液相色譜儀常見(jiàn)故障分析及解決要點(diǎn)

Word版本，下載可自由編輯液相色譜儀常見(jiàn)故障分析及解決要點(diǎn)1.保留時(shí)光變化

保留時(shí)光的變化有三中狀況：波動(dòng)、縮短、延伸。

保留時(shí)光浮現(xiàn)波動(dòng)時(shí)，應(yīng)檢查柱溫是否處于恒溫狀態(tài)，假如設(shè)置為室溫，氣溫的變化

會(huì)引起保留時(shí)光的波動(dòng)，應(yīng)當(dāng)設(shè)置為恒定溫度;等度和梯度間還沒(méi)有充分達(dá)到平衡狀態(tài)時(shí)，應(yīng)當(dāng)用十倍以上柱體積的流淌相去平衡色譜柱;緩沖液濃度太低時(shí)，應(yīng)換用25mmol/L的緩沖液;色譜柱被污染或已經(jīng)臨近柱壽命時(shí)，應(yīng)更換庇護(hù)柱或換新色譜柱。

保留時(shí)光縮短時(shí)，流速增強(qiáng)，應(yīng)檢查流速的設(shè)定;柱溫高時(shí)，應(yīng)檢查柱的設(shè)置;進(jìn)樣量太大時(shí)，削減樣品用量或降低樣品濃度;流淌相的組成發(fā)生了轉(zhuǎn)變，比如流淌相中易揮發(fā)有機(jī)相蒸發(fā)，兩相之間互溶不好，會(huì)導(dǎo)致流淌相不勻稱或某一相浮現(xiàn)部分沉淀;流淌相的PH值應(yīng)保持3~7.5范圍內(nèi)，否則會(huì)引起柱鍵合相的流失。

保留時(shí)光延伸時(shí)，流速減小，應(yīng)檢查流速的設(shè)定和管路是否有泄露;柱溫低時(shí)，檢查

柱溫的設(shè)置;流淌相的組成發(fā)生了轉(zhuǎn)變，比如流淌相中易揮發(fā)有機(jī)相蒸發(fā)，兩相之間互溶不好，會(huì)導(dǎo)致流淌相不勻稱或某一相浮現(xiàn)部分沉淀;檢查流淌相的pH值是否3~7.5范圍內(nèi)，否則會(huì)引起柱鍵合相的流失。

2.峰拖尾

色譜柱超載時(shí)，要削減進(jìn)樣量或稀釋樣品或使用高溶量的色譜柱;色譜柱性能不佳時(shí)，更換色譜柱;死體積或柱外體積過(guò)大時(shí)，將銜接降至最低，并對(duì)全部銜接點(diǎn)作合理的調(diào)節(jié)，盡可能采納細(xì)內(nèi)徑的銜接;加入硅羥基，其作用是純化色譜柱，增強(qiáng)緩沖液的濃度，降低流淌相的pH值，純化樣品;浮現(xiàn)峰干擾時(shí)，應(yīng)清潔樣品，調(diào)節(jié)流淌相。

3.峰展寬

進(jìn)樣體積過(guò)大時(shí)，用流淌相配樣;樣品過(guò)載時(shí)，進(jìn)小濃度、小體積樣品;在進(jìn)樣閥中

造成峰擴(kuò)展時(shí)，進(jìn)樣前后排出氣泡，以降低蔓延;流淌相粘度過(guò)高時(shí)，提升柱溫，并采納低粘度流淌相;等度洗脫，保留時(shí)光過(guò)長(zhǎng)時(shí)，要增強(qiáng)流速或改用梯度洗脫;柱外體積過(guò)大時(shí)，[1]將銜接管徑和連結(jié)管降至最小。

4.基線噪聲

流淌相或檢測(cè)器中有氣泡時(shí)，要對(duì)流淌相舉行脫氣處理;檢測(cè)器燈有延續(xù)噪聲時(shí)，更

換氘燈;浮現(xiàn)由污染引起的隨機(jī)噪聲時(shí)，應(yīng)清洗色譜柱、凈化樣品、使用HIPLC級(jí)試劑;偶然有噪聲時(shí)，可能是來(lái)自電源的干擾，假如電壓不穩(wěn)時(shí)，應(yīng)采納穩(wěn)壓電源。

5.肩峰或分叉

進(jìn)樣量太大或樣品濃度過(guò)高時(shí)，要削減進(jìn)樣量或稀釋樣品;樣品溶劑太強(qiáng)時(shí)，應(yīng)使用懦弱的樣品溶劑;色譜柱性能欠佳時(shí)，應(yīng)更換色譜柱。

6鬼峰

色譜柱未達(dá)到平衡時(shí)，要繼續(xù)平衡色譜柱;樣品中溶劑出峰時(shí)，使用流淌相作樣品的

溶劑;浮現(xiàn)進(jìn)樣閥殘余峰時(shí)，使用強(qiáng)溶劑清洗進(jìn)樣閥，并改進(jìn)閥和樣品的清洗程序;流淌相用水不合格率，應(yīng)使用HPLC級(jí)的水。

使用注重事項(xiàng)

在使用混合溶劑作流淌相時(shí)，一定要先混合，再過(guò)0.45um濾膜;等流淌相恢復(fù)至室溫，用超聲波或He氣舉行脫氣處理后，方可使用。

更換流淌相時(shí)，必需按一定的程序舉行，否則會(huì)產(chǎn)生問(wèn)題。更換流淌相有三種狀況：互溶性流淌相的更換、無(wú)互溶性流淌相的更換和緩沖溶液的更換。對(duì)于第一種狀況，先用預(yù)備更換的流淌相把吸濾器徹低清洗整潔，再打開(kāi)儀器的排液閥，按清洗鍵，清洗泵中的流淌相。

將吸濾器放入新流淌腥中，減慢流速清洗數(shù)分鐘后關(guān)閉排液閥。接下來(lái)清洗色譜柱和檢測(cè)器檢測(cè)池直到基線平穩(wěn)。對(duì)于其次種狀況，先用與新舊流淌相都互溶的