艾滋病實驗室的生物安全教學內容

艾滋病實驗室的生物安全疫情呈緩慢上升趨勢，綜合防治效果開始顯現(xiàn)從2000年到2004年疫情呈快速上升趨勢，年平均增幅達164%；綜合防治效果開始顯現(xiàn)。2005年以后，疫情上升趨勢放緩，年平均增幅為12%。盡管疫情增幅有所減緩，但由于新增感染數(shù)逐年增加，基數(shù)持續(xù)加大，危害仍在持續(xù)加重。我省艾滋病流行概況疫情分布范圍持續(xù)擴大，從2002年的50個縣增加到2009年的114個縣。地區(qū)差異明顯，在全省歷年累計報告HIV/AIDS中，運城市報告占42.87%，太原市占21.39%，而忻州市只占1.87%，呂梁市占1.49%。2009年報告的HIV/AIDS中，太原市占34.39%，運城市占24.58%，而忻州市和呂梁市各占2.16%。疫情分布范圍擴大，地區(qū)差異明顯

山西省自2006年開始，性傳播成為主要傳播途徑，持續(xù)保持在較高比例，每年報告的HIV/AIDS中約30%-40%為性傳播。2009年占38.1%。

2006年首次報告經男男同性傳播，截止到2009年底，已經累計報告95例，管理104例。數(shù)量快速增多，分布在全省除朔州市的10個市。性傳播成為主要傳播途徑，同性性傳播上升速度明顯

青年成為艾滋病感染的主要人群

自2006年開始，每年報告HIV/AIDS中，20～29歲年齡組比例持續(xù)增加，約占當年報告數(shù)的1/3，成為艾滋病病毒感染的主要人群。流動人口成為艾滋病傳播的重要

人群

外來人口和流動人口中發(fā)現(xiàn)的艾滋病感染者逐年增加，從2004年的6.3%上升到2009年的40.55%。該群體在我省流動、生活，作為艾滋病傳播的主要人群，給我省艾滋病防治工作帶來極大挑戰(zhàn)，是艾滋病防控的重點和難點艾滋病檢測艾滋病檢測工作須遵守《實驗室生物安全通用要求》《全國艾滋病檢測工作管理辦法》《全國艾滋病檢測技術規(guī)范（2009版）》艾滋病檢測HIV抗體檢測分為篩查試驗（包括初篩和復檢）和確證試驗篩查試驗常用方法快速檢測酶聯(lián)免疫吸附試驗（第三代或第四代試劑）試劑包被抗原或抗體類型及來源窗口期方法檢測抗體特點第一代（1985）HIV-1型抗原

(病毒裂解產物)30-60天間接法lgG假陽性較多，血清要高度稀釋，靈敏度低，僅能檢測HIV-1第二代（1990）HIV（1+2型）抗原（基因重組或合成多肽）28-35天間接法lgG靈敏度和特異性優(yōu)于第一代，但只能檢測HIV-lgG第三代HIV（1+2型）抗原（基因重組）14-25天雙抗原夾心法LgG+lgM可檢測HIV不同的抗體亞類（lgG、lgM、lgA等）靈敏度、特異性均較高第四代HIV（1+2型）抗原（基因重組+抗-p24抗體）10-18天雙抗原夾心法和雙抗體夾心法LgG+lgM+Ag檢測HIV（1+2型）抗體和p24抗原，明顯縮短窗口期，進一步降低輸血的殘余危險度篩查結果

陰性——出具“HIV抗體陰性”報告陽性——填寫“HIV抗體篩查陽性送檢單”，按照有關要求送樣品至市級篩查中心實驗室或確證實驗室，必要時可出具“HIV抗體待復檢”報告一般工作流程（酶聯(lián)免疫吸附實驗)檢測試驗判斷結果填寫《HIV抗體篩查陽性送檢單》，上報篩查中心實驗室或確證實驗室，必要時可出具待復檢報告陽性反應陰性反應評價試驗雙孔復查均陽性均陰性出具陰性報告外部質控：受控試驗有效，如失控，分析原因重新進行試驗艾滋病的實驗室安全根據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》，艾滋病毒（HIV）屬于乙類傳染病，在衛(wèi)生部2006年公布《人類傳染的病源微生物名錄》中將艾滋病毒（1和2型）列為危害程度第二類病原微生物。根據(jù)《人類傳染的病源微生物名錄》要求：艾滋病血清檢測屬于未經培養(yǎng)的感染材料的操作，應在符合BSL-2實驗室的艾滋病檢測實驗室（考核發(fā)證）中進行。HIV的分類及防護要求危害程度分類

生物安全級別病毒培養(yǎng)

BSL-3動物感染實驗

BSL-3未經培養(yǎng)的感染材料的操作

BSL-2滅活材料的操作

BSL-1無感染性材料的操作

BSL-1個體防護的配備原則BSL－2實驗室除符合BSL－1的要求外，還應該符合下列條件：在實驗室中應穿著工作服或罩衫等防護服。離開實驗室時，防護服必須脫下并留在實驗室內。不得穿著外出。用過的工作服應先消毒，然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。當手可能接觸感染材料、污染的表面或設備時應戴手套。如可能發(fā)生感染性材料的溢出或濺出，宜戴兩副手套。不得戴著手套離開實驗室。工作完全結束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。當微生物的操作不可能在生物安全柜內進行，而必須采取外部操作時，為防止感染性材料濺出或霧化危害，必須使用面部保護裝置（護目鏡、面罩、個體呼吸保護用品或其他防濺出保護設備）。

在安排工作人員的實驗室區(qū)域時，要根據(jù)其工作的種類和所涉及的生物試劑，對實驗室環(huán)境做好安全檢查。進入實驗室應穿隔離衣、戴手套，必要時（如對初篩陽性標本進行復測或確認時，或直接對HIV毒種進行操作時）戴防護眼鏡，以防污染暴露的皮膚和衣物。不用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。如接觸物傳染性危險大，可戴雙層（兩付）手套以增加保護。操作時手套破損，應立即丟棄、洗手并戴上新手套。禁止采用口腔吸液管，必須使用移液器來操作實驗室的所有液體。操作中有標本、檢測試劑外濺時應及時消毒。對大量濺出的濃度高的傳染物在清潔之前應先用1%次氯酸鈉溶液浸泡，然后戴上手套擦凈。工作完畢，要對工作臺面消毒。工作臺面應當用0.1%0.2%次氯酸溶液消毒；用消毒液清洗后要干燥20min以上；工作完畢，脫去手套后洗手，再脫去工作衣，用肥皂和流動水洗手。血清及其它體液樣品均應嚴格按要求妥善保存，HIV抗體陽性樣品應做好標記單獨保存。實驗室的安全操作避免利器的使用盡量避免在實驗室使用針頭、刀片、玻璃器皿等利器，以防刺傷。如果必須使用，在處理或清洗時應采取措施防止刺傷或劃傷，并應對用過的物品進行消毒處理。盡量使用安全針具采血，如蝶形真空針，自毀性針具等，以降低直接接觸血液和刺傷的危險性。應將用過的銳器直接放入耐刺、防滲漏的利器盒，針頭直接放入堅固的容器內，消毒后廢棄。禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。禁止用手直接接觸使用后的針頭、刀片等銳器。從大量的國內外實驗室相關感染的報告中，可以發(fā)現(xiàn)：大多實驗室感染事件是由人為意外事故或違規(guī)操作而造成的，且是可以最大限度減少的！

操作者在實驗過程中的疏忽或錯誤，有時會造成嚴重后果，對操作者本人、共同進行操作的工作人員和實驗室環(huán)境造成威脅。因此，妥善、果斷地處理這些意外事故對于保證實驗室安全至關重要。菌（毒）外溢在臺面、地面和其他表面1.處理人員應戴手套，穿防護服，必要時需進行臉和眼睛防護。2.用布或紙巾覆蓋并吸收溢出物。3.向紙巾上傾倒適當?shù)南緞?，并立即覆蓋周圍區(qū)域。通?？梢允褂?%漂白劑溶液（次氯酸鈉溶液）；但在飛機上發(fā)生溢出時，則應該使用季銨鹽類消毒劑，如苯扎溴銨等。4.使用消毒劑時，從溢出區(qū)域的外圍開始，向中心進行處理。5.作用適當時間后（例如30分鐘），將所處理物質清理掉。如果含有碎玻璃或其他銳器，則要使用簸箕或硬的厚紙板來收集處理過的物品，并將它們置于可防刺透的容器中以待處理。6.對溢出區(qū)域再次清潔并消毒（如有必要，重復第2～5步）。7.將污染材料置于防漏、防穿透的廢棄物處理容器中。8.在成功消毒后，通知主管部門目前溢出區(qū)域的清除污染工作已經完成。菌（毒）外溢在臺面、地面和其他表面菌（毒）外溢在防護服上應立即進行局部消毒，更換。污染的防護服用消毒液浸泡后進行高壓滅菌處理。菌（毒）外溢到皮膚粘膜這種情況被視為有很大危險，應立即停止工作，能消毒的用消毒液在污染部位進行消毒，然后用水沖洗15-20min。處理后安全撤離，視情況隔離觀察，期間根據(jù)條件進行適當?shù)念A防治療。皮膚刺傷

若皮膚被刺破應被視為有極大危險，應立即停止工作，對傷口進行擠血，用水沖洗消毒。視情況隔離觀察，其間根據(jù)條件進行適當?shù)念A防治療。離心管發(fā)生破裂

非封閉離心桶的離心機內盛有潛在感染性物質的離心管發(fā)生破裂，這種情況被視為發(fā)生氣溶膠暴露事故，應立即加強個人防護力度，其處理原則如下：（1）如果機器正在運行時發(fā)生破裂或懷疑發(fā)生破裂，應關閉機器電源，停止后密閉離心筒至少30min，使氣溶膠沉積。

（2）如果機器停止后發(fā)現(xiàn)破裂，應立即將蓋子蓋上，并密閉至少30min。發(fā)生這兩種情況時都應報告實驗室負責人。隨后的所有操作都應加強個人呼吸保護并戴厚橡膠手套，必要時可在外面戴一次性手套。當清理玻璃碎片時應當使用鑷子，或用鑷子夾著的棉花來進行。所有破碎的離心管、玻璃碎片、離心桶、十字軸和轉子都應放在無腐蝕性的、已知對相關微生物具有殺滅活性的消毒劑內浸泡。未破損的帶蓋離心管應放在另一個有消毒劑的容器中，然后回收。離心機內腔應用適當濃度的同種消毒劑反復擦拭，然后用水沖洗并干燥。清理時所使用的全部材料都應按感染性廢棄物處理。離心管發(fā)生破裂工作人員職稱、數(shù)量、上崗培訓，復訓上崗人員從事工作前必須進行HIV抗體（乙型肝炎丙型肝炎等肝炎病毒標記物）的檢測入個人檔案每半年到一年做一次HIV抗體復測，并保留血樣一年以上遇有意外事故，接觸者應在接觸當時、4周、8周、12周和6個月各采血檢查一次健康監(jiān)護艾滋職業(yè)暴露的處理

局部緊急處理局部壓，擠，沖，洗局部消毒：75%酒精，0.2%次氯酸鈉，0.5%碘伏，0.2-0.5%過氧乙酸眼睛，粘膜：沖洗向所在單位有關領導向當?shù)丶部刂行模ǚ酪卟块T）報告及早報告，作好處理緊急報告咨詢與宣傳穩(wěn)定情緒了解全過程后分析感染可能性提供相關知識防止傳播向有關領導宣傳，做好保密，妥善處理暴露者風險評估緊急處理的質量服藥方案明確感染和措施效果流行病學和實驗研究證明

增加感染的危險因素接觸血液量大，接觸時間長（血量）受損傷口深（深度）造成傷口