山東大學(xué)2023年-2023年學(xué)年第1學(xué)期生物技術(shù)《現(xiàn)代分子生物學(xué)》考試試卷(附答案)

第第16頁(yè)2023—20231學(xué)期《現(xiàn)代分子生物學(xué)》考試試卷〔A卷〕院/系 年級(jí) 專業(yè) 姓名 學(xué)號(hào)考生答題須知全部題目答題答案必需做在考點(diǎn)發(fā)給的答題紙上，做在本試題冊(cè)上無(wú)效。請(qǐng)考生務(wù)必在答題紙上寫清題號(hào)。評(píng)卷時(shí)不評(píng)閱本試題冊(cè)，答題如有做在本試題冊(cè)上而影響成績(jī)的，后果由考生自己負(fù)責(zé)。答題時(shí)一律使用藍(lán)、黑色墨水筆或圓珠筆作答〔畫圖可用鉛筆，用其它筆答題不給分。答題時(shí)不準(zhǔn)使用涂改液等具有明顯標(biāo)記的涂改用品。一、單項(xiàng)選擇題〔共10題，每題2分，共20分。每題的備選項(xiàng)中，只有一個(gè)最符合題意〕1．以下關(guān)于基因表達(dá)調(diào)控的論述正確的選項(xiàng)是〔 。A．在原核生物中，阻遏物的調(diào)整功能只能發(fā)生在RNA聚合酶結(jié)合啟動(dòng)子之前B．在原核生物中，由激活物調(diào)控的基因往往需要下游調(diào)控因子C．大腸桿菌的CAP蛋白可以調(diào)控很多個(gè)基因的表達(dá)D．原核生物核糖體蛋白的表達(dá)調(diào)控主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄水平2．原核生物基因啟動(dòng)子中－10區(qū)與－35區(qū)的最正確距離是〔 。[中山大學(xué)2023研]A．＜15bp B．16～19bpC．20bp D．0＞20bp信號(hào)識(shí)別顆?！睸RP〕的作用是〔 。[河北大學(xué)2023研]A．指導(dǎo)RNA拼接B．在蛋白質(zhì)的共翻譯運(yùn)轉(zhuǎn)中發(fā)揮作用C．指引核糖體大小亞基結(jié)合D．指導(dǎo)轉(zhuǎn)錄終止4．蛋白質(zhì)翻譯后的修飾主要包括〔。A．乙酰化B．糖基化C．磷酸化D．上述各種修飾操縱子模型可以成功地說(shuō)明基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控機(jī)制，照此假說(shuō)，實(shí)現(xiàn)對(duì)基因活性起調(diào)整作用的是〔 。誘導(dǎo)酶B．阻遏蛋白C．RNA聚合酶D．DNA聚合酶以下關(guān)于乳糖操縱子的調(diào)控作用表達(dá)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是〔 。cAMP可與CRP結(jié)合成復(fù)合物cAMP-CRP復(fù)合物結(jié)合在啟動(dòng)子前方葡萄糖充分時(shí)，cAMP水平不高D．葡萄糖和乳糖并存時(shí)，細(xì)菌優(yōu)先利用乳糖E．葡萄糖和乳糖并存時(shí)，細(xì)菌優(yōu)先利用葡萄糖7．真核基因常常被斷開〔 。A．反映了真核生物的mRNA是多順反子B．由于編碼序列外顯子被非編碼序列內(nèi)含子所分隔CDNA于不同的染色體上D．說(shuō)明初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物必需被加工后才可被翻譯E．說(shuō)明真核基因可能有多種表達(dá)產(chǎn)物，由于它有可能在mRNA加工的過程中承受不同外顯子重組方式以下哪種是終端分化細(xì)胞？〔 。A．神經(jīng)元B．骨髓干細(xì)胞C．肝細(xì)胞D．表皮細(xì)胞有關(guān)原核生物EF-Ts因子，錯(cuò)誤的選項(xiàng)是〔 。A．是一個(gè)翻譯起始因子B．是一個(gè)翻譯延長(zhǎng)因子C．參與EF-Tu的再生D．BC都正確以下有關(guān)SD序列的說(shuō)法，哪個(gè)是正確的？〔 〕A．SD序列對(duì)原核生物和真核生物的翻譯都是重要的B．SD序列相對(duì)于起始密碼子AUG而言，是與方向和位置都無(wú)關(guān)的C．SD序列有時(shí)也會(huì)隱蔽在mRNA的莖一環(huán)構(gòu)造中，對(duì)翻譯起到抑制作用D．原核生物中的編碼基因的翻譯共同受到一個(gè)上游SD序列的掌握二、填空題〔5210分〕大腸桿菌DNA聚合酶I經(jīng)酶切后，得到大小片段，其中大片段具有 酶活性和 酶活性，小片段具有 酶活性。對(duì)于低豐度mRNAcDNA克隆的分別，一種方法是構(gòu)建的cDNA文庫(kù)，另一種方法是。在大腸桿菌中，cAMP的濃度受到葡萄糖代謝的調(diào)整假設(shè)將細(xì)菌放在缺乏碳源的培育基中培育，細(xì)胞內(nèi)cAMP濃度就高；假設(shè)在含葡萄糖的培育基中培育，cAMP的濃度就 ；假設(shè)培育基中只有甘油或乳糖等不進(jìn)展糖酵解途徑的碳源，cAMP的濃度會(huì) 。因此推想糖酵解途徑中位于葡糖-6-磷酸與甘油之間的某些代謝產(chǎn)物是腺苷酸環(huán)化酶活性的抑制劑。人X染色體具有一個(gè)重要的基因 ，該基因只在失活的X染色體上表達(dá)，而不在活性的X染色體上表達(dá)。在活性X染色體上該基因總是 。而失活X染色體上該位點(diǎn)都是 的。失活的X染色體上其他絕大多數(shù)基因都處于關(guān)閉狀態(tài)，DNA序列都呈高度 。5．RNA分子結(jié)合氨基酸和識(shí)別mRNA的兩個(gè)構(gòu)造區(qū)域分別稱為和。三、是非題〔共5題，每題2分，共10分。正確的用T表示，錯(cuò)誤的用F表示〕1．依據(jù)某一感興趣蛋白質(zhì)的序列、抗原性以及配基結(jié)合性質(zhì)制備探針，可從DNA文庫(kù)篩選到相應(yīng)的基因。〔 〕[華南理工大學(xué)2023研]2．基因工程的一個(gè)必需步驟是利用限制性內(nèi)切核酸酶切割目的基因使其產(chǎn)生黏性末端，然后連接到載體上?！? 〕[四川大學(xué)2023研]在真核生物中，雙鏈DNA的交換是一種普遍現(xiàn)象，而在原核生物中，雙鏈DNA的重組交換是很少見的?！?〕阻遏作用和誘導(dǎo)作用的解釋都是以乳糖操縱子學(xué)說(shuō)為根底?！?〕真核生物基因表達(dá)的調(diào)控單位是操縱子?！?四、簡(jiǎn)答題〔共5題，每題6分，共30分〕1．舉例說(shuō)明什么是C值悖論。闡述同源重組的機(jī)理。說(shuō)明基因克隆的一種方法。怎樣將一個(gè)平末端DNA片段插入到EcoRⅠ限制位點(diǎn)中去？為什么被RNA聚合酶Ⅲ識(shí)別的啟動(dòng)子不常見？五、論述題〔21530分〕你對(duì)應(yīng)用RACE技術(shù)克隆cDNA53′末端的原理有怎樣的了解？[山東師范大學(xué)2023研]試述DNA的主要理化性質(zhì)。2023—20231學(xué)期《現(xiàn)代分子生物學(xué)》考試試卷〔A卷〕標(biāo)準(zhǔn)答案一、單項(xiàng)選擇題〔10220分。每題的備選項(xiàng)中，只有一個(gè)最符合題意〕12345678910CBBDBDAADC二、填空題〔5210分〕1．5＇→3＇聚合；3＇→5＇外切；5＇→3＇外切富含目的基因序列；扣除雜交低；很高Xist；甲基化；去甲基化；甲基化受體臂；反密碼子臂三、是非題〔5210分。正確的用TF表示〕1 2 3 4 5F F T T F四、簡(jiǎn)答題〔5630分〕1．C值即一種生物的單倍體基因組的DNA總量。它是每一種活生物的一共性質(zhì)。C值悖論指物種的C值與生物構(gòu)造或組成的簡(jiǎn)單性或生物在進(jìn)化上所處地位的凹凸不全都的現(xiàn)象，C值與其進(jìn)化簡(jiǎn)單性之間無(wú)嚴(yán)格對(duì)應(yīng)關(guān)系?；蚪M中編碼序列的選擇壓力大，而真核生物中不編碼蛋白的序列很多，發(fā)生變異的概率增加，因此基因組大小會(huì)消滅很大的變化，在長(zhǎng)期的進(jìn)化過程中，基因組的大小不能完全代表生物進(jìn)化程度。舉例如下：①人類和兩棲類有格外接近的C值，說(shuō)明并非越高等的生物遺傳簡(jiǎn)單性越高。②兩棲類生物中最小的基因組缺乏，，最大的則達(dá)，家蠅和果蠅，二者的C6倍。則說(shuō)明表現(xiàn)簡(jiǎn)單度沒有明顯變化的肯定物種中，C值卻有很大變化。同源重組是指發(fā)生在DNA的同源序列之間的重組，真核生物的非姐妹染色單體的交換，細(xì)菌的轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)和接合，噬菌體的重組等都屬于這種類型。同源重組要求較大的DNA片段進(jìn)展交換，它們的序列一樣或接近一樣。同源重組的機(jī)理是：兩個(gè)雙鏈DNA分子配對(duì)，同源區(qū)發(fā)生鏈的斷裂；斷開的單鏈穿插連接，形成異源雙鏈DNA；分支點(diǎn)遷移：兩個(gè)雙螺旋形成的穿插連接以拉鏈?zhǔn)叫?yīng)集中，即鏈交換沿雙鏈滑動(dòng)，形成異源雙鏈區(qū)的雜種DNA長(zhǎng)片段；Holliday中間體的形成；連接分子的拆分：依據(jù)切開方向，Holliday中間體的拆分可產(chǎn)生兩種螺旋，親體雙螺旋和重組雙螺旋。無(wú)論哪種拆分方式，鏈交換后總會(huì)在兩條DNA分子上留下一段異源雙鏈區(qū)，但側(cè)翼區(qū)域的重組過程不肯定會(huì)同時(shí)發(fā)生?；蚩寺∈?0年月進(jìn)展起來(lái)的一項(xiàng)具有革命性的爭(zhēng)論技術(shù)，可概括為∶分、切、連、轉(zhuǎn)、選。最終目的在于通過相應(yīng)技術(shù)手段，將目的基因?qū)爰闹骷?xì)胞，在宿主細(xì)胞內(nèi)目的基因被大量的復(fù)制?；蚩寺〉姆椒ㄓ卸喾N，常見的基因克隆的方法有：基因捕獲技術(shù)，功能克隆，定位克隆，差異克隆等。其中差異克隆的方法如下：差異克隆是利用來(lái)源不同DNA之間的表現(xiàn)度差異來(lái)分別差異表達(dá)基因的功能克隆方法。在任何cDNAcDNA去除其次個(gè)來(lái)源中共同的RNA，留下獨(dú)特的RNA用于文庫(kù)構(gòu)建。將一個(gè)平末端DNA片段插入到EcoRⅠ限制位點(diǎn)中，操作步驟如下：將平末端片段利用甲基化酶處理，保護(hù)其中的EcoRⅠ識(shí)別序列〔假設(shè)平末端序列中不含有EcoRⅠ位點(diǎn)，則此步驟省略〕；化學(xué)合成一些長(zhǎng)為10bp含有EcoRⅠ識(shí)別位點(diǎn)的短的DNA片段，然后與帶克隆片段兩端連接起來(lái)；；利用EcoR工切割該片段，產(chǎn)生帶有EcoRⅠ黏性末端的片段；通過DNA連接酶的作用，將處理后的片段插入到EcoRⅠ限制位點(diǎn)中。5．被RNA聚合酶Ⅲ識(shí)別的啟動(dòng)子不常見的緣由如下：RNA聚合酶Ⅲ負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄一類具有轉(zhuǎn)錄物不編碼蛋白質(zhì)和基因通常以多拷貝存在兩種特征基因。RNA5SrRNAtRNA基因。與其他基因的啟動(dòng)子不同，在爭(zhēng)論5SrRNA550對(duì)核苷84＋50到＋845SrRNA基因的啟動(dòng)子。更少見的是，tRNA基因的啟動(dòng)子被分成A和B兩局部，它們之間的序列缺失不影響啟動(dòng)子的效率。五、論述題〔21530分〕RACE全稱是rapidamplificationofcDNAendcDNA末端快速擴(kuò)增法。RACE是用于從cDNA片段擴(kuò)增全長(zhǎng)基因的方法，依據(jù)序列設(shè)計(jì)基因片段內(nèi)部特異引物，由該片段向外側(cè)進(jìn)展PCR擴(kuò)增得到目的序列。RACE技術(shù)在cDNA53′端RNA5′端的方法5′RACE33′RACE。原理如下：〔1〕5′RACE的原理5′端RNA寡聚接頭的局部序列和基因特異的3′端反向引物進(jìn)展PCR5′端序列。①在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下，用基因片段內(nèi)部特異性引物〔GSP1〕cDNA第一條鏈的合成。②用RNase混合物降解模板mRNA并純化已合成的cDNA的第一條鏈。③用末端轉(zhuǎn)移酶在cDNA3′端參加連續(xù)的dCTP，形成oligo〔dC〕尾巴。④以連有oligo〔dC〕的錨定引物AP和基因片段內(nèi)部特異的引物GSP2進(jìn)展巢式PCR擴(kuò)增，以5′端片段。〔2〕3′RACE的原理53′端寡dT下游局部序列為引物進(jìn)展PCR3′端序列。①在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以連有可以和mRNA3′多核苷酸末端配對(duì)的oligo〔dT〕的錨定引物AP起始cDNA第一條鏈的合成。②用RNase降解模板mRNA。③用錨定引物AP和基因片段內(nèi)部特異引物GSP進(jìn)展PCR3可用巢式PCR的方法連續(xù)進(jìn)展檢測(cè)和擴(kuò)增。DNA的主要理化性質(zhì)如下：核酸的帶電荷性質(zhì)①無(wú)論是DNA還是RNA，核苷酸鏈內(nèi)既有酸性的磷酸基又有堿性的含氮雜環(huán)堿基，因此核酸是兩性電解質(zhì)。②由于磷酸基的酸性較強(qiáng)，核酸通常表現(xiàn)為酸性。③在中性或堿性溶液中，核酸帶負(fù)電荷，在外加電場(chǎng)作用下向陽(yáng)極移動(dòng)。④核酸的帶電荷性質(zhì)可用于分別分子質(zhì)量大小不同的核酸。帶負(fù)電荷的核酸與帶正電荷的金屬離子成鹽，在有乙醇或異丙醇存在時(shí)核酸即可從溶液中沉淀析出。⑤常用氯化鈉、乙酸鈉、乙酸鉀或乙酸銨等鹽溶液來(lái)制備核酸。核酸的高分子性質(zhì)①核酸是分子質(zhì)量很大的高分子化合物，因此核酸溶液具有較大的黏性。②核酸溶液的黏性與分子的不對(duì)稱性有關(guān)，分子不對(duì)稱性愈大，其黏度也就愈大，不規(guī)章分子比球形分子溶液的黏度大，線性分子溶液的黏度更大。③DNA107，因此極稀的DNA溶液也有較大的黏度。④RNA溶液的黏度較DNA小。當(dāng)核酸溶液在受熱或酸堿等因素作用下發(fā)生變性時(shí)，分子不對(duì)稱性變小，溶液黏度下降。因此可用黏度測(cè)定作為DNA變性的指標(biāo)。核酸的紫外吸取①核酸分子的堿基中含有的共軛雙鍵具有吸取紫外線的性質(zhì)。①核酸分子的堿基中含有的共軛雙鍵具有吸取紫外線的性質(zhì)。280nm260nm。③利用核酸的紫外吸取特性可鑒別核酸樣品中的蛋白質(zhì)雜質(zhì)，對(duì)核酸進(jìn)展定性、定量分析。也可以利用核酸的最大紫外