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文檔簡介
探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數量的變化一、實驗目的
(一)通過探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數量的變化,來研究一個種群的數量變化情況,嘗試構建種群增長的數學模型。
(二)通過使用血球計數板掌握單細胞生物的計數方法。二、實驗原理
(一)酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng),培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、PH、溫度等因素有關,我們可以根據培養(yǎng)液中的酵母菌數量和時間為坐標軸做曲線,從而掌握酵母菌種群數量的變化情況。二、實驗原理
(二)利用血球計數板在顯微鏡下直接計數是一種常用的細胞計數法,這種方法可以直接測定樣品中全部的細胞數目,所以一般用于單細胞微生物數量的測定,由于血球計數板上的計數室蓋上蓋玻片后的容積是一定的,所以可根據在顯微鏡下觀察到的細胞數目來計算單位體積的細胞的總數目。三、探究問題
培養(yǎng)液中酵母菌種群的數量是怎樣隨時間變化的?四、作出假設
在有限的環(huán)境條件下,酵母菌種群的數量隨時間呈__
_型增長變化。S五、材料用具
酵母菌菌種,無菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液,無菌水,試管,棉塞,恒溫培養(yǎng)箱,顯微鏡,無菌滴管,無菌移液管,小燒杯或小試管,血球計數板(2mm×2mm)、紗布、濾紙、鑷子、蓋玻片等。一、血球計數板1、血球計數板的結構
血球計數板是一種專門用于計算較大單細胞微生物數量的儀器,由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四條下凹的槽,構成三個平臺。中間的平臺較寬,其中間又被一短橫槽隔為兩半,每半邊上面刻有一個方格網。大方格中方格小方格
方格網上刻有9個大方格,其中只有中間的一個大方格為計數室,供微生物計數用。
大方格的長和寬各為1mm,深度為0.1mm,即1mm×1mm×0.1mm,其容積為0.1mm3;大方格的長和寬各為2mm,深度為0.1mm,即2mm×2mm×0.1mm,其容積為0.4mm3計數室通常也有兩種規(guī)格16×25型:即大方格內分為16中格,每一中格又分為25小格25×16型:即大方格內分為25中格,每一中格又分為16小格。
不管計數室是哪一種構造,其每一大方格都是由16×25=25×16=400個小方格組成。
2、計數16×25型:
一般取四角的四個中方格(100個小方格)計數25×16型:一般計數四個角和中央的五個中方格(80個小方格)的細胞數。
3、計算
以1mm×1mm×0.1mm型為例計數室容積為0.1mm3,則每個小方格的容積為1/4000mm3
。100個小方格細胞總數/100×400×10000×稀釋倍數
酵母細胞個數/1mL=80個小方格細胞總數/80×400×10000×稀釋倍數
例1通常用血球計數板對培養(yǎng)液中酵母菌進行計數,若計數室為1mm×1mm×0.1mm方格,由400個小方格組成。若多次重復計數后,算得每個小方格中平均有5個酵母菌,則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數有
個。2×108例2檢測員將1mL水樣稀釋10倍后,用抽樣檢測的方法檢測每毫升藍藻的數量;將蓋玻片放在計數室上,用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計數室,并用濾紙吸去多余液體。已知每個計數室由25×16=400個小格組成,容納液體的總體積為0.1mm3。
現(xiàn)觀察到圖中該計數室所示a、b、c、d、e5個中格80個小格內共有藍藻n個,則上述水樣中約有藍藻
個/mL。5n×1051.怎樣進行酵母菌的計數。抽樣檢測培養(yǎng)液厚度為0.1mm,可算出10ml培養(yǎng)液中酵母菌總數的公式:2.5×104x(x為小方格內酵母菌數)2.從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數之前,要將試管輕輕振蕩幾下,為什么?使酵母菌細胞分布均勻,減少實驗誤差。3.本實驗需要設置對照?如果需要,請討論對照組應怎樣設計和操作,如果不需要,請說明理由。不需要,本實驗旨在探究培養(yǎng)液中酵母菌在一定條件下的種群數量變化,不同的時間量已經起到相互對照。4.需要做重復實驗嗎?不用重復,只要分組重復實驗獲得平均值即可。
5.如果一個小方格內酵母菌過多,難以數清,應當采取怎樣的措施?
搖勻試管取1mL酵
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