動物細(xì)胞融合與單克隆抗體(講課)

專題2細(xì)胞工程動物細(xì)胞融合與單克隆抗體2002年12月30日，

兩場籌備了10年的“太空婚禮”首次在神舟四號飛船上舉行，植物細(xì)胞“新人”—黃花煙草和革新一號煙草葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體，動物細(xì)胞“新人”是小鼠B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，兩批新人同時在“產(chǎn)房”—電融合儀內(nèi)孕育新生命?！疤栈槎Y”這兩場“太空婚禮”實質(zhì)是哪兩項細(xì)胞工程技術(shù)？植物體細(xì)胞雜交技術(shù)動物細(xì)胞融合技術(shù)(1)(1)(2)(3)(4)植物體細(xì)胞雜交過程示意圖溫故知新:A細(xì)胞B細(xì)胞融合一動物細(xì)胞融合的概念雜交細(xì)胞動物細(xì)胞融合（也稱細(xì)胞雜交）：是指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程。動物細(xì)胞融合過程示意圖細(xì)胞膜的流動性融合原理電激、PEG等誘導(dǎo)融合的手段？融合后形成的細(xì)胞類型？AB雜交細(xì)胞遺傳物質(zhì)有什么特點？三種AA自融細(xì)胞、BB自融細(xì)胞、AB雜交細(xì)胞同時具有兩種生物的遺傳物質(zhì)

A細(xì)胞B細(xì)胞滅活病毒誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的過程使細(xì)胞相互凝聚細(xì)胞膜打開，促進細(xì)胞發(fā)生融合比較項目融合原理融合方法誘導(dǎo)融合手段用途植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的流動性細(xì)胞的全能性纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合離心、電刺激、振動、聚乙二醇克服遠源雜交不親和，獲得雜種植株動物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動性用胰蛋白酶使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合除應(yīng)用植物細(xì)胞雜交手段外，還有滅活病毒獲得雜交細(xì)胞二、比較植物細(xì)胞雜交技術(shù)動物細(xì)胞融合三、動物細(xì)胞融合技術(shù)的優(yōu)勢已成功的動物細(xì)胞融合實例有很多，如人—小鼠、人—兔、人—雞、鼠—兔、雞—鼠等上百種融合細(xì)胞。甚至已成功完成了酵母菌—雞、人—胡蘿卜等細(xì)胞的融合。1.抗體由何種細(xì)胞產(chǎn)生？2.抗體主要分布在哪里？4.用傳統(tǒng)的方法如何獲得抗體？傳統(tǒng)方法生產(chǎn)抗體抗原反復(fù)注射動物從動物的血清中分離抗體缺點：產(chǎn)量低、純度低，特異性差怎么獲得大量的單一抗體？怎么獲得大量的單一抗體？方案一利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)單個效應(yīng)B細(xì)胞，使它增殖，產(chǎn)生出大量的單一抗體設(shè)計方案：方案二利用效應(yīng)B細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞融合，獲得雜交瘤細(xì)胞，使它增殖，產(chǎn)生出大量單一抗體骨髓瘤細(xì)胞免疫小鼠單克隆抗體篩選克隆、篩選體內(nèi)培養(yǎng)體外培養(yǎng)效應(yīng)B淋巴細(xì)胞（選擇培養(yǎng)基）（抗體檢測）細(xì)胞融合雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞單克隆抗體的制備

看書上53頁圖，分組討論，單抗制備過程分哪幾步？請用箭頭把以下代表單克隆抗體制備過程步驟的圖解的字母按正確順序連接起來。順序是？

1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（）A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞

C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞D.沒經(jīng)過免疫的Ｂ淋巴細(xì)胞A鞏固練習(xí)2.動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的比較中，正確的是（）誘導(dǎo)融合的方法完全相同B.所用的技術(shù)手段基本相同C.操作步驟基本相同D.都能形成雜種細(xì)胞D3.單克隆抗體制備過程中培育的雜交細(xì)胞是（）A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與肝細(xì)胞融合B.由小鼠一個B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成C.由小鼠一個B淋巴細(xì)胞與肌瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成D.由小鼠一個B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合而成D4.只能使動物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)方法是（）

A．PEGB．滅活的病毒C．電刺激D．離心B5.單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（）①淋巴細(xì)胞②小鼠骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞⑤雜交瘤細(xì)胞A.②④B.①③⑤C.①②③④D.②③CA、B細(xì)胞為動物細(xì)胞,請據(jù)圖回答問題:A細(xì)胞B細(xì)胞C細(xì)胞D細(xì)胞(1)若A細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞B細(xì)胞為淋巴細(xì)胞,那么D細(xì)胞稱為

細(xì)胞,D細(xì)胞具有兩個親本細(xì)胞的特征,一方面因具有骨髓瘤細(xì)胞的

性質(zhì),通過