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ICS65.020B15團(tuán) 體 標(biāo) 準(zhǔn)T/JAASS9-2020水果、蔬菜中吡蟲啉農(nóng)藥殘留免疫親和柱凈化高效液相色譜檢測(cè)技術(shù)DeterminationofImidaclopridbyHighperformanceliquidchromatographywithimmunoaffinitycolumnclean-up2020-10-12發(fā)布 2020-10-12實(shí)施江蘇省農(nóng)學(xué)會(huì) 發(fā)布T/JAASS9-2020目 次前言 Ⅲ范圍 1規(guī)范性引用文件 1術(shù)語(yǔ)和定義 1原理 1試劑與材料 1儀器與設(shè)備 1試樣制備 2測(cè)定 2結(jié)果判定與表述 3檢測(cè)限和重復(fù)性 3前??言本文件按照GB/T1.1-2020給出的規(guī)則起草。本文件由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出。本文件由江蘇省農(nóng)學(xué)會(huì)歸口。本文件主要起草人:劉鳳權(quán)、王利民、華修德、王鳴華、張存政、郭逸蓉、徐振林、石松、孫遠(yuǎn)明。IIIT/JAASS9-2020水果、蔬菜中吡蟲啉農(nóng)藥殘留免疫親和柱凈化—高效液相色譜檢測(cè)技術(shù)范圍本文件規(guī)定了吡蟲啉農(nóng)藥殘留的免疫親和層析凈化—高效液相色譜檢測(cè)技術(shù)的原理、試劑與材料、儀器與設(shè)備、試樣制備、測(cè)定、結(jié)果計(jì)算與表述和重復(fù)性。本文件適用于蔬菜、水果中吡蟲啉農(nóng)藥殘留的測(cè)定。規(guī)范性引用文件(包括所有的修改單適用于本文件。GB2763 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量GB/T6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和實(shí)驗(yàn)方法術(shù)語(yǔ)和定義本文件無(wú)術(shù)語(yǔ)和定義。原理試樣經(jīng)過(guò)甲醇-水提取后,提取液經(jīng)過(guò)濾、稀釋后,濾液經(jīng)過(guò)含有吡蟲啉特異性抗體的免疫親和層析柱層析凈化,經(jīng)高效液相色譜儀分離、檢測(cè)后,測(cè)定試樣中吡蟲啉的含量。試劑與材料除另有規(guī)定外,所有試劑均為分析純;實(shí)驗(yàn)室用水符合GB/T6682中規(guī)定的二級(jí)水,標(biāo)準(zhǔn)溶液和流動(dòng)相用水為一級(jí)水。甲醇色譜純苯色譜純乙腈色譜純儀器與設(shè)備1T/JAASS9-2020吡蟲啉免疫親和柱,柱容量≥300ng。濾紙9cm雙圈定性濾紙容量瓶20mL容量瓶高效液相色譜儀試樣制備提取20g。10mL乙腈(5.4)-水(70:30)5min30min。隨后將樣品溶液在濾紙(6.2)上進(jìn)行固液分離。20mL容量瓶(6.3)20mL(樣品處理液沖洗濾紙中的樣品)。5倍稀釋,待檢測(cè)用。凈化將免疫親和柱(6.1)10.0mL玻璃定量管下。10.0mL樣品提取液注入玻璃定量管中。2mL/min流速緩慢通過(guò)免疫親和柱。10.0mL2次,棄去全部流出液。1.0mL1mL/min,收集全部洗脫液于玻璃試管中,加純水定容2.0mL,供色譜檢測(cè)用。測(cè)定色譜條件色譜柱:SB-C18柱、4.6×250mm流動(dòng)相:甲醇+水(15:85)溶液流速:1.0mL/min檢測(cè)波長(zhǎng):紫外波長(zhǎng)270nm柱溫:室溫進(jìn)樣量:20色譜測(cè)定2T/JAASS9-2020分別取相同體積樣液和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液注入高效液相色譜儀,在上述色譜條件下測(cè)定試樣的響應(yīng)值(峰高或峰面積)。經(jīng)過(guò)與吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)溶液譜圖比較響應(yīng)值得到試樣中吡蟲啉的濃度。結(jié)果計(jì)算與表述試樣中吡蟲啉含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)X計(jì),單位為毫克每千克(mg/kg),按式(1)計(jì)算:(1)式中:Pi:試樣溶液中吡蟲啉組分的峰面積值;Cs:吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,單位為納克每毫升(ng/mL);Vs:標(biāo)準(zhǔn)溶液的檢測(cè)體積(mL);Ps:吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)溶液面積平均值(系列濃度);m:試樣質(zhì)量,單位為克(g)。測(cè)定結(jié)果用平行測(cè)定的算術(shù)平均值表示,計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后一位。檢測(cè)限和重復(fù)性0.2mg/kgGB27
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