水迷宮實驗報告doc

--讓每個人公平地提升自我10水迷宮試驗報告篇一：Morris水迷宮Morris水迷宮Morris水迷宮是一種能夠?qū)崟r和離線分析Morris水迷Morris水迷宮以攝像機和電腦作為硬件根底，試驗過程中不需要對試驗動物作特別標(biāo)記。目標(biāo)識別方法可以選擇灰度閾值方法或者背景差值方法。morris件或者Excel文件，便利利用Excel，SPSS等工具軟件作進(jìn)一步分析。本系統(tǒng)除了可以適用于Morris可以用于分析大小鼠抑郁無望試驗以及負(fù)重游泳疲乏試驗。Morris環(huán)境光照條件沒有太高的要求設(shè)備和方法。水迷宮使用的水迷宮池為直徑90cm-180cm，高50cm溫控恒溫水池，水池外表承受靜電噴塑方法處理，目標(biāo)站臺凹凸及大小均可調(diào)整。攝像機垂直放置于水迷宮池中心上方大約2米處，調(diào)整鏡頭焦距使得其視角可以掩蓋整個試驗區(qū)域。系統(tǒng)僅在該區(qū)域內(nèi)采樣，硬件系統(tǒng)由電腦和連接到黑白CCD攝像機的視頻采集卡組成，視頻信號由視頻采集卡轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號后輸入到計算機?？梢栽O(shè)置試驗時間長短以及動物找到平臺后自動完畢試驗?？梢栽O(shè)置試驗開頭后延時等待時間以便利對試驗過程的掌握?？梢栽O(shè)置識別區(qū)域面積大小范圍從而排解水池反光可能產(chǎn)生的誤識別。試驗完畢后，可以計算埋伏期、穿越平臺次數(shù)、總游泳距離、各象限游泳時間、距離及其所占百分比等水迷宮試驗數(shù)據(jù)。Morris埋伏期/游泳總距離/平均速度/穿越平臺的次數(shù)/距離/百分比/平均速度平臺位置角度/入水點位置角度游泳軌跡圖輸出/軌跡圖編輯圓形區(qū)域分析：四象限中四個虛擬平臺四周位置的游泳軌跡分析，分析參數(shù)包括時間/距離/百分比/密度環(huán)形區(qū)域分析：與平臺相切或相鄰的環(huán)帶區(qū)域內(nèi)的軌跡分析，分析參數(shù)包括時間/路程/百分比/密度其他特點：可設(shè)置彼此獨立的試驗數(shù)據(jù)存檔文件夾，便于試驗資料治理異地分析試驗結(jié)果，可以將局部試驗記錄數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)移到其他電腦上做數(shù)據(jù)分析和輸出可同步保存原始的試驗影像資料，便于回放比對試驗數(shù)據(jù)或者重分析試驗結(jié)果可以直接輸出單次試驗的試驗報告，無須另外編輯處理，便利學(xué)生試驗試驗數(shù)據(jù)可以直接生成Excel文件，便于進(jìn)一步統(tǒng)計處理，可識別分析白鼠或者黑〔灰〕鼠，動物無需做特別標(biāo)記可選功能模塊包括游泳靜止?fàn)顟B(tài)分析〔強迫游泳試驗分析〕模塊。Morris水迷宮動物在其中不得不爭論水池中隱蔽的平臺的位置，該系統(tǒng)已經(jīng)成為爭論小型嚙齒類動物學(xué)習(xí)或記憶行為的經(jīng)典系統(tǒng)。水迷宮系統(tǒng)包括帶水池的平臺，低照度靈敏CCDDVDPC，遙控裝置和連接線?！緺幷摗克詫m試驗前一天應(yīng)當(dāng)怎么做水迷宮正式試驗開頭前一天，是否需要讓大鼠在水中試游一下，具體應(yīng)1min，在這個過程中需要引導(dǎo)大鼠上平臺么，是在什么時候引導(dǎo)呢？各人體會這一個過程對后面的試驗影響很大，期望有閱歷的前輩指點一下，感謝protocol游泳一次，讓其生疏環(huán)境，1在試驗時間完畢時還未找到時賜予引導(dǎo)。依我做的試驗體會，這一過程對后面的影響并不大，老鼠是種格外聰明的動物，只要訓(xùn)練時嚴(yán)格依據(jù)程序進(jìn)展，大局部都會很快的找到平臺的。具體的訓(xùn)練期程序很多文獻(xiàn)及儀器說明書都有，等你做了試驗就會有自己的體會了，祝試驗成功。感謝你的講解，但是我做的時候遇到了一些問題，一28±10s二是訓(xùn)練后埋伏期并沒有隨訓(xùn)練次數(shù)增加而縮短，而是根本〔我做了3天，每天的比照組埋伏期平均值〕不知道是不是和我在預(yù)適應(yīng)的時候讓他們游泳的時間不一樣有關(guān)。請問在試驗中還需要留意些什么問題以保證少受外界因素的影響？我們在做的時候，并不做預(yù)適應(yīng)的，在第一次訓(xùn)練時，5拿棍子引導(dǎo)它一下，以后的學(xué)習(xí)及記憶的過程中均如此。我66動物的個體差異一般都比較大啊，不過正常比照組要好一些的。在試驗過程中盡量保持條件全都，另外，肯定要平行。由于時間很長，盡量保持各組的時間全都。對，還有人的站位，盡量離水迷宮遠(yuǎn)一些，防止大鼠將你當(dāng)作參照物，造成視覺混淆。請教一下，看來大家都是作關(guān)于記憶方面的，不知道大家所用的分子生物學(xué)指標(biāo)都是什么了？除了檢測神經(jīng)遞質(zhì)還有別的嗎？都是檢測哪些具體的又是怎么做的了，大家爭論下。感謝了。恰好有一份水迷宮的文獻(xiàn)，講的格外好。共享給大家related forms of learning memory.pdf.part1.rar(100.0k)文件較大，分卷壓縮了related forms of learning memory.pdf.part2.rar(96.72k)wrote:請教一下，看來大家都是作關(guān)于記憶方面的，不知道大家所用的分子生物學(xué)指標(biāo)都是什么了？除了檢測神經(jīng)遞質(zhì)還有別的嗎？都是檢測哪些具體的又是怎么做的了，大家討論下。感謝了。檢測海馬及邊緣系統(tǒng)的膽堿能神經(jīng)元喪失狀況老年斑和神經(jīng)元纖維纏結(jié)bmuerwrote:感謝你的講解，但是我做的時候遇到了一些問題，一是動物之間的個體差異很大，標(biāo)準(zhǔn)差或許在28±10s左右，二是訓(xùn)練后埋伏期并沒有隨訓(xùn)練次數(shù)增加而縮短，而是根本沒〔我做了3天，每天的比照組埋伏期平均值根本〕不知道是不是和我在預(yù)適應(yīng)的時候讓他們游泳的時間不一樣有關(guān)。請問在試驗中還需要留意些什么問題以保證少受外界因素的影響？經(jīng)過學(xué)習(xí)幾次之后，大局部鼠都能正確找到平臺，而且埋伏期隨著次數(shù)的增加而縮短，很明顯的。3protocol中的一般試驗程序所被承受的7天程序，3天是少了，附件有水迷宮的中文程序，里面有具體的程序包括試驗天數(shù)，可能對你有所幫助。篇二：小鼠迷宮試驗一、Morris水迷宮試驗(一)試驗概述MorrisMorris2080(1981)代初設(shè)計并應(yīng)用于腦學(xué)習(xí)記憶機制爭論的一種試驗AD(二)試驗原理雖然老鼠是天生的游泳健將，但是它們卻厭惡處于水中的狀態(tài)，同時游泳對于老鼠來說是格外消耗體力的活動，他們會本能的查找水中的休息場所。查找休息場所的行為涉及到一個簡單的記憶過程，包括收集與空間定位有關(guān)的視覺信息，再對這些信息進(jìn)展處理、整理、記憶、加固、然后再取出，目的是能成功的航行并且找到隱蔽在水中的站臺，最終從水中逃脫。(三)試驗方法分獲得性訓(xùn)練、探查和對位訓(xùn)練3個過程。1．獲得性訓(xùn)練〔Acquisitionphase〕理論上將水池分4將動物〔大鼠或小鼠〕頭朝池壁放入水中，放入位置隨機取東、西、南、北四個起始位置之一。記錄動物找到水下平臺的時間〔s60s10s．將動物移開、擦干。必要時將動物〔尤其是大鼠〕放在150W的白熾燈下烤5min，放回籠內(nèi)。每只動物每天訓(xùn)415~20min5d。探查訓(xùn)練(probetrial1)最終一次獲得性訓(xùn)練完畢后的其次天，將平臺撤除，開頭60s的探查訓(xùn)練。將動物由原先平臺象限的對側(cè)放入水中。記錄動物在目標(biāo)象限〔原先放置平臺的象限〕所花的時間和進(jìn)入該象限的次數(shù)，以此作為空間記憶的檢測指標(biāo)。對位訓(xùn)練〔reveralphase〕測定動物的工作記憶workingmemory。探查訓(xùn)練完畢后的其次天，開頭維持天的對位訓(xùn)練。將平臺放在原先平臺所在象限的對側(cè)象限，方法與獲得性訓(xùn)練一樣。每天訓(xùn)練4次。每次記錄找到平臺的時間和游泳距離以及游泳速度。對位探查訓(xùn)練〔probetrial2〕最終一次對位訓(xùn)練的其次天進(jìn)展。方法與上述探查訓(xùn)練類似。記錄動物60s內(nèi)動物在目標(biāo)象限〔平臺其次次所在區(qū)〕所花時間和進(jìn)入該區(qū)的次數(shù)。(一)試驗概述高架十字迷宮是利用動物對異環(huán)境的探究特性和對高懸放開臂的恐驚形成沖突沖突行為來考察動物的焦慮狀態(tài)。高架十字迷宮具有一對開臂和一對閉臂，嚙齒類動物由于嗜暗性會傾向于在閉臂中活動，但出于古怪心和探究性又會在開臂中活動，在面對穎刺激時，動物同時產(chǎn)生探究的沖動與恐驚，這就造成了探究與回避的沖突行為，從而產(chǎn)生焦慮心理。而抗焦慮藥物能明顯增加進(jìn)入開臂的次數(shù)與時間，十字迷宮距離地面較高，相當(dāng)于人站在峭壁上，使試驗對象產(chǎn)生恐驚和擔(dān)憂心理。高架十字迷宮被廣泛應(yīng)用于藥開發(fā)/篩選/評價、藥理學(xué)、毒理學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、動物心理學(xué)及行為生物學(xué)等多個學(xué)科的科學(xué)-爭論和計算機關(guān)心教學(xué)等領(lǐng)域，是醫(yī)學(xué)院校與科研機構(gòu)開展行為學(xué)爭論尤其是焦慮抑郁爭論的經(jīng)典試驗。(二)試驗方法試驗開頭時將小鼠從中心格面對閉合臂放入迷宮，記錄5閉合臂停留時間。計算開放臂停留時間比例，開放臂進(jìn)入次數(shù)比例，高架十字迷宮中總進(jìn)入次數(shù)。試驗完成后將小鼠取Xeye物行為學(xué)軟件進(jìn)展數(shù)據(jù)分析。進(jìn)入開放臂次數(shù)及停留時間與大鼠的焦慮心情成負(fù)相關(guān)，進(jìn)入開放臂次數(shù)越少，停留時間越短，說明老鼠的焦慮心情越嚴(yán)峻。三、Y迷宮試驗Y記憶的測試。Y有食物供給裝置，依據(jù)分析動物取食的策略即進(jìn)入各臂的次數(shù)、時間、正確次數(shù)、錯誤次數(shù)、路線等參數(shù)可以反映出實驗動物的空間記憶力量。相對而言，Y對八臂迷宮來說更加簡潔，有肯定的有用性，現(xiàn)常用于學(xué)習(xí)記憶功能評價。Y迷宮、八臂迷宮這類食物獎賞型迷宮任務(wù)能夠檢測嚙齒類動物與海馬和前額葉腦區(qū)相關(guān)的空間參考記憶和空間工作記憶。當(dāng)動物在迷宮中查找食物時，動物需要依據(jù)迷宮四周的視覺標(biāo)示，記住它已搜尋過的迷宮臂，以避開重復(fù)進(jìn)入同一個臂，從而有效地獲得食物。這種類型的記憶能指導(dǎo)進(jìn)展中的行為，被稱為工作記憶。Y力，這相對于被動回避等試驗的優(yōu)點在于：這種迷宮利用了嚙齒類動物對異環(huán)境自然探究的自然習(xí)性，不需要動物學(xué)習(xí)任何規(guī)章來趨利避害，能夠有效地反映出動物對異環(huán)境的識別記憶力量。(二)試驗方法1．YY迷宮試驗包含兩個階段，間隔1h。第一個階段為訓(xùn)練期，異臂被隔板擋住，小鼠由起始臂放入，在起始臂和其10min，訓(xùn)練完畢后，小鼠被放回飼養(yǎng)籠。1h22臂隔板，小鼠由起始臂放入，在3個臂中自由活動5min。錄像記錄5min內(nèi)每只小鼠在各個臂停留的時間和穿梭次數(shù)。數(shù)據(jù)統(tǒng)計：Y迷宮試驗中，5min內(nèi)小鼠在各個臂之間停Y5minY迷宮的起始臂、異臂和其他臂，但對于同一只小鼠，在迷宮試驗的兩個階段，三個臂是固定的。由于小鼠對該迷宮測試的記憶時間最長不超過數(shù)小時，所以該迷宮測試可以在同一只小鼠上反復(fù)進(jìn)展，但兩次試驗需間隔至少1周，并轉(zhuǎn)變?nèi)齻€臂的搭配〔Delluetal，XX。評價空間識別記憶力量可以用小鼠在各個臂停留的時間作為檢測指標(biāo)，同時以動物在各個臂的穿梭次數(shù)作為檢測其活動力量的一個指標(biāo)〔Delluetal，1992，XX。2．YY-迷宮為一個三等臂式反射箱，三臂的夾角為120°，50~70V，大致固定在電擊小鼠，以小鼠馬上逃往安全區(qū)為一次正確反響。具體方3min，每次電擊延遲為5s，直到小鼠的訓(xùn)練過程中連續(xù)9次正確反響即為學(xué)會。記錄小鼠24h后進(jìn)展記憶保持力量的檢測，以正確反響次數(shù)占總檢測次數(shù)的百分比表示記憶保持力量(正確反響的次數(shù)/總檢測次數(shù)×100%)，此值越高說明記憶力越好。(一)試驗簡介八臂迷宮〔放射臂迷宮〔radialarmmaz〕試驗也是最為常用的評價動物學(xué)習(xí)記憶力量的模型之一，由Olton等人于20世紀(jì)70年月中期建立。其根本依據(jù)是，掌握進(jìn)食的動物受食物的驅(qū)使對迷宮各臂進(jìn)展探究；經(jīng)過肯定時間的訓(xùn)練，動物可記住食物在迷宮中的空間位置。該方法可同時測〔workingmemorymemory。所用動物包括大鼠、小鼠和鴿子。這一模型對腦區(qū)毀損和多種藥物均很敏感。后者包括乙醇、東良宕堿〔抗膽堿能藥〕MK-801〔NMDA〕等。(二)試驗方法動物適應(yīng)試驗環(huán)境124小時。此后每天訓(xùn)練完畢后限制性地賜予正常食料〔據(jù)體重不同，大鼠16-20g，小鼠2-3g，以使體重保持在正常進(jìn)食大鼠的80%~85%。其次天，迷宮各臂及中心區(qū)分撒著食物顆粒〔每只4~5粒，直徑約3~4mm。然后，同時將4〔通往各臂的門翻開10min。第三天，重復(fù)其次天的訓(xùn)練。這一過程讓動物在沒有很強的應(yīng)激條件下生疏迷宮環(huán)境。第四天起，動物單個進(jìn)展訓(xùn)練：在每個臂靠近外端10min后將動物取出。第五天，將食物放在食盒內(nèi)，重復(fù)前一天的訓(xùn)練，24各臂門關(guān)閉，將動物放在迷宮中心；30s動物在迷宮中自由活動并攝取食粒，直到動物吃完全部4個臂的食粒。如經(jīng)10min食粒仍未吃完，則試驗終止。每天訓(xùn)1h4工作記憶錯誤〔workingmemoryerrors一次訓(xùn)練中動物再次進(jìn)入已經(jīng)吃過食粒的臂；參考記憶錯誤〔referencememoryerrors物進(jìn)入不曾放過食粒的臂；總的入臂次數(shù)；計算機還可記錄動物在放射臂內(nèi)及中心區(qū)的活動狀況，包括5次訓(xùn)練的工作記憶錯誤為零、參考記憶錯誤不超過1次時，可以開頭藥物測試或腦內(nèi)核團(tuán)構(gòu)造毀損試驗。一般先給溶劑〔如生理鹽水〕，再給減弱記憶的藥物〔如東良宕堿、MK-801等，然后加用增加記憶的藥物，劑量由低到高。用兩個指標(biāo)評價動物的記憶，即工作記憶錯誤頻率〔frequencyofworkingmemoryerrors〕和參考記憶錯誤頻率〔frequencyofreferencememoryerrors，分別等于工作記憶錯誤或參考記憶錯誤與總的入臂次數(shù)的比率。用這兩個指標(biāo)分別評價工作記憶與參考記憶。同時，計算平均探究時間〔averageexplorationtime，即測試時間與總的入臂次數(shù)之比，為評價一般運動活性的指標(biāo)。依據(jù)毀損的腦區(qū)構(gòu)造或所給減弱記憶的藥物的不同，工作記憶錯誤頻率和/或參考記憶錯誤頻率顯著增高，記憶增加藥物或治療可使這種錯誤頻率降低。(五)留意事項小鼠放射迷宮設(shè)備和試驗程序與大鼠類似，但迷宮規(guī)格應(yīng)比大鼠迷宮小1/4~1/2，以免增加小鼠行為操作難度。本試驗也可只用來測定工作記憶。方法中唯一不同的是，在全部放射臂均放置食粒，而不是只選4個臂放置食粒。慢性應(yīng)激對動物的迷宮操作可產(chǎn)生影響，且存在性別差異。經(jīng)過慢性應(yīng)激以后，雄性大鼠記憶力減弱，表現(xiàn)為記憶錯誤頻