(3.2.6)-細(xì)菌的培養(yǎng)方法與生長(zhǎng)

微生物檢驗(yàn)細(xì)菌培養(yǎng)方法與生長(zhǎng)【知識(shí)目標(biāo)】掌握細(xì)菌的培養(yǎng)方法；掌握細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象。

【能力目標(biāo)】能進(jìn)行常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)，能認(rèn)識(shí)細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象

任務(wù)目標(biāo)一、細(xì)菌的培養(yǎng)方法根據(jù)臨床初步診斷及待檢細(xì)菌的種類，可選用不同環(huán)境條件進(jìn)行培養(yǎng)，常用培養(yǎng)方法有：

1.需氧培養(yǎng)

2.CO2培養(yǎng)

3.厭氧培養(yǎng)法適用于需氧菌和兼性厭氧菌，在有氧環(huán)境下35℃孵育18~24h。普通培養(yǎng)1.需氧培養(yǎng)：適用5%~10%CO2環(huán)境才生長(zhǎng)良好的細(xì)菌，如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、布魯菌的首次分離培養(yǎng)。供給CO2的方法有：CO2培養(yǎng)箱、燭缸法、化學(xué)法(每升容積0.4gNaHCO3+0.35ml濃HCl)。燭缸培養(yǎng)法2.CO2培養(yǎng)：適用于厭氧菌的分離培養(yǎng)，常用的方法有厭氧罐法、氣袋法和厭氧手套箱法等。厭氧菌培養(yǎng)箱3.厭氧培養(yǎng)法：厭氧袋法厭氧培養(yǎng)盒加凡士林封蓋加石蠟封蓋產(chǎn)氣陽性二、細(xì)菌的生長(zhǎng)現(xiàn)象根據(jù)細(xì)菌的種類及培養(yǎng)基的不同，可將其生長(zhǎng)現(xiàn)象分為有：

1.細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象

2.細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象

3.細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象（一）細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象混濁沉淀：多見于鏈狀排列的細(xì)菌菌膜：多見于厭氧菌（二）細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象有鞭毛細(xì)菌：在培養(yǎng)基中沿穿刺線并向外擴(kuò)散生長(zhǎng)，穿刺線邊緣模糊。無鞭毛細(xì)菌：只沿穿刺線生長(zhǎng)，穿刺線邊緣清晰。(三）細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象細(xì)菌經(jīng)分離培養(yǎng)后，在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)可形成菌落。菌落是由單個(gè)細(xì)菌分裂繁殖形成的肉眼可見的細(xì)菌集團(tuán)。當(dāng)進(jìn)行樣品活菌計(jì)數(shù)時(shí)，以在瓊脂平板上形成的菌落數(shù)來確定樣品中的活菌數(shù)，用菌落形成單位（CFU）表示。不同細(xì)菌在瓊脂平板上形成的菌落特征不同，表現(xiàn)在菌落大小、形態(tài)、顏色、氣味、透明度、表面光滑或粗糙、濕潤(rùn)或干燥、邊緣整齊與否等方面各有差異。細(xì)菌菌落一般分為下列3種類型：(三）細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象表面光滑、濕潤(rùn)、邊緣整齊。新分離的細(xì)菌大多為光滑型菌落。1.光滑型菌落(三）細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象菌落表面粗糙、干燥，呈皺紋或顆粒狀，邊緣不整齊。R型菌落多為S型細(xì)菌變異失去表面多糖或蛋白質(zhì)而成。但也有少數(shù)細(xì)菌新分離的毒力株為R型，如結(jié)核分枝桿菌、炭疽芽胞桿菌等。2.粗糙型菌落(三）細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象菌落表面光滑、濕潤(rùn)、有光澤，似水珠樣。多見于有厚莢膜或豐富黏液層的細(xì)菌，如肺炎克雷伯菌等。3.粘液型菌落(三）細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象另外，細(xì)菌在血瓊脂平板上生長(zhǎng)可出現(xiàn)不同的溶血現(xiàn)象。α溶血（亦稱草綠色溶血、β溶血（又稱完全溶血）、γ溶血（即不溶血）。有些細(xì)菌在代謝過程中產(chǎn)生水溶性色素、脂溶性色素。此外，有的細(xì)菌在瓊脂平板上生長(zhǎng)繁殖后，可產(chǎn)生特殊氣味，如銅綠假單胞菌產(chǎn)生生姜味、白假絲酵母菌產(chǎn)生酵母味等。(三）細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)