs)即：待測溶液與參比溶液的吸光度差值與兩溶液的濃度之差成正比。第五節(jié)定性定量方法第五節(jié)定性定量方法課堂活動1.在紫外-可見分光光度法中，影響吸光系數(shù)的因素是A．溶劑的種類和性質(zhì)B．溶液的物質(zhì)量濃度

C．物質(zhì)的本性和光的波長D．吸收池大小

E．待測物的分子結(jié)構(gòu)2.紫外-可見分光光度法常用的定量分析方法有

A．間接滴定法B．標(biāo)準(zhǔn)對比法C．標(biāo)準(zhǔn)曲線法

D．直接電位法E．吸光系數(shù)法第五節(jié)定性定量方法課堂互動3．在符合朗伯-比爾定律的條件下，有色物質(zhì)的濃度、最大吸收波長、吸光度三者的關(guān)系是A．增加、增加、增加B．增加、減小、不變

C．減小、增加、減小D．減小、不變、減小4．維生素D2的摩爾吸收系數(shù)264nm=18200。用2.0cm吸收池測定，如果要控制吸光度A在0.699～0.187范圍內(nèi)，應(yīng)使維生素D2溶液的濃度在什么范圍內(nèi)？第五節(jié)定性定量方法點(diǎn)滴積累（1）紫外-可見分光光度法的各種定量方法的優(yōu)缺點(diǎn)：1．標(biāo)準(zhǔn)曲線法的優(yōu)點(diǎn)：測定大批量樣品時，操作簡單、準(zhǔn)確、快速。缺點(diǎn)：不同人處理相同的測量數(shù)據(jù)，得到的結(jié)果不易完全相同。2．標(biāo)準(zhǔn)對比法的優(yōu)點(diǎn)：測量數(shù)據(jù)相同，任何人都能得到完全一致的結(jié)果。缺點(diǎn)：隨機(jī)誤差較大。3．吸光系數(shù)法的優(yōu)點(diǎn)：與標(biāo)準(zhǔn)對比法的優(yōu)點(diǎn)相同。缺點(diǎn)：測定條件不易與文獻(xiàn)完全一致，從而引入誤差。

第五節(jié)定性定量方法點(diǎn)滴積累（2）紫外-可見分光光度法的各種定量方法的優(yōu)缺點(diǎn)：4．解聯(lián)立方程組法的優(yōu)點(diǎn)：可以不經(jīng)分離直接測定二元組分溶液。缺點(diǎn)：在兩個測定波長處，要求兩個組分的吸光系數(shù)有較大的差別。5．等吸收波長消去法的優(yōu)點(diǎn)：可以不經(jīng)分離直接測定二元組分溶液，還適于測定混濁液的測定。缺點(diǎn)：要求干擾組分的吸收光譜中有一個峰或谷。6．差示分光光度法的優(yōu)點(diǎn)：可以直接測定高濃度溶液。缺點(diǎn)：需要用高精密度的儀器。

第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介一、有機(jī)化合物的紫外-可見吸收光譜有機(jī)化合物的紫外-可見吸收光譜主要是由分子中價電子的能級躍遷而產(chǎn)生的。電子的能級躍遷有4個基本類型。第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介二、根據(jù)紫外-可見吸收光譜推斷官能團(tuán)

三、根據(jù)紫外-可見吸收光譜推斷異構(gòu)體（一）判別順反異構(gòu)體（二）測定某些化合物的互變異構(gòu)現(xiàn)象第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介點(diǎn)滴積累1．紫外-可見吸收光譜是化合物的價電子能級躍遷形成的。2．根據(jù)紫外-可見吸收光譜的光譜特征，可以推斷待測化合物的官能團(tuán)、順反異構(gòu)和互變異構(gòu)。

第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介一、選擇題（一）單項選擇題1．紫外-可見光的波長范圍是：A.200~400nmB．400~760nmC．200~760nmD．360~800nm2．下列敘述錯誤的是：A．光的能量與其波長成反比B．有色溶液越濃，對光的吸收也越強(qiáng)烈C．物質(zhì)對光的吸收有選擇性D．光的能量與其頻率成反比

【目標(biāo)檢測】第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介3．紫外-可見分光光度法屬于：A．原子發(fā)射光譜B．原子吸收光譜C．分子發(fā)射光譜D．分子吸收光譜4．分子吸收紫外-可見光后，可發(fā)生哪種類型的分子能級躍遷：A．轉(zhuǎn)動能級躍遷B．振動能級躍遷C．電子能級躍遷D．以上都能發(fā)生第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介5．某有色溶液的摩爾濃度為c，在一定條件下用1cm比色杯測得吸光度為A，則摩爾吸光系數(shù)為：A．cAB．cMC．D．6．某吸光物質(zhì)的摩爾質(zhì)量為M，其摩爾吸收系數(shù)與比吸收系數(shù)的換算關(guān)系是

A．＝·MB．＝/M

C．＝·M/10D．＝/M×10第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介7．關(guān)于光的性質(zhì)，描述正確的是：A．光具有波粒二象性B．光具有發(fā)散性C．光具有顏色D．本質(zhì)是單色光8．某吸光物質(zhì)的吸光系數(shù)很大，則表明：A．該物質(zhì)溶液的濃度很大B．測定該物質(zhì)的靈敏度高C．入射光的波長很大D．該物質(zhì)的分子量很大第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介9．相同條件下，測定甲、乙兩份同一有色物質(zhì)溶液的吸光度。若甲溶液1cm吸收池，乙溶液2cm吸收池進(jìn)行測定，結(jié)果吸光度相同，甲、乙兩溶液濃度的關(guān)系：A．c甲＝c乙B．c乙＝4c甲C．c甲＝2c乙D．c乙＝2c甲10．在符合光的吸收定律條件下，有色物質(zhì)的濃度、最大吸收波長、吸光度三者的關(guān)系是：A．增加、增加、增加B．增加、減小、不變C．減小、增加、減小D．減小、不變、減小

第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介11．吸收曲線是在一定條件下以入射光波長為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)所描繪的曲線，又稱為：A．工作曲線B．A-λ曲線C．A-c曲線D．滴定曲線12．標(biāo)準(zhǔn)曲線是在一定條件下以吸光度為橫坐標(biāo)、濃度為縱坐標(biāo)所描繪的曲線，也可稱為：A．A-λ曲線B．A-c曲線C．滴定曲線D．E-V曲線

第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介13．紫外-可見分光光度計的基本結(jié)構(gòu)可分為：A．二個部分B．三個部分C．四個部分D．五個部分14．722型分光光度計的比色皿的材料為：A．石英B．鹵族元素C．硬質(zhì)塑料D．光學(xué)玻璃

第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介15．紫外-可見分光光度法定量分析的理論依據(jù)是：A．吸收曲線B．吸光系數(shù)C．光的吸收定律D．能斯特方程16．下列說法正確的是：A．吸收曲線與物質(zhì)的性質(zhì)無關(guān)B．吸收曲線的基本形狀與溶液濃度無關(guān)C．濃度越大，吸光系數(shù)越大D．吸收曲線是一條通過原點(diǎn)的直線第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介17．測定大批量試樣時，適宜的定量方法是：A．標(biāo)準(zhǔn)曲線法B．標(biāo)準(zhǔn)對比法C．解聯(lián)立方程組法D．差視分光光度法18.紫外-可見分光光度法是基于被測物質(zhì)對：A．光的發(fā)射B．光的散射C．光的衍射D．光的吸收

第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介19．下面有關(guān)顯色劑的正確敘述是：A．本身必須是無色試劑并且不與待測物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)B．本身必須是有顏色的物質(zhì)并且能吸收測定波長的輻射C．能夠與待測物質(zhì)發(fā)生氧化還原反應(yīng)并生成鹽D．在一定條件下能與待測物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)并生成穩(wěn)定的吸收性物質(zhì)20．某種溶液的吸光度：A．與比色杯厚度成正比B．與溶液的濃度成反比C．與溶液體積成正比D．與入射光的波長成正比

第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介21．雙光束分光光度計與單光束分光光度計的主要區(qū)別是：A．能將一束光分為兩束光B．使用兩個單色器C．用兩個光源獲得兩束光D．使用兩個檢測器22．下列說法錯誤的是：A．標(biāo)準(zhǔn)曲線與物質(zhì)的性質(zhì)無關(guān)B．吸收曲線的基本形狀與溶液濃度無關(guān)C．濃度越大，吸光系數(shù)越大D．從吸收曲線上可以找到最大吸收波長第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介（二）多項選擇題1．在可見光區(qū)測定吸光度時，吸收池的材質(zhì)可用：A．彩色玻璃B．光學(xué)玻璃C．石英

D．溴化鉀E．以上均可2．在紫外-可見分光光度法中，影響吸光系數(shù)的因素是：A．溶劑的種類和性質(zhì)B．溶液的物質(zhì)的量濃度C．物質(zhì)的本性和光的波長D．吸收池大小E．待測物的分子結(jié)構(gòu)

第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介3．影響摩爾吸光系數(shù)的因素是：A．溫度B．溶劑的種類C．物質(zhì)的結(jié)構(gòu)D．入射光的波長E．溶液的濃度4．光的吸收定律通常適用于：A．散射光B．單色光C．平行光D．折射光E．稀溶液第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介5．紫外-可見分光光度法常用的定量分析方法有：A．間接滴定法B．標(biāo)準(zhǔn)對比法C．標(biāo)準(zhǔn)曲線法D．直接電位法E．吸光系數(shù)法6．紫外-可見分光光度計的主要部件是：A．光源B．單色器C．吸收池D．檢測器E．顯示器第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介7．分光光度計常用的色散元件是：A．鎢絲燈B．棱鏡C．飽和甘汞電極D．光柵E．光電管8．紫外-可見分光光度法可用于某些藥物的：A．定性鑒別B．純度檢查C．毒理實(shí)驗(yàn)

D．含量測定E．藥理檢查第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介二、填空題1．可見光的波長范圍為

，近紫外分光的波長范圍為

。2．光的吸收定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式（A=KcL）中，K稱為吸光系數(shù)，常用三種方法來描述，分別是

、

、

，物質(zhì)的吸光系數(shù)愈大，表示該吸光物質(zhì)的吸光性愈

。3．吸收光譜是以

為橫坐標(biāo)，以

為縱坐標(biāo)而繪制的曲線。吸收峰最高處所對應(yīng)的波長為

，用

表示。4．紫外—可見分光光度法進(jìn)行定量分析時，常選用

作入射光，此時測定的

最高。

第六節(jié)紫外-可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)分析中的應(yīng)用簡介5．在紫外光區(qū)測定吸光度時，應(yīng)使用紫外-可見分光光度計的

燈作光源，所用吸收池的材質(zhì)是——。6．測定吸光度時，當(dāng)空白溶液置入光路時，應(yīng)使T＝

，此時A＝

。7．為提高測定的準(zhǔn)確度，溶液的吸光度讀數(shù)范圍應(yīng)調(diào)節(jié)在0.2～0.7為宜，可通過調(diào)節(jié)溶液的

和

來實(shí)現(xiàn)。8．紫外-可見分光光度法對單組分溶液進(jìn)行定量分析的常用方法有

，