植物化學(xué)保護試驗指導(dǎo)

試驗指導(dǎo)

農(nóng) 藥學(xué)植物化學(xué)保護編者 編者駱焱平楊葉華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護學(xué)院2022年十一月前言本試驗指導(dǎo)是在九七年編寫的《植物化學(xué)保護試驗指導(dǎo)》的根底上，依據(jù)華南熱帶OO二年制定的專業(yè)課程教學(xué)打算和試驗課程教學(xué)大綱的要求進展修訂的。該書在原試驗指導(dǎo)的根底上，經(jīng)過增加試驗工程、補充并修改局部內(nèi)容后完成。全書共分為三大局部：第一局部介紹農(nóng)藥方面的基本學(xué)問，要求學(xué)生把握常見農(nóng)藥的配制方法和鑒別方法；其次局部介紹農(nóng)藥的室內(nèi)生物〔或稱靶標生物，如昆蟲、螨類、病菌、線蟲、雜草、鼠類等對農(nóng)藥的反響來測定農(nóng)藥的毒力和藥效的基根底，是植物保護專業(yè)的必修課程，也是一穩(wěn)固和充實理論教學(xué)，加深學(xué)生對理論學(xué)問的理解，增加學(xué)生對病蟲方面的實踐操作能力，以便在生產(chǎn)和科研上合理利用不同的測定方法，開發(fā)農(nóng)藥，劑型，的施藥方法。本試驗指導(dǎo)的任務(wù)是：1、 教學(xué)的方法加深學(xué)生對理論課的理解，把握試驗中的一般技術(shù)。2、 留意與有關(guān)學(xué)科的協(xié)作如昆蟲學(xué)病物學(xué)、化學(xué)、統(tǒng)計學(xué)等學(xué)科的連接。3、 突出學(xué)生的創(chuàng)力量。加上編者水平有限，難免會消滅一些缺點和錯誤，期望大家批判指正，并提出貴重的意見和建議，以便逐步完善。目 錄實 驗 知………………1第一部分 農(nóng)藥的基本學(xué)問……………………實驗一 波爾多液的配制…………2實驗二 石硫合劑的配制…………3第二部分 農(nóng)藥室內(nèi)生物測定技術(shù)……………………實驗三 孢子萌發(fā)試驗法…………4實 驗 四 抑 制 菌 法………………6實驗五 生長速率測定法…………8試驗六抑制菌絲產(chǎn)生孢子囊及釋放游動孢子試驗… 10試驗七殺菌劑保護作用和治療作用的測定〔離體葉片法〕… 10試驗八殺菌劑防治橡膠炭疽病的田間藥效試驗… 13實驗九 定………………16實驗十 殺蟲劑熏蒸作用的測定…………………17定… 18實驗十二 定………………21試驗十三有機磷殺蟲劑對膽堿酯酶活性的抑制… 22定… 25試驗十五殺蟲劑對植物的藥害試驗〔植株施藥法〕… 26實驗十六 殺蟲劑的田間藥效試驗—……………28法……………28第三部分農(nóng)藥田間藥效試驗…………參 考 獻………………附錄………………試驗須知本試驗課程是以化學(xué)、植物病理學(xué)、昆蟲學(xué)、雜草學(xué)、生物統(tǒng)計學(xué)等學(xué)科為根底，以昆蟲、病菌、雜草、農(nóng)藥等為爭論對象，是一門試驗性很強的課程。本書主要以《農(nóng)物保護專業(yè)的必修課程。學(xué)生在試驗中必需努力培育自己的獨立工作力量，把握根本操作技術(shù)，通過試驗加深對理論的理解，并運用所學(xué)到的根本理論和根本技能為我國農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化效勞。凡參與試驗的學(xué)生必需嚴格遵守以下規(guī)則：1、 試驗的學(xué)生必需嚴格遵《學(xué)生試驗手冊。2、 學(xué)生必需預(yù)習試驗指導(dǎo)書及相關(guān)專業(yè)教材，了解每次試驗的原理、試驗方法和具體操作步驟。3、 時應(yīng)當獨立思考，認真操作，不許大聲喧嘩。4、 要疼惜儀器，節(jié)約藥品、試劑等。5、 儀器設(shè)備必需登記并依據(jù)情節(jié)輕重酌情賠償。6、 準放置食物、吃東西或吸煙。7、 試驗中要留意安全農(nóng)藥對高等動物均有毒性，很多試劑也有—定的毒性。且未經(jīng)允許不準任意攜出試驗室外，用過的廢物一定的缸內(nèi)，不準任憑亂丟。試驗中，如覺察藥物中毒現(xiàn)象席報告教師以便急救。8、 按時完成試驗報告試驗完成后按教師要求48或72小時來檢查結(jié)果，按時交試驗報告，試驗成績以5分制計。試驗四常見農(nóng)藥質(zhì)量的簡易鑒別[試驗?zāi)康腯：把握常見農(nóng)藥質(zhì)量的簡易鑒別方法。[試驗器材]：量筒、燒杯、移液管、滴管、藥勺。[試驗藥品]：敵敵畏EC、樂果EC、馬拉硫磷EC、功夫EC、ECECWPWP、硫磺粉、特克多懸浮劑等[鑒別方法]：一、粉劑的鑒別1、 外觀 粉劑的外觀應(yīng)為疏松的細粉無團塊但凡流淌性差，結(jié)成快狀物，或手捏成團，不易散開，說明這些粉劑大多是存放時間過長或存放不當，造成減效或者失效。2、吸濕性取藥粉前，先查看粉劑包裝袋外面有沒有潮濕的狀況，假設(shè)有，是吸濕性大的表現(xiàn)。然后從袋里取出一點藥粉倒在一張白紙上，拿起白紙，用拇指和食指在紙外面捏一下，假設(shè)粘成一片，說明這種藥粉已吸潮；假設(shè)照舊是松散的細粉，說明是好的噴粉藥劑。3、懸浮法取1g100ml10min后，靜置片刻，然后漸漸倒去上層90%左右的溶液，將剩下的溶液用重量的濾紙過濾，再將紙和沉淀物曬干或烘干，稱其重量，求出懸浮率。懸浮率〔%〕=〔樣品重-沉淀物重〕/樣品重*10030%以上為良好，證明可以使用。二、可濕性粉劑的鑒別1、 外觀可濕性粉劑應(yīng)為很細的疏松粉末，無團塊。2、 潮濕法 稱取被檢驗的農(nóng)藥樣品 1g，輕輕撒在200ml1min內(nèi)農(nóng)藥能夠全局部散進入水中，即為有效農(nóng)藥。假設(shè)長時間不能潤濕而漂移在水面上，則證明農(nóng)藥已經(jīng)失效。3、懸浮法取清水11g被檢驗的農(nóng)藥樣品，充分搖勻，靜置20-30min，觀看藥品懸浮狀況。未變質(zhì)農(nóng)藥，粉粒極細，沉淀慢而少，整個藥液濁而不清；假設(shè)杯中少局部水清亮，大局部渾濁，則還可使用；假設(shè)樣品沉淀快，而杯中大局部藥液呈現(xiàn)半透亮狀，則不能使用。4、沉淀法取5g糊狀，再加水攪拌，未變質(zhì)的農(nóng)藥粉粒細，懸浮性好，沉淀慢而少，已變質(zhì)農(nóng)藥懸浮性不好，沉淀快而多。三、乳油的鑒別1、振蕩法首先看清瓶子內(nèi)有無分層現(xiàn)象，如有分層現(xiàn)象，說明乳化性能已經(jīng)降低，可用力振蕩均勻，靜置一小時，假設(shè)仍舊分層，說明農(nóng)藥已經(jīng)變質(zhì)。2、兌水法取清水200ml1ml待檢驗的乳油農(nóng)藥，乳化性能好的呈放射狀向四周集中，靜置后，水面無浮油，水底無沉淀，呈乳白色液體，且均勻全都，則為正常乳油。假設(shè)外表有乳油或瓶底有沉淀，則說明藥劑已變質(zhì)。3、 加熱法先把有沉淀的乳劑農(nóng)藥連瓶放在50-55℃1h后，沉淀能漸漸溶解，溶液均勻全都，藥效一般不減，說明農(nóng)藥可以使用；假設(shè)農(nóng)藥的沉淀物不溶解，則說明農(nóng)藥已經(jīng)變質(zhì)失效。四、懸浮劑的鑒別均勻。假設(shè)因長時間存放消滅分層，經(jīng)手搖動可恢復(fù)均勻狀態(tài)的，仍可視為合格產(chǎn)品。假設(shè)不能重變成均勻的懸浮液，底部沉淀物搖不起來，懸浮性能就不好。上述各種方法可簡便地鑒別各農(nóng)藥劑型是否變質(zhì)失效，如要進一步了解各農(nóng)藥制劑的真實含量〔有效成份〕則需將樣品送到農(nóng)藥特地爭論機構(gòu)或農(nóng)藥檢測機構(gòu)進展分析鑒定。此外，用上述簡易法鑒別農(nóng)藥的時候，千萬留意農(nóng)藥的毒性，不要把農(nóng)藥弄到手上，假設(shè)弄到手上或皮膚上，要立即用水沖洗，對于粉劑農(nóng)藥，先用水沖洗后，再用肥皂洗凈，對于乳油農(nóng)藥要特別留神，趕快用清水沖洗，再用堿水洗，最終用肥皂洗凈。假設(shè)遇到農(nóng)藥，不久后感覺惡心，要準時去醫(yī)院請醫(yī)生檢查。盛過農(nóng)藥的器具要妥當處理，不要再做其他用途。五、試驗作業(yè)按要求完成教師布置的農(nóng)藥鑒別任務(wù)，記錄試驗過程中所觀看的現(xiàn)象。推斷哪些劑型是合格的。試驗六殺蟲劑觸殺作用〔contactaction〕毒力測定根本原理是將肯定濃度〔或劑量〕的殺蟲劑施于蟲體的全部或局部〔適宜部位觸殺作用。依據(jù)試蟲及藥劑劑特點，已被公認而一般應(yīng)用〔1〕〔2〕〔3〕浸漬〔〕藥膜法等。法有目標昆蟲的或墊有濕濾紙液體噴布器底部或噴粉罩底液或粉劑均勻地直接噴撒到目標昆蟲體上，待藥液稍干或蟲體粘粉較穩(wěn)定后，將噴過藥的目標昆蟲移入干凈的容器內(nèi)或培育皿內(nèi)，用通氣蓋蓋好，置于適合于目標昆蟲生育的溫濕度及通氣良好的環(huán)境中恢復(fù)，1-2h后，放入無藥的穎飼料，在規(guī)定時間內(nèi)〔12、24、48h，觀看目標昆蟲Potter噴霧器，真空噴粉器等。二、點滴法：[根本原理部位，來測定殺蟲劑穿透表皮而引起昆蟲中毒致死的觸殺毒力。每個試蟲的某一部位都承受一樣容積的藥液，因而同一處理的每個試蟲實際承受的劑量一樣。此法是殺蟲劑觸殺毒力測定中最準確的方法。也是目前普遍承受的一種測試技術(shù)。[試蟲范圍]昆蟲的觸殺毒力測定，如蚜蟲、葉蜂、二化螟、玉米螟、菜青蟲、粘蟲等。[試驗材料]：微量注射1支、培育皿15cm6個、剪刀1棉花、蠟筆等、無水乙醚[供試藥劑]；95%敵百蟲結(jié)晶[使用濃度]：10；2.5；0.62；0.15；0.039ugl液[供試方法]：荔枝蝽蟓成蟲，24[試驗方法]：用無水乙醇將試蟲麻醉4min，使試蟲處于麻醉狀態(tài)，每頭蟲稱重，并放在培育皿中編號〔培育皿用厚45〔4/濃度，自然枯燥后，經(jīng)1小時10mi每頭的死活狀況〔用真實死亡表示〕或正常飼養(yǎng)24小時后觀看實際死亡狀況。結(jié)果的計算：先按ug/g〔5合并計算〕然后區(qū)分：生存組生存局部致毒反響間組死亡組中間組活蟲劑量A=中間組活蟲總數(shù) B=

中間組死活蟲劑量中間組活中總數(shù)LD5=A+〕/〔mg/g體重或ug/g體重三、浸漬法〔immersionmethord〕浸漬法是一種測定殺蟲藥劑觸殺毒力的室內(nèi)測試技術(shù)。因方法簡潔快速，不需要特別儀器設(shè)備，常用于有效化合物的篩選試驗，被聯(lián)合國食農(nóng)組織〔FAO〕推舉為蚜蟲抗藥性的標準測定方法。根本原理：用浸沾方法直接將供試殺蟲劑施于昆蟲體表，測定藥液穿透表皮引起昆蟲中毒致死的觸殺毒力。測試方法：①將試蟲〔如粘蟲、家蠶〕直接浸入藥液中，或?qū)⒃囅x放在鋼紗籠中，再浸漬；②將試蟲〔如蚜蟲〕放〔2.5cm3cm〕然后浸入藥液中；③蚜蟲、紅蜘蛛以及介殼蟲等，可以連同植物寄主一起浸入藥液。紅蜘蛛有吐絲成球現(xiàn)象，藥液不易均勻沾濕體表影響結(jié)果?？上葘в屑t蜘蛛的葉片置于豆苗〔3－5cm高然后進展浸液。浸液肯定時間后取出晾干，或用吸水紙吸去多余藥液，再移入干凈器皿中〔大型昆蟲，如粘蟲、家蠶等需放入穎飼料境中，隔肯定時間〔12h，24h、48h〕觀看記載死亡狀況，計算死亡率〔或校正死亡率〕求得致死中濃度。幼蟲，對殺蟲劑較敏感，常用此法進展大量化合物初篩，或用來進行殺蟲劑殘留量的生物分析。四、藥膜法：根本原理：將肯定量的殺蟲藥劑，承受浸沾、點滴、噴灑等方法施于物體外表上，形成一個均勻的藥膜，然后放入肯定量的供試目標昆蟲，讓其爬行接觸肯定時間后，再移至正常的環(huán)境條件下，在規(guī)定時間內(nèi)觀看試蟲的中毒死亡反響，計算擊倒率或死亡率。亦可讓試蟲和藥膜長時間接觸而觀看試蟲的擊倒時間、直到全部試蟲被擊倒，求出擊倒率，比較毒力。還可將形成的藥膜，放置不同時間，經(jīng)受光照、雨淋等處理，然后再讓試蟲接觸，這樣可測得殘效結(jié)果。制做藥膜的方法有蠟?zāi)し?，濾紙藥膜法及玻璃藥膜法。、蠟紙藥膜法：試驗材料：藥劑：6％六六六粉，用滑石粉稀釋成所需濃度。試蟲：赤擬谷盜或粘蟲幼蟲9cm15φcm30方法：將6％六六六粉劑用滑石粉稀釋成3%，1.5%，0.7%，0.38%六六六粉，各稱取100mg邊使藥粉在中間移動數(shù)次，均勻分布在蠟紙上，然后將多余藥粉倒回原處，再輕輕地彈動反面2～3下，